PRE ANALITIKPEMERIKSAANHEMOSTASIS

Bagian Patologi Klinik/Instalasi Patologi KlinikFK UGM/RSUP Dr. Sardjito

Ypgyakarta

platelets

Vessel walls

Coagulation factors

inhibitors

.. ..

.. ..

..

Fibrinolytic system

Pemeriksaan hemostasis • Pem. clotting time (CT) /masa jendal• Pem. bleeding time (BT)/masa perdarahan• Pem. jumlah trombosit• Pem.APTT (Activated Partial Thromboplastin Time)• Pem. PT (Prothrombin Time)• Pem. TT (Thrombin Time)• APTT substitusi• Skrining inhibitor• Pem. F. VIII dan IX• Agregasi trombosit• Antibodi anti-trombosit• D-dimer

Pre - analitik• Nama penderita • Umur• Jenis kelamin• Alamat dan no. tilp• No MR • Ruang• Tanggal dan jam sampling• Dokter yang meminta• Jenis pemeriksaan yang diminta• Jenis bahan yang diperiksa• Kondisi bahan• Pemakaian obat• Transfusi darah

Kondisi bahan

Pengiriman sesuai ? (cara & penampung) Penampung: bersih, sekali pakai (?),

tanpa goresan, tabung plastik Label akurat dan lengkap ? Hemolisis ? (dilaporkan) Darah beku ? (dilaporkan) Volume darah yang dibutuhkan ? Lama dan cara pengiriman?

• Darah segar

• Vena mediana cubiti

• Tidak diperbolehkan pengambilan darah melalui selang infus

• Sedapat mungkin pengambilan darah satu kali tanpa diulang-ulang, hindari penusukan beberapa kali pada tempat yang sama & pengisapan darah diulang-ulang (memacu agregasi trombosit & sistim koagulasi)

Sering terjadi di bangsal Anak (PICU/NICU)

Pengambilan dan penampungan darah

• Jarum utk. pengambilan drh. or.dewasa min. ukuran 21, sedang utk. Bayi ukuran 22 atau 23

• Pengambilan drh. dpt.memakai semprit atau vacuette atau vacutainer

• Bendungan hrs.dipasang segera sebelum pengambilan darah

• Jika pengambilan darah tidak langsung berhasil, maka darah yang didapat tidak boleh dipakai

• Perbandingan darah : antikoagulansia harus sesuai (9 bagian darah :1 bagian sitrat)

• Antikoagulansia menggunakan Natrium sitrat (3,2% lebih baik dp 3,8%)

• Waktu memindahkan darah dari semprit ke penampung, jarum harus dilepas

• Penampung tidak boleh terbuat dari bahan yang dapat menginduksi aktivasi kontak seperti gelas

• Sebaiknya dipakai penampung plastik atau gelas berlapis silikon

• Tidak boleh ditunda (setelah pengambilan darah harus segera dikirim ke laboratorium, tidak boleh dibiarkan lama di bangsal)

• Paling lama dlm 2 jam setelah pengambilan darah harus sudah dipisahkan

• Yang penting harus segera dibuat plasma• Kondisi terpaksa: plasma sitrat simpan di -20°C (2 mgg), -70°C (6 bln)

• Darah harus segera dimasukkan ke penampung yang berisi antikoagulan dengan membolak-balik sebanyak 5 kali

• Jangan mengocok kuat-kuat supaya eritrosit tidak lisis dan proses koagulasi tidak teraktivasi

• Untuk kebanyakan bahan yang dipakai dalam tes koagulasi adalah platelet poor plasma (PPP)

• Sentrifugasi : Kecepatan minimum 1700 g min. 10 menit, sebaiknya dengan refrigerated centrifuge

Perhatikan hal-hal berikut!

• Biarkan dulu semua komponen reagen pada suhu kamar minimal 30 menit sebelum digunakan

• Reagen yang dilarutkan akan siap dipakai setelah 30 menit• Homogenkan reagen dengan menggoyang pelan-

pelan sebelum dihangatkan atau dipakai• Hangatkan reagen secukupnya dan sisanya

simpan pada suhu 2-8 C. • Pada suhu 37°C reagen stabil hanya beberapa jam• Pelarutan dengan air, gunakan aquabides

Penyimpanan reagen dan sampel

• Perhatikan masa kadaluarsa reagen setelah dilarutkan

Contoh: Simplastin Excel/Excel S 4 hari pada

2-8°C Platelin LS 30 hari pada

2-8°C Fibriquik 3 hari pada

2-8°C Verify 1 24 jam pada

2-8°C

•Sampel dapat disimpan dalam keadaan beku

•Penyimpanan pada suhu -70°C lebih baik

•Penyimpanan pada suhu -35°C cukup baik

• Untuk pemeriksaan antikoagulan lupus, sampel yang dibekukan harus disentrifus 2 kali

• Sampel untuk coagulation factor assay/pem. faktor koagulasi harus disimpan pada suhu 4°C sebelum dikerjakan

• Proses thawing/beku cair yang berulangkali sebaiknya dihindari

• Sampel lipemik & ikterik dpt mengganggu pem PT & APTT terutama dg memakai metode optikal

• Jika refrigerated centrifuge tidak ada,bisa pakai yang biasa dan plasma segera dipisahkan dan disimpan pada suhu 4°C

• Pada suhu kamar >25°C, faktor koagulasi yang labil akan cepat rusak

• Usahakan sampel diperiksa secepatnya, tidak boleh lebih dari 4 jam

• Kuvet digunakan sekali pakai

Antikoagulan pada pemeriksaan koagulasi

• Natrium sitrat• Larutan antikoagulan dapat

disimpan pada suhu 4°C sampai 3 bulan

• Jika ada kontaminasi harus dibuang

• Jika hmt sangat rendah atau tinggi sekali, volume antikoagulan harus disesuaikan

Volume antikoagulan yang diperlukan untuk memperoleh 5 ml darah sitrat:

Hematokrit Vol.antikoag. Volume darah

25 – 55% 0,5 ml 4,5 ml

20% 0,7 ml 4,3 ml

60% 0,4 ml 4,6 ml

70% 0,25 ml 4,75 ml

80% 0,2 ml 4,8 ml

Volume darah yang dibutuhkan =

60

100 - Hmtx 4,5

Trombosit

• Trombosit : mudah beradhesi dan beragregasi

• Mudah melekat pada kaca• Mudah melekat pada kotoran

Akibat kesalahan pre-analitik:• pengambilan darah kurang baik (tdk sekali tusuk/hisap)

• keterlambatan pengiriman & pengerjaan(didiamkan terlalu lama)

• drh : antikoagulan kurang sesuai

jumlah trombosit menurun

• Dianjurkan setiap tdp jumlah trombosit < 100 rb/mmk, cek apusan:– Amati penyebaran trombosit– Amati adanya agregat trombosit– Amati di daerah ekor, kd trombosit

mengelompok di daerah ini– Amati adanya satelitosis– Jika tdp agregat trombosit, tulis:

• ‘terdapat agregat tormbosit’ atau ‘penyebaran tidak merata, trombosit berkelompok’

• Disarankan ulang sampling

faktor koagulasi +

Trombosit +

PT & APTT memendek (negatif palsu):• sitrat terlalu sedikit / (perbandingan drh : sitrat tdk adekuat)

• sentrifugasi tdk adekuat

tidak ada kalsium

PT & APTT memanjang (positif palsu):• terlalu banyak sitrat :

• darah kurang/perbandingan drh: sitrat tdk adekuat• kontaminasi Ca

• >> Ca yang diikat• hematokrit tinggi• pengambilan darah tdk adekuat (penusukan/ penghisapan darah beb kali)• pengiriman terlambat• preparasi plasma terlambat• pemeriksaan terlambat• penampung drh kotor, jamur, tergores• lebih baik pakai tabung plastik a bersilikon• ttp silikon: kd lepas

Pre analitik PT & APTT

Plasma sitrat