Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

Microscopio LEICA DM5000

-Técnicas disponibles: Campo claro Campo oscuro DIC Fluorescencia -Programa para la captación de imágenes: LAS V4.6 encender el microscopio para poder abrir el programa la fluorescencia es opcional

Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000 Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

Fuente de luz blanca

(LED) Encender del interruptor y luego en la pantalla de

control abrir el obturador Pantalla de

control

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Microscopio LEICA DM5000

-Encender el ordenador y el microscopio -Encender la fuente de luz blanca (LED). Ver foto anterior

-Entrar en LasX User. Contraseña: Leica5000 -Programa para la captación de imágenes: LAS V4.6

Fuente de fluorescencia (opcional)

Ordenador

Microscopio

Equipos para la observación de las muestras SERVICIO DE MICROSCOPÍA

Instituto de Biología Molecular y Celular de Plantas. CSIC-UPV

Botón donde se puede seleccionar la técnica con la que se va a trabajar

Botón de estado del equipo. Indica el objetivo y la técnica con la que

estamos trabajando.

1. Intensity: NO controla la luz blanca. Se hace desde la fuente LED

2. Obturador o TL-Shutter: cierra el paso de la luz transmitida

3. Aperture: diafragma de apertura o de iris, permite dar más contraste a la imagen

4. Field: diafragma de campo. Se ajusta para hacer el Köhler pero este equipo lo adapta a cada objetivo.

TRANSMITIDA INCIDENTE

1. BF: campo claro

2. DF: campo oscuro

3. DIC o Nomarski

4. POL: polarización

Fluo: fluorescencia

A DAPI GFP N21

F.excitac BP 340-380 350/50 BP 470/40 BP 515-560

F.emis LP425 460/50 BP 525/50 LP 590

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En Opciones Preferencias (imagen): -Poner cómo se guardarán las imágenes. Ojo al formato! - Es aconsejable el formato tiff y en 8 bits para poder hacer Stitching (no comprime) - Añadir un nombre por defecto si se desea

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Carpeta de captura: -Elegir o hacer una nueva carpeta en imágenes usuarios. -Establecerla como carpeta de captura; se verá con un punto rojo.

BOTONES DE CARPETA Y ESCALA

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Escala: -Activar Mostrar y cambiar sus propiedades si se desea (color, fondo, barra de fin…) -Activar Fusionar todo si deseamos poner la escala en todas las fotos. -Desplazar la escala en la imagen antes de adquirir la foto.

BOTONES DE CARPETA Y ESCALA

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EN ADQUIRIR

Exposición automática

Equilibrado de blancos

Mostrar sub/sobreexposición

Selección de configuración: las guardadas por los usuarios

Configuraciones predefinidas

OJO es aconsejable volver a las condiciones iniciales en

Opciones de EntradaConfiguración Default

(luego quitar el modo automático)

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-En Adquirir opciones de entrada dar a la configuración por defecto y quitar la exposición automática -Ajustar la exposición y resto de parámetros.

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Equilibrado de blancos: -Con un click derecho en la pantalla aparece el recuadro de la imagen. -Situarlo en la zona donde se quiera hacer el balance y hacer el cuadro del tamaño adecuado. Luego seleccionar equilibrado de blancos.

EN ADQUIRIR

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EN ADQUIRIR

Ajuste de exposición: -Exposición: regula el tiempo de exposición de la cámara y por tanto, la cantidad de luz de la imagen. -Ganancia: poner a valores bajos. Sólo altos para enfocar en fluorescencia usando valores bajos de exposición. -Saturación: da mayor o menor intensidad a los colores. -Gamma: valor de 0.6 en imágenes de campo claro y de 1 en imágenes con fluorescencia.

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Adquirir: -En Cámara, opciones de entrada: se puede guardar una configuración nueva con sus valores de exposición, ganancia..etc. -Tras guardarla aparecerá en el recuadro de configuraciones propias.

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EN ADQUIRIR

Procesamiento: -Se puede dar nitidez a la imagen y mostrar en vivo o voltearla.

Región de interés: -Útil para encontrar foco.

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EN EXAMINAR o PROCESAR

Stitching: -Quitar la escala (ni merge ni show) -Hacer las fotos con cierto grado de solapamiento entre ellas -Seleccionar todas las imágenes a unir -En las ventanas de la derechadar a stitching y poner nombre. -Después se puede añadir la escala.

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EN PROCESAR

Agregar línea de medida: -En Anotar anotaciones básicas, activar mostrar en línea. Poner línea de distancia y hacerla sobre la imagen. -Después se puede reemplazar la imagen anterior o bien guardarla como una nueva.