Post on 08-Jul-2018
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
1/15
Universidad de los Andes – Departamento de química Laboratorio de analítica II
Determinación y cuantificación de FAMES en el
aceite de oliva por medio de cromatografía de gases
acoplada a masas
Diana Carolina Borda Borda*
*Universidad de los Andes – Departamento de química (dc.borda318uniandes.edu.co!
Resumen – "e reali#$ la cuanti%icaci$n de los &steres metílicos del 'cido palmítico
contenido en el aceite de oliva teniendo como re%erencia aceite palmítico con el que se)ace una curva de calibraci$n se anali#a la muestra de aceite de oliva marca +a Coru,a.
"e obtiene que la cantidad de estos &steres en el aceite de oliva es de 3.-/ lo que supera
mínimamente la cantidad te$rica reportada en la composici$n del aceite de oliva.
0000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000
Introducción – +a t&cnica de
cromatora%ía de ases %ue introducida por 2ames artin en 14-5. 6l principio
de operaci$n de esta t&cnica requiere la
volatili#aci$n de la muestra en el inectorseuida de la separaci$n de los
componentes de la me#cla en columnas
especiales. "$lo los compuestos que pueden vapori#arse sin descomponerse
van a poderse anali#ar por esta t&cnica.
6n esta t&cnica se usa un as como %ase
m$vil este as debe ser su%icientemente puro para no inter%erir en los resultados.
+a separaci$n de los componentes est'
determinada por la distribuci$n de cadacomponente entre la %ase m$vil la %ase
estacionaria que normalmente es una
columna capilar. Despu&s de eluir de lacolumna cada componente es
transportado al detector o a un
espectr$metro de masas 1. 6ste equipo
ioni#a la %ase aseosa proveniente de lacolumna de cromat$ra%o de ases.
Dependiendo de la t&cnica de ioni#aci$nestos iones que representan a la mol&culaintacta tendr'n su%iciente enería para
%ramentarse en iones con menor masa.
6n 7C" (cromatora%ía de asesacoplada a masas! la maor parte de los
iones %ormados tiene una cara unitaria.
6l espectr$metro de masas separa los
iones de acuerdo a los valores obtenidosde la relaci$n masacara (m#! es por
esto que como la maoría de iones est'n
carados unitariamente el valor de m# esconsiderado como la masa del ion 5.
9or otro lado los :A6" (&stresmetílicos de 'cidos rasos! se obtienen a
partir de los lic&ridos que %orman los
'cidos rasos al unirse a la licerina
conocidos tambi&n como &stres de
licerina 3. 6stos &steres de licerinareaccionan con metanol produciendo los
:A6" licerol como se observa en lafigura 1.
Figura 14. Reacción global de lametanólisis.
Resultados – "e reali#aron - puntos a
distintas concentraciones de aceite palmítico para obtener una curva de
calibraci$n. 9ara esto se asume que la
soluci$n de aceite palmítico es pura se
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
2/15
toman ;.;1- ;.;menes deaceite m's - m+ de )e?ano representa un
punto en la curva de calibraci$n.
6l primer punto de esta curva se toma
corriendo el equipo durante
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
3/15
Figura 4. Resultado primer punto de la curva de calibración. Segundo espectro.
Figura 5. Resultado primer punto de la curva de calibración. Tercer espectro.
6l seundo punto de esta curva se toma
corriendo el equipo durante 85 minutos al obtener m's de un pico en el
cromatorama se reportan adem's dos
de los espectros de masas obtenidos paracada pico.
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
4/15
Figura . Resultado segundo punto de la curva de calibración. Cromatograma.
Tabla 2. Resultado segundo punto de la curva de calibración.
Figura !. Resultado segundo punto de la curva de calibración. Primer espectro.
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
5/15
Figura ". Resultado segundo punto de la curva de calibración. Segundo espectro.
6l tercer punto de esta curva se toma
corriendo el equipo durante 5< minutos
al obtener m's de un pico en elcromatorama se reportan adem's dos
de los espectros de masas obtenidos para
cada pico (uno de &ster metílico del 'cido
palmítico el otro del oleioco!.
Figura #. Resultado tercer punto de la curva de calibración. Cromatograma.
Tabla 3. Resultado tercer punto de la curva de calibración.
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
6/15
Figura 1$. Resultado tercer punto de la curva de calibración. Primer espectro.
Figura 11. Resultado tercer punto de la curva de calibración. Segundo espectro.
6l cuarto punto de esta curva se toma
corriendo el equipo durante 5< minutos
al obtener m's de un pico en el
cromatorama se reportan adem's tres
de los espectros de masas obtenidos para
cada pico.
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
7/15
Figura 12. Resultado cuarto punto de la curva de calibración. Cromatograma.
Tabla 4. Resultado cuarto punto de la curva de calibración.
Figura 13. Resultado cuarto punto de la curva de calibración. Primer espectro.
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
8/15
Figura 14. Resultado cuarto punto de la curva de calibración. Segundo espectro.
Figura 15. Resultado cuarto punto de la curva de calibración. Tercer espectro.
6l quinto punto de esta curva se toma
corriendo el equipo durante
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
9/15
Figura 1. Resultado %uinto punto de la curva de calibración. Cromatograma.
Tabla 5. Resultado %uinto punto de la curva de calibración.
Figura 1!. Resultado %uinto punto de la curva de calibración. Primer espectro.
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
10/15
Figura 1". Resultado %uinto punto de la curva de calibración. Segundo espectro.
:inalmente la muestra se toma corriendo
el equipo durante 3- minutos se
reportan adem's tres de los espectros de
masas obtenidos para cada pico.
Figura 1#. Resultado muestra. Cromatograma.
Tabla . Resultado muestra.
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
11/15
Figura 2$. Resultado muestra. Primer espectro.
Figura 21. Resultado muestra. Segundo espectro.
Figura 22. Resultado muestra. Tercer espectro.
Discusión de resultados – 6n todos loscromatoramas se observ$ un pico
correspondiente para el aceite palmítico
esto se deduce al comparar el espectro demasas obtenido con el espectro de masas
te$rico (Figura !!. "e obtienen adem's
picos para el &ster metílico del 'cido
linoleico el &ster metílico del 'cidooleico (espectro de masas te$rico Figura
"!.
9ara la cuanti%icaci$n por 'reas es
necesario conocer la cantidad de muestra
inectada para saber cu'nto )a de cada
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
12/15
componente. "in embaro como se
asumi$ aceite palmítico puro dere%erencia se toman las cantidades a
partir de la densidad de este (;.8-m+!.
Con los vol>menes tomados al inicio
multiplicados por la densidad se obtiene
el peso del aceite con las 'reas
obtenidas para cada punto de la curva(tabla =! se obtiene la curva de
calibraci$n observada en la %iura 5 para
el aceite palmítico en donde la masa est'
en microramos.
Figura 235. &spectro de masas teórico del 'ster met(lico del )cido palm(tico.
Figura 245. &spectro de masas teórico del 'ster met(lico del )cido oleico.
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
13/15
Tabla !. Resultados curva de calibración con )reas.
@olumen(m+!
Concetraci$n(m+!
Densidad(m+!
asa(microramos! Area
;.;;1 ;.;;5-- ;.8- 5.-- -4;3=54;.;;1 ;.;;=- ;.8- =.- 11;-1;
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
14/15
* " $ & ( 1* 1" 1$ 1& 1( "*
*
%*******
1********
1%*******
"********
"%*******
#********
#%*******
+,-. / 1(''#%$$01- #%)$'##10%%23 / *0))
Curva de calibración
urva de calibraci4n
Linear ,urva de
calibraci4n.
Figura 2!. Curva de calibración *inal.
A)ora se toma el 'rea del pico obtenido para el &ster del 'cido palmítico en la
muestra de aceite de oliva se obtiene
que esta 'rea es iual a 18;;-1 lo quecorresponde se>n la curva de calibraci$n
a 3.45 microramos de 'cido palmítico en
la muestra. 6n la etiqueta del aceite deoliva dice que la cantidad de 'cidos
rasos es de 41; m+ se encontr$
adem's que el porcentae de 'cido palmítico puede ser del ;.3 al 3.-/ por lo que se calcula el porcentae obtenido
asumiendo que )a 4 de 'cidos rasos
en total considerando que se tomaron1;; microlitros de muestra de estos 1;;
microlitros se anali#$ tan solo un
microlitro. 6sto da como resultado un porcentae de aceite palmítico de 3.-/
lo que supera en poca medida el valor
te$rico.
9 g
10mL∗( 1mL1000 μL )∗(100 μL )=0.009 g
0.009g
100 μL=0.00009
g
μL
=0.0000032g
0.00009g∗100=3.5556
#arte e$perimental – 6n un vaso de
precipitados arear EF (;.- ! metanol (- m+!. Gomar un aitador
man&tico colocarlo dentro del vaso de
precipitados colocar este sobre una planc)a con aitaci$n. Dear que el EF
se disuelva en el metanol ("oluci$n A!.
Gomar la cantidad de aceite deseada en un
tubo de ensao (para cada punto de lacurva de calibraci$n! arearle )e?ano
(- m+!. Aitar mu bien. Arear
soluci$n A (;.- m+! aitar viorosamente. "eparar en un embudo de
decantaci$n las dos %ases tomar la %ase
or'nica anali#arla en el 7C".Hepetir el procedimiento para todos los
puntos de la curva de calibraci$n para la
muestra.
%onclusiones – "e determin$ la cantidad
del &ster metílico del 'cido palmítico en
el aceite de oliva pero la incertidumbrede este resultado es mu rande pues se
FAMES – G!MS
8/19/2019 Fames Gc-ms Informe
15/15
asume todo el tiempo que la re%erencia es
aceite palmítico puro. "in embaro alcorrer los puntos en el cromat$ra%o se
encontr$ que )abía m's componentes
dentro de este aceite.
Aun así el resultado es una composici$ndel 3.-/ de aceite palmítico en el aceite
de oliva lo que concuerda con loestipulado en la literatura.
&i'liografía –
I1J "parKman D.L 9enton M.L itson :.
+as c,romatograp,- and ass
Spectroscop-. / practical guide. "anDieoN 6lsevier. 5;11. p. 1-.
I5J "parKman D.L 9enton M.L itson :.+as c,romatograp,- and ass
Spectroscop-. / practical guide. "an
DieoN 6lsevier. 5;11. p. 84.
I3J Beer F.L Oalter O. anual de
%u(mica org)nica. @ersi$n en espa,ol.BarcelonaN Hevert& ".A. 148=. p. 55.
I