Tecnicas y microscopio 2013
-
Upload
luisepacheco -
Category
Documents
-
view
1.812 -
download
2
Transcript of Tecnicas y microscopio 2013
![Page 1: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/1.jpg)
Universidad de CaraboboFacultad de Odontología
Departamento de Ciencias MorfofuncionalesHistología General y Bucodentaria
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Y
MICROSCOPIO2013
PROFESOR: LUIS ENRIQUE PACHECO
![Page 2: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/2.jpg)
www.histologiadidactica.blogspot.com
@profesorpacheco
Profesor Luis Pacheco
![Page 3: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/3.jpg)
TEXTOS RECOMENDADOS
![Page 4: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/4.jpg)
INDICADOR DE LOGRO UNIDAD I
DESCRIBE LAS CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS,
ULTRAESTRUCTURALES Y LAS TÉCNICAS PARA EL PROCESAMIENTO,
OBSERVACIÓN Y DIAGNÓSTICO HISTOLÓGICO DE LAS CÉLULAS Y
TEJIDOS BÁSICOS.
![Page 5: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/5.jpg)
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
![Page 6: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/6.jpg)
MÉTODOS 1-Examen inmediato o in vivo:
a) Observación de células en el organismo vivo.
b) Observación de células que se
mantienen vivas luego de ser obtenidas del organismo
2- Examen mediato o post-morten:
Requiere de la muerte celular y supone seguir una serie de pasos, la Técnica histológica
![Page 7: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/7.jpg)
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS SON LOS DIFERENTES PROCEDIMIENTOS,
QUE SE USAN PARA MANTENER, EN LO
POSIBLE, EL ASPECTO DE LAS
ESTRUCTURAS HISTOLÓGICAS DEL
ORGANISMO VIVO. TRANSFORMÁNDOLAS
EN DELGADOS CORTES COLOREADOS
QUE PUEDAN POSTERIORMENTE SER
OBSERVADOS AL MICROSCOPIO
![Page 8: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/8.jpg)
PROCEDIMIENTOS:
FIJACIÓN DESHIDRATACIÓN ACLARAMIENTO INFILTRACIÓN E INCLUSIÓN SECCIÓN O CORTE COLORACIÓN MONTAJE
![Page 9: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/9.jpg)
FIJACIÓN En este Procedimiento se introduce el tejido en sustancias
que retardan las alteraciones y conservan su configuración normal.
FORMALDEHIDO AL 10%.
![Page 10: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/10.jpg)
DESHIDRATACIÓN
CONSISTE EN INTRODUCIR EL TEJIDO FIJADO EN FRASCOS DE
ALCOHOL ABSOLUTO A CONCENTRACIONES ASCENDENTES
Y TIEMPOS DETERMINADOS.
70% 80% 95% 100% 100% 100%
30´ 45´ 45´ 60´ 60´ 60´ 5Horas
![Page 11: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/11.jpg)
ACLARAMIENTO O DIAFANIZACIÓN
ESTE PASO SUSTITUYE EL ALCOHOL POR EL XILOL (VUELVE
TRANSPARENTE AL TEJIDO), QUE ES UN LÍQUIDO MISCIBLE
CON LA PARAFINA
XILOL XILOL
45´ 45´
![Page 12: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/12.jpg)
ES LA FORMACIÓN DEL BLOQUE DE PARAFINA Y TEJIDO QUE RECIBE EL NOMBRE DE TACO
INFILTRACIÓN E INCLUSIÓN
![Page 13: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/13.jpg)
SECCIÓN O CORTE Consiste en cortar el tejido en secciones lo
suficientemente delgadas para permitir el paso de la luz, el corte se realiza con un micrótomo.
![Page 14: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/14.jpg)
SECCIÓN O CORTE
![Page 15: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/15.jpg)
Para eliminar PLIEGUES O ARRUGAS del tejido…
EL CORTE ES LLEVADO A UN RECIPIENTE QUE ES EL
BAÑO DE FLOTACIÓN (40º C)
![Page 16: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/16.jpg)
MONTAJE Y TINCIÓN
Los cortes se colocan sobre un portaobjetos y luego se tiñen mediante coloraciones hidrosolubles
![Page 17: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/17.jpg)
Para ADHERIR el corte a la lámina…
SE COLOCA EN UNA LAMINA PORTA OBJETO Y SE
LLEVA A LA ESTUFA DURANTE 15 a 20´ A 80ºC
![Page 18: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/18.jpg)
MONTAJE Y TINCIÓNExtraer parafina Hidratar Colorear
2 tubos
15´
100% 100% 100% 70% 70%
70% 100% 100%
5´ 5´ 5´ 5´
5 Veces in/out
![Page 19: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/19.jpg)
UNA VEZ COLOREADA LA LAMINA, SE USA MARTEX
(RESINA ACRILÍCA DILUIDA EN XILOL)
SE COLOCA UN CUBREOBJETO Y EL TEJIDO QUEDA LISTO PARA OBSERVARLO AL
MICROSCOPIO
MARTEX
![Page 20: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/20.jpg)
COLORACION CON HEMATOXILINA Y EOSINA
La hematoxilina es un colorante básico que tiñe de color azuloso a los componentes ácidos de la célula.
La eosina es un colorante acido que tiñe de color rosado a los componentes básicos de la célula.
![Page 21: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/21.jpg)
OTRAS TÉCNICAS DE TINCIÓN
Tricrómico de Masson Orceína Resorcina Colorante de Wright Tinciones Argenticas Hematoxilina Férrica Acido Periódico de Shiff Colorante Giemsa
![Page 22: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/22.jpg)
COLORACIONES:
Tricrómico de Masson OrceínaResorcina
Hematoxilina férrica Hematoxilina eosina
![Page 23: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/23.jpg)
COLORACIONES:
Sales de Plata
TricrómicoHematoxilina Eosina
![Page 24: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/24.jpg)
COLORACIONES:
Ovario De Gata Hematoxilina -Eosina
Ganglio Raquídeo Plata
Hígado Carmín de Best
![Page 25: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/25.jpg)
COLORACIONES:
Raíz de cebolla
Hematoxilina Ferrica
Riñón
Hematoxilina-Eosina
![Page 26: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/26.jpg)
MICROSCOPIO
![Page 27: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/27.jpg)
MICROSCOPIO
Un microscopio es un dispositivo encargado de hacer visibles objetos muy pequeños.
Es el instrumento mas importante en la histología , debido al tamaño de las estructuras analizadas.
Se clasifica según el tipo de fuente luminosa que utilice.
![Page 28: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/28.jpg)
MICRO- (PEQUEÑO) / SCOPIO (OBSERVAR): INSTRUMENTO QUE PERMITE OBSERVAR OBJETOS QUE SON DEMASIADO PEQUEÑOS PARA SER VISTOS A SIMPLE VISTA.
MICROSCOPIO
![Page 29: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/29.jpg)
Óptico• Óptico simple• Óptico compuesto
Electrónico• Electrónico de transmisión • Electrónico de barrido
![Page 30: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/30.jpg)
Ultramicroscopio.Microscopio de contraste de fase. Microscopio de interferencia.Microscopio confocal.Microscopio de polarización.Microscopio de fuerza atómica.
![Page 31: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/31.jpg)
MICROSCOPIO ÓPTICO Consiste en una
fuente luminosa, un condensador que enfoca los rayos de luz sobre la muestra, una platina en la cual se coloca la muestra, un objetivo y un ocular .
![Page 32: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/32.jpg)
COMPONENTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
Sistema óptico
Sistema de iluminación
Sistema mecánico
![Page 33: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/33.jpg)
SISTEMA ÓPTICO Y DE ILUMINACIÓN
Ocular
Objetivos
Fuente de luzCondensador
![Page 34: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/34.jpg)
Es cilindro hueco metálico, provisto de una lente o un sistema de lentes convergentes, cuya finalidad es aumentar la imagen real e invertida enviada por el objetivo.
OCULAR
![Page 35: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/35.jpg)
OBJETIVO
Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta 4X, 10X,40X,100X.
![Page 36: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/36.jpg)
CONDENSADOR Y DIAFRAGMAEl condensador concentra el haz de luz sobre la preparación y el diafragma limita el haz de rayos que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos mas desviados.
![Page 37: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/37.jpg)
Base
ColumnaPlatina
Cabezal
Brazo
SISTEMA MECÁNICO
![Page 38: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/38.jpg)
Sistema Mecánico
Revolver
Platina
Tornillo Macrométrico
Tornillo Micrométrico
![Page 39: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/39.jpg)
Sistema Mecánico
Tornillo Macrométrico
Tornillo Micrométrico
![Page 41: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/41.jpg)
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN
Usa un Haz de electrones. para producir la imagen, esto permite obtener una mayor amplificación y resolución. La imagen puede plasmarse en una película y producir micrografías en blanco y negro.
![Page 42: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/42.jpg)
PODER DE RESOLUCIÓN
Capacidad de un lente o sistema óptico del microscopio de separar claramente dos puntos que se encuentran muy próximos. la resolución esta limitada por la longitud de onda de la luz ,la apertura numérica del objetivo y el grosor del espécimen observado.
![Page 43: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/43.jpg)
Microscopio Óptico Microscopio electrónico
Utiliza un haz de luz. Utiliza un haz de electrones.
Utiliza lentes de cristal. Utiliza lentes electromagnéticas.
La imagen se observa de forma directa. La imagen se registra en una placa fotográfica
Proporciona aumentos de hasta 1000 X Proporciona aumentos de hasta 200000 X
Posee un poder de resolución de aproximadamente 0.2 micras
Posee una resolución de aproximadamente 0.2 nanómetros
![Page 44: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/44.jpg)
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO
Proporciona una imagen tridimensional del espécimen.
El haz de electrones no atraviesa el objeto, por lo que no es necesario utilizar cortes ultra finos.
La imagen Obtenida es observada en una Pantalla de TV
![Page 45: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/45.jpg)
Diferencia entre las imágenes observadas
M.O M.E.T M.E.B
![Page 46: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/46.jpg)
DIFERENCIAS ENTRE M.O, M.E.T Y M.E.B
MICROSCOPIO ÓPTICO
•LAS LENTES ÓPTICAS ENFOCAN UN HAZ DE FOTONES
•BUENA AMPLIFICACIÓN Y RESOLUCIÓN
•PARA OBSERVAR LOS TEJIDOS SE USAN COLORANTES HIDROSOLUBLES
•REQUIERE DE CORTES DELGADOS
•LA IMAGEN QUE SE OBSERVA ES BIDIMENSIONAL
•LA IMAGEN SE PROYECTA EN EL OJO A TRAVÉS DE LOS LENTES Y SE VISUALIZA SEGÚN LOS COLORANTES UTILIZADOS
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN
•LOS ELECTROMAGNETOS ENFOCAN UN RAYO DE ELECTRONES
•MAYOR AMPLIFICACIÓN Y RESOLUCIÓN QUE EL M.O
•PARA OBSERVAR LOS TEJIDOS SE USAN TÉCNICAS DE PRECIPITADOS DE METALES PESADOS
•REQUIERE DE CORTES EXTREMADAMENTE DELGADOS
•LA IMAGEN QUE SE OBSERVA ES BIDIMENSIONAL
•LA IMAGEN SE PROYECTA EN UNA PANTALLA Y POR MEDIO DE UNA VENTANA DE OBSERVACIÓN SE VE LA IMAGEN EN BLANCO Y NEGRO
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO
•LOS ELECTROMAGNETOS ENFOCAN UN RAYO DE ELECTRONES
•MAYOR AMPLIFICACIÓN Y RESOLUCIÓN QUE EL M.O PERO MENOR QUE EL M.E.T
• SE DEPOSITA EN LA SUPERFICIE DEL ESPÉCIMEN A OBSERVAR UNA CAPA DELGADA DE UN METAL PESADO
•NO REQUIERE DE CORTES DELGADOS
•LA IMAGEN QUE SE OBSERVA ES TRIDIMENSIONAL
• LA IMAGEN SE REPRESENTA FOTOGRAFIÁNDOLA O DIGITALIZÁNDOLA EN UNA COMPUTADORA Y SE OBSERVA A TRAVÉS DE UNA PANTALLA DE TV.
![Page 47: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/47.jpg)
Microscopio electrónico
Macroscópico Microscopio óptico
![Page 48: Tecnicas y microscopio 2013](https://reader035.fdocuments.us/reader035/viewer/2022062308/5591740e1a28abe45b8b463c/html5/thumbnails/48.jpg)
CONCLUSIÓN Conocer la estructura , organización y
funcionamiento de células, tejidos, órganos, nos permitirá comprender en un fúturo, el origen de los cuadros patológicos de nuestros pacientes, los que se iniciaran con alteraciones a nivel celular.