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2009 PerkinElmer 2009 PerkinElmer
2009 PerkinElmer
2009 PerkinElmer
Migracin de HPLC a UHPLC
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Sistema Conventional LC vs. UHPLC
Tiempo de anlisis
3 - 60 min
Tiempo de anlisis
1 - 8 min
Bomba
Flujo: 0.5 - 5 ml/min
Presin: 500 - 6,000psi
Baja o Alta presin en la
mezcla con gradiente
Presin Max: 6,000
Columnas : 3 a10m
Column ID: 4.6mm
Rango de temperatura:
4 - 90 C
Frecuencia de muestreo: 1 -
50 pts/ seg
Automuestreador
Flujo: 0.5 - 3 ml/min
Presin: 1000 - 15,000psi
Alta presin con gradiente
Binario
Presin Max: 15,000 psi
Columnas : sub 3m
Column ID:2.1mm
Rango de temperatura:
4 - 90 C
Frecuencia de muestreo: 1 -
100 pts/ seg
Detectors
Horno para Columnas
Analytical LC UHPLC
Columnas
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FLEXAR Ms posibilidades en los anlisis de HPLC
. Y en las presiones de la Bomba
18,000 PSI
http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/FlexarFX10%20%20Y%20FX-15.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/FlexarFX10%20%20Y%20FX-15.pptx7/22/2019 Hplc vs Uhplc
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0 5 10 15 20 min.
Las isoflavonas en
productos nutracuticos se
pueden analizar con UHPLC al
menos seis veces ms rpido, con
una sensibilidad ms alta y
reduciendo al menos en un 90% el
uso de los solventes de la fase
mvil al compararlo con HPLC
convencional..
Convencional
HPLC
UHPLC
Beneficios de UHPLC
Green Productivity Mayor Rendimiento
Mucho Menos Solventes Mejor Deteccin
ahorra tiempo y dinero
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55 No tenga miedo de un UHPLC!!!
Los temores comunes de migracin a UHPLC
Tecnologa NuevaCosto del nuevo hardware
Robustez de las columnas sub-2mm
Alta Presin
Entrenamiento
Software
Conversin de Mtodos
Migracin a UHPLC es ms fcil de lo que la mayoria de la gente
piensa
El nuevo hardware se paga solo, con el incremento en la productividad
y reduccin de los costo de operacin.
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Hay 5 parmetros importantes
de un mtodo que hay que
tomar encuenta para transferir
un mtodo de HPLC a UHPLC.
Volumen Inyeccin (Vin j)
Velocidad de Flujo (F)
Tiempo de programaIsocratico (tiso)
Tiempo de programa
Gradiente (tgrad)
Pendiente Gradiente
Herramientas disponibles para simplificar la migracin de un Mtodo
Muchas referencias estn disponibles con una descripcin detallada para la
transferencia de un mtodo, incluyendo un libro de PerkinElmer titulado Guidelines
for the Use of UHPLC Instruments by D. Guillarme & J. Veuthey. White paper isavailable at:
http://las.perkinelmer.com/content/applicationnotes/wtp_guidelinesforuhplcinstruments.pdf
Calculadora para la transferencia de mtodos est disponible en PerkinElmer
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Transferencia de un Mtodo con Gradiente
Comparison of HPLC and the transferred
(calculated) UHPLC gradient programs
Step
HPLC
Time
UHPLC
Time %ACN
1 0 0 70
2 5 0.6 70
3 25 3.2 85
4 29 3.7 85
5 30 3.8 70
6 45 5.7 70
Disminucin del
Tiempo de anlisis8X
45 min Run 5.7 min Run
65
70
75
80
85
90
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
Time(min)
%ACN
HPLC
65
70
75
80
85
90
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Time(min)
%ACN
UHPLC
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Aplicaciones de UHPLC
Nutracetico : Isoflavonas en Soya
10.00
20.00
30.00
40.00
50.00
60.00
70.00
80.00
90.00
100.00
110.00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42
Peak List
1. Daidzin2. Glycitin
3. Genistin
4. Daidzein
5. Gylcitein
6. Genistein
1
2
3
4
5
6
PE Brownlee C18 150 mm x 4.6 mm, 5 mm
.
.
1 .
1 .
.
.
.
.
.
.
.
. 0 .5 1 .0 1 .5 2.0 2.5 3 .0 3 .5 4.0 4.5 5 .0 5 .5 6 .0 6.5
PE Brownlee C18
50 mm x 2.1 mm, 1.9 mm
Mejora en el rendimiento de 6X
.5 2.0 2.5 3.0
1
2
3
4
5
6
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Aplicaciones de UHPLC
Furanic Compounds Typically Found in Electrical Insulating Liquids
Method ASTM D 5837
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Aplicaciones de UHPLC
PE Brownlee Aqueous C18 250mm x 4.6mm, 5mm
Mezcla de Pesticidas
PE Brownlee C18 50mm x 2.1mm, 1.9mm
4X THROUGHPUT
IMPROVEMENT!
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Aplicaciones de UHPLC
Brownlee Aqueous C18 150mm x 4.6mm, 5mm
EPA Phenols in water.PE Brownlee C18
50mm x 2.1mm, 1.9mm
2.5X THROUGHPUT
IMPROVEMENT!
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Resumen
La Migracin de un sistema de HPLC a UHPLC, se requiere de un
sistema optimizado, no basta con el cambio de la columna.
La Conversin de un mtodo de HPLC a UHPLC es simple, utilizando la
calculadora de UHPLC disponible.
Incremento en la productividad de hasta 9 veces, al disminuir el tiempo
de anlisis
Menor consumo de fase mvil hasta 93%
Tecnologa Verde
Desarrollo de mtodos / optimizacin es mucho ms rpido debido a que
los tiempo de las corridas son ms corto en UHPLC
Los instrumentos se pagan solos, por el incremento en la productividad y
reduccin de los costos de operacin.
No tenga miedo de un UHPLC
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