EVD PREPAREDNESS AND RESPONSE TRAINING PACKAGE Laboratory 1 |1 | Laboratório Diagnóstico, amostra...

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LaboratórioLaboratório

Diagnóstico, amostra e Diagnóstico, amostra e transporte transporte

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FIG: Representação de uma imagem microscópica FIG: Representação de uma imagem microscópica do vírus do Ébolado vírus do Ébola

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Objectivos e Resultados da Objectivos e Resultados da SessãoSessão

Objectivos– Compreender os princípios básicos do

diagnóstico de laboratório– Assegurar uma recolha segura de amostras

do caso suspeito de Ébola– Assegurar um transporte seguro e apropriado

da(s) amostra(s) para o Laboratório de Referência

Resultados Esperados– Conhecer todos os principais abastecimentos– Identificar todos os passos para a recolha e

transporte das amostras– Compreender todas as principais medidas

para a prevenção de infecções

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Diagnóstico ● Doenças que devem ser excluídas incluem: paludismo, febre

tifóide, shigelose, cólera, leptospirose, peste, riquetsiose, febre recorrente, meningite, hepatite e outras febres hemorrágicas virais

● Papel essencial do histórico do doente; exposição à área/aldeia com um surto em curso e/ou contacto com casos confirmados

● Testes de diagnóstico: ● Ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA)● Testes de detecção de antígenos● Ensaio de reacção em cadeia de polimerase via transcriptase reversa (RT-

PCR)● Microscopia electrónica● Isolamento do vírus através da cultura de células

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Viremia de Curta Duração

Tempo3-7 dias 3-15 dias

Febre

Vírus / Antigénio

Anticorpos neutralizantes IgG ELISA

Anticorpos IgM

Incubação Doença(Figura adaptada de T Ksiazek CDC/Atlanta)

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● Uma rede de laboratórios de diagnóstico de alta segurança Laboratórios Humanos e Animais de Alta Segurança BSL-4 e alguns BSL-3

● Apoia a resposta rápida para detectar, diagnosticar e controlar novas ameaças de doenças Resposta laboratorial Desenvolvimento de análises e reagentes Transferência e formação de tecnologias Investigação aplicada Coordenação mundial e troca de informações

Rede Laboratorial de Agentes Patogénicos Emergentes e Perigosos (EDPLN)

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EDPLN - 23 membros a nível mundial

Região das Américas

Regiões da OMS

Região Africana

Região do Sudeste Asiático

Região Europeia

Região do Mediterrâneo Oriental

Região do Pacífico Ocidental

Membro da EDPLN (6 membros)

Membro da EDPLN e CC da OMS (15 membros)

Membro da EDPLN e laboratório veterinário (2 membros)

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Recolha e Transporte de Amostras: Recolha e Transporte de Amostras: resumoresumo

• Antes da recolha das amostras• Durante a recolha das amostras• Após a recolha das amostras

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• Antes de entrar no quarto do doente1. Reunir todos os materiais2. Preencher a documentação do doente3. Realizar a higiene das mãos4. Colocar todo o equipamento de

protecção pessoal5. Levar todos os principais materiais

para a recolha das amostras

Antes da recolha das Antes da recolha das amostrasamostras

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Reunir todos os materiaisReunir todos os materiaisEquipamento para recolher uma amostra de sangue: 2-5 ml de tubo com EDTA, tubo de separação de soro (SST)

Equipamento para prevenir infecções

OU +

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Preencher a documentação Preencher a documentação do doentedo doente

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Realizar a higiene das mãosRealizar a higiene das mãos

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Colocar todo o equipamento de protecção Colocar todo o equipamento de protecção pessoalpessoal

Levar todos os principais materiais para a recolha das amostrasLevar todos os principais materiais para a recolha das amostras

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Recolha da amostra de sangue de EVD

• Apenas devem ser obtidas amostras essenciais para o diagnóstico ou monitorização (2 a 5 ml)

• Amostras a serem recolhidas: 2 a 5 ml de sangue para PCR e cultura de vírus num tubo com EDTA; para a serologia (se necessário) num tubo de separação de soro (SST)

• As amostras devem ser obtidas por pessoal experiente nas técnicas necessárias

• É necessária uma boa coordenação com as outras equipas (epidemiológica, colegas da prevenção e controlo de infecções, médicos, etc.)

• As roupas protectoras incluem: dois pares de luvas, que facilita a descontaminação do exterior do recipiente de amostras; bata resistente a fluídos e de mangas compridas com punhos; protecção facial completa; máscara cirúrgica ou de procedimento

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Recolha da amostra de sangue de EVD

• A necessidade de equipamento de protecção pessoal (EPP) adicional, como coberturas para os pés/pernas, touca, a utilização de uma máscara ajustada N95 ou semelhante ou fatos biológicos específicos depende do potencial de contacto com fluídos ou de aerossolização, dependendo do procedimento a ser feito e da presença de sintomas clínicos que aumentem a probabilidade de contacto com fluídos corporais

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• Recolha de uma amostra de sangue de um doente1. Preparar o quarto2. Identificar e preparar o doente3. Recolher a amostra de sangue4. Tirar o tubo de recolha de sangue do suporte e

colocá-lo no tabuleiro5. Colocar a agulha, outros artigos que pingam sangue

ou possuem fluídos corporais dentro do saco de resíduos infecciosos para serem destruídos

• Preparar a amostra de sangue para transporte• Remover o EPP• Realizar a higiene das mãos

Durante a recolha das amostrasDurante a recolha das amostras

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Recolha de amostras de sangue (1ª Recolha de amostras de sangue (1ª parte)parte)

Preparar o quarto Identificar e preparar o doente

Escolher o sítio

Colocar um torniquete

Pedir ao doente que faça um punho, para que as veias fiquem mais destacáveis

Desinfectar a área onde irá colocar a agulha

Ancorar a veia Retirar o sangue

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Recolha de amostras de sangue (2ª Recolha de amostras de sangue (2ª parte)parte)

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Preparar a amostra de sangue para o Preparar a amostra de sangue para o transportetransporte

A amostra está agora pronta para ser enviada para o Laboratório Nacional Central. Siga os requisitos de empacotamento do Envio de Amostras para as substâncias infecciosas.

< 1 semana: Armazenar amostras à temperatura ambiente até 24 horas. > 1 semana antes do envio: armazenar entre 0-5° Celsius. > uma semana antes do envio, armazenar a -20° Celsius (ou melhor ainda, a -70° Celsius se disponível). Evitar ciclos de congelamento-descongelamento.

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Remover o EPP e realizar a higiene das Remover o EPP e realizar a higiene das mãosmãos

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1. Preparar todos os materiais de envio antes de entregar a(s) amostra(s)

2. Preparar a amostra3. Empacotar a amostra4. Marcar e rotular a caixa5. Finalizar o envio

Após a recolha das amostrasApós a recolha das amostras

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● O envio de amostras deve seguir os padrões internacionais de envio para o “transporte de substâncias infecciosas de categoria A” (sistema de empacotamento triplo)

● A logística de envio deve ser coordenada através da rede EDPLN● Categoria A para os vírus vivos● Categoria B para amostras inactivas

Envio de Amostras

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Preparar todos os materiais de envio Preparar todos os materiais de envio antes de entregar a(s) amostra(s)antes de entregar a(s) amostra(s)

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Envio de uma amostra de sangue de EVD

• Armazenar as amostras num frigorífico ou num congelador (se demorar mais de 24 horas) até que sejam enviadas para serem testadas.

• As amostras refrigeradas devem ser enviadas com embalagens de gelo e as amostras congeladas devem ser enviadas com gelo seco.

• Enviar as amostras em sacos de resíduos infecciosos estanques separados e seláveis, colocados num recipiente de envio aprovado pelo TDGR.

• O empacotamento, envio e transporte de todas as amostras relacionadas com um caso suspeito de EVD devem obedecer aos requisitos do Transporte de Materiais Perigosos (TDGR) e devem ser realizados por um indivíduo certificado pelo TDG. Estes regulamentos requerem que o manuseamento e o envio das amostras do doente estejam de acordo com os procedimentos internacionais para o transporte de substâncias infecciosas de categoria A (UN2814)

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Preparar a amostraPreparar a amostra

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Empacotar a amostraEmpacotar a amostra

Se for necessária refrigeração

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Marcar e rotular a Marcar e rotular a caixacaixa

Finalizar o Finalizar o envioenvio

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QuestõesQuestões