Bst Report Fifit_DOi

8/19/2019 Bst Report Fifit_DOi

1/34

UJI BST

BAB I

P E N D A H U L U A N

A. Latar Belakang

Perkembangan dalam bidang farmasi saat ini berpengaruh

terhadap pengujian yang dilakukan. Sekali pengujian dapat memberikan

manfaat dan hasil yang banyak sehingga tidak lagi menggunakan banyak

waktu untuk melakukan pengujian berulang- ulang. Sepertinya halnya

pengujian tentang kandungan kimia dari suatu bahan alam, selain yang

didapatkan zat yang berkhasiat kita juga dapat menentukan efek toksisitas

dari suatu senyawa.

metode kimiawi atau fisika merupakan metode yang digunakan

untuk mengukur aktifitas kebanyakan obat atau bahan alam secara cepat

dan teliti dengan menggunakan alat modern, misalnya dengan

spektrofotometer ultraviolet/infrared, dan polarograf. ntuk obat yang

struktur kimianya belum diketahui dan untuk sediaan tak murni atau

campuran dari beberapa zat aktif, metode ini tidak dapat dilakukan. !bat-

obat ini diukur dengan metode biologis, yaitu dengan bio-assay, dimana

aktifitas ditentukan oleh organisme hidup "hewan, kuman# dengan

membandingkan efek obat tersebut dengan efek suatu standar

internasional.

$engan menggunakan atau melihat kematian dari hewan

percobaan sebagai suatu respon dari pengaruh suatu senyawa yang diuji


2/34

UJI BST

inilah yang merupakan uji toksisitas. %ngka kematian hewan percobaan

tersebut dihitung sebagai &edian lethal concenration. '(rine shrimp

lethality test) *dalah uji pendahuluan suatu senyawa yang memiliki

keuntungan dimana hasil yang diperoleh lebih cepat "+ jam#, tidak

mahal, mudah pengerjaannya dari pengujian lanilla. fek toksik dapat

diketahui atau diukur dari kematian larva karena pengaruh bahan uji

al diatas yang melatar belakangi dilakukannya uji toksisitas

dimana ini sangat penting untuk mengetahui dan melihat efek toksisitas

yang paling efektif dari sampel yang digunakan.

B. Maksud dan Tujuan Percobaan

&aksud dari percobaan ini adalah untuk mengetahui cara

pengujian (S " (rine Shrimp 0ethality est # pada hewan tertentu.

ujuan dari percobaan ini adalah untuk melihat toksisiitas

berdasarkan konsentrasi efektif yang bersifat letal pada larva udang

( Artemia salina ).

C. Manfaat Praktku!

%gar dapat mengetahui cara pengujian (S " (rine Shrimp

0ethality est # dengan melihat toksisitas dari suatu bahan alam dengan

melihat pengaruh konsentrasi yang paling efektif yang dapat mematikan

hewan coba tertentu.


3/34

UJI BST

D. Prns" Percobaan

Penentuan toksisiitas berdasarkan konsentrasi efektif pada ekstrak

metanol akar penawar yang ditandai dengan adanya kematian pada larva

udang ( Artemia salina ) selama 1 2 + jam.


4/34

UJI BST

BAB II

TIN#AUAN PU$TA%A

A. Uraan He&an

'. %lasfkas He&an Coba

http3//en.wikipedia.org/wiki/Scientific4classification

5ingdom 3 %nimalia

Phylum 3 %rtrophoda

Sub Phylum 3 6rutaceae

5elas 3 (ronchociopoda

!rdo 3 %nostrata

7amili 3 %rtemidae

8enus 3 %rtemia

Spesies 3 Artemia salina Linn

(. Morfolog )Mudj!an* '+,,-

9stilah untuk telur artemia yang benar adalah siste yaitu telur

yang telah berkembang lebih lanjut menjadi embrio dan kemudian

diselubungi oleh cangkang yang kuat dan tebal. 6angkang ini

berguna untuk melindungi terhadap pengaruh terhadap, benturan

keras, sinar ultraviolet dan mempermudah pengapungan.

6angkang telur artemia secara garis besar dibagi dua yaitu

korion yang bagian luar dan kutikula emnbrionik yang dibagian

dalam. $iantara dua lapisan tersebut terdapat lapisan ketiga yang

dinamakan selaput kutikuler luar.

http://en.wikipedia.org/wiki/Scientific_classificationhttp://en.wikipedia.org/wiki/Scientific_classification


5/34

UJI BST

5orion sendiri yang tebalnya : ; < mikrometer, masih dibagi

lagi menjadi dua bagian yaitu lapisan paling luar yang namakan

lapisan peripheral "terdiri dari selaput luar dan lapisan kortial# dan

lapisan alveolar yang berada dibawahnya. Selaput kurtikuler yang

tebalnya =,> mikrometer, merupakan selaput biologis yang tersusun

tiga.

5utikula embrionim yang tebalnya 1,< ; +,+ mikrometer,

dibagi menjadi dua bagian lagi, yaitu lapisan fibrosa di bagian atas

dan selaput kurtikuler dalam dibawahnya. Selaput ini nantinya

merupakan selaput penetasan yang memmbungkus embrio.

(agian luar korion banyak mengandung hematin "derivat

haemoglobin# yaitu sejenis lpopretein. 5arena hematin itulah makan

telurnya jadi berwarna coklat. 9ni penting untuk melindungi embrio

dari pengaruh buruk sinar ultraviolet.

$iameter sebutir telur %rtemia berkisar berkisar antara +==-

?>= mikrometer "=,+ ; =,? mm#, sedangkan berat keringnya sekitar ?,

:> mikrogram, yang terdiri dari +,@ mikrogram embrio dan =,A>

mikrogram cangkangnya.

?. raian tentang larva "&udjiman, 1@ kali


6/34

UJI BST

perubahan bentuk merupakan satu tingkatan. 0arva tingkat 9

dinamakan instar 9, tingkat 99 instar 99, tingkat 999 instar 999, demikian

seterusnya sampai instar BC, setelah itu berubalah menjadi %rtemia

dewasa.

0arva yang baru saja menetas masih dalam tingkatan instar

9, bentuknya bulat lonjong dengan panjang sekitar == mikron "=,=

mm# dan beratnya 1> mikrogram. Darna kemerah-merahan karena

masih banyak mengandung makanan cadangan.

%nggota badannya terdiri dari sepasang sungut kecil

"antenula atau antenna 9# dan sepasang sungut besar "antenula atau

antenna 99# dibagian dan seterusnya.

%nggota badannya trdiri dari sungut kecil "antenula atau

anntenna 9# dan sepasang sungut besar "antenna 99#, dibagian depan

diantara ke dua sungut kecil terdapat bintik merah yang tidak lain

adalah mata naupilisnya "oselus#. $ibelakang sungut besar terdapat

mandibula "rahang# dan rudimeter kecil. Sedangkan pada bagian

perut "ventral# sebelah depan terdapat labrum.

Pada pangkal sungut besar "antena 99# terdapat bangun

seperti duri yang menghadap ke belakang "gnotobasen seta#

bangunan ini merupakan ciri khusus untuk membedakan burayak

instar 9, instar 99 dan instar 999. Pada banyak instar 9 "baru menetes#

gnotobasen setannya masih belum berbuluh dan juga belum

bercabang.


7/34

UJI BST

Sekitar + jam setelah menetas, burayak akan berubah

menjadi instar 99. 0ebih lama lagi akan berubah menjadi instar 999.

Pada tingkatan instar 99, gnotobesan setanya sudah berbulu tapi

masih belum bercabang. Sedangkan pada instar 99, selain berbulu

gnotobasen seta tersebut sudah bercabang dua.

Pada tingkatan instar 99, burayak mulai mempunyai mulut,

saluran pencernaan dan dubur. !leh karena itu mereka mulai

mencari makan, bersamaan dengan itu cadangan makanannya

juga sudah mulai habis. Pengumpulan makannya dengan cara

menggerak-gerakannya antena 99-nya. Selain untuk mengumpulkan

makanan antena 99 jua berfungsi untuk bergerak. ubuh instar 99

dan instar 99 sudah lebih panjang dari instar 9.

Pada tingkatan selanjutnya, disebelah kanan dan kiri

mata nauplius mulai terbentuk sepasang mata majemuk. &ula-mula

masih bertangkjai. 5emudian secara berangsur-angsur berubah

menjadi bertangkai. Selain itu, dibagian samping badannya "kanan

dan kiri# juga berangsur-angsur tumbuh tunas kainya "torakopoda#.

&ula-mula tumbuh dibagian depan kemudian berturut-turut oleh

bagian-bagian yang lebih ke belakang. Setelah menjadi instar BC,

kakinya sudah lengkap sebanyak 11 pasang, maka berakhirlah

masa burayak dan berubah menjadi Artemia dewasa.

Artemia dewasa bentuknya telah sempurna, dengan

ukuran panjang 1 cm dan beratnya 1= mg. Artemia dewasa dapat


8/34

UJI BST

hidup selama beberapa bulan "sampai : bulan# . sementara itu

setiap ; > hari sekali mereka dapat beranak "pada lingkungan

yang baik# atau bertelur "pada lingkungan yang baik# sebanyak >=

; ?== ekor atau butir. %nak artemia "nauplisus# sudah menjadi

dewasa dalam waktu 1 hari. Eadi pada keadaan lingkungan yang

baik %rtemia akan memperbanyak diri secara cepat dengan

melahirkan anak. %pabila keadaan berubah menjadi buruk, mereka

segera memproduksi telur, yang nantinya mampu bertahan selama

keadaan buruk tersebut berlangsung. Sedangkan Artemia dewasa

akan segera mati. %pabila keadaan buruk telah berlalu telur-telur

Artemia akan menetas.

B. Uraan Baan

'. Uraan /at aktf

1. %ir Suling )Drjen P0M* '+1+ al. ',-

Fama resmi 3 %Gua destillata

Sinonim 3 %ir suling, aGuadest

H&/(& 3 +! / 1


9/34

UJI BST

+. &etanol ) Drjen P0M* '+1+ al. 23-

Fama resmi 3 &ethanol

Sinonim 3 &etanol

H&/(& 3 6?! / ?+

Humus struktur 3 6?-!

Pemerian 3 6airan tidak berwarna , jernih dan berbau

khas

5elarutan 3 $apat bercampur dengan air , membentuk

cairan jernih tidak berwarna

Penyimpanan 3 $alam wadah tertrutup baik.

5egunaan 3 Sebagai cairan penyari dan kontrol

C. Dasar Teor

Setiap zat kimia pada dasarnya bersifat racun dan terjadinya

keracunan ditentukan oleh dosis dan cara pemberian. Paracelsus pada

tahun 1>: telah meletakkan dasar penilaian toksikologis dengan

mengatakan, bahwa dosis menetukan apakah suatu zat kimia adalah

racun "dosis sola facit venenum#. Sekarang dikenal banyak faktor yang

menentukan apakah suatu zat kimia bersifat racun, namun dosis tetap

merupakan faktor utama yang terpenting. ntuk setiap zat kimia, termasuk

air, dapat ditentukan dosis kecil yang tidak berefek sama sekali, atau

suatu dosis besar sekali yang dapat menimbulkan keracunan dan


10/34

UJI BST

kematian. ntuk zat kimia dengan efek terapi, maka dosis yang adekuat

dapat menimbulkan efek farmakoterapeutik. )4ans&ara* '++3* al 5 167-

5ebanyakan obat dapat diukur aktivitasnya secara cepat dan

teliti dengan metode kimiawi atau fisika, dengan mnggunakan alat

modern, misalnya dengan spektrofotometer ultraviolet/infrared. $an

polarograf. )Tja8* (99(* al 5 '6-

ntuk obat yang struktur kimianya belum diketahui dan untuk

sediaan tak murni atau campuran dari beberapa zat aktif, metode ini tidak

dapat dilakukan. !bat-obat ini diukur dengan metode biologis, yaitu

dengan bio-assay, dimana aktivitas ditentukan oleh organisme hidup

"hewan, kuman# dengan membandingkan efek obat tersebut dengan efek

suatu standar internasional. )Tja8* (99(* al 5 '6-

(io-assay dan penggunaan satuan biologis umumnya

ditinggalkan segera setelah terwujud suatu metode fisiko-kimiawiI

selanjutnya kadar dinyatakan dalam gram atau mg. 6ara inilah yang

dilakukan pada tubokurarin "1@>>#, kloramfenikol "1@>:# dan penisilin

"1@:=#. !bat-obatan yang dewasa ini masih distandarisasi secara biologis

adalah %6, antibiotika polimiksin dan basitrasin, vitamin %, faktor

pembeku darah, sediaan antigen dan antibodi, digitalis, pirogen dan

insulin "meskipun struktur kimia dan pemurniannya sudah dikenal#. )Tja8*

(99(* Hal 5 '6-


11/34

UJI BST

oksikologi merupakan ilmu yang lebih tua dari 7armakologi.

$isiplin ini mempelajari sifat-sifat racun zat kimia terhadap makhluk hidup

dan lingkungan. Sedikitnya >=.=== zat kimia kini digunakan oleh manusia

dan karena tidak dapat dihindarkan, maka kita harus sadar tentang

bahayanya. )4ans&ara* '++3* al 5 16(-

ji toksisitas dilakukan untuk mengetahui tingkat keamanan dan

kebahayaan zat yang diuji. %dapun sumber zat toksik berasal dari alam

maupun bahan sintetik ) Anon!* (991* al.+ -.

%da beberapa kemungkinan untuk menggolongkan toksikologi

diantaranya 3 )Mustcler* '++'. al 5 1(7-

1. fek toksis akut, yang langsung berhubungan dengan pengambilan

zat toksik.

+. fek toksik kronik, yang pada umumnya zat dalam jumlah sedikit

diterima tubuh dalam jangka waktu yang lama sehingga akan

terakumulasi mencapai konsentrasi toksik dan dengan demikian

menyebabkan terjadinya gejala keracunan.

fek toksik yang terjadi Sangat bervariasi dalam sifat, organ

sasaran maupun mekanisme kejanya.efek toksik dapat bersifat

) Anon!* (991* al.+ - 5

1. Lokal I yaitu hanya terjadi pada tempat bahan toksik besentuhan

dengan tubuh, misalnya pada saluran pencernaan, iritasi gas, atau uap

saluan nafas


12/34

UJI BST

+. $ste!k I terjadi hanya setelah toksikan tersekap dan tersebar

kebagian tubuh yang lain. mumnya toksikan hanya mempengaruhi

satu atau baberapa organ saja.

?. :e;ersble I bila efek yang ditimbulkan dapat hilang dengan

sendirinya atau dapat hilang beberapa waktu setelah pemaparan

toksikan tertentu.

. Irre;ersble I yaitu efek yang menetap atau justru bertambah parah

setelah pemaparan toksikan berhenti.

5anker berasal dari bahasa Junani yaitu kartunus 3 kepiting,

artinya pembentukan jaringan baru yang abnormal dan bersifat ganas,

suatu kelompok sel dengan mendadak menjadi liar dan memperbanyak

diri secara pesat dan terus-menerus ) 4ans&arna* '++3 5 362 -

%dapun sifat mum 5anker yaitu )4ans&arna* '++35 363 -

1. Pertumbuhan berlebihan umumnya berbentuk tumor

+. 8angguan deferensiasi dari sel dan jaringan sehingga mirip jaringan

mudigah

?. (ersifat invasif,mampu tumbuh dijaringan sekitar

. (ersifat metastatik,menyebar ke tempat lain

>. &emiliki hereditas bawaan,turunan sel kanker juga dapat

menyebabkan kanker

:. %danya pergeseran metabolisme


13/34

UJI BST

(elakangan ini telah banyak pengujian tentang toksisitas yang

dikembangkan untuk pencarian produk alam potensial sebagai bahan

antineoplastik, metode pengujian tersebut antara lain simple brench-top

bioassay "terdiri dari brine shrimp lethality test, lemna minor bioassay dan

grown-gall potato disc bioassay# dan pengujian pada sel telur bulu babi

) Mclaugln* '++' * al. 72 -

1. $engan berdasarkan pemikiran bahwa efek farmakologi adaolah

toksikologi sederhanan pada dosis yang rendah dan sebagian besar

senyawa antitumor. Senyawa yang mempunyai kemampuan

membunuih sel kanker dalam dalam kultur sel . pengujian ini adalah

pengujian letalitas yang sederhana dan tidak spesifik untuk aktufitas

tumor, tetapi merupakan andikator toksisitas yang baik dan

menunjukan korelasi yang kuat dengan pengujian anti tumor lainnya

seperti uji sitotoksitas dan uji leukemia tikus. 5arena kesederhanaan

prosedur pengerjaan, biaya yang rendah serta kolerasinya terhadap

pengujian toksisitas dan pengujian antitumor menjadikan brine

shrimp lethality test sebagai uji hayati pendahuluan untuk aktifitas

anti tumor yang sesuai dan dapat dilakukan secara rutin.

+. 0emmna minor bioassay terutama digunakan sebagai uji pendahuluan

terhadap bahan yang dapat menghambat dan meningkatkan

pertumbuhan tanaman. $engan pengujian ini dapat diamati bahwa

senyawa anti tumor alami juga dapat menghambat pertumbuhan

lemmna, walaupun kolerasinya dengan pengujian anti tumor lanilla


14/34

UJI BST

kurang baik. !leh karena itu, pengujian ini lebih diarahkan untuk

mencari herbisida dan stimulan pertumbuhan tanaman baru.

?. 8rown-gall potato bioassay merupakan metode pengujian toksisitas

yang relatif cepat pengerjaannya, tidak mal, tidak memerlukan hewan

percobaan serta menunjukan korelasi yang Sangay baik dengan uji

antitumor lanilla. $isebabkan bakteri gram negatif agrobakterium

tumefaciens yang selanjutnya menyebabkan pertumbuhan jeringan

tumor secara otonom dan tidak dipengerahui oleh mekanisme control

normal tumbuhan. Pengujian dilakukan tumor grwon-gall pada urbi

kentang yang infeksikan dengan bakteri agrobakterim tumefaciens.

Suatu metode yang menggunakan udang laut artemia salina

leach diajukan sebagai suatu 'bioassay) sederhana untuk penelitian

produk alamiah h*dala 'brine shrimp lethality test) metode ini

mangunakan hewan uji artemia salina leach yang merupakan udang-

udangan primitif sederhana dan efektif dalam ilmu biologi dan toksikologi.

Prosedur penentuan 06>= dalam mg/ml dari ekstrak dilakukan dalam

mKdium air asin. (esarnya aktifitas adari ekstrak ditjukan sebagai

toksisitas terhadap larva udang ) Anon!* (991* al.'9 -.

'(rine shrimp lethality test) *dalah uji pendahuluan suatu

senyawa yang memiliki keuntungan yaitu hasil yang diperoleh lebih cepat

"+ jam#, tidak mahal, mudah pengerjaannya dari pengujian lainnya

karena tidak membutuhkan peralatan dan latihan khusus/ sampel yang


15/34

UJI BST

digunakan relatif sedikit. fek toksik dapat diketahui atau diukur dari

kematian larva karena pengaruh bahan uji ) Anon!* (991* al.'9 -.

Pengertian tentang 06>= adalah konsentrasi dari statu senyawa

kimia diudara atau dalam air yang dapat menyebabkan >=L kematian

pada statu populasi hewan uji atau makhluk hidup tertentu. Sedengkan

0$>= adalah dosis dari statu senyawa kimia yang dapat menyebabkan

>=L kematian hewan uji yang diberikan pada setiap individu yang telah

ditentukan atau yang lebih tepat *dalah dosis tunggal yang diperoleh

secara statistik dari suatu bahan yang dapat menyebabkan >=L kematian

hewan uji ) Ma8er * '+,(* al. 7'= dimaksudkan untuk pengujian ketoksikan

dengan perlakuan terhadap hewan uji secara berkelompok yaitu pada

saat hewan uji dipaparkan suatu bahan kimia melaluui udara maka hewan

uji tersebut akan menghirupnya atau percobaan toksisitas dengan media

air. Sedangkan 0$>= digunakan untuk menguji ketoksikan suatu bahan

nimia dengan rute pemberian secara oral atau intraperitonial pada hewan

uji ) Ma8er * '+,(* al. 7'= dapat digunakan untuk menentukan tingkat efek toksik

suatu senyawa sehingga dapat juga untuk mempediksi potensinya

sebagai anti kanker ) Anon!* (991* al.+ -.


16/34

UJI BST

D. Prosedur %erja ) Anon!* (991* al. '' -

%lat 3 aerator, batang pengaduk, corong, gelas ukur 1= ml, mikropipet,

neraca analitik, pipet tetes, pipet skala 1 ml, sepeangkat alat

penetesan telur, timbangan kasar, termometer, vial.

(ahan 3 air laut, air suling, ekstrak ragi, yertas saring, sampel uji, telur

udang artemia salina leach.

1. Penyiapan larva

Sebanyak >= mg telur aritemia salina leach, direndam dalam +== ml air

laut pada kondisi p A ; < dibawah cahaya lampu dan suhu +> = 6 dan

dilengkapi dengan anterator. elur udang akan menetas setelah + jam

dan menjadi larva. 0arva yang telah berumur + hari "< jam# digunakan

sebagai hewan uji aktifitas ketoksikan.

+. Pelaksanan pengujan

Sampel uji yang telah ditimbang dilarutkan dengan metanol hingga

diperoleh konsentrasi += mg/ml sebagai larutan persedian. $ari sedian

tersebut dipipet ke dalam vial masing-masing 1, 1=, 1==, 1=== dan

1=.=== Ml dengan menggunakan mikropipet . 5emudian pelarutnya

diuapkan lalu ditambah > ml air laut. ntuk ekstrak yang tidak larut

dalm air laut sebelumnya dilarutkan dengan methanol 1 L. control

dibuat dengan mengguankan methanol 1L dibuat perlakuan yang

sama dengan sampel.

5edalam masing-masing vial yang berisi sample uji serta larutan

control dengan berbagai konsentrasi dimasukkan 1= ekor larva


17/34

UJI BST

aritemia salina leach dan volumenya dicukupkan sampai 1= ml dengan

air laut. 5edalam tiap vial ditambahkan 1 tees suspensi ekstrak ragi "?

mg dalam > ml air laut# sebagai sum,ber makanan. Cial-vial uji

kemudian disimpan ditempat yang cukup mendapat sinar lampu.

Setelah + jam dilakukan pengamatan tergadap larva yang mati. ntuk

tiap samoel dan control dilakukan pengulangan sebanyak ? kali.


18/34

UJI BST

BAB III

MET0DE %E:#A

A. =aktu dan Te!"at Praktku!

Praktikum ini dilaksanakan pada hari Sabtu tanggal 1< $esember

+==A di 0aboratorium (iofarmasi 7akultas 7armasi niversitas &uslim

9ndonesia &akassar.

B. Alat dan Baan

1. %lat yang digunakan

1. %erator

2. (atang pengaduk

3. 6orong

4. 8elas ukur 1= ml 5ateter

5. &ikropipet

:. Feraca analitik

A. Pipet tetes


19/34

UJI BST

+. (ahan yang digunakan

1. %luminium foil

+. %ir suling

?. %ir laut

. kstrak ragi

>. kstrak metanol akar penawar

:. 5ertas saring

A. &etanol

?. ewan uji yang digunakan

elur udang Artemia salina leach

D. Cara %erja

1. Penyiapan larva udang Artemia salina leach

a. $isiapkan >= mg telur udang " Artemia salina leach )

b. $imasukkan dalam toples yang telah berisi air laut

c. $iukur pada p A ; < dibawah pencahayaan lampu pada suhu +>o

6

d. $ibiarkan selama < jam

+. Penyiapan (ahan

a. Pembuatan metanol 1 L

1. $isiapkan alat dan bahan

+. $itimbang metanol sebanyak 1 ml


20/34

UJI BST

?. $itambahkan dengan 1== ml air suling lalu diaduk lagi hingga

homogen

. $isimpan metanol tersebut pada gelas ukur dan siap digunakan

b. Pembuatan suspensi ragi

a. $isiapkan alat dan bahan

b. $itimbang ragi ?= mg

c. $itambahkan dengan >= ml air suling lalu diaduk lagi hingga

homogen

d. $isimpan ragi tersebut pada gelas ukur dan siap digunakan.

c. Pembuatan ekstrak metanol akar penawar

a. Pengolahan sampel

1. $itimbang sampel uji sebanyak >== mg

+. $ipotong potong ; potong kecil sampel uji

?. $icuci dengan air

. $isortasi basah sampel dengan cara memisahkan kotoran ;

kotoran yang melekat pada akar penawar

>. $ikeringkan sampel uji

:. $isortasi kering

A. Sampel uji siap dimaserasi

b. kstraksi sampel

&aserasi dilakukan dengan cara memasukkan potongan-

potongan akar penawar sebanyak >== mg ke dalam bejana

maserasi "toples#, kemudia ditambah +>= ml metanol, ditutup


21/34

UJI BST

dan dibiarkan selama ? hari pada temperatur kamar terlindung

dari cahaya, sambil berulang ; ulang diaduk. Setelah ? hari,

disaring ke dalam bejana penampung, kemudian ampas akar

penawar diperas dan ditambah cairan penyari lagi secukupnya

dan diaduk kemudian disaring lagi sehingga diperoleh sari 1==

ml. Sari yang diperoleh ditutup dan disimpan pada tempat yang

terlindung cahaya selama + hari, endapan yang terbentuk

dipisahkan dan filtratnya dipekatkan.

c. Penguapan ekstrak

1. kstrak yang diperoleh diuapkan dengan cara diangin ;

anginkan dibawah kipas angin

+. $iperoleh ekstrak kental methanol

?. Perlakuan

a. 5ontrol methanol 1 L

1. $isiapkan ? vial

+. $ibuat konsentrasi 1=, >=, 1==, +==, dan 1===

?. $imasukkan kontol metanol sebanyak 1 tetes dalam vial

. $imasukkan air laut sebanyak > ml

>. $imasukkan larva udang 1= ekor dalam masing masing vial

:. $icukupkan hingga 1= ml air laut

A. $imasukkan suspensi ragi sebanyak 1 tetes


22/34

UJI BST

@. $isimpan dibawah pencahayaan lampu selama 1 2 + jam

1=.$iamati jumlah larva yang mati

b. kstrak metanol akar penawar

1. $isiapkan ? vial

+. $ibuat konsentrasi 1=, >=, 1==, +==, dan 1===

?. $imasukkan kstrak metanol akar penawar " + mg/ml# dalam

vial

. $imasukkan air laut sebanyak > ml

>. $imasukkan larva udang 1= ekor dalam masing masing vial

:. $icukupkan hingga 1= ml air laut

A. $imasukkan suspensi ragi sebanyak 1 tetes


23/34

UJI BST

BAB I>

HA$IL DAN PEMBAHA$AN

A. Hasl Penga!atan

Tabel Ekstrak Metanol Akar Pena&ar

5onsentrasi

sampel

Perlakuan Eumlah larva

Sebelum perlakuan

Eumlah larva yang

mati "letal#

1=

9 1= +

99 1= >

999 1=

>=

9 1= 1=

99 1= 1=

999 1= 1=

1==

9 1= 1=

99 1= 1=

999 1= 1=

+==

9 1= 1=

99 1= 1=

999 1= 1=

1=== 9 1= 1=

99 1= 1=

999 1=

5ontrol 3

&etanol

%ir laut

1=

1=

1=

+

? #u!la Lar;a @ang Mat

5onsentrasi

sampel

Perlakuan Eumlah larva

Sebelum perlakuan

Eumlah larva yang

mati "letal#

9 1= += L


24/34

UJI BST

1= 99 1= >= L

999 1= = L

>=

9 1= 1== L99 1= 1== L

999 1= 1== L

1==

9 1= 1== L

99 1= 1== L

999 1= 1== L

+==

9 1= 1== L

99 1= 1== L

999 1= 1== L

1=== 9 1= 1== L

99 1= 1== L999 1=

5ontrol 3

&etanol

%ir laut

1=

1=

1== L

+= L

B. Pe!baasan

(iossay adalah suatu pengujian tentang toksisitas pada suatu

produk dalam rangka pencarian produk alam yang potensial yang

biasanya menggunakan makhluk hidup sebagai sampel. 5ebanyakan obat

dapat diukur aktivitasnya secara cepat dan teliti dengan metode kimiawi

atau fisika, dengan mnggunakan alat modern, misalnya dengan

spektrofotometer ultraviolet/infrared.


25/34

UJI BST

ntuk obat yang struktur kimianya belum diketahui dan untuk

sediaan tak murni atau campuran dari beberapa zat aktif, metode ini tidak

dapat dilakukan. !bat-obat ini diukur dengan metode biologis, yaitu

dengan bio-assay, dimana aktivitas ditentukan oleh organisme hidup

"hewan, kuman# dengan membandingkan efek obat tersebut dengan efek

suatu standar internasional.

oksisitas adalah efek beracun dari suatu senyawa atau bahan

obat pada organ target. mumnya suatu senyawa kimia mempunyai

potensi terhadap timbulnya gangguan atau kematian jika diberikan pada

organisme hidup

ji toksisitas dilakukan untuk mengetahui tingkat keamana dan

kebahayaan zat yang diuji. %dapun sumber zat toksik berasal dari alam

maupun bahan sintetik.

itik awal yang bisa digunakan dalam mempelajari toksisitas

*dalah dengan menggunakan kematian dari hewan percobaan sebagai

statu respon dari pengaruh statu senyawa yang diuji. %ngka kematian

hewan percobaan dihitung sebagai &edian lethal concentration.

%da ? jenis metode pengujian (iossay untuk mengetahui toksisitas

suatu bahan alam yaitu Simple (rench-op (ioassay "&etode (S '(rine

Shrimp 0ethality, 0emna &inor (ioassay dan 6rown-8all Potato $isc

(ioassay# serta Pengujian pada sel telur babi.

a. &etode (S '(rine Shrimp 0ethality) adalah suatu metode guna

menentukan toksisitas suatu senyawa bahan alam dengan cepat,


26/34

UJI BST

murah dan cukup akurat untuk penapisan ekstrak bahan aktif dengan

menggunakan hewan ji %rtemia salina 0each yang berumur < jam.

&etode ini juga digunaka untuk mendeteksi keberadaan senyawa

toksik dalam proses isolasi senyawa dari bahan alam yang berefek

sitotoksik dengan menentukan harga 06 >= dari senyawa aktif. &etode

(S dapat digunakan dari berbagai sistem uji seperti morfin,

karsinogenik dan ketoksikan dari hewan dan tumbuhan laut serta

senyawa racun dari tumbuhan darat.

b. 0emna minor (iossay terutama digunakan sebagai uji pendahuluan

terhadap bahan yang dapat menghambat dan meningkatkan

pertumbuhan tanaman. $engan pengujian ini dapat diamati bahwa anti

tumor alami juga dapat menghambat pertumbuhan lemna, walaupun

korelasinya dengan antitumor lainnya kurang baik. !leh karedna itu

pengujian ini lebih diarahkan untuk mencari herbisida dan stimulant

pertumbuhan baru.

c. 6rown-gall potato (iossaay merupakan metode pengujian toksisitas

yang relatif cepat pengerjaannya, tidak mahal, tidak memerlukan

hewan percobaan serta menunjukan korelasi yang baik dengan uji

anti tumor lainnya. 6rown-8all merupakan suatu penyakit neoplastik

pada tumbuhan yang disebabkan bakteri gram negatif %grobacterium

tumefaciens yang selanjutnya menyebabkan pertumbuhan jaringan

tumor secara otonom dan tidak dipengaruhi oleh mekanisme kontrol

normal.


27/34

UJI BST

'(rine shrimp lethality test) *dalah uji pendahuluan suatu

senyawa yang memiliki keuntungan yaitu hasil yang diperoleh lebih cepat

"+ jam#, tidak mahal, mudah pengerjaannya dari pengujian lainnya

karena tidak membutuhkan peralatan dan latihan khusus/ sampel yang

digunakan relatif sedikit. fek toksik dapat diketahui atau diukur dari

kematian larva karena pengaruh bahan uji.

5anker ialah suatu penyakit sel dengan ciri gangguan atau

kegagalan mekanisme pengatur multipikasi dan fungsi homeostatis

lainnya pada organisme multiseluler.

Suatu metode yang menggunakan udang laut artemia salina

leach diajukan sebagai suatu 'bioassay) sederhana untuk penelitian

produk alamiah h*dala 'brine shrimp lethality test) . &etode ini

mangunakan hewan uji artemia salina leach yang merupakan udang-

udangan primitif sederhana dan efektif dalam ilmu biologi dan toksikologi.

Prosedur penentuan 06>= dalam mg/ml dari ekstrak dilakukan dalam

mKdium air asin. (esarnya aktifitas dari ekstrak ditujukan sebagai

toksisitas terhadap larva udang.

$engan berdasarkan pada pemikiran bahwa efek faemakologi

adalah toksikologi sederhana pada dosis yang rendah dan sebagian besar

senyawa antitumor adalah sitotoksik, maka brine shrimp lethaly test dapat

digunakan sebagai uji pendahuluan senyawa anti tumor. Senyawa yang

mempunyai kempuan membunuh larva udang diperkirakan juga

mempunyai kemampuan membunuh sel kanker dalam kultur sel.


28/34

UJI BST

Pada percobaan ini, digunakan hewan uji berupa larva udang

karena udang (Artemia salina) merupakan udang-udangan primitif,

sederhana dan efektif dalam ilmu biologi dan toksikologi. $imana efek

toksisitas terhadap udang ini ditujukan dari besarnya aktivitas ekstrak

yang digunakan.selain itu telah diteliti bahwa larva udang memiliki sel

kanker yang mirip dengan sel kanker manusia. Sedangkan sampel uji

yang digunakan adalah akar penawar yang diyakini sebagai salah satu

antikanker.

$alam pengujian percobaan ini, pertama ; tama $isiapkan >= mg

telur udang " Artemia salina leach ) kemudian $imasukkan dalam toples

yang telah berisi air laut lalu dikondisikan pada p A ; < dibawah

pencahayaan lampu pada suhu +>o 6. Pengamatan ini dibiarkan selama

< jam.

Setelah < jam, akhirnya terbentuklah larva udang. Pengujian

berikutnya yaitu disiapkan ekstrak metanol akar penawar yang telah

dipekatkan, lalu dimasukkan dalam masing masing vial sebanyak

" + mg / ml # , dan ditambahkan air laut sebanyak > ml. Selanjutnya,

dimasukkan larva udang sebanyak 1= ekor lalu dicukupkan sampai 1= ml

air laut dan ditambahkan 1 tetes suspensi ragi sebagai makanan larva.

Pengujian ini dilakukan pada berbagai konsentrasi yaitu 1 3 1=, 1 3 >=, 1 3

1==, 1 3 +==, dan 1 3 1===, dan dilakukan tiga kali pengujian untuk

mendapatkan data yang lebih akurat.


29/34

UJI BST

Pada pengujian ini, digunakan pula kontrol dengan metanol 1 L

yang pengerjaannya sama dengan ekstrak metanol akar penawar. Setelah

perlakuan selanjutnya disimpan dibawah pencahayaan selama 1 2 + jam.

%dapun hasil pengamatan yang diperoleh yaitu pada konsentrasi

1 3 1= jumlah larva yang mati yaitu pada vial pertama N + ekor, vial kedua

N > ekor, dan pada vial ketiga N ekor. Pada konsentrasi 1 3 >= ; 1 3 1===

jumlah larva yang mati N 1= ekor. Sedangkan pada perlakuan kontrol

metanol 1 L, jumlah larva yang mati juga 1= ekor, dan pada air laut N +

ekor.

$ari data diatas dapat disimpulkan bahwa kematian larva hampir

seluruh konsentrasi mencapai 1== L. $engan adanya larva yang mati

pada 1== L maka sampel akar penawar terbukti berkhasiat sebagai

antikanker.

BAB >I

P E N U T U P

A. %es!"ulan

$ari hasil percobaan yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan

bahwa konsentrasi paling efektif pada akar penawar yang berkhasiat

sebagai anti kanker yaitu pada 1 3 >=, 1 3 1==, 1 3 +==, dan 1 3 1===

dengan kematian larva udang mencapai 1== L.


30/34

UJI BST

B. $aran

$%EMA %E:#A

B$T

) B:INE $H:IMP LETA:L@ TE$T-

1. Penyiapan larva udang " Artemia salina )

>= mg telur aritemia


31/34

UJI BST

+== ml air larut

"p A ; < O cahaya lampu O suhu +>= 6#

&enetas selama + jam

" $ibiarkan selama < jam #

+. Perlakuan larva udang

kstrak metanol akar penawar

Cial yang telah berisi > ml air laut

1 3 1= 1 3 >= 1 3 1== 1 3 +== 1 3 1===


32/34

UJI BST

1= ekor larva O suspensi ragi ad dalam 1= ml air laut

$ibuat ? kali perlakuan

$isimpan O pencahayaan selama 1 2 + jam

$iamati jumlah larva yang mati

?. Perlakuan kontrol metanol 1 L

&etanol 1 L

Cial yang telah berisi > ml air laut

1 3 1= 1 3 >= 1 3 1== 1 3 +== 1 3 1===


33/34

UJI BST

1= ekor larva O suspensi ragi ad dalam 1= ml air laut

$ibuat ? kali perlakuan

$isimpan O pencahayaan selama 1 2 + jam

$iamati jumlah larva yang mati

DATA: PU$TA%A

%nonim , +==A , Penutun Praktikum Farmakologi dan Toksikologi II ,&9 , &akassar.

$irjen P!& , 1@A@ , Farmakope Indonesia Edisi III * $epkes H9, Eakarta.

$irjen P!& , 1@@> , Farmakope Indonesia Edisi IV * $epkes H9, Eakarta.

http3//en.wikipedia.org/w/inde2.phptitleN0arva udangQactionNeditQsectionN+ 5 Copyright © 2005, IPTEKnet. All rights reserved.

http://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Larva%20udang%20&action=edit&section=2http://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Larva%20udang%20&action=edit&section=2http://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Larva%20udang%20&action=edit&section=2http://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Larva%20udang%20&action=edit&section=2


34/34

UJI BST

8aniswarna, S , 1@@> , Farmakologi dan Terapi Edisi IV , 7armakologidan erapi kedokteran 9 , Eakarta.

&ayer,( , dkk , 1@.

&c, 0auglin, 1@@1 , 1@@1 , A Blind oparison o! "imple Bench # topBioassay and $uman Tumour el itoto%icities as Antitumor Prescreens, Fatural Product 6hemistry, lsivier, %msterdam, 1

&udjiman, 1@

Bst Report Fifit_DOi

Documents

Transcript of Bst Report Fifit_DOi