Manuale d’uso – QuickTox Kit for QuickScan detection of Ochratoxin - Rev. 7 – 01/02/2019 1

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QuickTox Kits for QuickScan detection of Ochratoxin (AQ113BG) Cat. # GX1032

Manuale d’uso – QuickTox Kit for QuickScan detection of Ochratoxin - Rev. 7 – 01/02/2019 2

QuickTox Kits for QuickScan detection of Ochratoxin (AQ113BG) Cat. # GX10320

Sommario Procedure per Matrice QuickToxTM Kit for QuickScan detection of Ochratoxin (AQ113BG)

Matrice Campionamento Preparazione del campione

Volume di Grain Buffer Diluito per

grammo di campione

Agitazione Chiarificazione

Protocollo e Range di Quiantificazione

(eseguire le diluizioni, se necessario)

Trasferimento in bicchierino ed

eventuale pre-mix

Inserire la Strip e

attendere

Lettura QuickScan: selezionare la Dilution nella

pagina dei Risultati

Frumento Raccogliere un

campione rappresentativo

secondo le indicazioni UE

1. Macinare

2. Pesare

(minimo 20 g)

5 ml

30 secondi

Centrifugare 3 minuti a 2000 g

Protocollo Base

1.5 – 30 ppb

Trasferimento:

50 µL Buffer DB3 +

200 µL campione

10 minuti

1:1 (di default)

Diluizione 1:6

30 – 100 ppb

Pre-mix:

1 ml Grain Buffer Diluito +

200 µL campione

Trasferimento:

50 µL Buffer DB3 +

200 µL campione

1:6

Mais 4 ml Protocollo Base

1.5 – 30 ppb

Trasferimento:

50 µL Buffer DB3 +

200 µL campione

1:1 (di default)

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Il kit QuickToxTM Kit for QuickScan detection of Ochratoxin è stato sviluppato per estrarre e rilevare la presenza di Ocratossina-A in

campioni di frumento e mais. Il kit fornisce risultati quantitativi nel range 1.5 – 30 ppb. Per il frumento il range può essere esteso a 100

ppb mediante una diluizione addizionale.

50 QuickTox Strips*

Buffer DB3

Grain Buffer concentrato 20X

100 puntali

50 bicchierini

* Le strip sono sensibili all’umidità pertanto si consiglia di conservarle all’interno del tubo ben chiuso. Evitare di piegare le strips in quanto questo ne comprometterebbe il normale funzionamento.

ATTENZIONE: L’analisi deve essere eseguita a temperatura ambiente a 20-25° C. Se eseguito a temperature inferiori o superiori, il test

può dare risultati errati.

• Grain Buffer Diluito: diluire il Grain Buffer concentrato 20 volte con acqua distillata (ad esempio mescolare 190 ml di acqua con

10 ml di Grain Buffer concentrato).

• Lasciare che campioni e reagenti raggiungano la temperatura ambiente (20-24°C) prima di iniziare i test.

• Raccogliere un campione rappresentativo del materiale da analizzare seguendo le indicazioni sul campionamento della UE e

comunque possibilmente almeno 1 - 2 Kg.

• Macinare finemente il campione arrivando ad una granulometria di almeno 20 Mesh (0.8 mm). Granulometrie più grossolane

possono limitare l’efficienza estrattiva portando a sottostime.

• Pesare da 20 a 50 g di campione dopo averlo ben mescolato.

• In base alla matrice che si deve analizzare e alla quantità pesata, aggiungere i volumi di Grain Buffer Diluito per grammo di

campione indicati nella seguente tabella

Matrice Volume di Grain Buffer Diluito per grammo di campione

Frumento 5 ml (ad esempio per 20 g di campione servono 100 ml di Grain Buffer Diluito)

Mais 4 ml (ad esempio per 20 g di campione servono 80 ml di Grain Buffer Diluito)

• Chiudere e agitare vigorosamente per 30 secondi assicurandosi che l’intero campione sia bagnato.

• Riempire un tubo da microcentrifuga con il campione estratto.

• Centrifugare per 3 minuti a 2000 g. Il surnatante deve essere utilizzato per il test.

4 – Preparazione del campione

2 – Contenuto del kit

1 - Introduzione

3 – Preparazione dei reagenti

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• Trasferire 50 µl di Buffer DB3 in un bicchierino

• Aggiungere 200 µl di campione

• Aspirare e ri-dispensare il campione con una pipetta per 4-5 volte per miscelare

• Inserire immediatamente una strip nel campione con la freccia rivolta verso il basso

• Attendere 10 minuti

• Rimuovere la strip dal campione

• Tagliare con delle forbici la parte colorata della strip

• Procedere con la lettura al QuickScan

• Fare doppio clic sull’icona QuickScan (QS) per aprire il programma di lettura. Apparirà il menu principale (Fig1).

• Inserire la strip nel carrello con il codice a barre rivolto verso il basso e vicino all’impugnatura (Fig.2).

• Inserire Il carrello nel lettore (Fig.3).

• Leggere la strip cliccando su "Read Test" sul software QS e attendere che il QS termini la scansione.

• Nella finestra dei risultati (Fig. 4) è possibile inserire i dettagli identificativi dell’analisi. Affinché l’immagine venga salvata inserire

almeno il nome del campione nello spazio “Sample ID” e premere Invio (Enter) sulla tastiera.

Fig. 1 Fig. 2 Fig. 3 Fig. 4

• Se si desidera stampare immediatamente il report di analisi, premere il comando PRINT in basso a destra.

• Premere CLOSE per chiudere la finestra di lettura.

• Per rivedere o stampare i risultati in un secondo momento, doppio clic sulla cartella REPORTS sul desktop.

• Per visualizzare il registro di tutte le analisi eseguite, cliccare sul comando DATA LOG nella schermata iniziale del programma.

Un risultato >30 ppb indica che il campione supera gli 30 ppb di ocratossina A. Per i SOLI campioni di frumento è possibile misurare

valori fino a 100 ppb effettuando un’appropriata diluizione (vedi paragrafo “7 - Procedura di diluizione”).

5 - Esecuzione del test

6 – Lettura della strip con il QuickScan

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È possibile misurare la contaminazione di Ocratossina A in frumento a valori superiori a 30 ppb; la procedura è validata fino a 100 ppb.

A tal fine i campioni risultati > 30 ppb possono essere diluiti e ritestati.

• In un nuovo microtubo mescolare 1 ml di Grain Buffer Diluito + 200 µl di estratto per avere una diluizione 1:6 dell’estratto.

• Ripetere il test: come indicato nel paragrafo “5 – Esecuzione del Test” e leggere nuovamente la strip come indicato nel paragrafo

“6 – Lettura della strip con il Quick Scan”.

• Nella finestra dei risultati (Fig. 4), nella colonna “Select Dilution” selezionare il fattore 1:6; il software calcolerà automaticamente il

livello di contaminazione tenendo conto della diluizione effettuata e i risultati sono validi nel range di 30 - 100 ppb.

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si compongono sono di qualità standard. In caso di materiale difettoso, Generon S.p.A. si impegna a fornire un prodotto sostitutivo.

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: +39 059 8637161 : +39 059 7353024

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7 – Procedura di diluizione

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You can download all the documentation in English language directly from the envirologix website

www.envirologix.com (research your product)

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QuickTox Kits for QuickScan detection of Ochratoxin (AQ113BG) Cat. # GX10320

Référé pour Matrice QuickToxTM Kit for QuickScan detection of Ochratoxin (AQ113BG)

Matrice Échantillonnage Préparation de l’échantillon

Volume de Grain Buffer par

gramme d’échantillon

Agitation Purification

Protocole et Range de quantification (performer, si

nécessaire, les dilutions)

Transfert au tube de réaction et éventuel

Pré-mix

Insérer la bandelette et

attendre

Lecture QuickScan: sélectionner la

Dilution Tab sur la page des Résultats

Blé Recueillir un échantillon

représentatif sur la base des

indications UE

1. Moudre finement

2. Peser

(minimum 20 g)

5 ml

30 secondes

Centrifugation

3 minutes à 2000 g

Protocole Base

1.5 – 30 ppb

Transférer:

50 µL Tampon DB3 +

200 µL échantillon

10 minutes

1:1 (de default)

Dilution 1:6

30 – 100 ppb

Pré-mix:

1 ml Grain Buffer Dilué +

200 µL échantillon

Transférer:

50 µL Tampon DB3 +

200 µL échantillon

1:6

Maïs 4 ml Protocole Base

1.5 – 30 ppb

Transférer:

50 µL Tampon DB3 +

200 µL échantillon

1:1 (de default)

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Le kit QuickToxTM Kit for QuickScan detection of Ochratoxin a été mis au point pour extraire et détecter la présence d’Ochratoxine-A

dans échantillons de blé et maïs. Le kit fournit résultats quantitatifs dans la plage range 1.5 – 30 ppb. Pour le blé la plage peut être

étendue jusqu’à 100 ppb, après une dilution supplémentaire.

50 bandelettes QuickTox*

Tampon DB3

Grain Buffer concentré 20X

100 embouts

50 petits verres

* Les bandelettes sont sensibles à l’humidité, donc il est recommandable de les conserver à l’intérieur de leur tube original fermé. Eviter d’infléchir les bandelettes, puisque ça pourrait empêcher le flux de l’échantillon.

ATTENTION: Réaliser l’analyse à température ambiante, au moins 20-25° C. Une température inférieure ou supérieure peut fausser les résultats.

• Grain Buffer Dilué: diluer le Grain Buffer concentré 20 fois avec eau distillée (par exemple: mélanger 190 ml d’eau avec 10 ml

de Grain Buffer concentré).

• Avant de performer les tests, amener les bandelettes et les échantillons à température ambiante (20-24° C).

• Recueillir un échantillon représentatif du matériel qui doit être analysé, sur la base des indications UE sur l’échantillonnage et

de toute façon au moins 1 - 2 Kg.

• Moudre finement l’échantillon jusqu’à une granulométrie d’au moins 20 Mesh (0,8 mm). Mélanger soigneusement tout le

matériel broyé avant d’effectuer le sous échantillonnage afin de minimiser la variabilité

• Peser de 20 à 50 g d’échantillon après l’avoir mélangé.

• Sur la base de la matrice à analyser et à la quantité pesée, ajoutes les volumes de Grain Buffer par gramme d’échantillon

indiquées dans le tableau suivant:

Matrice Volume de Grain Buffer Dilué par gramme d’échantillon

Blé 5 ml (par exemple pour 20 g d’échantillon, il faut 100 ml de Grain Buffer dilué)

Maïs 4 ml (par exemple pour 20 g d’échantillon, il faut 80 ml de Grain Buffer dilué))

• Fermer le récipient et mélanger énergiquement pendant 30 secondes, de façon à ce que tout l’échantillon soit mouillé.

• Remplir un tube de microcentrifugeuse avec l’échantillon extrait.

• Centrifuger 3 minutes à 2000 g. Le surnageant est à utiliser pour le test.

4 – Préparation de l’échantillon

2 – Contenu du kit

1 - Introduction

3 – Préparation des réactifs

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• Transférer 50 µl de Tampon DB3 dans un petit verre

• Ajouter 200 µl d’échantillon

• Mélanger soigneusement avec la micropipette, en remplissant et vidant la pipette 4-5 fois.

• Insérer la bandelette dans le tube, en immergeant la partie colorée.

• Atteindre 10 minutes

• Enlever la bandelette du tube de test

• Couper la partie colorée à l’aide de ciseaux

• Procéder avec la lecture de la bandelette avec le QuickScan

• Lancer le logiciel avec un double clic sur l’icône Quickscan (QS) sur le bureau. Le menu principal va s’ouvrir (Fig.1).

• Ouvrir le boitier et poser la bandelette avec le code-barres vers le bas porche à la poignée (Fig.2).

• Insérer le boitier porte-bandelettes dans le scanner (Fig.3).

• Cliquer sur “READ TEST” dans le menu principal du logiciel. Attendre que le Quickscan termine le scan.

• La fenêtre des résultats va s’ouvrir, où on peut taper les informations pour identifier l’échantillon (Fig.4). Afin que l’image de la

bandelette soit mémorisée sur l’ordinateur, il faut au moins taper le nom de l’échantillon dans l’espace “Sample ID” et appuyer

sur la touche Entrez (Enter).

Fig. 1 Fig. 2 Fig. 3 Fig. 4

• Pour imprimer immédiatement le rapport d’analyse, appuyer PRINT en bas à droite.

• Appuyer CLOSE pour fermer la fenêtre des résultats.

• Pour revoir ou imprimer les résultats dans un second temps, cliquez sur le dossier REPORTS sur le bureau.

• Pour visualiser le registre de toutes les analyses effectuées, cliquer sur “DATA LOG” dans le menu principal du logiciel.

Un résultat >30 ppb indique que l’échantillon dépasse les 30 ppb d’ochratoxine A. Pour les échantillons de blé, il est possible tester

valeurs jusqu’à 100 ppb avec les procédures de dilution appropriées (voir paragraphe “7 - Procédure de dilution”).

5 - Réalisation du Test

6 – Lecture de la Bandelette avec le QuickScan

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Il est possible tester la contamination d’Ochratoxine A dans échantillons de blé à valeur supérieurs à 30 ppb; la procédure est validé

jusqu’à 100 ppb.

Les échantillons dépassants les > 30 ppb peuvent être dilués et testés à nouveau.

• Dans un nouveau tube mélanger 1 ml de Grain Buffer Diluito + 200 µl d’extrait pour avoir une dilution 1:6.

• Répéter le test: comme indiquée dans le paragraphe “5 – Réalisation du Test” et lire à nouveau la bandelette comme indiqué

dans le paragraphe “6 – Lecture de la Bandelette avec le QuickScan”.

• Dans la fenêtre des résultats (Fig. 4), sélectionner dans la colonne “Dilution” du menu rideau 1:6; le logiciel calculera

automatiquement le niveau de contamination en considérant la dilution effectuée et les résultats sont valides dans la plage 30 -

100 ppb.

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7 – Procédure de dilution