AC ANTICITOPLASMÁTICOS INFORMACIÓN QUE PUEDEN APORTARNOS
Dra Mª Belén Aparicio Hernández Complejo Universitario Salamanca
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015
¿DE QUÉ HABLAMOS CUANDO NOS REFERIMOS A AC ANTICITOPLASMÁTICOS?
CÉLULA COMPLETA NÚCLEO CELULAR
CITOPLASMA CELULAR BIO RAD LABORATORIES
Education and Training Tools
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CICLO CELULAR
PROFASE
METAFASE
ANAFASE TELOFASE CEL.
DIVIDIDA
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DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS ESTRATEGIA A SEGUIR
• Inmunofluorescencia indirecta (IFI) – Sustratos:
• TRIPLE TEJIDO (ASMA, AMA, LKM)
• HEp-2 (ANA)
• LEUCOCITOS HUMANOS (ANCAS).
– Subjetivo
• Inmunoensayos – ELISA
– Inmunoblot
– Eliminan la variación intra e inter observador de la IFI
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• Informe – Positivo/negativo
– Patrón fluorescencia
– intensidad/título
– intervalos referencia
• Conjugado – Anti IgG humana
– FITC/proteína (3)
– Contenido Ab (30-60 µg/ml)
– Dilución trabajo
Substrato Hep 2 Triple tejido (Riñón/hígado/estómago) Leucocitos humanos.
Muestra Suero
IFI Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015
Patrones de fluorescencia HEP 2
NUCLEAR homogéneo/periférico, moteado, centromérico, nucleolar, PCNA, nuclear dots, membrana nuclear, granular difuso
CITOPLASMÁTICO moteado, granular, punteado, citoesqueleto.
MITÓTICO huso mitótico, centrosoma, NuMA, cuerpo medio, Cenp-F
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Anticuerpos Citoplasmáticos Células Hep 2
Citoesquel.
Actina
Vimentina
Otros
Vinculina
Citoqueratina
Tropomiosina
Dra Mª Belén Aparicio Hernández Complejo Universitario Salamanca
Mitocond M2
Moteado
JO1
RIBOSOMAL
GOLGI LISOSOMAL
SRP
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ANTI JO1 ANTICUERPO Anti Jo-1
ANTÍGENO HISTIDIL-t-RNA SINTETASA
ENFERMEDADES ASOCIADAS
POLIMIOSITIS Y DERMATOMIOSITIS SID. OVERLAP
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN MOTEADO FINO DIFUSO EN TODO EL CITOPLASMA. MATERIAL CROMOSÓMICO NO SE TIÑE.
NOTAS CONSIDERADO UNO DE LOS 6 ENAS INDIVIDUALES. EL MAS FRECUENTE EN LAS MIOSITIS.
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ANTI P- RIBOSOMIAL ANTICUERPO Anti P- RIBOSOMIAL
ANTÍGENO PROTEÍNAS RIBOSOMIALES P0,P1 Y P2
ENFERMEDADES ASOCIADAS
LES ASOCIADO A SÍNTOMAS NEUROLÓGICOS
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN HOMOGÉNEO GRANULAR DENSO EN TODO EL CITOPLASMA. NUCLEOLOS MARCADOS HOMOGÉNEAMENTE.
NOTAS NORMALMENTE NO INCLUIDO EN DETERMINACIONES DE ENA SCREENING. 10-20%. PACIENTES.
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AC APARATO DE GOLGI
ANTICUERPO COMPLEJO DE GOLGI
ANTÍGENO LOCALIZADOS EN EL COMPLEJO DE GOLGI
ENFERMEDADES ASOCIADAS
LES,SÍNDROME SJOGREN. INFECCIONES NEOPLASIAS
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN GRANULAR IRREGULAR FOCALIZADO CERCA DEL NÚCLEO EN CITOPLASMA(INTERFASE). TINCIÓN DIFUSA CITOPLASMÁTICA (CELS DIVISIÓN)
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AC ANTI LISOSOMAL ANTICUERPO LISOSOMAL
ANTÍGENO PROTEÍNAS LISOSOMALES Y LAMPS (ASOCIADOS A LAS PROTEÍNAS DE LAS MEMBRANAS LISOSOMALES)
ENFERMEDADES ASOCIADAS
LES (POCO FREC) SÍN ASOCIACIÓN CLÍNICA IMPORTANTE.
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN GRANULAR IRREGULAR MEDIO, GRUESO EN EL CITOPLASMA.. NO HAY FLUORESCENCIA EN NUCLEO Y NUCLEOLOS.
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AC ANTI SRP ANTICUERPO SIGNAL RECOGNITION
PARTICLE
ANTÍGENO COMPLEJO DE 6 POLIPÉPTIDOS DE RIBONUCLEOPROTTEÍNAS
ENFERMEDADES ASOCIADAS
POLIMIOSITIS. RARO: DERMATOMIOSITIS ESCLEROSIS SITÉMICA FIBROSIS PULMONAR INTERSTICIAL
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN MOTEADO GRANULAR CITOPLASMÁTICO. NÚCLEO NEGATIVO.
NOTAS PATRÓN MOTEADO CITOPLASMÁTICO. INMUNOBLOT.
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AC ANTI F ACTINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO.
ANTÍGENO F ACTINA
ENFERMEDADES ASOCIADAS
HEPATITIS AUTOINMUNE 1 CIRROSIS BILIAR PRIMARIA ENFS TJ CONECTIVO
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN DE MICROFILAMENTOS RECTILÍNEOS Y PARALELAS. NÚCLEO Y NUCLEOLOS NEGATIVOS.
NOTAS 20% PACIENTES CON HAI Y ASMA NO SON F ACTINA. IFI HEP 2, INMUNOBLOT o ELISA.
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AC ANTI VIMENTINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO
ANTÍGENO VIMENTINA
ENFERMEDADES ASOCIADAS
HEPATITIS AUTOINMUNE ARTRITIS REUMATOIDE SIND FATIGA.
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN DE FILAMENTOS INTEMEDIOS CON TINCIÓN PERINUCLEAR DENSA Y FIBRILAR CITOPLASMÁTICA.
NOTAS SU PRESENCIA TIENE UNA CORRELACIÓN INCIERTA.
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AC ANTI CITOQUERATINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO
ANTÍGENO CITOQUERATINA
ENFERMEDADES ASOCIADAS
HEPATOPATÍA ALCOHÓLICA ARTRITIS REUMATOIDE PSORIASIS INDIVIDUOS SANOS.
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN CON TINCIÓN PERINUCLEAR DENSA Y RETICULAR CITOPLASMÁTICA.
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AC ANTI TROPOMIOSINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO
ANTÍGENO TROPOMIOSINA
ENFERMEDADES ASOCIADAS
INDIVIDUOS SANOS. COLITIS ULCEROSA ARTRITIS REUMATOIDE ESCLEROSIS SISTÉMICA
PATRÓN TÍPICO HEP 2. MARCAJE DE LAS FIBRAS DE ESTRÉS POR DEBAJO DE LA MEMBRANA CITOPLASMÁTICA. INTERFASE Y METAFASE NEGATIVO.
NOTAS INTERACTÚA CON OTRAS MOLÉCULAS EN LA CONTRACCIÓN MUSCULAR
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AC ANTI VINCULINA ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO
ANTÍGENO VINCULINA
ENFERMEDADES ASOCIADAS
INDIVIDUOS SANOS. MIASTENIAS GRAVIS TROMBOCITOPENIA INMUNE
PATRÓN TÍPICO HEP 2. FIBRAS FLUORESCENTES A LO LARGO DE LA MEMEBRANA CITOPLASMÁTICA DIRIGIDAS HACIA EL NÚCLEO
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AC ANTIMITOCONDRIALES ANTICUERPOS ANTIMITOCONDRIALES
9 TIPOS M1-M9. 96% M2
ANTÍGENO COMPLEJO PIRUVATO DEHIDROGENASA (PDC).
ENFERMEDADES ASOCIADAS
CIRROSISBILIAR PRIMARIA (CBP) ESCLERODERMIA,CREST, LES,SIND. SJOGREN,SIND OVERLAP.
PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN CITOPLASMÁTICO GRANULAR IRREGULAR DESDE EL NUCLEO POR TODO CITOPLASMA.
NOTAS CONFIRMAR EN TRIPLE TEJIDO: TINCIÓN GRANULAR CITOPLASMÁTICA EN HEPATOCITOS, TÚBULOS RENALES Y CEL. PARIETAL ESTÓMAGO.
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GOLGI
LC-1 LKM-1 GSTT-1
CEL PARIETAL GÁSTRICA
HEPATOCITO
PATRONES AC CITOPLASMÁTICOS
HEP 2
MOTEADO PUNTEADO CITOESQUELETO GRANULAR
DIFUSO FINO MIT LISOSOMAL GW ACTINA OTRAS
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Report of the first international consensus on standardized nomenclature of antinuclear antibody HEp-2 cell patterns 2014–2015
Edward K. L. Chan1, Jan Damoiseaux2, Orlando Gabriel Carballo3,4, Karsten Conrad5, Wilson de Melo Cruvinel6, Paulo Luiz Carvalho Francescantonio6, Marvin J. Fritzler7, Ignacio Garcia-De La Torre8, Manfred Herold9, Tsuneyo Mimori10,11, Minoru Satoh12, Carlos A. von Mühlen13 and Luis E. C. Andrade14,15* Frontiers in Immunology August
2015. Volume 6. Article 412. The 12th International Workshop on Autoantibodies and Autoimmunity
held in Sao Paulo, Brazil, on August 28, 2014,
Frontiers in immunology. August 2015,Vol 8, Article 412. Chan et al.
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Recordando y Participando
1. Cuál de los siguientes autoanticuerpos son criterios diagnósticos de HAI tipo 1
A. ANA y ASMA.
B. LKM3 y ASMA.
C. LKM-1 y LC-1.
D. LKM-1 y ANA.
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IFI AutoAc Hepatitis Autoinmune
R. Liberal et al. / Autoimmunity Reviews 13 (2014) 435–440
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2. Se considera criterio diagnóstico definitivo de HAI cuando un paciente presenta una de las siguientes respuestas:
A. IgG en concentraciones menores a 1 vez el límite
superior normal. B. Presentar hepatotoxicidad por alcohol o fármacos. C. Presencia de autoanticuerpos a títulos inferiores a
1/40. D. Ninguna de las anteriores.
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HEPATITIS AUTOINMUNE
Completa +2
Recaída al suspender el tratamiento +3
Hepatitis de
Interfase +3
Infiltrado linfoplasmocitario predominante +1
Rosetas (aspecto seudoglandular) +1
Ninguno de los anteriores -5
Alteraciones biliares -3
Otros hallazgos que sugieran otra
etiología -3
ANA, SMA O LKM -1 >1/80 +3 1/80 +2 1/40 (niños) +1 1/40 (adultos) 0 AMA + -4 Positividad para otros autoanticuerpos definidos (sólo si autoAc clásicos -) (pANCA, anti.LC1, anti-SLA, etc.) +2 HLA DR3 o DR 4 +1 (sólo si autoAc -) Marcadores de hepatitis vírica Positivo -3 Negativo +3
FA/ALT (AST)
<1.5 +2
1.5-3 0
>3 -2
Gammaglobulina o IgG
>2 +3
1.5-2 +2
1-1.5 +1
<1 0
Sexo femenino +2
Fármacos
Sí -4
No +1
Alcohol
<25g/día +2
>60g/día -2
Otras enfermedades autoinmunes +2
Respuesta al tratamiento
Parámetros histológicos
Parámetros inmunológicos y virológicos
Parámetros bioquímicos
Parámetros clínicos
Diagnostic criteria of autoimmune hepatitis. R. Liberal et al. Autoimmunity Reviews,13,435-440.2014
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3.Los anticuerpos mitocondriales positivos en riñón en IFI de triple tejido afectan:
A. Los túbulos renales proximales y distales.
B. Túbulos renales proximales.
C. Túbulos renales distales.
D. Ninguna de las anteriores.
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IFI TRIPLE TJ RATA
MITOCONDRIALES
LKM 1 MITOCONDRIALES
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4. Cuál de estos anticuerpos no son anticitoplasmáticos:
A. Ac Anti f-actina.
B. Ac Anti citoqueratina
C. Ac Anti histona
D. Ac Anti mitocondriales
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Anticuerpos Citoplasmáticos Células Hep 2
Citoesquel.
Actina
Vimentina
Otros
Vinculina
Citoqueratina
Tropomiosina
Dra Mª Belén Aparicio Hernández Complejo Universitario Salamanca
Mitocond M2
Moteado
JO1
RIBOSOMAL
GOLGI LISOSOMAL
SRP
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5. Ante una sospecha clínica, analítica o histológica de HAI se deben determinar los anticuerpos:
A. ANAS
B. ASMA
C. ANTI LKM1
D. Todas las anteriores.
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AUTOANTICUERPOS ASOCIADOS HAI
Hepatitis Autoinmune
Autoanticuerpos asociados
Prevalencia HAI
TIPO I ASMA ANA ANTI-SLA/LP
40-90% 5-70% 10-30%
TIPO II ANTI LKM-1 ANTI LC-1 ANTI SLA/LP
2-4% 1-2% 10-30%
Los Tipos se establecen de acuerdo a los anticuerpos
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Muchas Gracias Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015
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