UNIVERSIDAD AUTONOMA GABRIEL RENE MORENO Facultad de Ciencias Veterinarias

Carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia

TESIS DE GRADO

EVALUACIN DE IVERMECTINAS A DIFERENTES CONCENTRACIONES CONTRA NEMATODES GASTROINTESTINALES EN BOVINOS CRIOLLOS

Y MESTIZOS SANTACRUZ-BOLIVIA

Tesis de grado presentado por: Paola Pilar Espinoza Cariola

Para obtener el titulo de:

Mdico Veterinario Zootecnista

Asesores: Dr. Jaime Guzmn C. Dra. Isi M. Angulo A. Dr. Hans Vaquero

Santa Cruz de la Sierra - Bolivia

2007

- 1 -

EVALUACION DE IVERMECTINAS A DIFERENTES CONCENTRACIONES CONTRA NEMATODES GASTROINTESTINALES EN BOVINOS CRIOLLOS

Y MESTIZOS SANTA CRUZ BOLIVIA1

Espinoza, C. P. P.2; Guzmn, C. J. A.3; Angulo A. I. M.4; Vaquero H.5

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

I. RESUMEN El presente trabajo se realiz en el mes de junio del 2007, en la propiedad El Remanso dependiente de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la U.A.G.R.M, ubicada en la provincia Warnes a 85 km. al noreste del departamento de Santa Cruz, en 56 bovinos de 7-12 meses de edad de raza Criollo y mestizos, infectados naturalmente con nematodos gastrointestinales con una carga parasitaria mayor a 200 HPG, distribuyndose en 4 grupos. El grupo control fue tratado con solucin fisiolgica como placebo y los tres grupos restantes fueron tratados previo pesaje con una dosis de 0,2 mg de ivermectina por kg PV, con ivermectinas en concentraciones de 1%; 3,15% y 4%. Se realizaron recuentos de huevos por gramo HPG el da 0 y 14 post tratamiento, luego se realiz la prueba de la reduccin de la oviposicin para determinar la resistencia antihelmntica, tambin se realizaron cultivos de larvas antes y despus del tratamiento. Los resultados se tabularon y fueron sometidos aun ANAVA, bajo un diseo completamente al azar y la prueba de Duncan para comparar medias. En el da 0 los HPG para el grupo control fue 1830, para la ivermectina al 1% fue 1367, para la ivermectina 3,15% fue 1452 y la ivermectina al 4% fue 782. (P> 0,05). En el da 14 los HPG para el grupo control fueron 2469, para la ivermectina al 1% fue 766, en la ivermectina al 3,15% fue 942 y en la ivermectina al 4% fue 467. (P

- 2 -

II. INTRODUCCION Los parsitos internos y externos del ganado continan siendo una de las principales causas de prdidas econmicas en Amrica Latina y en otras regiones pecuarias del trpico y subtrpico del mundo. Las ivermectinas tambin se denominan avermectinas. Dentro de este grupo, se encuentran los siguientes frmacos: ivermectina, abamectina, doramectina, moxidectina y milbemecina. Este grupo de medicamentos fue sintetizado en 1980 por Chavala y col. a partir de un fermentado de Streptomyces avermitilis, del cual se obtiene un anillo lactona macrocclico que muestra efectos como antibitico, antinematdico y adems, una marcada toxicidad contra los insectos (Sumano, L.H.; Ocampo, C.L., 1997) Las ivermectinas son el resultado de la fermentacin bacteriana del Streptomyces avermitilis, obtenido por primera vez por Bur y col. en el ao de 1979. Mas adelante, se descubri su potente actividad antihelmntica. Se inicio su comercializacin para medicina veterinaria en 1981. Las Ivermectinas actan bloqueando la transmisin nerviosa de parsitos complejos como los nematodos (gusanos redondos), son efectivas tambin contra ectoparsitos como los caros y los piojos. Las afecciones parasitarias son consideradas como causa importante de prdidas en la productividad ganadera, debido a daos tales como: morbilidad y mortalidad de los animales, reduccin de los niveles de produccin y productividad, alteraciones reproductivas y altos costos del control, entre otros. Estudios realizados en Europa, Amrica del sur y Oceana demuestran una resistencia a benzimidazoles y avermectinas, se han visto resistencia de nematodos de pequeos rumiantes a los antihelmnticos disponibles (Walter, 2003). Con los hallazgos concretos en argentina (Ansan y Col., 2001; Fiel y Col., 2001) se obtuvieron hallazgos de nematodos resistentes a los antiparasitarios de la familia de las avermectina (ivermectina y doramectina), Brasil (Pinheiro y Paiva, 1990; Soutello et al., 2003) y recientemente Uruguay (Salles, 2004; Lorenzelliy Macchi, 2004). Por lo que los objetivos que planteados para el presente trabajo fueron: Evaluar tres ivermectinas a diferentes concentraciones contra nematodos gastrointestinales en bovinos criollos y mestizos en Santa Cruz-Bolivia Cuantificar la carga parasitaria e identificar las larvas de los diferentes gneros de nematodos gastrointestinales en bovinos pre y post- tratamiento. Evaluar la eficacia o efectividad de tres ivermectinas a diferentes concentraciones en bovinos criollos y mestizos. Hacer conocer los resultados del presente trabajo de investigacin a veterinarios y ganaderos en general.

- 3 -

IV. MATERIALES Y METODOS

4.1 MATERIALES 4.1.1 Localizacin y descripcin del rea de trabajo El presente trabajo se realiz en el Centro pecuario , El Remanso, dependiente de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Autnoma Gabriel Rene Moreno, ubicada a 85 Km. al Nor Este de la ciudad de Santa Cruz de la Sierra, en la provincia Warnes, Cantn Tocomech, a los 62 45 de latitud Oeste y 17 17 latitud Sur; a 370 m.s.n.m. El clima de la regin esta caracterizado como subtropical, con temperaturas promedio de 23 C y precipitacin anual media de 1200 mm (CIAT, 1991). 4.1.2. Unidad de muestreo La investigacin se realiz muestreando a un total de 100, los cuales se escogieron 56 animales con HPG mayor a 200, distribuidos completamente al azar, de la siguiente manera:

4.2. MTODOS 4.2.1 Mtodo de Campo El mtodo de campo que se emple fue la identificacin, toma de muestras de heces y pesaje de 100 animales de los cuales se escogieron 56 animales con HPG mayor a 200, esto se realiz el da 0 antes de aplicar las ivermectinas. Los resultados de HPG de cada uno, se anotaron en las planillas de primer muestreo, tambien se realizo el cultivo e identificacin de generos de nematodos. En la segunda jornada de campo se procedieron a formar los cuatro grupos y se realiz el tratamiento correspondiente en base al HPG, se consider como el da 0 de la prueba. Cada animal fu dosificado segn el peso y se anotaron dichos datos en la planilla de tratamiento. En la tercera jornada de campo, da 14 del tratamiento, en esta oportunidad, se extrajeron muestra de materia fecal a los animales de los cuatro grupos, del mismo modo se realizaron los HPG y cultivos. Todos los resultados se anotaron en la planilla de segundo muestreo 4.2.2 Mtodo de laboratorio A todas las muestras tomadas el da 0 y 14 se les realiz la tcnica cuantitativa para determinar la cantidad de huevos por gramo de heces (HPG) y luego se realizaron los

Grupos # de Animales

Control 13 Ivermectina 1% 15 Ivermectina 3.15% 14 Ivermectina 4% 14

Total 56

- 4 -

respectivos coprocultivos e identificacin de larvas de cada uno de los cuatro grupos correspondientes, para este procedimiento se realiz la tcnica de Roberts y OSullivan (modificada).

4.2.3 Mtodo Estadstico

Para el anlisis de resultado se realiz un anlisis de varianza (ANAVA) a los H.P.G. obtenido antes y despus de la aplicacin de los tratamientos. Se realiz el anlisis bajo un diseo completamente al azar con el siguiente estadstico de prueba: Yij= U + Ti +Eij. Para la comparacin de medias antes y despus de cada tratamiento se realiz la prueba de T student y para la comparacin de medias de todos los tratamientos entre si, se realiz la prueba de Duncan. (Sofware Statgraphic)

V. RESULTADOS Y DISCUSON

En la evaluacin de la carga parasitaria en el da cero del experimento se observaron medias de HPG de 1367 en el grupo tratado con ivermectina al 1%, 1452 en el grupo tratado con la ivermectina al 3,15%, 782 en el grupo tratado con la ivermectina al 4% y 1830 en el grupo control, al anlisis estadstico no se observan diferencias estadsticas significativa entre los tratamientos (P>0,05). En la evaluacin a los 14 das post tratamiento las medias de HPG fueron: 766 en el grupo tratado con ivermectina 1%, 942 en el grupo tratado con ivermectina 3,15%, 467 en el grupo tratado con ivermectina al 4% y 2469 en el grupo control, donde al anlisis estadstico se observa una diferencia estadstica significativa, siendo la mayor carga para el grupo control con 2469 HPG y la menor para los tres grupos tratados, quienes a su vez no difieren entre si (P< 0,01). (GRAFICO y CUADRO N 1). En la evaluacin por producto se observ que el grupo Control, Ivermectina al 1% e Ivermectina 3,15% no se observ diferencia significativa P> 0,05 entre la carga parasitaria pre post tratamiento, mientras que en tratamiento con Ivermectina al 4% se observa diferencia significativa P< 0,05 aunque no produjo una adecuada reduccin de la oviposicin para el control de nematodos gastrointestinales.

GRAFICO N 1: Carga parasitaria de bovinos pre y post tratamiento

CARGA PARASITARIA

1367 1452

782

1831

767943

467

2469

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

Ivermectina 1% Ivermectina 3,15% Ivermectina 4% Control

TRATAMIENTOS

HPG

HPG Pre Tto HPG Post Tto

- 5 -

CUADRO N 1: Comparacin de medias de HPG en bovinos tratados con ivermectinas a travs de la prueba de Duncan HPG pre-Tto (1) HPG post-Tto (2)

Tratamiento N X ES X ES Ivermectina 1% Ivermectina 3,15% Ivermectina al 4% Control

15

14

14

13

1367

1452

782

1830

603,3 484,9 190,0 448,7

766b

942b

467b

2469a

148,5 298,8 130,2 416,3

Total 56 1349 1131 (1): P>0,05 (2): P

- 6 -

Sangster y Gill, 1999., sealan que el uso extensivo, con mal manejo en la dosificacin de productos en conjuncin con otros factores, conduce a la aparicin de resistencia, definida como la transmisin gentica de la prdida de sensibilidad en poblaciones que fueron previamente sensibilizadas con una droga en particular. Morales y Pino 2001, sealan que el desarrollo de resistencia esta relacionado con utilizacin de la va parenteral y aplicaciones repetidas, sin embargo Le janbre y col., 2000, indica que estudios genticos de resistencia a la ivermectina puede depender de un nico o varios genes de acuerdo al parasito participante. En nuestro pas no existen trabajos de investigacin relacionados al tema de resistencia helmntica frente a las ivermectinas, pero en pases vecinos como Brasil en agosto del 2002, Rangel y col., realizaron un trabajo de investigacin en bovinos de corte utilizando ivermectina al 1% y ivermectina LA al 1%, obteniendo al igual que nosotros una reduccin de la oviposicin inferior al 90%, siendo de igual manera, Haemonchus el gnero mas predominante. En los cultivos de larvas de muestras fecales de bovinos antes del tratamiento, hubo una predominancia de Haemonchus 60% luego Trichostrongylus 20%, Ostertargia 8%, Bunostomum 3%, Cooperia 2%, Oesophagostomum 5%, Chabertia 1% y Strongyloides 1%, en el segundo cultivo de larvas a los 14 das post- tratamiento, los gneros se mantuvieron casi en la misma proporcin habindose encontrado en Haemonchus una media total de 64%, Trichostrongylus 22%, Ostertargia 4%, Bunostomum 4%, Cooperia 2%, Oesophagostomum 2%, Chabertia 1%, Strongyloides, en este segundo cultivo no se observo presencia de larvas en el grupo tratado con ivermectina al 4%, posiblemente por que este grupo tenia menor carga parasitaria HPG en relacin de los otros grupos y tambin debido a que el cultivo se realiza de un pool completamente al azar de cada animal, habindose tomado posiblemente las porciones de materia fecal donde no existan huevos.(CUADRO N 2) CUADRO N 2: Porcentaje y media total de los gneros de larvas de nematodos gastrointestinales detectados en materia fecal de bovinos pre y post tratamiento (junio del 2007)

% % % % %

GENERO/TTO Ivermectina al 1% Ivermectina

al 3,15% Ivermectina

al 4% Control Media Total

Da 0 Da 14 Da 0 Da 14

Da 0

Da 14

Da 0

Da 14

Da 0

Da 14

Haemonchus Trichostrongylus Ostertargia Bunostomum Cooperia Oesophagostomum Chabertia Strongyloides

54

17

12

2

5

10 - -

76

14 6 - 2 - - 2

53

37

4

5 - - -

1

44

48 -

4 -

4 - -

86 5 1 3 4 1 - -

- - - - - - - -

46

21

15

2

1

8

6

1

72 3 7 7 7 2 2 -

60

20

8

3

2

5

1

1

64

22 4 4 2 2 1 1

TOTAL 100 100 100 100 100 - 100 100 100 100

- 7 -

Vermunt., 1995, Hejmadi y col., 2000, dicen que el desarrollo de las larvas post tratamiento es de importancia, por que son las portadoras de los genes de resistencia a los antiparasitarios en cuestin., aspectos muy importante a tomar en cuenta en nuestro trabajo donde se observo el crecimiento de larvas en los grupos tratados con las ivermectinas al 1% y 3.15% y no as en la ivermectina al 4%. En Chile el ao 2001, Sievers y col., realizaron otro trabajo sobre la comparacin de la efectividad antihelmntica de seis productos comerciales que contienen lactosas macrocclicas frente a nematodos gastrointestinales en bovinos, donde la ivermectina presento una efectividad menor, pero en este, los gneros predominantes fueron: Ostertargia, Cooperia y Trichostrongylus. En Argentina un estudio realizado por Olachea y col., confirman la resistencia de los helmintos a las ivermectinas, siendo los gneros mas encontrados Cooperia y Ostertargia. Vermunt., 1995, Hejmadi y col., 2000, dicen que el desarrollo de las larvas post tratamiento es de importancia, por que son las portadoras de los genes de resistencia a los antiparasitarios en cuestin., aspectos muy importante a tomar en cuenta en nuestro trabajo donde se observo el crecimiento de larvas en los grupos tratados con las ivermectinas al 1% y 3,15% y no as en la ivermectina al 4%.

VI. CONCLUSION Y RECOMENDACIONES Los resultados obtenidos en el presente trabajo nos permiten concluir que existe resistencia antihelmntica de bovinos de la propiedad El Remanso frente a las ivermectinas en concentraciones al 1%, 3,15% y 4%, debido a que ningn producto alcanzo reducciones de la oviposicin superiores al 90%. Los gneros predominantes fueron Haemonchus, Trichostrongylus, Ostertargia, Bunostomum y en menor proporcin Cooperia, Oesophagostomum, Chabertia y Strongyloides. Es necesario realizar exmenes de materia fecal para el recuento de HPG antes y despus de los tratamientos para detectar la eficacia de los antiparasitarios frente a nematodos gastrointestinales. Es necesario que una entidad oficial realice el control de los antiparasitarios que se importan o expenden en el mercado nacional para garantizar su inocuidad y calidad.

- 8 -

VII. BIBLIOGRAFIA

AZOGUE, L.F., 1997. Evaluacin de la ivermectina y la doramectina en el control de garrapatas en bovinos, U.A.G.R.M. Facultad de medicina Veterinaria y Zootecnia. Tesis de Grado.

BOERO, J.J. 1976. Parasitosis animal. Traducido por huerta R.C. 4ed. Eudeba. Buenos Aires, Argentina.pp. 1-25, 428- 448.

BORCHERT, A., 1985. Parasitologia veterinaria.Nematelmintos., MC. 3ed. Acribia. Zaragoza, Espaa. pp.17-37,433-437.

COLES, G. C., y Col., 1992. Methods for detection of anthelmintic resistance in nematodes of veterinary important. World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology (WAAVP). Vet parasitol. pp 44; 35-44.

CORDERO DEL CAMPILLO, M., y Col. 1999. Parasitologa Veterinaria. Mc Graw- Hill- Interamericana. Madrid. Espaa. pp. 113-123

FIEL, C.A., y Col., 1998. Manual para el diagnostico de nematodos en bovinos. Edicin auspiciada por la divisin de sanidad animal de Bayer- Argentina. pp. 1-61.

FIEL, C.A., y Col., 1998. Resistencia antihelmntica en bovinos: causas, diagnstico y profilaxis. Buenos Aires. Argentina. pp.18,171: 21-33

GROCK, T.R., 1986. Texto de parasitologia Santa Cruz, Bolivia. U.A.G.R.M. Facultad de veterinaria y Zootecnia. pp. 1-9.

HENDRIX, CH.M., 1999. Diagnostico Parasitolgico Veterinario. 2ed. Harcourt Brace. Madrid- Espaa. pp. 139-140.

LAPAGE, G. 1975. Parasitologa veterinaria. 2ed. Cap. 31. Traducido de la 2 edicin en ingles por Carrasco Ruiz, R., Mxico, DF., Continental. pp. 492-514.

NIEC. R., 1968. Cultivo e Identificacin de larvas: Infectantes de Nematodos Gastrointestinales del Bovino y Ovino. Manual tcnico. 3 Inta. Buenos Aires, Argentina. pp. 46-60

OLSEN, W.O. 1977. Parasitologa animal: El Parasitismo y los Protozoos. In; Parasitismo. 1ed. Espaa. Aedos. Vol. I. pp. 21-30.

QUIROZ, R.H., 2000. Parasitologa y enfermedades parasitarias de animales Domsticos. In. Ixodidos. Limaza, Mxico. pp. 768-802.

RANGEL, V. B., y Col. 2002. Resistencia de Cooperia spp. y Haemonchus spp. a las ivermectinas en bovinos de corte. Escola de veterinaria UFMG. Sao Paulo, Brasil. pp. 186-189.

SIEVERS, G.; FUENTEALBA, C.,2001. Comparacin de la efectividad antihelmntica de seis productos comerciales que contienen lactosas macrocclicas frente a nematodos gastrointestinales del bovino. Instituto de patologa animal, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad austral de chile. Valdivia, Chile. pp.81-87

SOULSBY, E.J.L 1987. Parasitologa y enfermedades parasitarias de los animales domsticos. In. Helmintos nematodos. Traducido por Martnez, A.A. 7ed.Interamericana. Mxico, D.F. pp. 1-464.

SUMANO, L.H.; OCAMPO, C.L., 1997. Farmacologa Veterinaria. 2ed. Impresin en Mxico. pp. 277-280.

- 9 -

THIENPONT, D., y Col., 1979. Diagnstico de las helmintiasis por medio de examen coprolgico. Janssen Research Foundation. Brucelas, Blgica. pp. 51-60

TIZARD, I., 1995. Inmunologia Veterinaria. 4ed. Interamericana McGraw- Hill. Mxico, D.F. pp. 249-257.

UENO, H., y Col., 1983. Manual para el diagnstico de las helmintoses de rumiantes. (JICA). Tokio, Japn. pp.23-24

VACA, J. L., 1997. Apuntes de Parasitologa Veterinaria. U.A.G.R.M. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Santa Cruz Bolivia. pp. 25-31.

VIGNAU, M. L., y Col., 2005. Parasitologa prctica y modelos de enfermedades parasitarias en los animales domsticos. UNLP. Buenos Aires, Argentina. pp.162-168.