7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
1/37
1
Universitatea de Medicin i Farmacie Carol Davila Bucureti
Facultatea de Farmacie
DISCIPLINA: FARMACOGNOZIE, FITOCHIMIE, FITOTERAPIE
Analiza farmacognostic a unui fitopreparat
cu aciune antiulceroas
Ceai gastric
Zamfir Teodora
Gr.13, an III
Prof.coord.conf.univ. Dutu Ligia Elena
Bucureti 2014
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
2/37
2
Cuprins
Capitolul 1:Date generale privind produsele vegetale component ale amestecului
1.1 Calendula flos.......pag 3
1.2. Hyperici herba ..............pag 4
1.3. Symphyti radix. pag 6
Capitolul 2:Analiza farmacognostic a produselor vegetale
componente ale fitopreparatului ...................................................................................pag 8
2.1.Examen macroscopic.........pag8
2.1.1 Calendula flos...pag 8
2.1.2 Hyperici herba..pag 8
2.1.3 Symphyti radix..pag 9
2.2 Examen microscopic....pag 10
2.2.1 Calendula flos..pag 10
2.2.2 Hyperici herba pag 11
2.2.3. Symphyti radix. pag 122.3. Analiza chimic calitativ a soluiei extractive apoase..Pag 13
2.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor......pag 23
2.5. Determinarea cantitativ a flavonelor.pag 26
Capitolul 3:Stabilirea formulei de fitopreparat..pag 28
3.1 Raportul dintre produsele vegetale componente ale fitopreparatului..pag 28
3.2 Analiza chimic calitativ a fitopreparatului...Pag 29
3.3 Determinarea cantitativ a flavonelor din fitopreparatpag 33
3.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor din fitopreparatpag 33
Capitolul 4:Corelaii ntre principiile active identificate
i potenialele efecte terapeutice induse.......................................................................pag 34
Capitolul 5:Concluzii.........pag 35
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
3/37
3
Capitolul 1
Date generale privind produsele vegetale component ale amestecului
1.1 Calendula flos
Reprezint inflorescena cu sau fr receptacul, uscat dup recoltare de la specia
Calendula officinalis L., glbenele(Asteraceae).Trebuie sa conin cel puin ;23% substane
solubile sau cel puin0,4% flavonoide exprimate n hiperozid.
Compoziie chimic :
n produsul vegetal predomin saponozidele triterpenice pentaciclice (2-10%),representative fiind calendulozidele (A-H) (Calendulozidele sunt mono- i bidesmozidele
acidului oleanolic)
Steroli Derivai flavonici ( glucozidele izoramnetolului i cvercetolului) Carotenoide ( licopina, i carotene, luteina, violaxantina, flavoxantina,
crizantemxantina);
Compui poliinici (acid calendulic); Cumarine (umbeliferona, esculetol, scopoletol); APFC-urireprezentate de acid clorogenic; Tanin; Mucilagii; 0,2-0,3% ulei volatile cu derivai sesquiterpenici ( -cadinol, constituent majoritar)
Aciune:
Cicatrizant prin saponozide, carotenoide, flavone; Antiinflamatoare; Antiedematoas; Antibacterian prin saponozide, flavone, tanin, ulei volatil; Coleretic prin acid clorogenic, umbeliferon;
Acid calendulic
Fig.33 (1)
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
4/37
4
Imunostimulatoare; Mucoprotectoareprin mucilagii; Antispastic prin flavone i cumarine; Capilaroprotectoareprin flavone; Antioxidant prin flavone;(3)
ntrebuinri :
n tratamentul plgilor, arsurilor, gastritei colecistitei, cistitei, ulcerului gastro-duodenali varicose, tulburari menstruale, n special n dismenoree;
n dermatocosmetic.Mod de administrare :
Infuzieobinut dintr-un gram de produs vegetal la 150 de ml ap; Tinctur diluat n ap(2-4 ml tinctur la 250-500 ml ap); Unguent (Pentru ungent se prevede un coninut n principia active corespunztoare la
2-5 g produs vegetal);(3)
1.2. Hyperici herba
Reprezint somitile florale uscate dup recoltare de la specia Hypericum perforatum L.,
suntoare, pojarni; conine cel puin 0,08% hipericine, exprimate n hipericin.
Compoziie chimic :
0,10-0,505 naftodiantrone, reprezentate de hipericinai pseudohipericin, localizate in punctele negre de pe
petale;
0,1-0,3% ulei volatile bogat n hidrocarburimonoterpenice ;
Hipericin
Fig.34(2)
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
5/37
5
4-5% flavone reprezentate de hiperozid, rutozid,isocvercotrozid, biflavone;
Xantone (1,3,6,7tetrahidroxixantona) Proantociani; 6-15% tanin de tip catehic; APFC-uri reprezentate de acid cafeic i clorogenic; Carotenoide 2-4% hiperforin (derivat defloroglucinol)(3)
Actiune :
Colagogcoleretic - prin acid cafeic iclorogenic;
Cicatrizant prin flavone, carotenoide, tanin; Antipruriginoas prin ulei volatile;
Antidepresiv i fotosensibilizatoare prin hipericin i pseudohipericin; Antibacterian prin hiperforin si ulei volatile; Capilaroprotectoare, diuretic prin flavone, cateholi;
ntrebuinri:
Intern in tratamentul :- Colitei;- Colicistitei;- Ulcerului gastro-duodenal;- Stri depressive ( la vrsta a III-a)
Extern - n arsuri.
Mod de administrare:
Infuzie- obinut din 2-4 g produs vegetal la 150 ml de ap;
Pseudoipericin
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
6/37
6
- se administreaz 1-2 cni de infuzie proaspt preparat/zi, de preferat dimineaai seara;
ulei de suntoare (obinut prin macerarea produsului vegetal ntr-un ulei vegetal) extract standardizat in hipericin;
1.3. Symphyti radix
Reprezint rdcinile si rrizomii proaspei sau uscai dup recoltare de la specia
Symphytum officinale L., ttneas, iarba lui Tatin(Boraginaceae)
Compozitie chimic:
Produsul vegetal conine :
0,6-0,8% alantoin; Alantoin Poliholozide; 4-6% tanin; 0,2-0,6 % alcalozi pirolizidinici; Derivai triterpenici; Aminoacizi; Asparagin 1-3% asparagin;
Aciune :
Cicatrizant prin alantoin i poliholozide; Antiulceroas prin alantoin; Antipruriginoas prin poliholozide; Antiinflamatoareprin acizi polifenolici; Astringent, antimicrobian prin tanin.
ntrebuinri:
n medicina tradiional produsul vegetal este frecvent utilizat n tratamentul ulcerului,gastritelor, afeciuni respiratorii (bronit, tuse de diferite etiologii)
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
7/37
7
Extern se folosete sub form de cataplasme sau unguente; se ntrebuineaz in tratareaplgilor infectate n curs de cicatrizare, arsurilor, ulcerului varicos, furunculozei;
Mod de administrare:
Infuzie obinut din 4-5 g produs vegetal la 250 de ml ap; timpul de infuzare este de10-15 min; se administreaz 2-3 cani de infuzie pe zip e o durat limitat de
tratament;
Extern, se recomand ca preparatele s se aplice pe dermul integru;
Durata limitat de tratament este datorat alcaloizilor pirolizidinic care, laadministrarea ndelungat aprodusului vegetal, induc hepatotoxicitate;
Doza zilnic de alcaloizi pirolizidinic nu trebuie s depeasc 100 demicrograme;
Durata tratamenului nu trebuie s depeasc 4-6 sptmni. Se presupune c administrarea timp de un an a unei cantitai de 1 microgram de
alcaloizi pirolizidinici pe zi ar putea avea efect cancerigen.(4)
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
8/37
8
Capitolul 2
Analiza farmacognostica produselor vegetale componente ale
fitopreparatului
2.1.Examen macroscopic
Prin acest examen, se urmrete stabilirea caracterelor morfologice (observate cu ochiul
liber sau la lup) i a caracterelor organoleptice ale produselor vegetale. Examinarea presupune
stabilirea aspectului, dimensiunilor, culorii, mirosului si gustului (3).
2.1.1 Calendula flos
Aspectul produsului vegetal: produsul vegetal
prezint un aspect neomogen, sub form de concissum.
Florile au corola galben, galben-portocalie sau
galben roiatic.
Culoarea produsului vegetal: este predominant
galben datorit florilor de glbenele.
Mirosul produsului vegetal: este specific glbenelelor,
acestea prezentnd un miros balsamic puternic.
Gustul produsului vegetal: gust amrui- srat, uor mucilaginos
2.1.2 Hyperici herba
Aspectul produsului vegetal: produsul
vegetal prezint un aspect neomogen, sub form de
concissum.
Pe toat suprafaa frunzei se observ
punctuaii translucide corespunztoare pungilor
secretoare, care i confer un aspect perforat.Florile sunt dispuse in dichazii;dichaziul terminal,
mpreun cu ramurile laterale terminate in dichazii
formez un corimb, sau mai rar o panicul.Caliciul
este format din 5 sepale lanceolate, ascuite,
Fig 11.Produs vegetal de tip
concissumHyperici herba
Fig 10.Produs vegetal de tip
concissumCalendula flos
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
9/37
9
glabre, cu punctuaiuni translucide i rare punctuaiuni negre.Corola este format din 5 petale
galben-aurii , care prezint pe margini mici puncte brun-negricioase.
Culoarea produsului vegetal: este galben-verzuie, culoare datorat mrunirii prilor
aeriene ale suntoarei;
Mirosul produsului vegetal: miros caracteristic
Gustul produsului vegetal: aromat, amar, astringent.
2.1.3 Symphyti radix
Aspectul produsului vegetal: produsul vegetal prezint un
aspect neomogen, sub form de concissum.
Culoarea produsului vegetal: este gri-brun, culoare
datorat mrunirii rizomului si a rdcinii;
Mirosul produsului vegetal: produsul vegetal uscat nuprezint miros characteristic;
Gustul produsului vegetal: amar.
Concluzie : n urma examenului macroscopic, a fost identificat fiecare produs vegetal
menionat de productor, un factor important reprezentndu-l forma de concissum sub care sunt
prezentate plantele medicinale mrunite.
Fig 12.Produs vegetal de tip
concissumS m h ti radix
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
10/37
10
2.2 Examen microscopic
Examenul micoscopic are ca scop stabilirea esuturilor i elementelor anatomice
caracteristice unui anumit tip de produs vegetal. Se poate realiza pe seciune, preparat superficial
(concissum) i pulbere (3). n cazul de fa examenul microscopic se realizeaz pe pulbere
clarificat cucloralhidrat.
Dup pulverizarea unei mici cantiti din produsul brut, din pulbere se presar cu un ac
spatulat peste o lam de microscop peste care se aduce iniial cteva picturi de cloralhidrat
800g/l.
Preparatul rezultat se trece cu micri succesive prin flacra unui bec de gaz, prin micri
circulare, pn se percepe un miros slab caracteristic de reactiv i se observ degajarea unor
vapori albicioi rezultai prin descompunerea claralhidratului. Nu se insist cu nclzirea
deoarece claralhidratul poate cristaliza pe lama ceea ce mpiedic obinerea unui preparat
microscopic corespunztor. Apoi se oprete nclzirea, se mai adaug cteva picturi de
cloralhidrat dac este nevoie i floroglucin clorhidric pentru evidenierea elementelor
lemnoase, se pune lamela peste preparat, i apoi se examineaz la microscop
2.2.1 Calendula flos
Caractere microscopice :n urma examenului microscopic am
regsit majoritatea elementelor specifice unui
preparat de tip flos:
Grauncioare de polen; Peri glandulari specifici
fam.Asteraceae
Fragmente de endoteciu ; Fragmente de epiderm cu aspect
variat;
Parenchim clorofilian ; Vase de lemn de calibru mic;
Fig 1.Gruncior de polen observate
la Calendulae flos
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
11/37
11
2.2.2 Hyperici herba
n urma examenului microscopic am regsit majoritatea elementelor specifice unui
preparat de tip herba:
Elementele comune pentru produsevegetale de tip folium : epiderma cu stomatele;-fragmente de parenchim clorofilian;-fragmente detesut palisadic si lacunar; si elementele comune pentruproduse vegetale de tip flores.
Elemente comune de flores: fragmentede endoteciu, grauncioare de polen, fragmente de
epiderma cu aspect variat, parenchim clorofilianprovenit de pe sepale, vase de lemn de calibru mic;
Fig 2. Fragment de endoteciu
observat la Calendulae flos
Fig 3. Peri glandulari specifici fam
Asteraceae
Fig 4.Pungi secretoare cu
hipericin observate la
Hyperici herba
Fig 6.Vase de lemn de calibru mic
observate la Hyperici herbaFig 5. Anter observat la
Hyperici herba
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
12/37
12
2.2.3. Symphyti radix
n urma examenului microscopic am regsit
majoritatea elementelor specifice unui preparat de tip
radix:
Vase de lemn de calibru mare; Suber; Parenchim cortical;
Fig 7. Gruncioare de polen
observate la Hyperici herba
Fig 9. Suber observat la
Symphyti radix
Fig 8. Vase de lemn de calibru mare
observate la Symphyti radix
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
13/37
13
2.3. Analiza chimic calitativ a soluieiextractive apoase
Examenul chimic calitativ are ca scop stabilirea principalelor grupe de principii active, prin
reacii chimice specifice. Realizarea acestui obiectiv are la baz dou etape:
produsul vegtal este supus unor extracii succesive cu solveni de polariti diferite, de laapolar spre polar (n general eter etilic, metanol, ap etc.)
n fiecare soluie extractiv se efectueaz reacii chimice specifice diferitelor clase deprincipii active. Aceste reacii de identificare vor fi descrisen continuare.
n prima faz este necesar obinerea unei infuzii conform specificaiilor productorului:
se iau 2 linguri de produs vegetal peste care se adaug 250 ml ap fierbinte i se las la infuzat
timp de 15 minute, la temperatura camerei, apoi se strecoar (3).
Indentificarea compuilor reductori:
Reacia cu reactivul Fehling
Principiul reaciei: are la baza proprietatea ozelor de a reduce reactivul Fehling (hidroxid
amino-cupric) la oxid cupros.
Tehnica de lucru: peste soluia extractivse aduce reactiv Fehling (obinut extempore din
Fehling I + Fehling II n cantiti egale). Amestecul se ncalzete la flacrmic.
Rezultate:
a) Calendula flos :precipitat rou-
crmiziu cum se
poate observa n Fig.
13 (3).
b) Hyperici herba :precipitat rou-
crmiziu cum se
poate observa n Fig.
14 (3).
c) Symphytum radix:precipitat rou-
crmiziu cum se
poate observa n Fig.
15 (3).
Fig 13.Reacia
cu FeCl3
Fig 15.Reacia
cu FeCl3
Fig 14.Reacia
cu FeCl3
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
14/37
14
Observaii: n cazul n care reacia este pozitiv, dar se obine o cantitate mic de
precipitat, poate demonstra c infuzia nu conine compui reductori n cantitate foarte mare.
I denti f icarea ozelor si poliholozidelor :
Reacia Molish
Principiul reaciei: sub aciunea acidului sulfuric concentrat, ozele i poliholozidele se
deshidrateaz, cu formarea furfuralului (pentoze) sau hidroximetil-furfuralului (hexoze); acetia,
prin cuplare cu timol, formeaz compui colorai n rou-purpuriu.
Tehnica de lucru: 35 ml soluie extractiv se concentreaz n capsul. Peste reziduu se
aduce 1 ml acid sulfuric concentrat i se menine n repaus cel puin 5 minute. Apoi se trateaz
cu 1-2 picturi timol 1%.
Rezultate: rezult un compus colorat n rou-violaceu sau rou-portocaliu pentru
Calendula flos i Symphytum radix
a) Calendula flos : seobserv apariia unui
precipitat rou-crmiziu
cum se poate observa n
Fig. 16 (3).
b) Hyperici herba :nu seobserv apariia unui
precipitat rou-crmiziu
cum se poate observa n
Fig. 17 (3).
c) Symphytumradix: se observ
apariia unui
precipitat rou-
crmiziu cum se
poate observa n
Fig. 18 (3).
Fig.16 Reacia Molish
Fig.18 Reacia MolishFig.17 Reacia Molish
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
15/37
15
Observaii: n urma reacei s-a format un compus rou-portocaliu, reacia fiind pozitiv
pentru Calendula flos i Symphytum radix.
I dentif icarea mucil agii lor:
Reacia de precipitare n alcool
Principiul reaciei: mucilagiile precipit n prezena alcoolului sau a acetonei.
Tehnica de lucru: ntr-o eprubet ce conine 10 mL metanol sau aceton se toarn n fir
subire, sub continu agitare 2- 3 mL soluie extractivconcentrat.
Rezultate:
a) Calendula flos : seformeaz un precipitat
voluminos, dup cum
se observ n fig.20
b) Hyperici herba : seformeaz un precipitat
voluminos, dup cum
se observ n fig.21
c) Symphytum radix: seformeaz un precipitat
voluminos, dup cum
se observ n fig.22
Observaii: reacia este pozitiv pentru toateprodusele vegetale.
I dentif icarea ODP-ur il or:
Reacia cu reactivul Arnow
Principiul reaciei: n prezena acidului azotos (format in situ n sistem din reacia
azotitului de sodiu cu acidul clorhidric), acidul cafeic formeaz nitrozoderivai. Acetia, nmediualcalin, tautomerizeaz la izonitrozoderivai, compui colorai n rou intens.
Tehnica de lucru: 1 mL soluie extractiv se trateaz
cu 1 mL acid clorhidric 0,5 N, 1 mL
reactiv Arnow i 1 mL hidroxid de sodiu 0,5 N. Apare o coloraie roie ca urmare a formrii
oximei acidului cafeic.
Fi .20 Fi .22Fi .21
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
16/37
16
Rezultate:
a) Calendula flos : seformeaz coloraie
roie, dup cum se
observ n fig.20
b) Hyperici herba : seformeaz coloraie
roie, dup cum se
observ n fig.20
c) Symphytum radix: seformeaz coloraie
roie, dup cum se
observ n fig.20
Observaii: intensitatea coloraiei este dependent de cantitatea de ODP-uri din produs
vegetal (3). n aceast situaie reaciile sunt pozitive.
I dentif icarea proantocianilor :
Reacia Bath-Smith
Principiul metodei: n mediu acid i la cald se transformn antociani.
Tehnica de lucru :la 1 ml soluie extractiv se adaug 1 ml soluie de acid clorhidric 3
mol/l. proba astfel obinut se menine30 de minute pe baia de ap n fiebere.
Fig.23 Fig.24 Fig.25
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
17/37
17
clorur de cianidol
Rezultate : se obine o coloraie , mai intens n mediu de alcool n-butilic pentru
Hyperici herba.
I denti fi carea fl avonelor:
1. Formarea fenoxizilor
Principiul reaciei: flavonozidele i agliconii formeaz n mediu alcalinfenoxizi colorai
n galben.
Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv apoas se adaug 0,5 ml soluie de hidroxid
de sodiu 100 g/l.
Rezultate: se observ intensificarea coloraiei galbenepentru toate cele trei produse
vegetale (3).
I dentif icarea antocianilor:
Reacia virajului de culoare:Principiul reaciei: prin variaia pH-ului au loc modificri structurale nsoite de
modificarea culorii.
Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv apoas se adaug 1-2 picturi soluie de acid
clorhidric 1 mol/l i se observ intensificarea coloraiei roii.
Rezultate: schimbrile nu au fost vizibile ;
cvercetol
Conc.
Cl
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
18/37
18
I dentif icarea taninuri lor:
Reacia cu clorur feric (III)
Principiul reaciei: n prezena cationului Fe+3taninurile catehice formeaz precipitate
i/sau coloraie verde-negricioas, iar cele galice precipitate i/sau coloraie albastr-negricioas.
Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv se adaug 0,5 ml soluie de clorur de fer (III)
10 g/l
Rezultate: se obine un precipitat i/sau coloraie diferit n funcie de tipul de tanin.
a) Calendula flos : - seobine o coloraie
verde -negricioas
b) Hyperici herba : - seobine o coloraie
verde -negricioas
c) Symphytum radix:- se obine o coloraie
verde -negricioas
Observaii: dac n soluia extractiv se gsesc att taninuri catehice ct i galice, aceast
reacie de culoare nu este concludent i se impune separarea acestora (3). Proba analizat
conine tanin catehic.
Fig.26 Fig.27
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
19/37
19
I denti f icarea saponozidelor :
Proba de spumefiere
Principiul reaciei: o soluie apoas coninnd saponozide, prin agitare energic timp de
15 secunde, formeaz o coloan de spum persistent cel puin 15 minute.
Tehnica de lucru: 5 ml soluie extractiv apoas se agit timp de 15 secunde, apoi se las
n repaus.
Rezultate:
Observaii: proprietile spumefiante, detergente ale saponozidelorlor se explic prin
tensioactivitatea; poliholozidele se comport asemntor, dar spuma nu este persistent (3).
a) Calendula flos :existena unei spume
persistente i
dupa 15 minute, denot
prezena saponozidelor
b) Hyperici herba :existena unei spume
persistente i
dupa 15 minute, denot
prezena saponozidelor
c) Symphytum radix:Nu se formeaz spuma
persistent reacia este
negativ => nu sunt
prezente saponozide
Fig. 28. Proba des umefiere
Fig. 29. Proba des umefiere
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
20/37
20
I denti f icarea carotenoidelor:
Reacia cu reactivul Carr-Price
Principiul reaciei: la tratare cu triclorura de stibiu, carotenoidele formeaz compui
colorai n albastru, care trec n rou-purpuriu i apoi n rou-brun.
Tehnica de lucru: 1-2 mL soluie extractiv apoasse aduce la reziduu, ntr-o capsul de
porelan, pe baie de apa. Peste reziduu se adaug 1-2 picturi reactiv Carr-Price.
Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre, care
vireaz rapid n rou-purpuriu i apoi n rou-brun (4).
Observaii: n cazul acestui preparat reacia este negativ pentru toate cele trei produse
vegetale.
I denti f icarea alcaloizil or:
Reacii generale de precipitare
Principiul reaciei: n prezena reactivului (R. Mayer, R. Bertrand), alcaloizii sruri
formeaz precipitate.
Tehnica de lucru: Peste 1 ml soluie apoas acid se adaug treptat reactivul de
precipitare (1-2 picturi) i se urmrete modificarea aspectului soluiei n raportcu o soluie
martor.Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se formeaz un precipitat (4).
Observaii: n cazul reaciilor cu reactivii Mayer i Bertrand se formeaz precipitate albe
sau alb-glbui, solubile n exces de reactiv; n cazul n care proba are un coninut mic de
alcaloizi, se va observa doar o opalescen, nu un precipitat.Reacia relizat pe probelede
analizat estepozitiv pentru Symphyti radix.
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
21/37
21
Nr.
Crt.Principiul activ
cutatReacia chimic
realizatProdus vegetal Rezultat Observaii
1Compui
reductori
Reacia cu reactiv
Fehling
Calendula flos Pozitiv (+)Precipitat rou-
crmiziu
Hyperici herba Pozitiv (+)Precipitat rou-
crmiziu
Symphyti radix Pozitiv (+)Precipitat rou-
crmiziu
2 Oze Reacia Molish
Calendula flos Pozitiv (+)Compus rou-
portocaliu
Hyperici herba Negativ (-)Compus rou-
portocaliu
Symphyti radix Pozitiv (+)Compus rou-
portocaliu
3 MucilagiiReacia de
precipitare n alcool
Calendula flos Pozitiv (+)
Precipitat voluminosHyperici herbaPozitiv (+)
Symphyti radix Pozitiv (+)
4 ODP-uriReacia cu reactivul
Arnow
Calendula flos Pozitiv (+)
Compus rouHyperici herbaPozitiv (+)
Symphyti radixPozitiv (+)
5 Proantociani Reacia Bath-Smith
Calendula flos Negativ (-)
Hyperici herba Pozitiv (+)
Coloraie mai
intens dect a
martorului
Symphyti radix Negativ (-)
6 Flavone
Formarea
fenoxizilor
Calendula flos Pozitiv (+)Intensificarea
coloraiei galbeneHyperici herba Pozitiv (+)
Symphyti radix Pozitiv (+)
7 AntocianiReacia de viraj de
culoare
Calendula flos Negativ (-)
Hyperici herba Negativ (-)
Symphyti radix Negativ (-)
Tabel Irezultate analiz chimic calitativ
pe produse vegetale
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
22/37
22
8 Taninuri Reacia cu FeCl3
Calendula flos Pozitiv (+)Coloraie
verde-negricioasHyperici herbaPozitiv (+)
Symphyti radix Pozitiv (+)
9 Alcaloizi Reacii generale deprecipitare
Calendula flos Negativ (-)
Precipitatalb/alb-galbui
Hyperici herba Negativ (-)
Symphyti radix Pozitiv (+)
10 Saponozide Proba de spumefiere
Calendula flos Pozitiv (+) Strat de spum
persistent 15 min
(>1cm)
Hyperici herba Pozitiv (+)
Symphyti radix Negativ (-)
11 Carotenoide
Reacia cu reactiv
Carr-Price
Calendula flos Negativ (-)Coloraie
albastr-verzuie
Hyperici herba Negativ (-)
Coloraie
albastr-verzuie
Symphyti radix Negativ (-)Coloraie
verde-albastruie
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
23/37
23
2.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor
ODP-urile sunt esterii monocafeilchinici (acidul clorogenic i izomerii si),
dicafeilchinici (cinarina i izomerii si), esteri ai acidului cafeic cu acizii tartric i
2-hidroxi-dihidrocafeic sau derivai glicozidai ai acidului cafeic. n aceast clas sunt inclui de
asemenea esteri ai acizilor p-cumarinici, ferulic, sinapic (esteri ntre dou sau mai dou sau mai
multe molecule de astfel de acizi, identici sau diferii).
Determinarea cantitativ a ODP-urilor se realizeaz pe o soluie extractiv apoas,
conform productorului.
Tehnica de lucru:
- Prepararea probei de analizat: ntr-un balon cotat de 10 ml se introduc 2 ml soluieextractiv, 1 ml soluie acid clorhidric 0,5 N, 1 ml reactiv Arnow, 1 ml soluie hidroxid
de sodiu 10%. Se campleteaz la volum cu ap.
- Prepararea probei-martor: ntr-o eprubet se introduce 2 ml soluie extractiv, 1 mlsoluie de acid clorhidric 0,5 N, 1 ml soluie hidroxid de sodiu 10%. Se campleteaz la
volum cu ap.
Se citete absorbana probei de analizat, fa de proba-martor, la lungimea de unda de 510
nm.
Coninutul n ODP-uri corespunztor la 100 ml soluie se calculeaz conform formulei:
Unde: c% = coninutul de ODP-uri al soluiei
Ep= absorbia probei
Eet = absorbia soluiei de acid cafeic, de concentraie Cetdin curba etalon (tabel III)
Cet= concentraia soluiei de acid cafeic, rezultat din curba etalon (tabel III)
Cp= (mp.v.-u%):50 *1/10;
u%= umiditatea produsului vegetal
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
24/37
24
Rezultate :
a) Calendula flos : n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
Ep = 0,352 de unde
rezult c se va alege
Eet = 0,385, astfel se
determin i Cet =
26,72
b) Hyperici herba : n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
Ep = 0,893 de unde
rezult c se va alege
Eet = 0,963, astfel se
determin i Cet =
55,80
c) Symphytum radix n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
Ep = 0,207, de unde
rezult c se va alege
Eet = 0,193, astfel se
determin i Cet =
13,36.
c% = 0,617 g ODP-uri,
exprimate n acid cafeic / 100
ml
c% =1,388725 g ODP-uri,
exprimate n acid cafeic / 100
ml
c% = 0,306 g ODP-uri,
exprimate n acid cafeic / 100
ml
Concluzie: n soluia apoas extractiv se gseste o cantitate destul de mare de acizi
polifenolcarboxilici.
Fig. 30. Dozarea ODP-urilora- martor; b-prob de analizat
a. b.
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
25/37
25
g acid cafeic/ mL Absorbanta
13,36 0,193
26,72 0,385
40,08 0,578
53,44 0,762
55,80 0,963
Tabelul II: variaia extincei n funciede concentrarea soluiei de acid cafeic
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
26/37
26
2.5. Determinarea cantitativ a flavonelor
Determinarea cantitativ a flavonelor se realizeaz pe o soluie extractiv apoas,
conform productorului.
Tehnica de lucru:
- Prepararea probei de analizat: ntr-un balon cotat de 10 ml se introduce 1 ml soluieextractiv i 1 ml soluie clorur de aluminiu 25 g/l. Se completeaz la volum cu ap.
- Prepararea probei-martor : ntr-un balon cotat de 10 ml se introduce 1 ml soluieextractiv. Se completeaz la volum cu ap.
Dup 30-45 minute se citete absorbana probei de analizat, fa de proba-martor, la
lungimea de und de 427nm.
Coninutul n flavone corespunztor la 100 ml soluie se calculeaz conform formulei:
Unde: c% = coninutul de flavone al soluiei
Ep= absorbia probei
Eet = absorbia soluiei de rutozid, de concentraie Cetdin curba etalon (tabel III)Cet= concentraia soluiei de rutozid, rezultat din curba etalon (tabel III)
Cp= (mp.v.-u%):50 *2/10;
u%= umiditatea produsului vegetal
Cet(g/ml) Eet
1,00 0,137
2,00 0,354
3,00 0,584
4,00 0,799
Tabelul III: Variaia extinciei n funciede concentraia soluiei de rutozid
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
27/37
27
Rezultate
a) Calendula flos : n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
Ep = 0,310, de unde
rezult c se va alege
Eet = 0,354, astfel se
determin i Cet= 2,0
b) Hyperici herba : n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
Ep = 0,508, de unde
rezult c se va alege
Eet = 0,584, astefel se
determin i Cet= 3,0.
c) Symphytum radix n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
Ep = 0,202, de unde
rezult c se va alege
Eet = 0,137, astefel se
determin i Cet= 1,0.
c% = 0,035018 g flavone,
exprimate n rutozid / 100 ml
soluie
c% = 0,02213 g flavone,
exprimate n rutozid / 100 ml
soluie
c% = 0,01579 g flavone,
exprimate n rutozid / 100 ml
soluie
Concluzie: n soluia apoas extractiv se gseste o cantitate destul de mic de flavone.
Fig. 31. Spectrofotometrul cu care s-aucitit absorbanele dozrilor
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
28/37
28
Capitolul 3
Stabilirea formulei de fitopreparat
3.1 Raportul dintre produsele vegetale componente ale fitopreparatului
n urma rezultatelor obinute la determinrile cantitative ale flavonelor i ODP-urilor am stabilit
mpreun cu coordonatorul de proiect urmtorul raport dintre produsele vegetale studiate :
suntoare 5 pri; glbenele 4 pri; ttneas 1 parte;
Fig.32 Amestec produse vegetale
conform raportului stabilit
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
29/37
29
3.2 Analiza chimic calitativ a fitopreparatului
Indentificarea compuilor reductori:
Reacia cu reactivul FehlingIdentificarea compuilor reductori se realizeaz conform
tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Rezultate: se observ apariia unui precipitat rou-crmiziu
Observaii: n cazul n care reacia este pozitiv, dar se obine o cantitate mic de
precipitat, poate demonstra c infuzia nu conine compui reductori n cantitate foarte mare.
I denti f icarea ozelor si poliholozidelor:- Identificarea ozelor si poliholozidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n
capitolul 2.3
Reacia Molish
Rezultate: rezult un compus colorat n rou-violaceu sau rou-portocaliu
Observaii: n urma reacei s-a format un compus rou-portocaliu, reacia fiind pozitiv.
I dentif icarea mucilagii lor:
Identificarea mucilagiilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Reacia de precipitare nalcool
Rezultate:
Observaii: reacia este slab pozitiv, dup cum se poate observa n Fig. 43.
I dentif icarea ODP-ur il or:
Identificarea ODP-urilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
30/37
30
Rezultate:
Observaii: intensitatea coloraiei este dependent de cantitatea de ODP-uri din produs vegetal
(3). n aceast situaie reaciile sunt pozitive.
I dentif icarea proantocianilor :
Identificarea proantocianilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Rezultate : se obine o coloraie , mai intens n mediu de alcool n-butilic (3).
Observaii: n acest caz reacia este pozitiv.
I denti fi carea fl avonelor:
Formarea fenoxizilor
Identificarea flavonelor prin formarea fenoxizilor se realizeaz conform tehnicii de lucru
prezentate n capitolul 2.3
Rezultate: se observ intensificarea coloraiei galbene.
I dentif icarea antocianilor:
Identificarea antocianilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Reacia virajului de culoare:
Rezultate: nu se observ schimbri:
I dentif icarea taninuri lor:
Identificarea taninurilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Reacia cu clorur feric (III)
Rezultate: se obine un precipitat de culoare verde-negricioas.
Observaii: dac n soluia extractiv se gsesc att taninuri catehice ct i galice, aceast
reacie de culoare nu este concludent i se impune separarea acestora (3).
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
31/37
31
I denti f icarea saponozidelor :
Identificarea saponozidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Proba de spumefiere
Rezultate: existena unei spume persistente i dupa 15 minute, denot prezena
saponozidelor.
Observaii: proprietile spumefiante, detergente ale saponozidelorlor se explic prin
tensioactivitatea;poliholozidele se comport asemntor, dar spuma nu este persistent (3).
I denti fi carea carotenoidelor:
Identificarea carotenoidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Reacia cu reactivul Carr-Price
Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre, care
vireaz rapid n rou-purpuriu i apoi n rou-brun (4).
Observaii: n cazul acestui preparat reacia este negativ.
I denti f icarea alcaloizil or:
Identificarea alcaloizilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Reacii generale de precipitare
Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se formeaz un precipitat (4).
Observaii: n cazul reaciilor cu reactivii Mayer i Bertrand se formeazprecipitate albe
sau alb-glbui, solubile n exces de reactiv; n cazul n care proba are un coninut mic de
alcaloizi, se va observa doar o opalescen, nu un precipitat.Reacia relizat pe proba de analizat
estepozitiv.
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
32/37
32
Nr.
Crt.Principiul activ
cutatReacia chimic
realizatRezultat Observaii
1 Compui reductoriReacia cu reactiv
FehlingPozitiv (+)
Precipitat
rou-crmiziu
2 Oze Reacia Molish Pozitiv (+)Compus
rou-portocaliu
3 MucilagiiReacia de precipitare
n alcoolPozitiv (+) Precipitat voluminos
4 ODP-uriReacia cu reactivul
ArnowPozitiv (+) Compus rou
5 Proantociani Reacia Bath-Smith Pozitiv (+)Coloraie mai intens
dect a martorului
6 FlavoneFormarea fenoxizilor
Pozitiv (+)
Intensificarea coloraiei
galbene
7 AntocianiReacia de viraj de
culoare
Negativ (-)
8 Taninuri Reacia cu FeCl3 Pozitiv (+)Coloraie
verde-negricioas(tanin catehic)
9 Saponozide Proba de spumefiere Pozitiv (+)
Strat de spum
persistent 15 min
(>1cm)
10 Carotenoide
Reacia cu reactiv
Carr-Price Negativ (-) Coloraie albastr
11 AlcaloiziReacii generale de
precipitarePozitiv (+)
Precipitat
alb/alb-galbui
Tabel IVrezultate analiz chimic
calitativ pe produse vegetale
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
33/37
33
3.3 Determinarea cantitativ a flavonelor din fitopreparat
Determinarea cantitativ a flavonelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n
capitolul 2.5Se obin urmtoarele rezultate :
n urma masurrii absorbanei probei n funcie de martor, Ep = 0,503, de unde rezult cse va alege Eet= 0,0,584, astfel se determin i Cet= 3,0=> c% = 0,02583 g flavone,
exprimate n rutozid / 100 ml soluie
3.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor din fitopreparat
Determinarea cantitativ a APFC-urilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n
capitolul 2.4Se obin urmtoarele rezultate :
n urma masurrii absorbanei probei n funcie de martor, Ep = 0,130, de unde rezult cse va alege Eet= 0,193, astfel se determin i Cet= 13,36=>c% = 0,08998 g ODP-uri,
exprimate n acid cafeic / 100 ml
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
34/37
34
Capitolul 4
Corelaii ntre principiile active identificate i potenialele efecte terapeutice
induse
Fitopreparatul obinut prin amestecarea celor trei produse vegetale conine
urmtoarele principii active: compui reductori,oze, mucilagii, ODP-uri, proantociani,
flavone, antociani, taninuri, saponozide, alcaloizi.
Astfel, fitopreparatulpoate avea urmtoarele aciuni:
Antibacterian prin saponozide, flavone, tanin Coleretic prin Apfc-uri Mucoprotectoareprin mucilagii; Antispastic prin flavone Capilaroprotectoareprin flavone; Antioxidant prin flavone; Cicatrizant prin flavone, carotenoide, tanin; Antiinflamatoareprin acizi polifenolici; Astringent, antimicrobian prin tanin.innd cont i de raportul n care cele trei produse vegetale au fost combinate, putem afirma
faptul c este posibil ca unele efecte terapeutice s predomine.Suntoarea iflorile de glbenele,
predominnd in fitopreparat, contribuie prin flavone, tanin la aciunea cicatrizant,prin mucilagii
la aciunea mucoprotectoare,prin saponozide la aciunea antibacterian,iar ttneasaprin
poliholozide i alantoin la aciunea antiulceroas
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
35/37
35
Capitolul 5Concluzii
Fitopreparatul, obinut prin amestecarea a cinci pri de suntoare, patru pri de
glbenele si o parte de ttneas, poate fi folosit cu succes drept adjuvant n terapia afeciunilor
gastro-intestinale precum: ulcer gastric, gastrit cronic, esofagit de reflux.Dar, innd cont i de
principiile active identificate i de corelaia lor cu efectele terapeutice, recomand acest
fitopreparat drept adjuvant in tratamentul ulcerului gastric.
7/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
36/37
36
Bibliografie
1. https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-
50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252Fceai-vrac%252Fceai-galbenele-flori-50gr-stefmar-1032.html%3B1000%3B15002. https://www.google.ro/search?noj=1&tbm=isch&sa=1&q=ceai+de+sunatoare+stefmar&oq=ceai+de+sunatoare+stefmar&gs_l=img.3...35965.35965.0.36450.1.1.0.0.0.0.88.88.1.1.0....0...1c.1.43.img..1.0.0.c4w7MQIqXQk#facrc=_&imgdii=_&imgrc=3ZNb9QXnJjOksM%253A%3BA1J9woaXrmFXZM%3Bhttp%253A%252F%252Fnature.costu.ro%252Fimage%252Fcache%252Fdata%252Fstefmar%252FUNIVERSALA-MEDIE-500x500.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fnature.costu.ro%252Findex.php%253Froute%253Dproduct%252Fproduct%2526path%253D63%2526product_id%253D254%3B500%3B5003. Grd C.E., Duu L.E., Popescu M.L., Tudor I., Iordache A.T.,Costea T.Bazeleteoretice i practice ale analizei farmacognostice, vol. I, Ed. Curtea Veche,Bucureti, 2008, p.4. Grd C.E., Duu L.E., Popescu M.L., Costea T., Iordache A.T., Tudor I.Bazeleteoretice i practice ale analizeifarmacognostice, vol. II, Ed. Curtea Veche, Bucureti, 2008, p.
https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%252https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-naturale%252Fceai%2527/23/2019 Analiza Farmacognostica a Produselor Vegetale Component Ale Fitopreparatului
37/37
Top Related