8/16/2019 Cultivo de Liquido Cefaloraquideo

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14/09/2015

Cultivo de LiquidoCefaloraquideo

Interés clínico del LCR

• Infecciones delSNC

• Procesosvasculares

• Enfermedadesdesmirelizantes

• Tumores del SNC

Meningitis

• La meningitis puede definirse como unainflamación de las leptomeninges (piamadre yaracnoides) con afectación del LCR que ocupael espacio subaracnoideo; puesto que tantolas leptomeninges como el LCR se extiendenpor el cerebro y canal medular, el términoimplica siempre una afectación

cerebroespinal.

Meningitis infeciosa

• Mas frecuente

Clasificada en:• Aguda:

– Piógena aguda (bacteriana) – Aséptica (viral)

• Crónica (bacteriana o micótica o parásitos)

Meningitis bacteriana

•

Curso agudo yabrupto• Gérmenes

involucradosdependen de laedad del paciente

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Meningitis: clínica

• Síntomas y signos deinfección general:

– Fiebre – Malestar general

• Síntomas o signos dehipertensiónendocraneana

– Cefalea – Vómitos

• Síntomas o signos deirritación meníngea

– Cefalea – Irritabilidad – Aturdimiento – Rigidez de nuca

Obtención de lamuestra

Obtención de la muestra

• Con presiones normales, pueden extraersehasta 20mL de LCR sin ningún peligro.

• Si la presión inicial es >200 mm Hg, no debenextraerse más de 2mL.

• Alícuotas: – Tubo 1: estudios bioquímicos e inmunológicos – Tubo 2: examen microbiológico –

Tubo 3: recuento de leucocitos y su contajediferencial.

La muestra

• El LCR es claro y sin color.• En presencia de alteraciones, el líquido puede

adquirir diferentes aspectos:• TURBIDEZ

– Presencia de gérmenes: > 105UFC – Pleocitosis: más de 200 leucocitos / μL – Existencia de hematíes: más de 400 / μL – Nivel elevado de proteínas

Microbiología

• Se considera unamuestra de emergencia

• Coloración de Gram: – Cristal violeta – Lugol – Alcohol-acetona – Safranina

• Examen directo (fresco)

Microbiología

¿Qué mediosutilizamos?

• Agar sangre decarnero

• Agarchocolate

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Microbiología

• Siembra pordispersiónagotamiento

• Incubación: – Temperatura: 35º C – Tiempo: 24 -48 horas – Requerimiento :

CO25%

Identificaciónbacteriana

α -hemolíticoGram: CGPCatalasa:

negativo

Streptococcus pneumoniae

• Las colonias jóvenes dey delviridans

neumococoestreptococoα -hemolítico aparecenlevantadas; sinembargo, después de24 a 48 horas, elcentro de las coloniasde neumococos sevuelve deprimido,mientras las coloniasde estreptococoviridans conservan suapariencia

Streptococcus pneumoniae

La optoquina

(hidrocloruro deetilhidrocupreína) susceptible en bajasconcentraciones (5μgo menos) La optoquina puedeinhibir otros α -hemolíticos , pero enconcentracionesaltas.

Incubación 20-24 hs35 °C y 5% CO 2

5μg

10mm

6mm

5μg

DISCO 6 mm

S : ≥ 14 mm = S. pn

9-13 mm = P. Solubilidad

DISCO 10mm

S: ≥ 16 mm = S. pn < 16 mm = P.Solubilidad

17 mm

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Las sales de bilis (desoxicolato y el taurocolato desodio) tienen la capacidad de lisar S. pneumoniae,cuando en solución se adicionan a una suspensión

de microorganismos (suspensión realizada a partirde un cultivo fresco de S. pneumoniae de 18- 24horas en agar sangre ovina al 5%).

S. pneumoniae produce enzimas autolíticas que sonlas responsables de la característica umbilicadade la colonia en cultivos viejos. La adición de lasolución de sales de bilis a la suspensión de la bacteria,acelera el proceso de lisis; proceso asociado con ladisminución de la tensión superficial entre el medio y lamembrana celular bacteriana.

Haemophilus influenzae es el

enfermedades

agente más

tales comofrecuente deneumonía, meningitis, otitis media yconjuntivitis. La meningitis por H. influenzaese presenta casi exclusivamente en niñosmenores de 5 años de edad; la mayoría de loscasos de enfermedad invasiva porH influenzae es causada pormicroorganismos con el polisacárido capsulartipo b

• Bacilos o cocobacilos Gram negativos,generalmente menores de 1 μm de ancho y delongitud variable;

• Son inmóviles, no esporulados, aerobios yanaerobios facultativos. Se desarrollan aun atemperatura óptima de 35 -37ºC en atmósferadel 5% de CO2.

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Son organismos quimiorganotróficosexigentes:que es un

requierenpigmento

del factor X (hemina),que contiene hierro y

suministra los compuestos tetrapirrólicosnecesarios para la síntesis de citocromos yenzimas y del factor V (NAD), que es unacoenzima que participa en las reaccionesde óxido reducción del metabolismo;esta coenzima es termolábil

Gram: CBGP Requerimiento de

factores Satelitismo

C.A.M.P.

Bilis esculina . Cl Na 6.5%

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Gram: BGP corto Blis esculina:

positivo Movilidad atemperaturaambiente(paraguas)

C.A.M.P.: positivo(palito de fosforo)

Movilidad a 22º C Movilidad a 37º C