Cromatografa Lquida de Alta Resolucin

*Que es HPLCHPLC son la siglas en ingles para High Performance Liquid Chromatography. Esencialmente HPLC es una tcnica de separacin de mezcla que utiliza equipo de alta presicin y tecnologa

*Aspectos Histricos1906 - Mikhail Semenovich Tswett (1872-1919) Carbonato de Calcio, Eter de etroleo.

1940's Cromatografa de Particin y Papel.

1950's Cromatografa de Gases, Capa Fina, Filtracin en Gel y Elusin por gradiente.

1960's Introduccin Comercial de Equipos HPLC

*Componentes de un equipo de HPLCChromatogramaInyectorDetectorColumnaSolventsPumpsMezclador

*Reservorios: recipientes utilizados para mantener la fase movil disponible para ser impulsada por la bomba hacia el inyector y luego hacia los otros componentes del sistema.Bomba: dispositivo de gran precisin para impulsar solvente a velicidades de flujo exactos y libre de pulso. La bombas pueden ser:- Isocrticas: Solo tienen capacidad de impulsar solvente o fase mvil premezclado y desgasificado.- Cuaternarias: tienen capacidad para mezclar hasta cuatro solventes y hace gradiente.- Binarias: Tienen capacidad para mezclar dos solventes e impulsar la mezcla de solvente a flujos muy bajos. En la actualidad se utilizan para acoplarse con detectores de masas.

*InyectoresLos inyectores son los dispositivos esenciales para colocar la muestra dentro del sistema. Pueden ser:

Manuales: en estos dispositivos la muestra se inyecta con una jeringa a un loop de volumen fijo y se acta manualmente.Automticos: La operacin de estos es desatendida por el operadores y permiten mejor manipulacin de la muestra.

*DetectoresLos detectores son dispositivos que monitorean el flujo de solvente que sale de la columna: Pueden ser:- De luz ultravioleta y visible (UV/Vis) los cuales a su vez pueden ser de longitud de onda variable o de arreglo de diodos.- De fluorescencia- ndice de refraccin- Electroqumicos- De masas

*Proceso de Separacin, Columnas

*Empaquetado tpico de las columnas de Cromatografa Lquida

*Soporte tpico de las columnas- Estireno DVBSoporte para:Fase reversa y fase normalIntercambio InicoCromatografa de Exclusin por Tamao

*Modos de la Cromatografa Lquida

*Diferencias entre Cromatografa Lquida y Cromatografa de GasesSolamente un 20% de los compuestos orgnicos conocidos pueden ser analizados por Cromatografa de Gases.

*Parmetros CromatogrficosDetector ResponseTimeWWABtR(B)ABInjectt0R(A)tt = Tiempo de Retencint = Tiempo de elusin de un compuesto no retenidoRW = ancho de pico a la base0

*Parmetros de SeparacinSeleccin de la Fase EstacionariaDimetro y Largo de la ColumnaComposicin de la Fase MovilTemperaturaFlujoTamao de la Muestra

*Revisin:Mencione tres diferencias entre Cromatografa de Gases y Cromatografa Lquida.

Cual es el modo mas ampliamente usado en Cromatografa Lquida?

Cual es el modo mas utilizado para la separacin de iones en solucin?

*Revisin:Mencione las partes de un instrumento de Cromatografa Lquida.

Cual es el smbolo para un componente no retenido durante la elusin?

Cual es la diferencia entre fase normal y fase reversa?

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