QUANTITATIVE LATERAL FLOW ST2 TEST …criticaldiagnostics.com/OUS/products/aspect_pdfs/AW201120 Rev...

QUANTITATIVE LATERAL FLOW ST2 TESTPlease read all of the information in these instructions for use for complete instructions before performing the test. If you have questions, call Critical Diagnostics Product Support for assistance. (See the Assistance section).

INDICATIONS FOR USE The ASPECT-PLUS TM ST2 Test is a rapid lateral flow immunoassay to be used with the ASPECT Reader TM for the quantitative determination of ST2 in serum, venous EDTA or heparin anti coagulated plasma and is intended for use by healthcare professionals only. The test is used as an aid for the risk stratification of heart failure (HF) or acute coronary syndrome (ACS) patients. The test can also be used to assess the risk of developing heart failure in individuals who are otherwise asymptomatic and apparently healthy.

INTRODUCTION Heart disease is a leading cause of death worldwide affecting millions of patients annually. For example, heart disease is responsible for 25 percent of all the deaths in the United States, more than all forms of cancer combined. Many patients are treated for coronary artery disease (CAD) and/or acute coronary syndrome (ACS) but eventually develop heart failure. Heart failure is a chronic, progressive disease in which the ability of the heart to provide needed cardiac output weakens, thus impeding the heart’s ability to pump enough blood to support the body’s metabolic demands. The prevalence of heart failure is growing worldwide and is a major burden on hospital care costs. A major component to this burden is the fact that patients afflicted with advanced heart failure have high rates of hospitalization and resource utilization, and similarly have a high risk for death.

EN

TEST PRINCIPLE The ASPECT-PLUS ST2 Test is a quantitative sandwich monoclonal lateral flow immunoassay. Serum, venous EDTA, or heparin anti-coagulated plasma is loaded into the sample well where it flows through the anti-ST2 antibody coated strip. Assay buffer is added to the second well. The cassette is then inserted into the ASPECT Reader for incubation, and ST2 is quantitatively determined and reported by the reader. Determination of a quantitative ST2 value using the ASPECT-PLUS ST2 Test is produced by standard linear regression analysis through a linear calibration curve unique to each lot of ASPECT-PLUS ST2 Test that is coded on the RFID tag included with each test cassette. The fluorescent signal measured on the test line is evaluated against the calibration curve to calculate an ST2 concentration.

MATERIALS PROVIDED:The ASPECT-PLUS ST2 Test kit contains all the reagents needed for the generation of test results for measurement of ST2 in serum, venous EDTA or heparin anti coagulated plasma sample.

The ASPECT-PLUS ST2 Test cassette and ASPECT-PLUS ST2 Test buffer vial contain:

ASPECT-PLUS ST2 Test cassette h X• Murine monoclonal antibodies against ST2• Goat polyclonal antibodies against murine Ig-G• Fluorescent dye

ASPECT-PLUS ST2 Test buffer h X• Stabilizers• Excipients

MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED• ASPECT Reader (REF: READ0001)

Σ=20

Σ=1

PLUS0001-01

PLUS0001-03

• Electronic Quality Control (EQC) (REF: EQC0001)• ST2 Controls, Level 1 and Level 2 (REF: LQC1111)• F Puncture-proof waste container for biohazard and sharps waste• Timer• Gloves• Calibrated pipette

PRECAUTIONS AND WARNINGS1. For in vitro diagnostic use.2. For use by healthcare professionals.3. Results should be interpreted along with clinical findings and other laboratory results.4. Do not use the ASPECT-PLUS ST2 Test cassette in any other uses not identified in the

Indications for Use.5. Keep the ASPECT-PLUS ST2 Test cassette in the sealed pouch until ready to use. Discard

after single use.6. Do not use after the expiration date printed on the package.7. F Contains material of animal origin and should be handled as though capable of

transmitting infectious disease. Follow proper infection control guidelines for handling all blood samples, EDTA plasma specimens, and related items. Parts of the kit that come in contact with blood or plasma are considered biohazardous and can potentially transmit infectious diseases, even after you have performed cleaning and disinfection.

8. Contains the active ingredient (0.05%) Proclin 300 as biocide preservative.9. Avoid contact of assay reagents or specimen with skin, eyes, or mucous membranes. In

the event of contact with skin or eyes, wash immediately with water. 10. Wash hands thoroughly after performing the test.11. Dispose of waste as potentially infectious agents and in accordance with local

requirements.

SAMPLE COLLECTION AND PREPARATION1. Use only serum, venous EDTA or heparin anticoagulated plasma. Other sample types, draw

methods or anticoagulants have not been evaluated. Preparation of sample should be performed as soon as possible after the specimen is collected.

2. The patient sample must be tested within 48 hours from collection when sample is stored room temperature (18-25°C). If not able to test within 48 hours, store refrigerated (2-8°C) up to seven (7) days or store frozen (< -20°C) for a maximum of 18 months.6

Storage Condition (temperature) Specimen Stability

20˚C 48 hours

4˚C 7 days

-20˚C and -80˚C 18 months

3. If the sample must be transported to a laboratory for testing, transport at room temp (18°-25°C) or refrigerated (2°-8°C) within 48 hrs of collection. Avoid exposure to temperatures >25°C.

NOTE: Current health status may affect test results or cause inaccurate results. It’s important to take certain health factors into account when reading test results and setting a course of action. STORAGE AND HANDLING The ASPECT-PLUS ST2 Test is stable up to 18 months when stored in a controlled environment as follows:

Store cassettes as packaged in the sealed foil pouch until ready to use and until the expiration date printed on the package:• Do not use the cassette if the foil pouch is torn, punctured, or not sealed completely.

Discard the cassette and use another cassette.• Store ASPECT-PLUS ST2 Test cassettes at 2°C to 8°C (35-46°F). • Before using refrigerated ASPECT-PLUS ST2 Test cassettes, allow individual foil pouched

cassettes to reach room temperature in 15 minutes prior to use.• Do not use after the expiration date printed on the package.

NOTE: Use the cassette within ten (10) minutes of opening the foil pouch.

QUALITY CONTROL CONSIDERATIONS Every ASPECT-PLUS ST2 Test cassette includes one internal control check (control line on test cassette) that is run automatically with every patient sample, external liquid control solution, or proficiency testing sample to check that there is proper flow in the ASPECT-PLUS ST2 Test cassette. If the automatic check of this built-in control shows that it is within a limit, the ASPECT Reader will report a result for the sample being tested. If the automatic check of this built-in control shows that is not within the limits, a test result will not be reported. Instead, the reader will display a warning or error message that is described in the ASPECT Reader User Guide.

Good Laboratory Practice suggests that external controls should be tested with each new lot or shipment of test materials, or every 30 days, and as otherwise required by your laboratory’s standard quality control procedures. Controls should be tested in the same manner as if testing patient specimens. When running patient samples or external controls, if a test fails for any reason (built-in control failure or an external control out of range) no patient results will be reported.

Users should follow government guidelines (for example, federal, state or local) and/or accreditation requirements for quality control.

ELECTRONIC QUALITY CONTROL (EQC) Use the EQC to ensure proper function of the ASPECT Reader. Perform the EQC testing for the following conditions: • Initial setup of the ASPECT Reader.• When the ASPECT Reader has been transported or moved.• Whenever there is uncertainty about the performance of the ASPECT Reader.• Whenever required by your laboratory’s quality control requirements. • Once at the beginning of each day.

NOTE: The EQC is light sensitive. Store the EQC in the provided foil pouch after each use.NOTE: The EQC is ready to test. No sample or test buffer is required.NOTE: Refer to the ASPECT Reader User Guide for complete instructions on use of the EQC.

PERFORM A TEST Please read all of the information in this instructions for use before performing a test. • Symbols used in these instructions are defined in Symbols Section. • Gather the items needed (See the Materials Provided and Materials Required But Not

Provided sections, above).• Follow proper infection control guidelines for handling all blood samples and anything that

comes in contact with blood. 1. Remove an ASPECT-PLUS ST2 Test cassette from refrigerated storage and warm to room

temperature for 15 minutes. DO NOT open the foil pouch until the cassette is at room temp.

2. Prepare the test sample. See Sample Collection and Preparation section.3. On the ASPECT Reader: a. Enter appropriate information to LOG IN and perform a test. b. From the main screen, select RUN PATIENT. c. Enter Patient ID, then select RUN PATIENT.4. Remove the test cassette from the foil pouch.

NOTE: You must use the cassette within 10 minutes of opening the foil pouch.

5. Using a calibrated micropippettor, pippette 35 µL patient sample into the sample well, which is the middle well with the [ ].

6. After 60 seconds, add 2 drops (~110 µL) test buffer into the test buffer well, which is the well beside the sample well on the edge of the test cassette. DO NOT add buffer to the sample well. Test buffer must be added ONLY to the buffer well of the test cassette.

7. After 40 seconds, insert the test cassette loaded with the patient sample and test buffer.

NOTE: The test cassette must be inserted into the reader within 60 seconds from the time buffer is added. A delay longer than 60 seconds after test buffer addition may lead to inaccurate results.

8. Close reader drawer and reader will initiate analysis. 9. Results will be displayed on the screen in approximately 20 minutes.

NOTE: Refer to the ASPECT Reader User Guide for complete instructions on how to perform a test.F Dispose of all items that have come in contact with the sample. Be sure to follow proper infection control guidelines.

READING RESULTS The ASPECT Reader measures ST2 automatically. The result is displayed on the screen. The operator has the option to print the results. A value in ng/mL represents the concentration of ST2 in the sample.

NOTE: ST2 levels less than 12.5 ng/mL or greater than 250 ng/mL will be reported as <12.5 ng/mL and >250 ng/mL.

For additional information, refer to the ASPECT Reader User Guide.

INTERPRETATION OF RESULTS • In self declared healthy individuals, normal patients, the interquartile values for ST2 are

15 to 25 ng/mL.• A concentration of 35 ng/mL is between the 90th and 95th percentile of the normal

population.1 • In patients diagnosed with ACS or HF and who have ST2 concentrations ≥35 ng/mL risk

of adverse events such as hospitalization or mortality within one (1) year is greater than for patients with ST2 concentrations below this level. Risk of mortality increases with increasing concentrations of ST2.2,3,4

• In asymptomatic and apparently healthy individuals, an elevated ST2 concentration has been shown to be indicative of a greater than two-fold increased risk of developing heart failure.5

• Although a negative ST2 result, <35 ng/mL, in patients with HF or ACS may be used to classify patients and individuals as low risk for adverse events such as rehospitalization or death, clinically appropriate therapy should be pursued.

• ST2 results should be used with other clinical and diagnostic information for forming a diagnosis and for patient management.

STANDARDIZATION Concentration results of the ASPECT-PLUS ST2 Test cassette are traceable to reference standard solutions that contain defined concentration of ST2 protein. The ASPECT-PLUS ST2 Test cassette and ST2 Controls are traceable to the same reference standard solutions.

LIMITATIONS1. Testing in studies has been limited to people 18 years of age and older.2. Validated with serum and venous EDTA and heparin anticoagulated plasma samples.3. The presence of human anti-mouse antibody (HAMA) may produce falsely low ST2

concentration.

4. There is a possibility that factors such as technical or procedural errors, as well as additional substances in blood specimens that are not listed below, may interfere with the test and cause erroneous results.

INTERFERING SUBSTANCES The following analytes were tested separately and do not interfere with the expected results up to the concentrations shown:

Substance Concentration

Bilirubin 0.1 mg/mL – 0.3 mg/mL

Cholesterol (Total) 1.5 mg/mL – 5 mg/mL

Hemoglobin 1 mg/mL – 2 mg/mL

Protein (BSA) 15 mg/mL – 60 mg/mL

Triglycerides/Lipids (Total) 1.5 mg/mL – 30 mg/mL

The following drugs were tested separately and do not interfere with the expected test results when spiked into EDTA plasma: acetaminophen, acetylsalicylic acid, allopurinol, ambroxol, amidoadrone, amlodipine besylate, ampicillin, ascorbic acid, atenolol, bivalirudin, caffeine, captopril, chloramphenicol, cinnarizine, cyclosporine A, digitoxin, digoxin, diltiazem, dopamine, dipyridamole, enalapril maleate, eplerenone, erythromycin, fluvastatin, furosemide, glyburide, heparin sodium, hydralazine hydrochloride, hydrochlorothiazide, indomethacin, lisinopril, nicotine, nifedipine, nitrofurantoin, oxytetracycline, phenytoin, pravastatin sodium, probenecid, procainamide

hydrochloride, (S)-(-)-propranolol hydrochloride, quinidine, simvastatin, spironolactone, sulfamethoxazole, theophylline, L-thyroxine, trimethoprim, verapamil hydrochloride, and warfarin.

Specificity was tested against human interleukin-1 soluble receptor type I (IL-1 sR-1), recombinant human IL-Iα and recombinant human IL-Iβ. None of the three molecules tested, even at a concentration as high as 5x the measured ST2 concentration, exhibited measurable cross reactivity.

PERFORMANCE CHARACTERISTICS PRECISIONAssay precision was determined per CLSI EP5-A2, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline—Second Edition. Three test specimens, EDTA plasma sample along with the two (2) ST2 Controls were used for this evaluation. Intra-assay, inter-assay, and total precision were calculated for each specimen tested. The precision results are summarized in Table 1. The assay meets acceptable analytical performance criteria, exhibiting an average CV of 10.4% for intra-assay and 13.6% for inter-assay variation and does not exhibit any precision bias through the tested concentration range. The precision performance was validated through “Inter-Laboratory” testing following CLSI EP15-A3, User Verification of Precision and Estimation of Bias. Measurements were performed in four (4) laboratories once per day with three (3) replicates of two specimens (plasma) at each of two (2) concentrations and both levels of liquid controls daily for five (5) days. This testing showed no significant difference from the values summarized in Table 1.

Table 1: Precision Analysis Summary

ST2 Level Intra-Assay CV Inter-Assay CV Total CV

Low (20 ng/mL) 15.4% 16.3% 22.4%

Clinical (32 ng/mL) 4.9% 13.3% 14.2%

Elevated (81 ng/mL) 10.8% 11.1% 15.5%

ANALYTICAL SENSITIVITYAnalytical sensitivity was determined per Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) protocol EP17-A, Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. To determine the Limit of Blank (LoB), fetal bovine serum (FBS) was used as the source of material without endogenous ST2. In accordance with the LoB determination protocol, a set of 60 replicates of FBS samples were measured over 4 days, with 15 replicates per day. Following determination of the LoB, the Limit of Detection (LoD) was ascertained. To determine the LoD, 60 replicates of 4 different low ST2 concentration human plasma samples were measured in sets of 15 replicates each over 4 consecutive days. Following determination of the LoD, the Limit of Quantitation (LoQ) was derived. To calculate LoQ, the same sample measurements used for the LoD determination were used to estimate bias and imprecision. Since the LoQ value is lower than the LoD value, then per the protocol, the LoQ will be defined as equal to the LoD at 12.5 ng/ml.

LINEARITYAssay linear performance was determined per CLSI protocol EP6-A, Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline. Frozen human EDTA plasma samples were used to produce plasma pools with which to perform this analysis. The ASPECT-PLUS ST2 Test has been designed with an upper linear limit of 250 ng/mL. For this analysis, a high concentration pool was prepared at a concentration of 425 ng/mL and a low concentration

pool with a concentration of 13.6 ng/mL. A series of eleven (11) pools were created by combining varying amounts of each of the high and low concentration stock pools together. Each pool was measured in replicates of three (3). Linear regression analysis of the results from these pools shows that the correlation between the predicted and measured results are linear up to 257 ng/mL with an R2 value of 0.9927 and a linear equation of y = 1.0x + 3.6, Figure 1.

Figure 1: Linearity of ASPECT-PLUS ST2 Test

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

Mea

sure

d Va

lues

Expected ST2 (ng/ml)

Linear

HOOK EFFECTNo effect up to 2000 ng/mL.

CONCORDANCE ANALYSISST2 is well established for use in conjunction with clinical evaluation as an aid in assessing the prognosis of patients diagnosed with chronic heart failure or acute coronary syndrome (ACS), as well as for determination of risk of developing heart failure in asymptomatic individuals. The

Presage® ST2 Assay (ELISA format) is the reference assay for the ASPECT-PLUS ST2 Test. To verify concordance of the ASPECT-PLUS ST2 Test with the Presage ST2 Assay, an analysis of EDTA plasma from 60 donors was performed. This analysis showed a R2 value of 0.92 and method comparison analysis by Passing-Bablok regression showed that the two assay techniques are comparable. The regression equation for this analysis is y = 1.01x + 5.8 and the Cusum test for linearity shows no significant deviation from linearity (p=0.75).

RETURN POLICY If there is a problem with the ASPECT-PLUS ST2 Test, you may be asked to return unused cassettes in the foil pouch. Before returning cassettes please obtain a return authorization number from your local distributor. This return authorization number must be on the shipping carton for return.

ASSISTANCE OR ADDITIONAL INFORMATION To order product, please contact your local distributor, or Critical Diagnostics Customer Service at +353 1 691 7061. For Technical Support, please contact your local distributor, or Critical Diagnostics at +353 1 691 7061 or email, [email protected].

REFERENCES1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States population. Clin Chim Acta.

2010 Nov 11; 411(21-22):1825-6.2. Felker GM, et al. Soluble ST2 in Ambulatory Patients with Heart Failure: Association with Functional Capacity and Long-Term Outcomes.

Circ. Heart Fail. 2013; 6: 1172-11793. Ky B, et al. High Sensitivity ST2 for Prediction of Adverse Outcomes in Chronic Heart Failure. Circ. Heart Fail. 2011 Mar;4(2):180-7.4. Kohli P, et al. Role of ST2 in Non–ST-Elevation Acute Coronary Syndrome in the MERLIN-TIMI 36 Trial. Clin Chem. 2012

Jan;58(1):257-66.5. Wang T, et al. Prognostic Utility of Novel Biomarkers of Cardiovascular Stress: The Framingham Heart Study. Circulation 2012 Sep

25;126(13):1596-604.6. Dieplinger B, et al. Long-term stability of soluble ST2 in frozen plasma samples. Clin Biochem. 2010 Sep;43(13-14):1169-1170.

M Manufacturer

V In Vitro Diagnostic medical device

i Consult instructions for use

D Do not reuse

h Catalogue Number

X Contains sufficient for <n> tests

r Temperature limitation

g Batch Code /Lot Number

H Use by (date)

F Biological Risk: Disposable items pose biological risks.

Patient Number

C CE Mark

ASPECT-PLUS ST2 Test cassette

ASPECT-PLUS ST2 Test buffer

Instructions for use

QUANTITATIVER ST2-SCHNELLTESTBitte lesen Sie alle Informationen in dieser Gebrauchsanweisung vollständig durch, bevor Sie den Test durchführen. Wenn Sie Fragen haben, wenden Sie sich bitte an den Produktsupport von Critical Diagnostics. (Siehe Abschnitt Kundendienst.)

INDIKATIONEN FÜR DIE VERWENDUNG Der ST2-Test ASPECT-PLUSTM ist ein schneller Lateral-flow-Immuntest zur Verwendung mit dem ASPECT ReaderTM für die quantitative Bestimmung von ST2 in Serum, venösem EDTA oder mit Heparin antikoaguliertem Plasma und darf nur von medizinischem Personal benutzt werden. Der Test wird als Hilfsmittel zur Risikoabschätzung von Patienten mit Herzversagen (HF) oder akutem Koronarsyndrom (ACS) verwendet. Der Test kann auch zur Beurteilung des Risikos verwendet werden, dass Personen, die ansonsten symptomlos und anscheinend gesund sind, ein Herzversagen entwickeln.

EINLEITUNG Herzerkrankungen sind eine weltweit führende Todesursache, die jährlich Millionen von Patienten betrifft. Herzerkrankungen sind beispielsweise für 25 Prozent aller Todesfälle in den USA verantwortlich – das ist mehr als bei allen Formen von Krebserkrankungen zusammen. Viele Patienten werden wegen koronarer Arterienerkrankung (CAD) und/oder akuten Koronarsyndroms (ACS) behandelt, entwickeln schließlich jedoch ein Herzversagen. Herzversagen ist eine chronische progressive Erkrankung, bei der die Fähigkeit des Herzens, das erforderliche Herzzeitvolumen zur Verfügung zu stellen, schwächer wird. Dies beeinträchtigt die Fähigkeit des Herzens, ausreichend Blut zu pumpen, um die metabolischen Bedürfnisse des Körpers abzudecken. Weltweit nimmt die Prävalenz des Herzversagens zu. Dies stellt für die Krankenhäuser eine erhebliche Kostenbelastung

DE

dar. Eine wesentliche Komponente dieser Belastung ist die Tatsache, dass die von fortgeschrittenem Herzversagen betroffenen Patienten mehr Krankenhausaufenthalte aufweisen, die Pflegeressourcen in höherem Maße nutzen sowie ein hohes Todesrisiko haben.

TESTPRINZIP Der ST2-Test ASPECT-PLUS ist ein quantitativer monoklonaler Sandwich-Lateral-flow-Immuntest. Serum, venöses EDTA oder mit Heparin antikoaguliertes Plasma wird in das Proben-Well gegeben, wo es durch den mit Anti-ST2-Antikörpern beschichteten Streifen fließt. In das zweite Well wird ein Testpuffer gegeben. Anschließend wird die Kassette zum Inkubieren in den ASPECT Reader eingeschoben, der eine quantitative ST2-Bestimmung durchführt und anschließend einen Bericht ausgibt. Die Bestimmung des quantitativen ST2-Wertes mit dem ST2-Test ASPECT-PLUS erfolgt durch eine lineare Standard-Regressionsanalyse über eine lineare Kalibrationskurve, die für jede Charge des ST2-Tests ASPECT-PLUS einmalig und auf dem RFID-Etikett jeder Testkassette kodiert ist. Das auf der Testlinie gemessene fluoreszierende Signal wird anhand der Kalibrationskurve zur Berechnung einer ST2-Konzentration ausgewertet.

BEREITGESTELLTE MATERIALIEN:Das ASPECT-PLUS-ST2-Testkit enthält alle Reagenzien, die zum Erzeugen der Testergebnisse zur Messung von ST2 in Proben von Serum, venösem EDTA und mit Heparin antikoaguliertem Plasma gebraucht werden.

Die ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette und das ASPECT-PLUS-ST2-Testpufferfläschchen umfassen Folgendes:

ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette h X• Monoklonale Maus-Antikörper gegen ST2• Polyklonale Ziegen-Antikörper gegen Maus-Ig-G• Fluoreszierendes Färbemittel

Σ=20PLUS0001-01

ASPECT-PLUS ST2-Testpuffer h X• Stabilisatoren• Hilfsstoffe

BENÖTIGTE, JEDOCH NICHT IM LIEFERUMFANG ENTHALTENE MATERIALIEN• ASPECT Reader (Artikelnr.: READ0001)• Elektronische Qualitätskontrolle (EQC) (Artikelnr.: EQC0001)• ST2-Kontrollen, Level 1 und Level 2 (Artikelnr.: LQC1111)• F Durchstichfester Abfallbehälter für biologische Gefahrstoffe und Injektionsabfall• Stoppuhr• Handschuhe• Kalibrierte Pipette

VORSICHTSMASSNAHMEN UND WARNHINWEISE1. Für die In-vitro-Diagnostik.2. Nur für medizinisches Fachpersonal.3. Die Ergebnisse sollten zusammen mit klinischen Befunden und anderen Laborergebnissen

interpretiert werden.4. Verwenden Sie die ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette nicht für andere Zwecke als in der

Gebrauchsanleitung angegeben.5. Lassen Sie die ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette bis zur Benutzung im versiegelten Beutel.

Werfen Sie sie nach einmaligem Gebrauch weg.6. Nicht nach dem auf der Packung aufgedruckten Verfallsdatum verwenden.7. F Enthält Material tierischen Ursprungs und sollte als potenziell infektiöses Material

behandelt werden. Halten Sie bei der Handhabung aller Blutproben, EDTA-Plasmaproben und dergleichen die geltenden Richtlinien zur Infektionskontrolle ein. Sämtliche Teile des Kits, die in Kontakt mit Blut oder Plasma kommen, werden als biologisch gefährlich angesehen und können möglicherweise Infektionskrankheiten übertragen, auch nachdem Reinigung und Desinfektion durchgeführt wurden.

Σ=1PLUS0001-03

8. Enthält den Wirkstoff Proclin 300 (0,05 %) als Biozid/Konservierungsmittel.9. Vermeiden Sie jeglichen Kontakt der Testreagenzien bzw. Proben mit der Haut, den Augen

oder den Schleimhäuten. Im Falle eines Kontakts mit der Haut oder den Augen sofort mit Wasser ab- bzw. ausspülen.

10. Nach dem Test gründlich die Hände waschen.11. Abfall gemäß den örtlichen Vorschriften als potenziellen Infektionserreger entsorgen.

PROBENENTNAHME UND -PRÄPARATION1. Verwenden Sie Serum, venöses EDTA oder mit Heparin antikoaguliertes Plasma. Andere

Probentypen, Entnahmemethoden oder Antikoagulanzien sind nicht ausgewertet worden. Das Präparieren der Plasmaprobe sollte so bald wie möglich nach der Probenentnahme durchgeführt werden.

2. Die Patientenprobe muss innerhalb von 48 Stunden ab der Entnahme getestet werden, wenn die Probe bei Zimmertemperatur (18-25 °C) gelagert wird. Wenn der Test nicht innerhalb von 48 Stunden durchgeführt werden kann, lagern Sie die Probe bis zu sieben (7) Tage gekühlt (2-8 °C) oder maximal 18 Monate tiefgefroren (< -20 °C).6

Lagerungsbedingung (Temperatur) Probenstabilität

20 °C 48 Stunden

4 °C 7 Tage

-20 °C und -80 °C 18 Monate

3. Wenn die Probe zum Testen in ein Labor transportiert werden muss, transportieren Sie sie bei Zimmertemperatur (18–25 °C) oder gekühlt (2–8 °C) innerhalb von 48 Std. ab der Entnahme. Vermeiden Sie eine Aussetzung gegen Temperaturen >25 °C.

ANMERKUNG: Der aktuelle Gesundheitsstatus kann die Testergebnisse beeinflussen oder zu ungenauen Ergebnissen führen. Bestimmte gesundheitliche Faktoren müssen berücksichtigt werden, wenn Testergebnisse abgelesen und Maßnahmen festgelegt werden. LAGERUNG UND HANDHABUNG Der ST2-Test ASPECT-PLUS ist bis zu 18 Monate stabil, wenn er in einer kontrollierten Umgebung wie folgt gelagert wird:

Lagern Sie die Kassetten im versiegelten Folienbeutel verpackt, bis sie gebraucht werden bzw. bis das auf der Verpackung aufgedruckte Verfallsdatum erreicht ist.• Verwenden Sie die Kassette nicht, wenn der Folienbeutel zerrissen, durchbohrt oder nicht

komplett versiegelt ist. Werfen Sie die Kassette weg, und verwenden Sie eine andere Kassette.

• Lagern Sie die ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette bei 2–8 °C. • Lassen Sie vor der Verwendung von gekühlten ASPECT-PLUS-ST2-Testkassetten

die einzelnen im Folienbeutel verpackten Kassetten etwa 15 Minuten lang auf Zimmertemperatur aufwärmen.

• Nicht nach dem auf der Packung aufgedruckten Verfallsdatum verwenden.

ANMERKUNG: Die Kassette innerhalb von zehn (10) Minuten nach Öffnen des Folienbeutels verwenden.

HINWEISE ZUR QUALITÄTSKONTROLLE Jede ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette beinhaltet eine interne Kontrolle (Kontrolllinie auf der Testkassette), die automatisch mit jeder Patientenprobe, externen flüssigen Kontrolllösung bzw. Testleistungsprobe zur Überprüfung des angemessenen Durchflusses beim ST2-Test ASPECT-PLUS ausgeführt wird. Wenn die automatische Prüfung dieser integrierten Kontrolle ergibt, dass

sich der Wert innerhalb bestimmter Grenzwerte befindet, gibt der ASPECT Reader ein Ergebnis für die getestete Patientenprobe aus. Wenn die automatische Prüfung dieser integrierten Kontrolle ergibt, dass sich der Kontrollwert nicht innerhalb der Grenzwerte befindet, wird kein Testergebnis ausgegeben. Der Reader zeigt stattdessen eine Warn- oder Fehlermeldung an, die im Benutzerhandbuch des ASPECT Reader erläutert wird.

Gemäß guter Laborpraxis sollten externe Kontrollen mit jeder neuen Charge bzw. Lieferung von Testmaterial bzw. alle 30 Tage sowie nach den Standardvorgaben zur Qualitätskontrolle Ihres Labors getestet werden. Kontrollen sollten auf die gleiche Weise wie Patientenproben getestet werden. Wenn beim Testen von Patientenproben oder externen Kontrollen ein Test aus irgendeinem Grund fehlschlägt (integrierte Kontrolle defekt oder externe Kontrolle außerhalb des Bereichs), werden keine Patientenergebnisse ausgegeben.

Befolgen Sie alle behördlichen (bundes- und landesweiten sowie örtlichen) Richtlinien und/oder Akkreditierungsanforderungen für die Qualitätskontrolle.

ELEKTRONISCHE QUALITÄTSKONTROLLE (EQK) Verwenden Sie die EQK, um das ordnungsgemäße Funktionieren des ASPECT Readers sicherzustellen. Führen Sie die EQK-Tests für folgende Bedingungen durch: • Bei der Ersteinrichtung des ASPECT Readers.• Wenn der ASPECT Reader transportiert oder umgestellt wurde.• Wenn es eine Unsicherheit bezüglich der Leistung des ASPECT Readers gibt.• Wenn es wegen der Anforderungen Ihres Labors bezüglich der Qualitätskontrolle

erforderlich ist. • Einmal zu Beginn jedes Tages.

ANMERKUNG: Die EQK ist lichtempfindlich. Lagern Sie die EQK nach jedem Gebrauch im mitgelieferten Folienbeutel.

ANMERKUNG: Die EQK ist sofort testbereit. Es sind keine Proben oder Testpuffer erforderlich.ANMERKUNG: Eine vollständige Anleitung zur Verwendung der EQK finden Sie in der Gebrauchsanweisung des ASPECT Readers.

DURCHFÜHRUNG EINES TESTS Bitte lesen Sie alle Informationen in dieser Gebrauchsanweisung vollständig durch, bevor Sie einen Test durchführen. • Die in diesen Anweisungen verwendeten Symbole sind im Abschnitt „Symbole“ definiert. • Legen Sie die benötigten Gegenstände bereit (Siehe die vorherigen Abschnitte

„Bereitgestellte Materialien“ und „Benötigte, jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien“).

• Halten Sie bei der Handhabung aller Blutproben und aller Gegenstände, die in Kontakt mit Blut kommen, die geltenden Richtlinien zur Infektionskontrolle ein.

1. Entnehmen Sie eine ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette aus der gekühlten Lagerung, und lassen Sie sie 15 Minuten lang auf Zimmertemperatur aufwärmen. Öffnen Sie den Folienbeutel ERST DANN, wenn die Kassette Zimmertemperatur hat.

2. Präparieren Sie die Testprobe. Siehe Abschnitt „Probenentnahme und -präparation“.3. Am ASPECT Reader: a. Geben Sie unter EINLOGGEN die erforderlichen Daten zum Durchführen eines

Tests ein. b. Wählen Sie auf dem Hauptbildschirm PATIENTEN AUSFÜHREN. c. Geben sie die Patienten-ID ein, und wählen Sie dann PATIENTEN AUSFÜHREN.4. Nehmen sie die Testkassette aus dem Folienbeutel.

ANMERKUNG: Sie müssen die Kassette innerhalb von 10 Minuten nach Öffnen des Folienbeutels verwenden.

5. Pipettieren Sie mit einer kalibrierten Mikropipette 35 µl Patientenprobe in das Proben-Well. Dabei handelt es sich um das mittlere Well mit dem Symbol [ ] .

6. Geben Sie nach 60 Sekunden 2 Tropfen (~110 µl) Testpuffer in das Testpuffer-Well, das sich neben dem Proben-Well am Rand der Testkassette befindet. Geben Sie KEINEN Puffer in das zweite Well. Der Testpuffer darf NUR in das Puffer-Well der Testkassette gegeben werden.

7. Schieben Sie nach 40 Sekunden die Testkassette mit der Patientenprobe und dem Testpuffer ein.

ANMERKUNG: Die Testkassette muss nach dem Hinzufügen des Testpuffers innerhalb von 60 Sekunden in den Reader eingeschoben werden. Eine längere Verzögerung als 60 Sekunden nach dem Hinzufügen des Testpuffers kann zu ungenauen Ergebnissen führen.

8. Schließen Sie das Fach des Readers. Der Reader startet dann die Analyse. 9. Die Ergebnisse werden nach ungefähr 20 Minuten auf dem Bildschirm angezeigt.

ANMERKUNG: Eine vollständige Anleitung zur Durchführung eines Tests finden Sie in der Gebrauchsanweisung des ASPECT Readers. F Entsorgen Sie alle Gegenstände, die in Kontakt mit der Probe gekommen sind. Achten Sie darauf, die geltenden Richtlinien zur Infektionskontrolle einzuhalten.

ABLESUNGSERGEBNISSE Der ASPECT Reader misst automatisch den ST2-Wert. Das Ergebnis wird auf dem Bildschirm angezeigt. Der Bediener kann die Ergebnisse ausdrucken. Die ST2-Konzentration von ST2 in der Probe wird durch einen Wert in ng/ml dargestellt.

ANMERKUNG: ST2-Level von weniger als 12,5 ng/ml oder von mehr als 250 ng/ml werden als <12,5 ng/ml bzw. >250 ng/ml ausgegeben.

Zusätzliche Informationen finden Sie im Benutzerhandbuch des ASPECT Readers.

INTERPRETATION DER ERGEBNISSE • Bei selbsterklärt gesunden Personen (normalen Patienten) liegen die Interquartilwerte für

ST2 zwischen 15 und 25 ng/ml.• Eine Konzentration von 35 ng/ml liegt zwischen der 90. und der 95. Perzentile des

Normalwerts.1 • Patienten, bei denen ACS oder HF diagnostiziert wurde und die ST2-Konzentrationen

>35 ng/ml aufweisen, haben ein Risiko unerwünschter Ereignisse wie Krankenhausaufenthalt oder Mortalität innerhalb eines (1) Jahres, das über demjenigen von Patienten mit ST2-Konzentrationen unterhalb des genannten Werts liegt. Das Mortalitätsrisiko nimmt mit steigender ST2-Konzentration zu.2,3,4

• Bei symptomlosen und anscheinend gesunden Personen hat sich eine erhöhte ST2-Konzentration als Hinweis auf ein mehr als doppelt so hohes Risiko erwiesen, ein Herzversagen zu entwickeln.5

• Auch bei Patienten mit HF oder ACS und negativem ST2-Ergebnis (<35 ng/ml), das sie als Personen mit niedrigem Risiko für unerwünschte Ereignisse wie erneuten Krankenhausaufenthalt oder Tod klassifiziert, ist die Festlegung einer klinisch angemessenen Therapie anzustreben.

• ST2-Ergebnisse sollten mit anderen klinischen und diagnostischen Daten zur Diagnosestellung und zum Patientenmanagement eingesetzt werden.

STANDARDISIERUNG Die Konzentrationsergebnisse der ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette lassen sich anhand von Standard-Referenzlösungen nachvollziehen, die eine festgelegte Konzentration des Proteins ST2 enthalten. Die ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette und die ST2-Kontrollen lassen sich anhand der gleichen Standard-Referenzlösungen nachvollziehen.

GRENZEN1. Die Tests im Rahmen von Studien wurden nur an Probanden durchgeführt, die mindestens

18 Jahre alt waren.2. Validiert mit Proben von Serum, venösem EDTA und mit Heparin koaguliertem Plasma.3. Das Vorhandensein von humanen Anti-Maus-Antikörpern (HAMA) kann eine falsch-

niedrige ST2-Konzentration ergeben.4. Faktoren wie technische oder Verfahrensfehler sowie zusätzliche Stoffe in Blutproben, die

unten nicht aufgelistet sind, können den Test störend beeinflussen und falsche Ergebnisse verursachen.

STÖRENDE SUBSTANZEN Folgende Analyten wurden separat getestet und stören die erwarteten Ergebnisse bis zu den angegebenen Konzentrationen nicht:

Substanz Konzentration

Bilirubin 0,1 mg/ml – 0,3 mg/ml

Cholesterin (gesamt) 1,5 mg/ml – 5 mg/ml

Hämoglobin 1 mg/ml – 2 mg/ml

Protein (BSA) 15 mg/ml – 60 mg/ml

Triglyceride/Lipide (gesamt) 1,5 mg/ml – 30 mg/ml

Die folgenden Medikamente wurden separat getestet und stören die erwarteten Testergebnisse nicht, wenn EDTA-Plasma mit ihnen beimpft wird: Acetaminophen, Acetylsalicylsäure, Allopurinol, Ambroxol, Amidoadron, Amlodipinbesylat, Ampicillin, Ascorbinsäure, Atenolol, Bivalirudin,

Koffein, Captopril, Chloramphenicol, Cinnarizin, Cyclosporin A, Digitoxin, Digoxin, Diltiazem, Dopamin, Dipyridamol, Enalaprilmaleat, Eplerenon, Erythromycin, Fluvastatin, Furosemid, Glyburid, Heparin-Natrium, Hydralazinhydrochlorid, Hydrochlorthiazid, Indomethacin, Lisinopril, Nikotin, Nifedipin, Nitrofurantoin, Oxytetracyclin, Phenytoin, Pravastatin-Natrium, Probenecid, Procainamidhydrochlorid, (S)-(-)-Propranololhydrochlorid, Chinidin, Simvastatin, Spironolacton, Sulfamethoxazol, Theophyllin, L-Thyroxin, Trimethoprim, Verapamilhydrochlorid und Warfarin.

Die Spezifizität wurde mit folgenden Substanzen getestet: humaner löslicher Interleukin-1-Rezeptor Typ I (IL-1 sR-1), rekombinantes humanes IL1 IL-Iα und rekombinantes humanes IL1β. Keines der drei getesteten Moleküle zeigte selbst bei einer 5x höheren Konzentration als der gemessenen ST2-Konzentration eine messbare Kreuzreaktion.

LEISTUNGSCHARAKTERISTIKA PRÄZISIONDie Präzision des Tests wurde gemäß CLSI EP5-A2, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods (Beurteilung der Präzisionsleistung quantitativer Messverfahren), Genehmigte Richtlinie – Zweite Auflage, bestimmt. Für diese Bewertung wurden drei Testproben verwendet: eine EDTA-Plasmaprobe zusammen mit zwei (2) ST2-Kontrollen. Für jede getestete Probe wurden die testinterne, die testvergleichende und die Gesamtpräzision errechnet. Die Ergebnisse bezüglich der Präzision sind in Tabelle 1 zusammengefasst. Der Test erfüllt die akzeptablen analytischen Leistungskriterien und zeigt einen durchschnittlichen kritischen Wert von 10,4 % für testinterne und von 13,6 % für testvergleichende Präzision und weist über den getesteten Konzentrationsbereich keine Abweichung der Präzision auf. Die Präzisionsleistung wurde durch „Ringtests“ gemäß CLSI EP15-A3, User Verification of Precision and Estimation of Bias (Präzisionsprüfung und Abweichungsbestimmung durch Benutzer) validiert. Messungen wurden in vier (4) Laboren einmal täglich mit drei (3) Replikaten von zwei Proben (Plasma) und jeweils zwei (2) Konzentrationen und mit beiden Stufen von Flüssigkeitskontrollen täglich an fünf (5) Tagen

hintereinander durchgeführt. Diese Tests zeigten keinen signifikanten Unterschied zu den in Tabelle 1 zusammengestellten Werten.

Tabelle 1: Zusammenfassung der Genauigkeitsanalyse

ST2-Level Testinterner KW Testvergleichender KW Gesamt-KW

Niedrig (20 ng/ml) 15,4 % 16,3 % 22,4 %

Klinisch (32 ng/ml) 4,9 % 13,3 % 14,2 %

Erhöht (81 ng/ml) 10,8 % 11,1 % 15, 5%

ANALYTISCHE EMPFINDLICHKEITDie analytische Empfindlichkeit wurde nach dem Protokoll EP17-A des Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation (Protokolle zur Bestimmung von Nachweisgrenzen und Quantifizierungsgrenzen), Genehmigte Richtlinie, bestimmt. Zur Bestimmung der Leerwertgrenze (LoB) wurde fötales Rinderserum (FBS) als Quellmaterial ohne endogenes ST2 verwendet. Gemäß dem Protokoll zur Bestimmung der Leerwertgrenze wurde ein Satz von 60 Replikaten von FBS-Proben über 4 Tage mit 15 Replikaten pro Tag gemessen. Nach der Bestimmung der Leerwertgrenze wurde die Nachweisgrenze (LoD) ermittelt. Zum Ermitteln der Nachweisgrenze wurden 60 Replikate von 4 verschiedenen menschlichen Plasmaproben mit niedriger ST2-Konzentration in Sätzen zu jeweils 15 Replikation über 4 Tage in Folge gemessen. Nach der Bestimmung der Nachweisgrenze wurde die Quantifizierungsgrenze (LoQ) ermittelt. Die gleichen Proben aus der Analyse der Nachweisgrenze wurden zur Abschätzung von Verzerrung und Ungenauigkeit verwendet, um die Quantifizierungsgrenze (LoQ) der Proben zu ermitteln. Da der Wert der Quantifizierungsgrenze

niedriger als der Wert der Nachweisgrenze ist, wird die Quantifizierungsgrenze gemäß dem Protokoll bei 12,5 ng/ml als gleich der Nachweisgrenze definiert.

LINEARITÄTDie Testlinearität wurde nach dem CLSI-Protokoll EP6-A, Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach (Bewertung der Linearität von quantitativen Messverfahren: Ein statistischer Ansatz), Genehmigte Richtlinie, bestimmt. Eingefrorene menschliche EDTA-Plasmaproben wurden zum Erzeugen von Plasmapools verwendet, mit denen diese Analyse durchgeführt werden sollte. Der ST2-Test ASPECT-PLUS wurde mit einer linearen Obergrenze von 250 ng/ml ausgelegt. Für diese Analyse wurden ein Pool mit hoher Konzentration (425 ng/ml) sowie ein Pool mit niedriger Konzentration (13,6 ng/ml) präpariert. Es wurde eine Reihe von elf (11) Pools erzeugt, indem verschiedene Mengen jeweils aus dem Pool mit hoher und dem mit niedriger Konzentration miteinander kombiniert wurden. Jeder Pool wurde in drei (3) Replikaten gemessen. Die lineare Regressionsanalyse der Ergebnisse aus diesen Pools zeigt, dass die Korrelation zwischen den vorhergesagten und den gemessenen Ergebnissen bis 257 ng/ml mit einem R2-Wert von 0,9927 und einer linearen Gleichung y = 1,0x + 3,6 linear ist (siehe Abbildung 1).

Abbildung 1: Linearität des ST2-Tests ASPECT-PLUS

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

Mes

swer

te

Erwartetes ST2

Linear

HOOK-EFFEKTKeine Auswirkung bis zu 2000 ng/ml.

ÜBEREINSTIMMUNGSANALYSEST2 ist für die Verwendung in Verbindung mit einer klinischen Bewertung als Hilfe bei der Beurteilung der Prognose von Patienten, bei denen chronisches Herzversagen oder akutes Koronarsyndrom diagnostiziert wurde, sowie zum Bestimmen eines Risikos der Entwicklung eines Herzversagens bei symptomlosen Personen gut etabliert. Der ST2-Test Presage® (ELISA-Format) ist der Referenztest für den ST2-Test ASPECT-PLUS. Zur Überprüfung der Übereinstimmung des ST2-Tests ASPECT-PLUS mit dem ST2-Test Presage wurde eine Analyse von EDTA-Plasma von 60 Spendern durchgeführt. Diese Analyse zeigte einen R2-Wert von 0,92, und die Analyse des Methodenvergleichs durch Passing-Bablok-Regression zeigte, dass die beiden Testverfahren vergleichbar sind. Die Regressionsgleichung für diese Analyse lautet y = 1,01x + 5,8, und der Cusum-Test für Linearität zeigt keine signifikante Abweichung von der Linearität (p=0,75).

RÜCKGABERICHTLINIE Wenn es beim ST2-Test ASPECT-PLUS zu Problemen kommt, werden Sie möglicherweise aufgefordert, nicht verwendete Kassetten im Folienbeutel zurückzuschicken. Wenden Sie sich bitte an Ihren Vertrieb vor Ort, um eine Rücksendegenehmigungsnummer anzufordern, bevor Sie Kassetten zurückschicken. Diese Rücksendegenehmigungsnummer muss sich bei der Rücksendung auf dem Versandkarton befinden.

KUNDENDIENST BZW. WEITERE INFORMATIONEN Für die Produktbestellung wenden Sie sich bitte an Ihren örtlichen Vertrieb oder an den Kundendienst von Critical Diagnostics unter der Rufnummer +353-1-691-7061. Technische Unterstützung erhalten Sie bei Ihrem örtlichen Vertrieb oder bei Critical Diagnostics unter der Rufnummer +353-1-691-7061. Oder schreiben Sie eine E-Mail an [email protected].

LITERATURHINWEISE1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States population. Clin Chim Acta.





M Hersteller

V Medizinprodukt zur In-vitro-Diagnostik

i Gebrauchsanweisung beachten

D Keine Wiederverwendung

h Katalognummer

X Inhalt reicht aus für <n> Tests

r Temperaturgrenzen

g Batchcode / Chargennummer

H Verfallsdatum

F Biologisches Risiko: Einwegartikel bergen biologische Risiken.

Patientennummer

C CE-Kennzeichen

ASPECT-PLUS-ST2-Testkassette

ASPECT-PLUS-ST2-Testpuffer

Gebrauchsanweisung

TEST ST2 A FLUSSO LATERALE QUANTITATIVOPrima di eseguire il test, leggere attentamente le informazioni contenute in queste istruzioni. Per eventuali domande, rivolgersi al servizio di assistenza prodotti di Critical Diagnostics. (Vedere la sezione Assistenza).

INDICAZIONI PER L’USO Il test ASPECT-PLUSTM ST2 è un immunodosaggio rapido a flusso laterale da utilizzare con il lettore ASPECT ReaderTM per la determinazione quantitativa di ST2 nel siero o nel plasma venoso con anticoagulante EDTA o eparina, progettato per l’uso professionale. Il test viene utilizzato come ausilio per la stratificazione del rischio in pazienti con insufficienza cardiaca (IC) o sindrome coronarica acuta (ACS), nonché per la valutazione del rischio di sviluppo di insufficienza cardiaca negli individui che sono altrimenti asintomatici e apparentemente sani.

INTRODUZIONE L’insufficienza cardiaca costituisce ogni anno la principale causa di morte per milioni di pazienti in tutto il mondo. Ad esempio, l’insufficienza cardiaca è responsabile del 25% dei decessi negli Stati Uniti, più di tutte le forme di cancro messe insieme. Molti pazienti vengono trattati per patologia coronarica e/o sindrome coronarica acuta, ma alla fine sviluppano insufficienza cardiaca. L’insufficienza cardiaca è una patologia cronica progressiva in cui la capacità del cuore di fornire la gittata cardiaca necessaria si indebolisce e quindi il cuore non riesce a pompare sangue sufficiente per supportare le esigenze metaboliche del corpo. La prevalenza dell’insufficienza cardiaca sta crescendo in tutto il mondo, ed è uno dei principali oneri della spesa sanitaria. Un componente primario di questi oneri è legato all’elevato tasso di ospedalizzazione dei pazienti affetti da insufficienza cardiaca avanzata e al rischio di morte elevato.

IT

PRINCIPIO DEL TEST Il test ASPECT-PLUS ST2 è un immunodosaggio quantitativo a flusso laterale monoclonale di tipo sandwich. Il siero o il plasma venoso con anticoagulante EDTA o eparina viene caricato nell’apposito pozzetto dove fluisce attraverso la striscia rivestita di anticorpi anti ST2. Il tampone viene aggiunto al secondo pozzetto. La cassetta viene poi inserita nel lettore ASPECT Reader per l’incubazione e dopo la determinazione quantitativa della proteina ST2 i risultati vengono riportati dal lettore. La determinazione del valore quantitativo di ST2 con l’utilizzo del test ASPECT-PLUS ST2 avviene mediante l’analisi della regressione lineare standard attraverso una curva di calibrazione lineare, unica per ogni lotto del test ASPECT-PLUS ST2, che viene codificata sul tag RFID incluso in ogni cassetta del test. Il segnale fluorescente misurato sulla riga di test viene valutato rispetto alla curva di calibrazione per calcolare una concentrazione di ST2.

MATERIALI FORNITIIl kit del test ASPECT-PLUS ST2 contiene tutti i reagenti necessari per generare i risultati della misurazione di ST2 nel siero o nel plasma venoso con anticoagulante EDTA o eparina.

La cassetta del test ASPECT-PLUS ST2 e il tampone del test ASPECT-PLUS ST2 contengono:

Cassetta del test ASPECT-PLUS ST2 h X• Anticorpi monoclonali murini anti ST2• Anticorpi policlonali di capra anti Ig-G murine• Colorante fluorescente

Tampone del test ASPECT-PLUS ST2 h X• Stabilizzatori• Eccipienti

Σ=20

Σ=1

PLUS0001-01

PLUS0001-03

MATERIALI NECESSARI MA NON FORNITI• Lettore ASPECT Reader (RIF: READ0001)• Sistema elettronico di controllo della qualità (EQC) (RIF: EQC0001)• Controlli ST2, Livello 1 e Livello 2 (RIF: LQC1111)• F Contenitore a prova di perforazione per i rifiuti taglienti e a rischio biologico• Timer• Guanti• Pipetta calibrata

PRECAUZIONI E AVVERTENZE1. Per uso diagnostico in vitro.2. Per uso professionale.3. I risultati devono essere interpretati unitamente ai dati degli esami clinici e di laboratorio.4. Qualsiasi impiego della cassetta del test ASPECT-PLUS ST2 non previsto nelle Indicazioni

per l’uso è considerato non conforme.5. Mantenere la cassetta ASPECT-PLUS ST2 nel blister sigillato fino al momento dell’uso.

Gettare via dopo l’uso.6. Non utilizzare oltre la data di scadenza indicata sulla confezione.7. F Contiene materiale di origine animale e deve essere gestito come potenziale veicolo di

patologie infettive. Attenersi sempre alle linee guida per il controllo delle infezioni quando si manipolano campioni di sangue, campioni di plasma EDTA ed elementi correlati. Le parti del kit che vengono a contatto con il sangue o il plasma vengono considerate rifiuti biologici pericolosi e possono potenzialmente trasmettere malattie infettive, anche dopo aver eseguito la pulizia e la disinfezione.

8. Contiene il principio attivo (0,05%) Proclin 300 quale conservante biocida.9. Evitare il contatto dei reagenti o dei campioni con la pelle, gli occhi o le membrane

mucose. In caso di contatto con la pelle o con gli occhi, lavare immediatamente con acqua.

10. Lavarsi accuratamente le mani dopo aver eseguito il test.11. Smaltire i rifiuti come agenti potenzialmente infettivi e nel rispetto delle disposizioni locali.

RACCOLTA DEL CAMPIONE E PREPARAZIONE1. Utilizzare solo siero, plasma venoso con anticoagulante EDTA o eparina. Altri tipi di

campioni, metodi di prelievo o anticoagulanti non sono stati valutati. Dopo la raccolta del campione, la preparazione del plasma deve essere eseguita nel più breve tempo possibile.

2. Quando è conservato a temperatura ambiente (18-25 ºC), il campione del paziente deve essere analizzato entro 48 ore dal prelievo. Se non è possibile analizzare il campione entro 48 ore, conservarlo in frigorifero (2-8 °C) fino a sette (7) giorni o congelarlo (<20 ºC) per un massimo di 18 mesi.6

Condizioni di conservazione (temperatura) Stabilità dei campioni

20 ˚C 48 ore

4 ˚C 7 giorni

-20 ˚C e -80 ˚C 18 mesi

3. L’eventuale trasporto del campione presso un laboratorio per l’esecuzione del test deve avvenire a temperatura ambiente (18-25 °C) o in contenitore refrigerato (2-8 °C) entro 48 ore dalla raccolta. Evitare l’esposizione a temperature > 25 °C.

NOTA: lo stato di salute corrente può influenzare i risultati del test e causare letture inaccurate. Quando si leggono i risultati del test e si decide in merito alle successive azioni da intraprendere, è importante tenere conto di determinate condizioni di salute.

CONSERVAZIONE E MANIPOLAZIONE Il test ASPECT-PLUS ST2 è stabile fino a 18 mesi se conservato in un ambiente controllato, attenendosi alle seguenti indicazioni:

Conservare le cassette nel blister in alluminio sigillato fino al momento dell’uso e fino alla data di scadenza stampata sulla confezione.• Non usare la cassetta se il blister in alluminio è strappato, forato o non completamente

sigillato. In tal caso, gettare via la cassetta e usarne una nuova.• Conservare le cassette del test ASPECT-PLUS ST2 ad una temperatura compresa tra 2 °C

e 8 °C (35-46 °F). • Prima di utilizzare il test ASPECT-PLUS ST2 conservato in frigorifero, lasciare che le singole

cassette nel blister di alluminio raggiungano la temperatura ambiente per 15 minuti.• Non utilizzare oltre la data di scadenza indicata sulla confezione.

NOTA: utilizzare la cassetta entro dieci (10) minuti dall’apertura del blister in alluminio.

CONSIDERAZIONI SUL CONTROLLO DELLA QUALITÀ Ogni cassetta del test ASPECT-PLUS ST2 include una verifica di controllo interna (riga di controllo sulla cassetta del test) che viene eseguita automaticamente con ogni campione da paziente, soluzione di controllo liquida esterna o campione per il test di proficiency per verificare che il flusso nella cassetta del test ASPECT-PLUS ST2 sia adeguato. Se la verifica automatica di questo controllo integrato mostra che il valore rientra nel limite, il lettore ASPECT Reader riporterà un risultato per il campione sottoposto al test. Se invece la verifica automatica del controllo integrato mostra che il valore non rientra nei limiti, il risultato del test non verrà riportato. Al contrario, il lettore visualizzerà un messaggio di avvertimento o di errore descritto nella Guida per l’utente del lettore ASPECT Reader.

La buona pratica di laboratorio suggerisce che i controlli esterni vengano testati con ogni nuovo lotto o consegna di materiali per test oppure ogni 30 giorni, nonché come altrimenti richiesto dalle normali procedure di controllo qualità del laboratorio. I controlli devono essere testati come i campioni dei pazienti. Quando si analizzano campioni di pazienti o controlli esterni, se un test non riesce per qualsiasi ragione (guasto del controllo integrato o controllo esterno fuori intervallo), i risultati del paziente non verranno riportati.

Gli utenti devono attenersi alle disposizioni del governo (per esempio, federali, statali o locali) e/o ai requisiti di accreditamento per il controllo di qualità.

CONTROLLO ELETTRONICO DELLA QUALITÀ (EQC) Utilizzare l’EQC per garantire il corretto funzionamento del lettore ASPECT Reader. Eseguire il test di EQC nelle circostanze seguenti: • Alla configurazione iniziale del lettore ASPECT Reader.• Quando il lettore ASPECT Reader è stato trasportato o spostato.• Quando vi è incertezza sulle prestazioni del lettore ASPECT Reader.• Quando richiesto dalle procedure per il controllo della qualità del laboratorio. • Tutti i giorni prima del suo utilizzo.

NOTA: l’EQC è sensibile alla luce. Conservare l’EQC nel blister in alluminio in dotazione dopo ogni utilizzo.NOTA: l’EQC è pronto all’uso. Non è richiesto alcun campione o tampone.NOTA: consultare la Guida per l’utente del lettore ASPECT Reader per le istruzioni complete sull’uso dell’EQC.

ESECUZIONE DI UN TEST Prima di eseguire il test leggere attentamente le informazioni contenute in queste istruzioni.

• Per informazioni sui simboli usati in queste istruzioni, fare riferimento alla sezione Simboli. • Predisporre tutto il necessario indicato nelle sezioni Materiali forniti e Materiali necessari

ma non forniti (vedere sopra).• Quando si maneggiano campioni di sangue, attenersi alle appropriate linee guida per il

controllo delle infezioni. 1. Rimuovere dal frigorifero una cassetta del test ASPECT-PLUS ST2 e portarla a temperatura

ambiente per 15 minuti. NON aprire il blister in alluminio finché la cassetta non ha raggiunto la temperatura ambiente.

2. Preparare il campione. Vedere la sezione Raccolta del campione e preparazione.3. Sul lettore ASPECT Reader: a. Selezionare ACCEDI e immettere le informazioni appropriate per eseguire il

test. b. Dalla schermata principale, selezionare ESEGUI PAZIENTE. c. Inserire l’ID paziente, quindi selezionare ESEGUI PAZIENTE.4. Rimuovere la cassetta del test dal blister in alluminio.

NOTA: utilizzare la cassetta entro dieci (10) minuti dall’apertura del blister in alluminio.

5. Utilizzando un micropipettatore calibrato, aspirare 35 µL di campione del paziente e trasferirlo nel pozzetto centrale con il simbolo [ ].

6. Dopo 60 secondi, aggiungere 2 gocce (~ 110 µL) di tampone nel relativo pozzetto situato accanto a quello del campione sul bordo della cassetta del test. NON aggiungere tampone al pozzetto del campione. Il tampone deve essere aggiunto SOLO al pozzetto del tampone della cassetta del test.

7. Dopo 40 secondi inserire la cassetta del test caricata con il campione del paziente e con il tampone.

NOTA: la cassetta del test deve essere inserita nel lettore entro 60 secondi dall’aggiunta del tampone. Un ritardo superiore ai 60 secondi può portare a risultati inaccurati.

8. Chiudere il cassetto del lettore. L’analisi ha inizio. 9. I risultati verranno visualizzati sullo schermo dopo circa 20 minuti.

NOTA: Per le istruzioni complete sulle modalità di esecuzione del test consultare la Guida per l’utente del lettore ASPECT Reader.F Smaltire quanto entrato a contatto con il campione. Attenersi scrupolosamente alle linee guida appropriate per il controllo delle infezioni.

RISULTATI DELLA LETTURA Il lettore ASPECT Reader misura automaticamente la proteina ST2. Il risultato viene visualizzato sullo schermo. L’operatore ha la possibilità di stampare i risultati. Il valore espresso in ng/mL corrisponde alla concentrazione di ST2 nel campione.

NOTA: livelli di ST2 inferiori a 12,5 ng/mL o superiori a 250 ng/mL verranno riportati come <12,5 ng/mL e >250 ng/mL.Per ulteriori informazioni, consultare la Guida per l’utente del lettore ASPECT Reader.

INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI • In soggetti che a seguito di una autovalutazione si dichiarano sani, pazienti normali, i

valori interquartili per la proteina ST2 sono compresi tra 15 e 25 ng/mL.• Una concentrazione di 35 ng/mL è tra il 90° e 95° percentile della popolazione normale.1 • Nei pazienti con diagnosi di ACS o IC che presentano concentrazioni di ST2 ≥35 ng/mL il

rischio di eventi avversi, tra cui ricovero in ospedale o decesso entro un (1) anno, è superiore a quello dei pazienti con concentrazioni di ST2 al di sotto di questo livello. Inoltre, il rischio di mortalità cresce all’aumentare delle concentrazioni di ST2.2,3,4

• In individui apparentemente sani e asintomatici, una concentrazione elevata di ST2 ha dimostrato di essere indicativa di un rischio due volte maggiore di sviluppare insufficienza cardiaca.5

• Benché un risultato ST2 negativo, ovvero <35 ng/mL in pazienti con IC o ACS possa servire a classificare tali pazienti e soggetti come a basso rischio di eventi avversi quali nuovo ricovero o decesso, è necessario istituire una terapia clinica appropriata.

• I risultati ST2 devono essere utilizzati insieme ad altre informazioni cliniche e diagnostiche per formulare una diagnosi e per il trattamento terapeutico dei pazienti.

STANDARDIZZAZIONE I risultati di concentrazione della cassetta del test ASPECT-PLUS ST2 sono riconducibili a soluzioni standard di riferimento che contengono una determinata concentrazione di proteina ST2. La cassetta del test ASPECT-PLUS ST2 e i controlli ST2 sono riconducibili alle stesse soluzioni standard di riferimento.

LIMITI1. I test negli studi sono stati limitati a soggetti di età pari o superiore a 18 anni.2. Sono convalidati solo con campioni di siero e plasma venoso ai quali è stato aggiunto

anticoagulante EDTA o eparina.3. La presenza di anticorpi umani antimurini (HAMA) può produrre concentrazioni

falsamente basse di ST2.4. Esiste la possibilità che fattori quali errori tecnici o procedurali, così come sostanze

addizionali diverse da quelle indicate di seguito, presenti nei campioni di sangue, possano interferire con il test e causare risultati errati.

SOSTANZE INTERFERENTI I seguenti analiti sono stati testati separatamente e non interferiscono con i risultati previsti fino alle concentrazioni indicate:

Sostanza Concentrazione

Bilirubina 0,1 mg/mL – 0,3 mg/mL

Colesterolo (totale) 1,5 mg/mL – 5 mg/mL

Emoglobina 1 mg/mL – 2 mg/mL

Proteina (BSA) 15 mg/mL – 60 mg/mL

Trigliceridi/lipidi (totale) 1,5 mg/mL – 30 mg/mL

I seguenti farmaci sono stati testati separatamente e non interferiscono con i risultati previsti del test se aggiunti al plasma EDTA: acetamminofene, acido acetilsalicilico, allopurinolo, ambroxolo, amiodarone, amlodipina besilato, ampicillina, acido ascorbico, atenololo, bivalirudina, caffeina, captopril, cloramfenicolo, cinnarizina, ciclosporina A, digitossina, digossina, diltiazem, dopamina, dipiridamolo, enalapril maleato, eplerenone, eritromicina, fluvastatina, furosemide, gliburide, eparina sodica, idralazina idrocloruro, idroclorotiazide, indometacina, lisinopril, nicotina, nifedipina, nitrofurantoina, ossitetraciclina, fenitoina, pravastatina sodica, probenecid, procainamide idrocloruro, (S)-(-)-propranololo idrocloruro, chinidina, simvastatina, spironolattone, sulfametossazolo, teofillina, L-tirossina, trimetoprim, verapamil idrocloruro e warfarin.

È stata testata la specificità del recettore umano solubile dell’interleuchina 1 di tipo I (IL-1 sR-1), della ricombinante umana IL-Iα e di quella IL-Iβ. Nessuna delle tre molecole testate, anche ad una concentrazione pari a 5 volte la concentrazione misurata di ST2, ha presentato una reattività crociata misurabile.

PRESTAZIONI METODOLOGICHE PRECISIONELa precisione del dosaggio è stata determinata in base al protocollo CLSI EP5-A2: Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; linea guida approvata, seconda edizione. Per questa valutazione sono stati usati tre campioni, plasma EDTA insieme con i due (2) controlli ST2. Per ogni campione testato è stata calcolata la precisione intra-dosaggio, inter-dosaggio e totale. I risultati della precisione sono riassunti nella tabella 1. Il dosaggio soddisfa criteri accettabili per ciò che riguarda le prestazioni analitiche, presentando un CV medio del 10,4% per la variazione intra-dosaggio e del 13,6% per quella inter-dosaggio e non presenta alcuno scostamento di precisione nell’intervallo di concentrazione testato. Le prestazioni di precisione sono state convalidate mediante prove “interlaboratorio” condotte in base al protocollo CLSI EP15-A3, per la verifica della precisione e la stima degli scostamenti da parte dell’utente. Le misurazioni sono state effettuate in quattro (4) laboratori, una volta al giorno per cinque (5) giorni, con tre (3) replicati di due campioni (plasma) a ciascuna delle due (2) concentrazioni e ad entrambi i livelli dei controlli liquidi. Questo test non ha mostrato alcuna differenza significativa rispetto ai valori riassunti nella tabella 1.

Tabella 1: Riepilogo dell’analisi di precisione

Livello ST2 CV intra-dosaggio CV inter-dosaggio CV totale

Basso (20 ng/mL) 15,4% 16,3% 22,4%

Clinico (32 ng/mL) 4,9% 13,3% 14,2%

Elevato (81 ng/mL) 10,8% 11,1% 15,5%

SENSIBILITÀ ANALITICALa sensibilità analitica è stata determinata in base al protocollo EP17-A del CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; linea guida approvata. Per determinare il limite di bianco (LoB) è stato impiegato siero bovino fetale (FBS) come fonte di materiale senza ST2 endogena. In conformità con il protocollo per la determinazione del LoB, è stata misurata una serie di 60 replicati di campioni FBS nell’arco di 4 giorni, con 15 replicati al giorno. Dopo la determinazione del LoB, è stato accertato il limite di rilevamento (LoD). Per determinare il LoD, sono stati misurati 60 replicati di 4 diversi campioni di plasma umano a bassa concentrazione di ST2, in serie di 15 replicati, nell’arco di 4 giorni consecutivi. Dopo la determinazione del LoD, è stato ottenuto il limite di quantificazione (LoQ). Per calcolare il LoQ e la stima degli scostamenti e dell’imprecisione sono state usate le stesse misurazioni impiegate per la determinazione del LoD. Poiché il valore del LoQ è inferiore al valore del LoD, in base al protocollo, il LoQ sarà definito come uguale al LoD a 12,5 ng/ml.

LINEARITÀLe prestazioni lineari del dosaggio sono state determinate in base al protocollo CLSI EP6-A Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; linea guida approvata. I campioni congelati di plasma EDTA umano sono stati utilizzati per la produzione di pool di plasma con cui effettuare questa analisi. Il test ASPECT-PLUS ST2 è stato progettato con un limite lineare superiore di 250 ng/mL. Per questa analisi è stato preparato un pool ad alta concentrazione (425 ng/mL) e un pool a bassa concentrazione (13,6 ng/mL). È stata creata una serie di undici (11) pool combinando quantità variabili di ciascuno dei pool ad alta e a bassa concentrazione. Ciascun pool è stato misurato in replicati di tre (3). L’analisi di regressione lineare dei risultati di questi pool mostra che la correlazione tra i risultati previsti e misurati è lineare fino a 257 ng/mL con un valore R2 di 0,9927 e un’equazione lineare di y = 1,0x + 3,6, Figura 1.

Figura 1: Linearità del test ASPECT-PLUS ST2

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

Valo

ri m

isur

a!

ST2 previsto (ng/ml)

Lineare

EFFETTO HOOKNessun effetto fino a 2000 ng/mL.

ANALISI DI CONCORDANZAST2 è attendibile, se usato in combinazione con la valutazione clinica, come ausilio per valutare la prognosi di pazienti con diagnosi di insufficienza cardiaca cronica o sindrome coronarica acuta (ACS), nonché per la determinazione del rischio di sviluppare insufficienza cardiaca negli individui asintomatici. Il dosaggio Presage® ST2 (formato ELISA) è il dosaggio di riferimento per il test ASPECT-PLUS ST2. Per verificare la concordanza del test ASPECT-PLUS ST2 con il dosaggio Presage ST2, è stata condotta l’analisi di plasma EDTA proveniente da 60 donatori. Questa analisi ha mostrato un valore di R2 di 0,92 e l’analisi comparativa dei metodi con regressione di Passing e Bablok ha mostrato che le due tecniche di analisi sono comparabili. L’equazione di regressione per questa analisi è y = 1,01x + 5,8 e il test CUSUM per la linearità non mostra alcuna deviazione significativa dalla linearità (p = 0,75).

POLITICA DI RESTITUZIONE DEI PRODOTTI In caso di problemi con il test ASPECT-PLUS ST2, è possibile che venga chiesto di restituire le cassette inutilizzate nel blister in alluminio. Prima di restituire le confezioni, richiedere al proprio distributore locale un codice di autorizzazione alla restituzione. Tale codice deve essere indicato sulla scatola utilizzata per la restituzione.

ASSISTENZA O INFORMAZIONI AGGIUNTIVE Per ordinare questo prodotto contattare il distributore locale o il servizio clienti di Critical Diagnostics al+353 1 691 7061. Per assistenza tecnica contattare il distributore locale o Critical Diagnostics telefonicamente al +353 1 691 7061 o tramite e-mail, all’indirizzo [email protected].

BIBLIOGRAFIA1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States population. Clin Chim Acta.

11 nov 2010; 411 (21-22):1825-6.2. Felker GM, et al. Soluble ST2 in Ambulatory Patients with Heart Failure: Association with Functional Capacity and Long-Term Outcomes.

Circ. Heart Fail. 2013; 6: 1172-11793. Ky B, et al. High Sensitivity ST2 for Prediction of Adverse Outcomes in Chronic Heart Failure. Circ. Heart Fail. Mar 2011; 4(2):180-7.4. Kohli P, et al. Role of ST2 in Non–ST-Elevation Acute Coronary Syndrome in the MERLIN-TIMI 36 Trial. Clin Chem. Gen 2012;

58(1):257-66.5. Wang T, et al. Prognostic Utility of Novel Biomarkers of Cardiovascular Stress: The Framingham Heart Study. Circolazione 25 set

2012; 126(13):1596-604.6. Dieplinger B, et al. Long-term stability of soluble ST2 in frozen plasma samples. Clin Biochem. Set 2010;43(13-14):1169-1170.

M Produttore

V Dispositivo medico per la diagnostica in vitro

i Consultare le istruzioni per l'uso

D Dispositivo monouso

h Codice

X Contiene materiale sufficiente per <n> test.

r Limiti di temperatura

g Codice lotto / N. di lotto

H Data di scadenza

F Rischio di contaminazione biologica: i componenti usa e getta comportano un rischio biologico.

Numero paziente

C Marcatura CE

Cassetta del test ASPECT-PLUS ST2

Tampone del test ASPECT-PLUS ST2

Istruzioni per l'uso

TEST QUALITATIF ST2 À FLUX LATÉRALLisez toutes les informations contenues dans ce mode d’emploi pour disposer d’instructions complètes avant d’effectuer le test. Pour toute question, contactez le support technique de Critical Diagnostics afin d’obtenir de l’aide. (Reportez-vous à la section Assistance).

MODE D’EMPLOI Le test ASPECT-PLUSTM ST2 est un immunodosage rapide à flux latéral à utiliser avec l’ASPECT ReaderTM pour la détermination quantitative de ST2 dans le sérum ou le plasma EDTA ou hépariné anticoagulé, exclusivement destiné aux professionnels de la santé. Ce test est utilisé dans le cadre de la stratification du risque chez les patients souffrant d’une insuffisance cardiaque (IC) ou d’un syndrome coronaire aigu (SCA). Il peut également servir à évaluer le risque de développer une insuffisance cardiaque chez les individus asymptomatiques et apparemment en bonne santé.

INTRODUCTION Touchant des millions de patients chaque année, les maladies cardiaques représentent une cause majeure de décès dans le monde. Elles sont par exemple responsables de 25 % des décès aux États-Unis, soit plus que tous les cancers réunis. De nombreux patients sont traités pour une maladie coronarienne (MC) et/ou un syndrome coronarien aigu (SCA), mais développent parfois une insuffisance cardiaque. L’insuffisance cardiaque est une maladie chronique évolutive dans laquelle la capacité du cœur à fournir le débit nécessaire diminue, entravant ainsi sa capacité à pomper la quantité de sang suffisante pour satisfaire les besoins métaboliques de l’organisme. La prévalence de l’insuffisance cardiaque augmente dans le monde et représente une charge financière importante pour les hôpitaux. Les patients souffrant d’insuffisance cardiaque à un stade

FR

avancé présentent un taux d’hospitalisation et d’exploitation de ressources élevé ainsi qu’un risque de mortalité important, ce qui contribue à cette charge financière.

PRINCIPE DU TEST Le test ASPECT-PLUS ST2 est un immunodosage monoclonal qualitatif en sandwich à flux latéral. Le sérum, le sang veineux EDTA ou le plasma hépariné anticoagulé est pipeté dans le puits d’échantillon où il passe à travers une bandelette recouverte d’anticorps anti-ST2. Le tampon de dosage est ajouté au deuxième puits. La cassette est ensuite insérée dans l’ASPECT Reader pour incubation et le taux de ST2 est déterminé quantitativement et consigné par le lecteur. Pour déterminer une valeur de ST2 quantitative, le test ASPECT-PLUS ST2 applique une analyse standard par régression linéaire à partir d’une courbe d’étalonnage linéaire propre à chaque lot de tests ASPECT-PLUS ST2 qui est codée sur l’étiquette RFID incluse dans chaque cassette de test. Le signal fluorescent mesuré sur la ligne de test est évalué par rapport à la courbe d’étalonnage pour calculer une concentration en ST2.

PRODUITS FOURNIS :La trousse de test ASPECT-PLUS ST2 contient tous les réactifs nécessaires pour mesurer le taux de ST2 dans un échantillon de sérum ou de plasma EDTA ou hépariné anticoagulé.

La cassette de test ASPECT-PLUS ST2 et le flacon de tampon de test ASPECT-PLUS ST2 contiennent :

Cassette du test ASPECT-PLUS ST2 h X• Anticorps monoclonaux murins anti-ST2• Anticorps polyclonaux de chèvre anti-IgG murins• Colorant fluorescent

Tampon de test ASPECT-PLUS ST2 h X• Stabilisants• Excipients

Σ=20

Σ=1

PLUS0001-01

PLUS0001-03

PRODUITS NÉCESSAIRES MAIS NON FOURNIS• ASPECT Reader (RÉF : READ0001)• Contrôle électronique de la qualité (EQC) (RÉF : EQC0001)• Contrôles ST2, Niveau 1 et Niveau 2 (RÉF : LQC1111)• F Récipient imperforable pour les matières contaminées et objets tranchants et pointus• Minuteur• Gants• Pipette étalonnée

PRÉCAUTIONS ET AVERTISSEMENTS1. Réservé au diagnostic in vitro.2. Exclusivement réservé aux professionnels de la santé.3. Les résultats du test doivent être interprétés en association avec tous les autres résultats

d’examens cliniques et d’analyses de laboratoire.4. N’utilisez pas la cassette de test ASPECT-PLUS ST2 à d’autres fins que celles indiquées dans

le mode d’emploi.5. Conservez la cassette de test ASPECT-PLUS ST2 dans le sachet scellé jusqu’à son utilisation.

Éliminez-la après la première utilisation.6. Ne les utilisez pas après la date de péremption indiquée sur l’emballage.7. F Contient des substances d’origine animale devant être manipulées comme des

matières potentiellement infectieuses. Respectez les consignes relatives à la prévention des infections lors de la manipulation des échantillons de sang, de plasma EDTA et des éléments associés. Les articles de la trousse qui ont été en contact avec du sang ou du plasma sont considérés comme biologiquement dangereux et susceptibles de transmettre des maladies infectieuses, même si un nettoyage et une désinfection ont été effectués.

8. Contient l’agent actif Proclin 300 (0,05 %) comme conservateur biocide.9. Évitez tout contact des réactifs du dosage ou des échantillons avec la peau, les yeux ou les

muqueuses. En cas de contact avec la peau ou les yeux, lavez immédiatement à l’eau.

10. Lavez-vous soigneusement les mains après avoir réalisé le test.11. Éliminez les déchets considérés comme des agents potentiellement infectieux

conformément aux exigences locales.

PRÉLÈVEMENT ET PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS1. Utilisez uniquement du sérum, du plasma EDTA ou anticoagulé à l’héparine. Les autres

types d’échantillon, méthodes de prélèvement ou anticoagulants n’ont pas été évalués. L’échantillon doit être préparé le plus tôt possible après le prélèvement de l’échantillon.

2. L’échantillon de patient doit être analysé dans les 48 heures suivant le prélèvement lorsqu’il est stocké à température ambiante (18-25 ºC). S’il ne peut pas être analysé dans un délai de 48 heures, placez-le au réfrigérateur (2-8 ºC) pendant sept (7) jours maximum ou au congélateur (< -20 ºC) pendant 18 mois maximum.6

Condition de stockage (température) Stabilité des échantillons

20 °C 48 heures

4 °C 7 jours

-20 ˚C et -80 ˚C 18 mois

3. Si l’échantillon doit être transporté dans un laboratoire pour y être analysé, transportez-le à température ambiante (entre 18 et 25 °C) ou réfrigéré (entre 2 et 8 °C) dans les 48 heures qui suivent le prélèvement. Évitez toute exposition à des températures >25 °C.

REMARQUE : L’état de santé actuel peut influer sur les résultats d’analyse ou les fausser. Il est important de tenir compte de certains facteurs de santé lors de la lecture des résultats du test et de définir un plan d’action.

CONSERVATION ET MANIPULATION Le test ASPECT-PLUS ST2 est stable jusqu’à 18 mois lorsqu’il est stocké dans un environnement contrôlé de la façon suivante :

Stockez les cassettes emballées dans le sachet scellé jusqu’à leur emploi et avant la date de péremption indiquée sur l’emballage :• N’utilisez pas la cassette si le sachet en aluminium est déchiré, percé ou n’est pas

complètement étanche. Éliminez la cassette et utilisez-en une autre.• Stockez les cassettes du test ASPECT-PLUS ST2 à une température comprise entre 2 °C

et 8 °C. • Laissez les cassettes réfrigérées du test ASPECT-PLUS ST2 dans leur sachet individuel

pendant 15 minutes avant utilisation, jusqu’à ce qu’elles soient revenues à température ambiante.

• Ne les utilisez pas après la date de péremption indiquée sur l’emballage.

REMARQUE : Utilisez la cassette dans les dix (10) minutes qui suivent l’ouverture du sachet.

REMARQUES RELATIVES AU CONTRÔLE QUALITÉ Chaque test ASPECT-PLUS ST2 inclut une vérification interne du contrôle (ligne de contrôle sur la cassette de test) qui est exécutée automatiquement pour tous les échantillons de patients, solutions de contrôle liquides externes ou échantillons de test d’aptitude afin de vérifier que le flux du test ASPECT-PLUS ST2 est suffisant. Si la vérification automatique de ce contrôle intégré indique une valeur adéquate, l’ASPECT Reader retourne un résultat concernant l’échantillon de patient analysé. Si la vérification automatique de ce contrôle intégré indique une valeur de contrôle hors des limites, aucun résultat de test n’est retourné et le lecteur affiche un message d’avertissement ou d’erreur tel que ceux décrits dans le manuel d’utilisation de l’ASPECT Reader.

Conformément aux bonnes pratiques de laboratoire, les contrôles externes doivent être testés avec chaque nouveau lot ou livraison de produits de test, ou tous les 30 jours, et dans tous les cas selon le protocole standard de contrôle qualité de votre laboratoire. Les contrôles doivent être testés de la même manière que les échantillons de patients. Lors de l’analyse d’échantillons de patients ou de contrôles externes, si un test échoue pour une raison quelconque (échec du contrôle intégré ou contrôle externe hors des limites), aucun résultat patient n’est retourné.

Les directives gouvernementales (fédérales, nationales ou locales par exemple) et/ou les conditions d’agrément relatives au contrôle de la qualité doivent être respectées par les utilisateurs.

CONTRÔLE ÉLECTRONIQUE DE LA QUALITÉ (EQC) Utilisez l’EQC pour vérifier le fonctionnement de l’ASPECT Reader. Lancez un test EQC dans les situations suivantes : • Configuration initiale de l’ASPECT Reader.• Après le transport ou le déplacement de l’ASPECT Reader.• En cas d’incertitude concernant la performance de l’ASPECT Reader.• Pour répondre aux exigences du contrôle qualité de votre laboratoire. • Au début de chaque journée.

REMARQUE : L’EQC est sensible à la lumière. Rangez-le dans le sachet fourni après chaque utilisation.REMARQUE : L’EQC est prêt pour le test. Aucun échantillon ni tampon de test n’est nécessaire.REMARQUE : Consultez le manuel d’utilisation de l’ASPECT Reader pour obtenir des instructions complètes sur l’utilisation de l’EQC.

RÉALISATION D’UN TEST Lisez toutes les informations contenues dans ce mode d’emploi avant de réaliser un test.

• Les symboles utilisés dans ces consignes sont définis dans la section Symboles. • Réunissez les éléments nécessaires (voir les sections Produits fournis et Produits

nécessaires mais non fournis ci-dessous).• Respectez les consignes relatives à la prévention des infections lorsque vous manipulez

des échantillons de sang et des produits qui ont été en contact avec le sang. 1. Retirez une cassette de test ASPECT-PLUS ST2 du réfrigérateur et ramenez-la à

température ambiante pendant 15 minutes. N’OUVREZ PAS le sachet en aluminium tant que la cassette n’est pas à température ambiante.

2. Préparez l’échantillon à analyser. Reportez-vous à la section Prélèvement et préparation des échantillons.

3. Sur l’ASPECT Reader : a. Saisissez les informations appropriées pour vous CONNECTER et lancer un

test. b. Sur l’écran principal, sélectionnez EXÉCUTER PATIENT. c. Saisissez l’ID patient, puis sélectionnez EXÉCUTER PATIENT.4. Retirez la cassette de test du sachet.

REMARQUE : Vous devez utiliser la cassette dans les 10 minutes suivant l’ouverture du sachet.

5. Avec un micropipetteur étalonné, pipetez 35 uL d’échantillon de patient dans le puits de prélèvement, c’est-à-dire dans le puits du milieu avec la [ ].

6. Au bout de 60 secondes, ajoutez 2 gouttes (~110 µL) de tampon de test dans le puits correspondant, c’est-à-dire à côté du puits d’échantillon sur le bord de la cassette de test. Ne pas ajouter de solution tampon au puits d’échantillon de sang. Le tampon de test doit UNIQUEMENT être ajouté au puits de tampon de la cassette de test.

7. Après 40 secondes, insérez la cassette de test chargée avec l’échantillon de patient et le tampon de test.

REMARQUE : La cassette de test doit être insérée dans le lecteur dans les 60 secondes qui suivent l’ajout du tampon. Tout délai supérieur à 60 secondes après l’ajout du tampon de test risque de fausser les résultats.

8. Fermez le tiroir du lecteur pour lancer l’analyse. 9. Les résultats s’affichent à l’écran en 20 minutes environ.

REMARQUE : Consultez le manuel d’utilisation de l’ASPECT Reader pour obtenir des instructions complètes sur la réalisation d’un test.F Éliminez tous les articles qui ont été au contact de l’échantillon. Respectez scrupuleusement les consignes relatives à la prévention des infections.

LECTURE DES RÉSULTATS L’ASPECT Reader mesure automatiquement le taux de ST2. Le résultat s’affiche à l’écran. L’opérateur peut choisir d’imprimer les résultats. La valeur exprimée en ng/ml représente la concentration en ST2 dans l’échantillon.

REMARQUE : Les taux de ST2 inférieurs à 12,5 ng/ml ou supérieurs à 250 ng/ml sont consignés comme <12,5 ng/ml et >250 ng/ml.Pour plus d’informations, consultez le manuel d’utilisation de l’ASPECT Reader.

INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS • Chez les individus qui se sont auto-déclarés en bonne santé, à savoir les patients sains, les

valeurs interquartiles de ST2 sont comprises entre 15 et 25 ng/ml.• La concentration de 35 ng/ml correspond à 90 à 95 % de la population normale.1 • Chez les patients pour lesquels un SCA ou une IC ont été diagnostiqués et présentant

des concentrations en ST2 > 35 ng/ml, le risque d’événements indésirables tels que l’hospitalisation ou le décès dans l’année qui suit (1 an) est supérieur à celui des patients

présentant des concentrations en ST2 inférieures à cette valeur. Plus les concentrations en ST2 augmentent, plus le risque de mortalité est élevé.2,3,4

• Chez les patients asymptomatiques et apparemment en bonne santé, une concentration élevée en ST2 indique un risque deux fois plus élevé de développer une insuffisance cardiaque.5

• Même si un résultat négatif de la ST2, < 35 ng, chez les patients souffrant d’IC peut être utilisé pour classer les patients et les sujets à faible risque d’événements indésirables tels que l’hospitalisation ou la mort, un traitement clinique approprié devra être suivi.

• Les résultats de ST2 doivent être utilisés avec d’autres informations cliniques et diagnostiques pour établir un diagnostic et prendre en charge les patients.

STANDARDISATION Les concentrations obtenues avec la cassette de test ASPECT-PLUS ST2 sont comparables aux solutions standards de référence qui contiennent une concentration définie en protéine ST2. La cassette de test ASPECT-PLUS ST2 et les contrôles ST2 sont comparables aux solutions standards de référence.

RESTRICTIONS1. Les tests réalisés dans le cadre des études ont été restreints aux personnes âgées de

18 ans et plus.2. Validés avec les échantillons de sérum et de plasma EDTA et anticoagulé à l’héparine.3. La présence d’anticorps humains anti-souris (HAMA) risque de produire une concentration

en ST2 faussement faible.4. Il est possible que certains facteurs tels que des erreurs techniques et de procédure, mais

aussi des substances supplémentaires dans les échantillons de sang non répertoriées ici, interfèrent avec le test et faussent les résultats.

SUBSTANCES INTERFÉRENTES Les analytes suivants ont été testés séparément et n’interfèrent pas avec les résultats prévus aux concentrations indiquées :

Substance Concentration

Bilirubine 0,1 mg/ml - 0,3 mg/ml

Cholestérol (total) 1,5 mg/ml - 5 mg/ml

Hémoglobine 1 mg/ml - 2 mg/ml

Protéine (BSA) 15 mg/ml - 60 mg/ml

Triglycérides/lipides (total) 1,5 mg/ml - 30 mg/ml

Les médicaments suivants ont été testés séparément et n’interfèrent pas avec les résultats de test prévus lorsqu’ils sont inoculés dans le plasma EDTA : paracétamol, acide acétylsalicylique, allopurinol, ambroxol, amidoadrone, bésylate d’amlodipine, ampicilline, acide ascorbique, aténolol, bivalirudine, caféine, captopril, chloramphénicol, cinnarizine, cyclosporine A, digitoxine, digoxine, diltiazem, dopamine, dipyridamole, maléate d’énalapril, éplérénone, érythromycine, fluvastatine, furosémide, glyburide, héparine sodique, chlorhydrate d’hydralazine, hydrochlrothiazide, indométhacine, lisinopril, nicotine, nifédipine, nitrofurantoïne, oxytétracycline, phénytoïne, pravastatine sodique, probénécide, chlorhydrate de procaïnamide, (S)-(-)-propranolol chlorhydrate, quinidine, simvastatine, spironolactone, sulfaméthoxazole, théophylline, L-thyroxine, triméthoprime, chlorhydrate de vérapamil et warfarine.

La spécificité a été testée avec le récepteur soluble de l’interleukine 1 humaine type I (IL-1 sR-1), l’IL-Iα humaine recombinante et l’IL-Iβ humaine recombinante. Aucune des trois molécules

testées n’a affiché de réactivité croisée mesurable, même à une concentration égale à 5 fois la concentration en ST2 mesurée.

PERFORMANCE PRÉCISIONLa précision du test a été déterminée conformément au document EP5-A2 du CLSI, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. Trois échantillons de test, l’échantillon de plasma EDTA et les deux (2) contrôles ST2 ont été utilisés pour cette évaluation. La précision intra-test, la précision inter-test et la précision totale ont été calculées pour chaque échantillon analysé. Les résultats relatifs à la précision sont résumés dans le Tableau 1. Le dosage satisfait les critères de performance analytique acceptable, avec un CV moyen de 10,4 % pour la variation intra-test et de 13,6 % pour la variation inter-test. Il ne présente aucun biais de précision sur la plage de concentration testée. La précision a été validée par des essais « interlaboratoires », conformément au document EP15-A3 du CLSI, User Verification of Precision and Estimation of Bias. Des mesures ont été relevées dans quatre (4) laboratoires une fois par jour sur trois (3) répétitions de deux échantillons (plasma), à chacune des deux (2) concentrations et aux deux taux de contrôles liquides chaque jour pendant cinq (5) jours. Ce test n’a révélé aucune différence significative par rapport aux valeurs résumées dans le Tableau 1.

Tableau 1 : Résumé de l’analyse de précision

Taux de ST2 CV intra-test CV inter-test CV total

Faible (20 ng/ml) 15,4 % 16,3 % 22,4 %

Clinique (32 ng/ml) 4,9 % 13,3 % 14,2 %

Élevé (81 ng/ml) 10,8 % 11,1 % 15,5 %

SENSIBILITÉ ANALYTIQUELa sensibilité analytique a été déterminée conformément au protocole EP17-A du CLSI, Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. Pour determiner la limite du blanc (LoB), du sérum fœtal bovin (FBS) a été utilisé comme matériau source sans ST2 endogène. Conformément au protocole de détermination de la LoB, 60 répétitions d’échantillons de FBS ont été mesurées sur 4 jours, soit 15 répétitions par jour. Ensuite, la limite de détection (LoD) a été déterminée. Pour déterminer la LoD, 60 répétitions de 4 échantillons de plasma humain présentant une faible concentration en ST2 ont été mesurés par groupes de 15 répétitions, chacune pendant 4 jours consécutifs. Ensuite, la limite de quantification (LoQ) a été déduite. Pour calculer la LoQ, les mêmes mesures d’échantillon que celles utilisées pour déterminer la LoD ont été utilisées pour estimer le biais et l’imprécision. Comme la valeur de LoQ est inférieure à celle de LoD, conformément au protocole, la LoQ est définie comme étant égale à la LoD à 12,5 ng/ml.

LINÉARITÉLa performance linéaire du test a été déterminée conformément le protocole EP6-A du CLSI, Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline. Des échantillons congelés de plasma EDTA humain ont été utilisés pour produire des pools de plasma avec lesquels réaliser cette analyse. Le test ASPECT-PLUS ST2 a été conçu avec une limite linéaire supérieure de 250 ng/ml. Pour cette analyse, un pool de concentration élevée (425 ng/ml) et un pool de concentration faible (13,6 ng/ml) ont été préparés. Une série de onze (11) pools a été créée en associant plusieurs quantités de chacun des pools à concentrations élevée et faible. Chaque pool a été analysé en trois (3) répétitions. L’analyse par régression linéaire des résultats de ces pools indique que la corrélation entre les résultats prévus et les résultats mesurés sont linéaires jusqu’à 257 ng/ml, avec une valeur R2 de 0,9927 et une équation linéaire de y = 1,0x + 3,6, Figure 1.

Figure 1 : Linéarité du test ASPECT-PLUS ST2

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

Vale

urs

mes

urée

s

Taux de ST2 prévu (ng/ml)

Linéaire

EFFET DE CROCHETAucun effet jusqu’à 2 000 ng/ml.

ANALYSE DE LA CONCORDANCELe test ST2 est bien défini pour être utilisé en association avec un examen clinique, pour faciliter le pronostic des patients souffrant d’une insuffisance cardiaque ou d’un syndrome coronaire aigu (SCA), mais aussi pour déterminer le risque de développer une insuffisance cardiaque chez des individus asymptomatiques. Le test Presage® ST2 (format ELISA) est le dosage de référence du test ASPECT-PLUS ST2. Pour vérifier la concordance entre le test ASPECT-PLUS ST2 et le test Presage ST2, une analyse du plasma EDTA de 60 donneurs a été réalisée. Cette analyse a présenté une valeur R2 de 0,92. Une analyse de comparaison des méthodes par régression de Passing et Bablok a démontré que les deux techniques de dosage étaient comparables. L’équation de régression de cette analyse est y = 1,01x + 5,8 et le test des sommes cumulées de la linéarité n’indique aucun écart significatif par rapport à la linéarité (p=0,75).

POLITIQUE DE RETOUR En cas de problème avec le test ASPECT-PLUS ST2, vous pourrez être invité à retourner les cassettes inutilisées dans le sachet. Avant de renvoyer les cassettes, demandez un numéro d’autorisation de retour à votre distributeur local. Ce numéro d’autorisation de retour doit figurer sur le carton d’expédition en cas de retour.

ASSISTANCE OU INFORMATIONS COMPLÉMENTAIRES Pour commander un produit, veuillez contacter votre distributeur local ou le service à la clientèle de Critical Diagnostics en composant le +353 1 691 7061. Pour le support technique, contactez votre distributeur local ou Critical Diagnostics en composant le +353 1 691 7061 ou par e-mail à l’adresse [email protected].

BIBLIOGRAPHIE1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States population. Clin Chim

Acta. 2010 Nov 11; 411(21-22):1825-6.2. Felker GM, et al. Soluble ST2 in Ambulatory Patients with Heart Failure: Association with Functional Capacity and Long-Term

Outcomes. Circ. Heart Fail. 2013; 6: 1172-11793. Ky B, et al. High Sensitivity ST2 for Prediction of Adverse Outcomes in Chronic Heart Failure. Circ. Heart Fail. 2011

Mar;4(2):180-7.4. Kohli P, et al. Role of ST2 in Non–ST-Elevation Acute Coronary Syndrome in the MERLIN-TIMI 36 Trial. Clin Chem. 2012

Jan;58(1):257-66.5. Wang T, et al. Prognostic Utility of Novel Biomarkers of Cardiovascular Stress: The Framingham Heart Study. Circulation 2012

Sep 25;126(13):1596-604.6. Dieplinger B, et al. Long-term stability of soluble ST2 in frozen plasma samples. Clin Biochem. 2010 Sep;43(13-14):1169-1170.

M Fabricant

V Dispositif médical de diagnostic in vitro

i Consulter le mode d'emploi

D Ne pas réutiliser

h Référence du catalogue

X Contenu suffisant pour <n> tests

r Limites de température

g Code de lot/Numéro de lot

H À consommer avant (date)

F Risque biologique : Les éléments jetables présentent des risques biologiques.

Numéro de patient

C Marquage CE

Cassette de test ASPECT-PLUS ST2

Tampon de test ASPECT-PLUS ST2

Mode d’emploi

PRUEBA CUANTITATIVA DE FLUJO LATERAL ST2Lea toda la información de estas instrucciones de uso antes de realizar la prueba. Si tiene preguntas, llame al Servicio de atención de Critical Diagnostics para solicitar ayuda. (Véase la sección Asistencia).

INDICACIONES DE USO La prueba ASPECT-PLUSTM ST2 es un inmunoensayo de flujo lateral rápido para utilizar con el ASPECT ReaderTM para la determinación cuantitativa de ST2 en suero o plasma venoso anticoagulado con EDTA o heparina y está pensado para uso exclusivamente por profesionales sanitarios. La prueba se utiliza como ayuda para la estratificación del riesgo de los pacientes con insuficiencia cardíaca (IC) o síndrome coronario agudo (SCA). La prueba puede usarse también para evaluar el riesgo de desarrollar insuficiencia cardíaca en personas que, por lo demás, están asintomáticas y aparentemente sanas.

INTRODUCCIÓN Las cardiopatías son una de las principales causas de muerte a nivel mundial y afectan a millones de pacientes cada año. Por ejemplo, las cardiopatías son responsables del 25 % de todas las muertes en los Estados Unidos, un porcentaje superior al de las muertes por todas las formas de cáncer. Muchos pacientes reciben tratamiento por cardiopatía isquémica (CI) y/o síndrome coronario agudo (SCA), pero finalmente desarrollan insuficiencia cardíaca. La insuficiencia cardíaca es una enfermedad crónica y progresiva en la que se reduce la capacidad del corazón para producir el gasto cardíaco necesario, lo que deteriora la capacidad del corazón para bombear suficiente sangre para satisfacer las demandas metabólicas del cuerpo. La prevalencia de la insuficiencia cardíaca está creciendo en todo el mundo y supone una carga importante en los costes de la asistencia hospitalaria. Uno de los

ES

componentes principales de esta carga estriba en las altas tasas de hospitalización y uso de recursos de los pacientes con insuficiencia cardíaca avanzada, así como un alto riesgo de muerte.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA El ASPECT-PLUS ST2 Test es un inmunoensayo cuantitativo de flujo lateral monoclonal de fase doble. Se carga suero o plasma venoso anticoagulado con EDTA o heparina en el pocillo de muestra donde fluye a través de la tira recubierta con anticuerpo anti-ST2. Se añade tampón de ensayo al segundo pocillo. A continuación, se inserta el cartucho en el ASPECT Reader para la incubación y el lector determina cuantitativamente el ST2 y lo notifica. La determinación de un valor cuantitativo de ST2 usando el ASPECT-PLUS ST2 Test se produce mediante análisis de regresión lineal estándar a través de una curva de calibración lineal exclusiva de cada lote del ASPECT-PLUS ST2 Test que está codificado en la etiqueta RFID incluida con cada cartucho de prueba. La señal fluorescente medida en la línea de prueba se evalúa frente a la curva de calibración para calcular una concentración de ST2.

MATERIALES SUMINISTRADOS:El kit del ASPECT-PLUS ST2 Test contiene todos los reactivos necesarios para la generación de los resultados de la prueba para la medición de ST2 en una muestra de suero o plasma venoso humano anticoagulado con EDTA o heparina

El cartucho de ASPECT-PLUS ST2 Test y el vial de tampón del ASPECT-PLUS ST2 Test contienen:

Cartucho ASPECT-PLUS ST2 Test h X• Anticuerpos monoclonales murinos frente a ST2• Anticuerpos policlonales de carnero frente a IgG murina• Tinción fluorescente

Tampón ASPECT-PLUS ST2 Test h X• Estabilizadores• Excipientes

Σ=20

Σ=1

PLUS0001-01

PLUS0001-03

MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS• ASPECT Reader (REF: READ0001)• Control de calidad electrónico (CCE) (REF: EQC0001)• Controles ST2, nivel 1 y nivel 2 (REF: LQC1111)• F Contenedor de residuos resistente a perforaciones para residuos biopeligrosos y

punzantes• Temporizador• Guantes• Pipeta calibrada

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS1. Para uso diagnóstico in vitro.2. Para uso por profesionales sanitarios.3. Los resultados deben interpretarse conjuntamente con los hallazgos clínicos y los

resultados de laboratorio.4. No utilice el cartucho ASPECT-PLUS ST2 Test con ninguna otra finalidad no mencionada en

las Indicaciones de uso.5. Mantenga el cartucho ASPECT-PLUS ST2 Test en la bolsa cerrada hasta que esté listo para

su uso. Deseche después de un único uso.6. No utilizar después de la fecha de caducidad impresa en el envase.7. F Contiene material de origen animal y debe manejarse como si fuera capaz de

transmitir enfermedades infecciosas. Siga las directrices adecuadas de control de infecciones para manipular todas las muestras de sangre, las muestras de plasma con EDTA y elementos relacionados. Partes del kit que entran en contacto con la sangre o el plasma se consideran biopeligrosas y pueden transmitir enfermedades infecciosas, incluso después de la limpieza y la desinfección.

8. Contiene el principio activo (0,05 %) Proclin 300 como conservante biocida.

9. Evite el contacto de los reactivos del ensayo o la muestra con la piel, los ojos o las membranas mucosas. En caso de contacto con la piel o los ojos, lávese inmediatamente con agua.

10. Lávese las manos concienzudamente después de realizar la prueba.11. Elimine el residuo como si contuviera agentes potencialmente infecciosos y de acuerdo con

los requisitos locales.

RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS1. Utilice solo suero, plasma anticoagulado con EDTA o heparina. No se han evaluado otros

tipos de muestra, métodos de extracción o anticoagulantes. La preparación de la muestra debe realizarse tan pronto como sea posible después de recoger la muestra.

2. La muestra del paciente debe estudiarse en el plazo de 48 horas desde la recogida cuando se conserve a temperatura ambiente (18-25 ˚C). Si no se puede realizar la prueba en el plazo de 48 horas, conserve la muestra refrigerada (2-8 ˚C) durante hasta siete (7) días o congelada (< -20 ˚C) durante un máximo de 18 meses.6

Condición de almacenamiento (temperatura) Estabilidad de la muestra

20 ˚C 48 horas

4 ˚C 7 días

-20 ˚C a -80 ˚C 18 meses

3. Si la muestra debe transportarse a un laboratorio para realizar pruebas, el transporte se debe realizar a temperatura ambiente (18-25 °C) o refrigerado (2-8 °C) dentro del plazo de 48 horas después de la recogida. Evite la exposición a temperaturas > 25 °C.

NOTA: El estado de salud actual puede afectar a los resultados de la prueba y causar resultados inexactos. Es importante tener en cuenta determinados factores de salud al leer los resultados de la prueba y establecer un plan de acción. CONSERVACIÓN Y MANIPULACIÓN El ASPECT-PLUS ST2 Test es estable durante hasta 18 meses cuando se conserva en un ambiente controlado, como sigue:

Conserve los cartuchos tal como están envasados, en la bolsa de aluminio cerrada, hasta que esté listo para usarlos y hasta la fecha de caducidad impresa en el envase:• No utilice el cartucho si la bolsa de aluminio está desgarrada, pinchada o no está

completamente sellada. Deseche el cartucho y utilice otro cartucho.• Conserve los cartuchos ASPECT-PLUS ST2 Test a una temperatura de 2 °C a 8 °C

(35-46 °F). • Antes de usar los cartuchos ASPECT-PLUS ST2 Test refrigerados, deje que los cartuchos

en las bolsas de aluminio individuales alcancen la temperatura ambiente en 15 minutos antes de su uso.

• No utilizar después de la fecha de caducidad impresa en el envase.

NOTA: Utilice el cartucho en el plazo de diez (10) minutos desde el momento de la apertura de la bolsa de aluminio.

CONSIDERACIONES SOBRE EL CONTROL DE CALIDAD Cada cartucho ASPECT-PLUS ST2 Test incluye una comprobación de control interno (línea de control en el cartucho de prueba) que se procesa automáticamente con cada muestra de paciente, una solución de control líquido externo o una muestra de prueba de idoneidad para comprobar que

hay un flujo adecuado en el ASPECT-PLUS ST2 Test. Si la comprobación automática de este control integrado demuestra que el valor está dentro de un límite, el ASPECT Reader notificará un resultado para la muestra del paciente que se está analizando. Si la comprobación automática de este control integrado demuestra que el valor de control no está dentro de los límites, no se notificará un resultado de la prueba. En lugar de ello, el lector mostrará un mensaje de advertencia o error que se describe en la Guía del Usuario del ASPECT Reader.

Las Buenas Prácticas de Laboratorio indican que deben analizarse controles externos con cada nuevo lote o cada envío de materiales de prueba o cada 30 días y como exijan los procedimientos de control de calidad estándar de su laboratorio. Los controles deben analizarse de la misma manera que si se analizaran muestras de pacientes. Cuando se procesen muestras de paciente o controles externos, si una prueba falla por cualquier razón (fallo del control integrado o un control externo fuera de rango), no se comunicarán resultados del paciente.

Los usuarios deben seguir las directrices oficiales (por ejemplo, federales, estatales o locales) y/o los requisitos de acreditación para el control de calidad.

CONTROL DE CALIDAD ELECTRÓNICO (CCE) Utilice el CCE para garantizar la función adecuada del ASPECT Reader. Realice las pruebas de CCE en las siguientes condiciones: • Configuración inicial del ASPECT Reader.• Cuando se haya transportado o trasladado el ASPECT Reader.• Siempre que haya incertidumbre sobre el rendimiento del ASPECT Reader.• Siempre que sea necesario según los requisitos de control de calidad de su laboratorio. • Una vez al comienzo de cada día.

NOTA: El CCE es sensible a la luz. Conserve el CCE en la bolsa de aluminio facilitada, después de cada uso.

NOTA: El CCE está listo para realizar la prueba. No es necesaria ninguna muestra o tampón de prueba.NOTA: Véase la Guía del Usuario del ASPECT Reader para ver las instrucciones completas sobre el uso del CCE.

REALIZACIÓN DE UNA PRUEBA Lea toda la información de estas instrucciones de uso antes de realizar una prueba. • Los símbolos empleados en estas instrucciones se definen en la sección Símbolos. • Reúna los elementos necesarios (Véanse las secciones anteriores Materiales suministrados

y Materiales necesarios pero no suministrados).• Siga las directrices adecuadas de control de infecciones para manipular todas las muestras

de sangre y cualquier elemento que entre en contacto con la sangre. 1. Extraiga un cartucho ASPECT-PLUS ST2 Test de su almacenamiento refrigerado y déjelo

calentarse hasta temperatura ambiente durante 15 minutos. NO abra la bolsa de aluminio hasta que el cartucho esté a temperatura ambiente.

2. Prepare la muestra de prueba. Véase la sección Recogida y preparación de las muestras.3. En el ASPECT Reader: a. Introduzca la información adecuada para INICIAR SESIÓN y realice una

prueba. b. Desde la pantalla principal, seleccione PROCESAR PACIENTE. c. Introduzca la ID del paciente, luego seleccione PROCESAR PACIENTE.4. Extraiga el cartucho de prueba de la bolsa de aluminio.

NOTA: Debe utilizar el cartucho en el plazo de diez (10) minutos desde el momento de la apertura de la bolsa de aluminio.

5. Utilizando un micropipeteador calibrado, pipetee 35 ul de muestra del paciente en el pocillo de muestra, que es el pocillo en la posición media, en el que aparece [ ].

6. Después de 60 segundos, añada 2 gotas (~110 µl) de tampón de prueba en el pocillo del tampón de prueba, que es el pocillo situado junto al pocillo de muestra en el borde del cartucho de prueba. NO añada tampón al pocillo de la muestra. El tampón de prueba debe añadirse SOLO al pocillo de tampón del cartucho de prueba.

7. Después de 40 segundos, inserte el cartucho de prueba cargado con la muestra del paciente y el tampón de prueba.

NOTA: El cartucho de prueba debe insertarse en el lector en el plazo de 60 segundos desde el momento en que se añade el tampón. Un retraso mayor de 60 segundos después de la adición del tampón de prueba puede conducir a resultados inexactos.

8. Cierre el cajón del lector y el lector iniciará el análisis. 9. Los resultados se mostrarán en la pantalla en aproximadamente 20 minutos.

NOTA: Véase la Guía del Usuario del ASPECT Reader para ver las instrucciones completas sobre cómo realizar la prueba.F Elimine todos los elementos que hayan entrado en contacto con la muestra. Asegúrese de seguir las directrices adecuadas para el control de infecciones.

RESULTADOS DE LA LECTURA El ASPECT Reader mide automáticamente el ST2. El resultado se muestra en la pantalla. El operador tiene la opción de imprimir los resultados. Un valor en ng/ml representa la concentración de ST2 en la muestra.

NOTA: Los niveles de ST2 menores de 12,5 ng/ml o mayores de 250 ng/ml se informarán como <12,5 ng/ml y >250 ng/ml.

Para más información, consulte la Guía del Usuario del ASPECT Reader.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS • En personas que se declaran sanas, pacientes normales, los valores intercuartil para ST2

son 15 a 25 ng/ml.• Una concentración de 35 ng/ml está entre el percentil 90 y el 95 de la población normal.1 • En pacientes diagnosticados con SCA o IC y que tienen concentraciones de ST2 ≥35 ng/ml,

el riesgo de acontecimientos adversos como hospitalización o mortalidad en un (1) año es mayor que en los pacientes con concentraciones de ST2 por debajo de este nivel. El riesgo de mortalidad aumenta al aumentar las concentraciones de ST2.2,3,4

• En personas asintomáticas y aparentemente sanas, se ha demostrado que una concentración elevada de ST2 es indicativa de un aumento a más del doble del riesgo de desarrollar insuficiencia cardíaca.5

• Aunque puede usarse un resultado negativo de ST2, <35 ng/ml, en pacientes con IC o SCA para clasificar a los pacientes e individuos en una categoría de bajo riesgo de acontecimientos adversos como rehospitalización o muerte, debe seguirse un tratamiento clínicamente adecuado.

• Los resultados de ST2 deben usarse junto con otra información clínica y diagnóstica para establecer un diagnóstico e instaurar un tratamiento.

ESTANDARIZACIÓN Los resultados de concentración del cartucho ASPECT-PLUS ST2 Test son rastreables hasta soluciones patrón de referencia que contienen una concentración definida de la proteína ST2. El cartucho ASPECT-PLUS ST2 Test y los controles ST2 son rastreables a las mismas soluciones patrón de referencia.

LIMITACIONES1. Las pruebas en los estudios se han limitado a personas de 18 años o más.

2. La prueba está validada con muestras de suero y muestras de plasma venoso anticoaguladas con EDTA y heparina.

3. La presencia de anticuerpo humano antirratón (HAMA) puede producir una concentración ST2 falsamente baja.

4. Existe la posibilidad de que los factores como los errores técnicos o de procedimiento, además de sustancias adicionales en las muestras de sangre no enumeradas a continuación, puedan interferir con la prueba y causar resultados erróneos.

SUSTANCIAS INTERFERENTES Los siguientes analitos se estudiaron por separado y no interfieren con los resultados esperados hasta las concentraciones que se muestran:

Sustancia Concentración

Bilirrubina 0,1 mg/ml – 0,3 mg/ml

Colesterol (Total) 1,5 mg/ml – 5 mg/ml

Hemoglobina 1 mg/ml – 2 mg/ml

Proteína (BSA) 15 mg/ml – 60 mg/ml

Triglicéridos/lípidos (total) 1,5 mg/ml – 30 mg/ml

Se estudiaron por separado los siguientes fármacos y no interfieren con los resultados esperados de la prueba cuando se añadieron a plasma con EDTA: paracetamol, ácido acetilsalicílico, alopurinol, ambroxol, amiodarona, besilato de amlodipino, ampicilina, ácido ascórbico, atenolol, bivalirrudina, cafeína, captopril, cloranfenicol, cinnarizina, ciclosporina A, digitoxina, digoxina, diltiazem, dopamina,

dipiridamol, maleato de enalapril, eplerenona, eritromicina, fluvastatina, furosemida, gliburida, heparina sódica, clorhidrato de hidralazina, hidroclorotiazida, indometacina, lisinopril, nicotina, nifedipino, nitrofurantoína, oxitetraciclina, fenitoína, pravastatina sódica, probenecid, clorhidrato de procainamida, clorhidrato de (S)-(-)-propranolol, quinidina, simvastatina, espironolactona, sulfametoxazol, teofilina, L-tiroxina, trimetoprim, clorhidrato de verapamilo y warfarina.

Se estudió la especificidad frente al receptor soluble humano de la interleucina-1 de tipo I (IL-1 sR-1), IL-I α recombinante humana e IL-Iβ recombinante humana. Ninguna de las tres moléculas estudiadas, incluso a una concentración de hasta 5 veces la concentración medida de ST2, mostró reactividad cruzada medible.

CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO PRECISIÓNSe determinó la precisión del ensayo según el documento CLSI EP5-A2, Evaluación del rendimiento de precisión de métodos de medición cuantitativos; Directriz Aprobada - Segunda Edición (Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline—Second Edition). Se usaron tres muestras de prueba, muestra de plasma con EDTA junto con los dos (2) controles de ST2 para esta evaluación. Se calcularon la precisión intraensayo, interensayos y total para cada muestra estudiada. Los resultados de precisión se resumen en la Tabla 1. El ensayo cumple criterios aceptables de rendimiento analítico, mostrando un promedio de CV del 10,4 % para la variación intraensayo y 13,6 % para la variación interensayo y no muestra ningún sesgo de precisión a lo largo del rango de concentración estudiado. El rendimiento de precisión se validó a través de pruebas en distintos laboratorios siguiendo el documento CLSI EP15-A3, Verificación por el usuario de la precisión y estimación del sesgo (User Verification of Precision and Estimation of Bias). Las mediciones se realizaron en cuatro (4) laboratorios una vez al día con tres (3) réplicas de dos muestras (plasma), cada una con dos (2) concentraciones y ambos niveles de controles de líquido diariamente durante cinco (5) días. Estas pruebas no mostraron diferencia significativa respecto a los valores resumidos en la Tabla 1.

Tabla 1: Resumen del análisis de precisión

Nivel de ST2 CV intraensayo CV interensayos CV total

Bajo (20 ng/ml) 15,4 % 16,3 % 22,4 %

Clínico (32 ng/ml) 4,9 % 13,3 % 14,2 %

Elevado (81 ng/ml) 10,8 % 11,1 % 15,5 %

SENSIBILIDAD ANALÍTICALa sensibilidad analítica se determinó mediante el protocolo del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) EP17-A, Protocolos para la Determinación de Límites de Detección y Límites de Cuantificación; Directriz Aprobada (Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline). Para determinar el límite de blanco (LdB), se usó suero bovino fetal (SBF) como fuente de material sin ST2 endógeno. De acuerdo con el protocolo de determinación del LdB, se midió un conjunto de 60 réplicas de muestras de SBF a lo largo de 4 días, con 15 réplicas al día. Después de la determinación del LdB, se comprobó el límite de detección (LdD). Para determinar el LdD, se midieron 60 réplicas de 4 diferentes muestras de plasma humanas de concentración baja de ST2 en conjuntos de 15 réplicas, cada una a lo largo de 4 días consecutivos. Después de la determinación del LdD, se comprobó el límite de cuantificación (LdC). Para calcular el LdC, se usaron las mediciones de las mismas muestras para la determinación del LdD, para estimar el sesgo y la imprecisión. Como el valor del LdC es menor que el valor del LdD, según el protocolo, el LdC se definirá como igual al LdD de 12,5 ng/ml.

LINEALIDADEl rendimiento lineal del ensayo se determinó según el protocolo del CLSI EP6-A, Evaluación de la Linealidad de los Procedimientos de Medición Cuantitativos: Enfoque Estadístico - Directriz Aprobada

(Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline). Se usaron muestras de plasma humano con EDTA congeladas para producir mezclas de plasma con las que realizar este análisis. El ASPECT-PLUS ST2 Test se ha diseñado con un límite lineal superior de 250 ng/ml. Para este análisis, se preparó una mezcla con concentración elevada, de 425 ng/ml y una mezcla de concentración baja, de 13,6 ng/ml. Se creó una serie de once (11) mezclas combinando diferentes cantidades de cada una de las mezclas de reserva con concentraciones altas y bajas. Cada mezcla se midió en réplicas de seis (3). El análisis de regresión lineal de los resultados de estas mezclas muestra que la correlación entre los resultados predichos y medidos es lineal hasta 257 ng/ml con un valor de R2 de 0,9927 y una ecuación lineal de y = 1,0x + 3,6, Figura 1.

Figura 1: Linealidad del ASPECT-PLUS ST2 Test

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

Valo

res

med

idos

ST2 esperado (ng/ml)

Lineal

EFECTO GANCHONo hubo efecto hasta 2000 ng/ml.

ANÁLISIS DE CONCORDANCIAST2 está bien establecido para uso conjuntamente con la evaluación clínica como ayuda para evaluar el pronóstico de pacientes diagnosticados de insuficiencia cardíaca crónica o síndrome coronario agudo (SCA), así como para la determinación del riesgo de desarrollar insuficiencia cardíaca en personas asintomáticas. El ensayo de Presage® ST2 (formato ELISA) es el ensayo de referencia para el ASPECT-PLUS ST2 Test. Para comprobar la concordancia del ASPECT-PLUS ST2 Test con el ensayo Presage ST2, se realizó un análisis de plasma con EDTA de 60 donantes. Este análisis mostró un valor de R2 de 0,92 y el análisis de comparación de métodos mediante regresión de Passing-Bablok demostró que las dos técnicas de ensayo son comparables. La ecuación de regresión para este análisis es y = 1,01x + 5,8 y la prueba de Cusum para linealidad no muestra desviación significativa respecto a la linealidad (p=0,75).

POLÍTICA DE DEVOLUCIONES Si hay un problema con el ASPECT-PLUS ST2 Test, es posible que se le pida que devuelva los cartuchos no utilizados en la bolsa de aluminio. Antes de devolver los cartuchos, obtenga un número de autorización de devolución de su distribuidor local. Este número de autorización de devolución debe aparecer en la caja de envío para la devolución.

ASISTENCIA O INFORMACIÓN ADICIONAL Para pedir un producto, póngase en contacto con su distribuidor local o con el Servicio de Atención al Cliente de Critical Diagnostics en el +353 1 691 7061. Para asistencia técnica, póngase en contacto con su distribuidor local o con Critical Diagnostics en el +353 1 691 7061 o envíe un correo electrónico a [email protected].

BIBLIOGRAFÍA1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States population. Clin Chim Acta.





M Fabricante

V Dispositivo médico para diagnóstico in vitro

i Consulte las instrucciones de uso

D No reutilizar

h Número de catálogo

X Contiene cantidad suficiente para <n> pruebas

r Limitación de temperatura

g Código / número de lote

H Utilizar antes de (fecha)

F Riesgo biológico: Los elementos desechables implican riesgos biológicos.

Número de paciente

C Marca CE

Cartucho ASPECT-PLUS ST2 Test

Tampón ASPECT-PLUS ST2 Test

Instrucciones de uso

KVANTITATIVT LATERALT FLÖDE ST2-TESTLäs all information i denna bruksanvisning för fullständiga anvisningar innan du utför testet. Om du har frågor, kontakta Critical Diagnostics produktsupport för hjälp. (Se avsnittet Hjälp.)

BRUKSANVISNING ASPECT-PLUSTM ST2-testet är en snabb immunanalys med lateralt flöde för användning med ASPECT ReaderTM för kvantitativ bestämning av ST2 i serum, venös EDTA- eller heparin-antikoagulerad plasma och är endast avsedd att användas av sjukvårdspersonal. Testet används som ett hjälpmedel för riskstratifiering av patienter med hjärtsvikt (HF) eller akut kranskärlssyndrom (ACS). Testet kan även användas för att utvärdera risken för att utveckla hjärtsvikt hos individer som annars är asymtomatiska och synbart friska.

INLEDNING Hjärtsjukdom är en av de främsta orsakerna till dödsfall i hela världen som påverkar miljontals patienter varje år. Hjärtsjukdomar svarar för 25 procent av alla dödsfall i USA, fler än alla former av cancer sammanlagt. Många patienter behandlas för kranskärlssjukdom (CAD) och/eller akut kranskärlssyndrom (ACS) men utvecklar slutligen hjärtsvikt. Hjärtsvikt är en kronisk och progressiv sjukdom där hjärtats förmåga att ge nödvändig hjärtminutvolym försvagas vilket därigenom hindrar hjärtats förmåga att pumpa tillräckligt med blod för att stödja kroppens metaboliska behov. Förekomsten av hjärtsvikt ökar i hela världen och orsakar en stor del av kostnaderna för sjukhusvård. En viktig del av denna börda är det faktum att patienter som lider av avancerad hjärtsvikt ofta tas in på sjukhus och därvid utnyttjar resurser, samtidigt som de har en hög dödsrisk.

SV

TESTPRINCIP ASPECT-PLUS ST2-testet är en kvantitativ monoklonal ”sandwich”-immunanalys med lateralt flöde. Serum, venös EDTA- eller heparin-antikoagulerad plasma placeras i provbrunnen placeras i provbrunnen där den flödar genom den anti-ST2-antikroppsbelagda remsan. Analysbuffert tillsätts i den andra brunnen. Kassetten förs sedan in i ASPECT Reader för inkubation och ST2 bestäms kvantitativt och rapporteras av läsaren. Bestämning av ett kvantitativt ST2-värde med ASPECT-PLUS ST2-testet utförs genom standardmässig linjär regressionsanalys med en linjär kalibreringskurva som är unik för varje parti av ASPECT-PLUS ST2-testet och som är kodat på RFID-brickan som medföljer varje testkassett. Fluorescenssignalen som mäts på testlinjen utvärderas mot kalibreringskurvan för beräkning av en ST2-koncentration.

MEDFÖLJANDE MATERIAL:ASPECT-PLUS ST2-testsatsen innehåller alla reagenser som krävs för generering av testresultat för mätning av ST2 i prov med serum, venös EDTA- eller heparin-antikoagulerad plasma från människa.

ASPECT-PLUS ST2-testkassetten och ASPECT-PLUS ST2-testbuffertflaska innehåller:

ASPECT-PLUS ST2-testkassett h X• Monoklonala musantikroppar mot ST2• Polyklonala getantikroppar mot mus-IgG• Fluorescensfärgämne

ASPECT-PLUS ST2-testbuffert h X• Stabiliserande medel• Hjälpämnen

NÖDVÄNDIGT MATERIAL SOM INTE MEDFÖLJER• ASPECT Reader (REF: READ0001)• Elektronisk kvalitetskontroll (EQC) (REF: EQC0001)

Σ=20

Σ=1

PLUS0001-01

PLUS0001-03

• ST2-kontroller, nivå 1 och nivå 2 (REF: LQC1111)• F Punkteringssäker avfallsbehållare för biofarligt avfall och vassa föremål• Tidtagare• Skyddshandskar• Kalibrerad pipett

FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER OCH VARNINGAR1. För in vitro-diagnostik.2. För användning av sjukvårdspersonal.3. Resultat ska tolkas tillsammans med kliniska resultat och andra laboratorieresultat.4. Använd inte ASPECT-PLUS ST2-testkassetten på några andra sätt än det som identifieras

i avsnittet Indikationer.5. Förvara ASPECT-PLUS ST2-testkassetten i den förseglade påsen tills den ska användas.

Kassera efter engångsbruk.6. Använd inte efter utgångsdatum som anges på förpackningen.7. F Innehåller material av animaliskt ursprung och ska hanteras som om det kan

överföra smittsam sjukdom. Följ lämpliga riktlinjer för infektionskontroll för hantering av alla blodprover, EDTA-plasmaprover och relaterat material. Delar av satsen som kommer i kontakt med blod eller plasma anses som biofarliga och kan möjligtvis överföra smittsamma sjukdomar, även efter att du har genomfört rengöring och desinfektion.

8. Innehåller den aktiva substansen (0,05 %) Proclin 300 som bakteriedödande konserveringsmedel.

9. Undvik att analysreagenser eller prover kommer i kontakt med hud, ögon eller slemhinnor. Spola omedelbart med vatten vid kontakt med hud eller ögon.

10. Tvätta händerna noga efter slutförande av testet.11. Kassera avfall som potentiellt smittsamma ämnen och i enlighet med lokala bestämmelser.

PROVTAGNING OCH PREPARATION1. Använd endast serum och venös EDTA- eller heparinantikoagulerad plasma. Andra

provtyper, provtagningsmetoder eller antikoagulanter har inte utvärderats. Preparation av prov bör utföras så snart som möjligt efter provtagning.

2. Patientprovet måste testas inom 48 timmar efter provtagning när provet förvaras i rumstemperatur (18–25 °C). Om ett test inte kan utföras inom 48 timmar ska provet förvaras i kylskåp (2–8 °C) upp till sju (7) dagar eller förvaras fryst (under –20 °C) i maximalt 18 månader6

Förvaringsförhållande (temperatur) Provhållbarhet

20 ˚C 48 timmar

4 ˚C 7 dagar

-20 ˚C och -80 ˚C 18 månader

3. Om provet måste transporteras till ett laboratorium för test ska det transporteras i rumstemperatur (18–25 °C) eller kylt (2–8 °C) inom 48 timmar efter provtagning. Undvik exponering för temperaturer > 25 °C.

OBS! Aktuellt hälsotillstånd kan påverka testresultat eller orsaka felaktiga resultat. Det är viktigt att ta hänsyn till vissa hälsofaktorer vid avläsning av testresultat och bestämning av vidare åtgärder. FÖRVARING OCH HANTERING ASPECT-PLUS ST2-testet är stabilt upp till 18 månader vid förvaring i en kontrollerad miljö enligt följande:

Förvara kassetterna förpackade i den förseglade foliepåsen fram till användning och tills utgångsdatumet som anges på förpackningen:• Använd inte kassetten om foliepåsen är trasig, punkterad eller inte förseglad ordentligt.

Kassera kassetten och använd en annan kassett.• Förvara ASPECT-PLUS ST2-testkassetterna i 2 °C till 8 °C. • Innan de kylda ASPECT-PLUS ST2-testkassetterna används ska kassetterna i individuella

foliepåsar få anta rumstemperatur i 15 minuter före användning.• Använd inte efter utgångsdatum som anges på förpackningen.

OBS! Använd kassetten inom tio (10) minuter efter öppnande av foliepåsen.

ÖVERVÄGANDEN FÖR KVALITETSKONTROLL Varje ASPECT-PLUS ST2-testkassett omfattar en intern kontroll (kontrollinje på testkassett) som körs automatiskt med varje patientprov, extern flytande kontrollösning eller färdighetstestprov för att kontrollera att det föreligger lämpligt flöde i ASPECT-PLUS ST2-testkassetten. Om den automatiska kontrollen av denna inbyggda kontroll visar att det ligger inom en gräns kommer ASPECT Reader att rapportera ett resultat för det testade provet. Om den automatiska kontrollen av denna inbyggda kontroll visar att det inte ligger inom gränserna kommer ett testresultat inte att rapporteras. I stället kommer läsaren att visa ett varnings- eller felmeddelande som beskrivs i användarhandboken för ASPECT Reader.

God laboratoriesed anger att externa kontroller ska testas med varje nytt parti eller ny leverans av testmaterial, eller var 30:e dag, och när så krävs i laboratoriets standardrutiner för kvalitetskontroll. Kontroller ska testas på samma sätt som test av patientprover. När patientprover eller externa kontroller körs kommer inga patientresultat att rapporteras om ett test misslyckas av något skäl (fel på inbyggd kontroll eller en extern kontroll som ligger utanför intervallet).

Användare ska följa till exempel statliga eller lokala riktlinjer och/eller ackrediteringskrav för kvalitetskontroll.

ELEKTRONISK KVALITETSKONTROLL (EQC) Använd EQC för att säkerställa att ASPECT Reader fungerar korrekt. Utför EQC-test för följande förhållanden: • Initial inställning av ASPECT Reader.• När ASPECT Reader har transporterats eller flyttats.• När det föreligger osäkerhet om prestandan för ASPECT Reader.• När så krävs av laboratoriets krav på kvalitetskontroll. • En gång i början av varje dag.

OBS! EQC är ljuskänslig. Förvara EQC i den medföljande foliepåsen efter varje användning.OBS! EQC är bruksfärdig. Inget prov eller ingen testbuffert krävs.OBS! Se användarhandboken för ASPECT Reader för fullständiga anvisningar om användning av EQC.

UTFÖR ETT TEST Läs all information i denna bruksanvisning innan du utför ett test. • Symboler som används i dessa anvisningar definieras i avsnittet Symboler. • Samla ihop föremålen som krävs (se avsnitten Medföljande material och Nödvändigt

material som inte medföljer ovan).• Följ lämpliga riktlinjer för infektionskontroll för hantering av alla blodprover och allt som

kommer i kontakt med blod. 1. Ta ut en ASPECT-PLUS ST2-testkassett från kylskåpet och värm till rumstemperatur i

15 minuter. Öppna INTE foliepåsen förrän kassetten har antagit rumstemperatur.2. Bered testprovet. Se avsnittet Provtagning och beredning.

3. På ASPECT Reader: a. Ange lämplig information för INLOGGNING och utföra ett test. b. Välj KÖR PATIENT från huvudskärmen. c. Ange Patient-ID och välj sedan KÖR PATIENT.4. Ta ut testkassetten från foliepåsen.

OBS! Du måste använda kassetten inom 10 minuter efter öppnande av foliepåsen.

5. Använd en kalibrerad mikropipett och pipettera 35 µl patientprov i provbrunnen som är brunnen i mitten med [ ].

6. Efter 60 sekunder ska du tillsätta 2 droppar (~110 µl) testbuffert i testbuffertbrunnen som är brunnen bredvid provbrunnen på kanten av testkassetten. Tillsätt INTE buffert i provbrunnen. Testbuffert måste tillsättas ENDAST i buffertbrunnen på testkassetten.

7. Efter 40 sekunder, för in testkassetten med patientprovet och testbuffert.

OBS! Testkassetten måste föras in i läsaren inom 60 sekunder från tillsättning av buffert. En fördröjning längre än 60 sekunder efter tillsättning av testbuffert kan leda till inkorrekta resultat.

8. Stäng läsarens lucka, varefter läsaren initierar analysen. 9. Resultat visas på skärmen efter cirka 20 minuter.

OBS! Se användarhandboken för ASPECT Reader för fullständiga anvisningar om hur testet ska utföras.F Kassera alla artiklar som har kommit i kontakt med prov. Se till att följa lämpliga riktlinjer för infektionskontroll.

AVLÄSNING AV RESULTAT ASPECT Reader mäter ST2 automatiskt. Resultatet visas på skärmen. Operatören har alternativet att skriva ut resultaten. Ett värde i ng/ml anger koncentrationen av ST2 i provet.

OBS! ST2-nivåer lägre än 12,5 ng/ml eller högre än 250 ng/ml rapporteras som <12,5 ng/ml och >250 ng/ml.Se användarhandboken för ASPECT Reader för ytterligare information.

TOLKNING AV RESULTAT • Hos individer som själva anser sig vara friska, genomsnittliga patienter, är

interkvartilvärdena 15 till 25 ng/ml för ST2.• En koncentration på 35 ng/ml ligger mellan den 90:e och 95:e percentilen av

normalpopulationen.1 • Hos patienter diagnostiserade med ACS eller HF och som har ST2-koncentrationer

≥35 ng/ml är risken för oönskade händelser såsom sjukhusinläggning eller mortalitet inom ett (1) år högre än för patienter med ST2-koncentrationer under denna nivå. Mortalitetsrisken ökar med stigande koncentrationer av ST2.2,3,4

• Hos asymtomatiska och synbart friska individer har en förhöjd ST2-koncentration visat sig medföra en mer än dubbelt ökad risk för att utveckla hjärtsvikt.5

• Kliniskt lämplig behandling ska eftersträvas även om ett negativt ST2-resultat, <35 ng/ml, hos patienter med HF eller ACS kan användas för att klassificera patienter och individer som att ha låg risk för oönskade händelser såsom sjukhusinläggning på nytt eller dödsfall.

• ST2-resultat ska användas tillsammans med annan klinisk och diagnostisk information för att ställa en diagnos och hantera patienter.

STANDARDISERING Koncentrationsresultat för ASPECT-PLUS ST2-testkassetten är spårbara till referensstandardlösningar som innehåller definierad koncentration av ST2-protein. ASPECT-PLUS ST2-testkassetten och ST2-kontroller är spårbara till samma referensstandardlösningar.

BEGRÄNSNINGAR1. Testning i studier har begränsats till personer från och med 18 års ålder.2. Endast validerad med serum och venösa EDTA- och heparinantikoagulerade plasmaprover.3. Förekomsten av human anti-musantikropp (HAMA) kan ge falskt låg ST2-koncentration.4. Det finns en risk för att faktorer såsom tekniska fel eller procedurfel samt ytterligare

ämnen i blodprover, som inte anges nedan, kan interferera med testet och orsaka felaktiga resultat.

STÖRANDE ÄMNEN Följande analyter testades separat och interfererar inte med de förväntade resultaten upp till koncentrationerna som anges:

Ämne Koncentration

Bilirubin 0,1 mg/ml – 0,3 mg/ml

Kolesterol (totalt) 1,5 mg/ml – 5 mg/ml

Hemoglobin 1 mg/ml – 2 mg/ml

Protein (BSA) 15 mg/ml – 60 mg/ml

Triglycerider/lipider (totalt) 1,5 mg/ml – 30 mg/ml

Följande ämnen testades separat och interfererar inte med de förväntade testresultaten när de tillsätts i EDTA-plasma: acetaminofen, acetylsalicylsyra, allopurinol, ambroxol, amidoadron, amlodipinbesylat, ampicillin, askorbinsyra, atenolol, bivalirudin, koffein, kaptopril, kloramfenikol, cinnarizin, cyklosporin A, digitoxin, digoxin, diltiazem, dopamin, dipyridamol, enalaprilmaleat,

eplerenon, erytromycin, fluvastatin, furosemid, glyburid, heparinnatrium, hydralazinhydroklorid, hydroklorotiazid, indometacin, lisinopril, nikotin, nifedipin, nitrofurantoin, oxytetracyklin, fenytoin, pravastatinnatrium, probenecid, prokainamidhydroklorid, (S)-(-)-propranololhydroklorid, kinidin, simvastatin, spironolakton, sulfametoxazol, teofyllin, L-tyroxin, trimetoprim, verapamilhydroklorid och warfarin.

Specificitet testades mot human interleukin-1-löslig receptor typ I (IL-1 sR-1), rekombinant human IL-Iα och rekombinant human IL-Iβ. Ingen av de tre testade molekylerna uppvisade mätbar korsreaktivitet, även vid en koncentration så hög som 5 x den uppmätta ST2-koncentrationen.

PRESTANDAKARAKTERISTIKA PRECISIONAnalysprecision bestämdes enligt CLSI EP5-A2, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline – Second Edition. Tre testprover, EDTA-plasmaprov tillsammans med de två (2) ST2-kontrollerna, användes för denna utvärdering. Precision inom analyser, mellan analyser och totalt beräknades för varje testat prov. Precisionsresultaten sammanfattas i tabell 1. Analysen uppfyller kriterier för acceptabel analytisk prestanda och uppvisar en genomsnittlig variationskoefficient på 10,4 % för variation inom analyser och 13,6 % för variation mellan analyser och uppvisar inget precisionsfel inom det testade koncentrationsintervallet. Precisionsprestandan validerades genom testning ”mellan laboratorier” enligt CLSI EP15-A3, User Verification of Precision and Estimation of Bias. Mätningar utfördes vid fyra (4) laboratorier en gång om dagen med tre (3) replikat av två prover (plasma) vid vardera av två (2) koncentrationer och båda nivåerna av flytande kontroller varje dag under fem (5) dagar. Denna testning påvisade ingen betydande skillnad från värdena som sammanfattas i tabell 1.

Tabell 1: Sammanfattning av precisionsanalys

ST2-nivå CV inom analyser CV mellan analyser Total CV

Låg (20 ng/mL) 15,4% 16,3% 22,4%

Klinisk (32 ng/mL) 4,9% 13,3% 14,2%

Förhöjd (81 ng/mL) 10,8% 11,1% 15,5%

ANALYTISK SENSITIVITETAnalytisk sensitivitet bestämdes enligt protokoll från Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) EP17-A, Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. För att bestämma blankprovsgränsen (LoB) används fetalt bovint serum (FBS) som materialkälla utan endogent ST2. I enlighet med protokollet för bestämning av LoB mättes en uppsättning av 60 replikat av FBS-prover under 4 dagar med 15 replikat per dag. Efter bestämning av LoB fastställdes detektionsgränsen (LoD). För att bestämma LoD mättes 60 replikat av 4 olika humanplasmaprover med låg ST2-koncentration i uppsättningar av 15 replikat vardera under 4 dagar i följd. Efter bestämning av LoD härleddes kvantifieringsgränsen (LoQ). För att beräkna LoQ användes samma provmätningar som för bestämning av LoD för att uppskatta systematiskt fel och avsaknad av precision. Eftersom LoQ-värdet är lägre än LoD-värdet kommer därför LoQ att definieras, enligt protokollet, som densamma som LoD vid 12,5 ng/ml.

LINJÄRITETAnalysens linjära prestanda bestämdes enligt CLSI-protokoll EP6-A, Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline. Frysta humana EDTA-plasmaprover användes för att framställa plasmapooler för att utföra denna analys. ASPECT-PLUS ST2-testet har utformats med en övre linjär gräns på 250 ng/ml. För denna analys

bereddes en pool med hög koncentration vid en koncentration på 425 ng/ml och en pool med låg koncentration vid en koncentration på 13,6 ng/ml. En serie av elva (11) pooler skapades genom att kombinera olika mängder av varje stampool med hög och låg koncentration tillsammans. Varje pool mättes i replikat av tre (3). Linjär regressionsanalys av resultaten från dessa pooler påvisar att korrelationen mellan de förväntade och uppmätta resultaten är linjär upp till 257 ng/ml med ett R2

-värde på 0,9927 och en linjär ekvation på y = 1,0x + 3,6, bild 1.

Bild 1: Linjäritet för ASPECT-PLUS ST2-test

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

Upp

mä!

a vä

rden

Förväntat ST2 (ng/ml)

Linjär

HOOK-EFFEKTIngen effekt upp till 2 000 ng/ml.

ÖVERENSSTÄMMELSEANALYSST2 är väletablerat för användning tillsammans med klinisk utvärdering som ett hjälpmedel för att uppskatta prognosen för patienter diagnostiserade med kronisk hjärtsvikt eller akut

kranskärlssyndrom (ACS) samt bestämning av risken för att utveckla hjärtsvikt hos asymtomatiska individer. Presage® ST2-analysen (ELISA-format) är referensanalysen för ASPECT-PLUS ST2-testet. För att bekräfta överensstämmelse av ASPECT-PLUS ST2-testet med Presage ST2-analysen utfördes en analys av EDTA-plasma från 60 givare. Denna analys påvisade ett R2-värde på 0,92 och metodjämförelseanalys genom Passing-Bablok-regression påvisade att de två analysteknikerna är jämförbara. Regressionsekvationen för denna analys är y = 1,01x + 5,8 och CUSUM-testet för linjäritet påvisar ingen betydande avvikelse från linjäritet (p = 0,75).

RETURPOLICY Om det föreligger ett problem med ASPECT-PLUS ST2-testet kan du bli ombedd att skicka tillbaka oanvända kassetter i foliepåsen. Se till att du erhåller ett returauktoriseringsnummer från din lokala distributör innan du skickar tillbaka kassetter. Detta returauktoriseringsnummer måste placeras på transportkartongen för retur.

HJÄLP ELLER KOMPLETTERANDE INFORMATION För att beställa produkt ska du kontakta din lokala distributör eller Critical Diagnostics kundservice på +353 1 691 7061 För teknisk support, ska du kontakta din lokala distributör eller Critical Diagnostics på +353 1 691 7061 eller skicka e-post, [email protected].

REFERENSER1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States population. Clin Chim Acta.





M Tillverkare

V Medicinsk utrustning för in vitro-diagnostik

i Se bruksanvisning

D Återanvänd inte

h Katalognummer

X Innehåller tillräckligt för <n> tester

r Temperaturbegränsning

g Satskod/partinummer

H Använd före (datum)

F Biologisk risk: Kasserade artiklar utgör en biologisk risk.

Patientnummer

C CE-märkning

ASPECT-PLUS ST2-testkassett

ASPECT-PLUS ST2-testbuffert

Bruksanvisning

ILOŚCIOWY TEST PRZEPŁYWU BOCZNEGO ST2Przed przystąpieniem do wykonania testu należy przeczytać wszystkie informacje podane w niniejszej instrukcji obsługi. W razie pytań należy zadzwonić do działu pomocy technicznej firmy Critical Diagnostics. (patrz punkt „Pomoc”).

WSKAZANIA DO STOSOWANIA Test ASPECT-PLUSTM ST2 to szybki immunologiczny test przepływu bocznego, przeznaczony do stosowania z czytnikiem ASPECT ReaderTM do ilościowego oznaczania białka ST2 w surowicy, osoczu krwi żylnej pobranej na EDTA lub antykoagulowanej heparyną i użytkowania wyłącznie przez pracowników służby zdrowia. Test ten jest wykorzystywany jako pomoc w przypadku stratyfikacji ryzyka u pacjentów z niewydolnością serca (NS) lub ostrym zespołem wieńcowym (OZW). Testu tego można także użyć w celu oceny ryzyka rozwoju niewydolności serca u osób, u których nie występują żadne objawy i które są widocznie zdrowe.

WSTĘP Choroby serca to główna przyczyna zgonów na świecie, która każdego roku powoduje śmierć milionów pacjentów. Choroby serca odpowiadają na przykład za 25% zgonów w całych USA, tj. więcej niż wszystkie postacie raka. Wielu pacjentów leczonych jest w związku z chorobą wieńcową (CAD) i/lub ostrym zespołem wieńcowym (OZW), ale ostatecznie rozwija się u nich niewydolność serca. Niewydolność serca to przewlekła, postępująca choroba, w przypadku której zdolność serca do dostarczania pożądanego rzutu serca ulega osłabieniu, co ogranicza zdolność tego narządu do pompowania

PL

krwi w ilości wystarczającej do zaspokojenia potrzeb metabolicznych organizmu. Chorobowość niewydolności serca na świecie wzrasta i stanowi główny składnik dla kosztów hospitalizacji. Główną składową tego obciążenia jest fakt, że pacjenci z zaawansowaną niewydolnością serca charakteryzują się wysokimi odsetkami hospitalizacji i wykorzystania zasobów, a także wysokim ryzykiem zgonu.

ZASADA TESTU Test ASPECT-PLUS ST2 to ilościowy immunologiczny test przepływu bocznego typu sandwich z wykorzystaniem przeciwciała monoklonalnego. Surowica, osocze krwi żylnej pobranej na EDTA lub antykoagulowanej heparyną umieszczane jest w studzience próbki, skąd przepływa przez pasek pokryty przeciwciałem anty-ST2. Do drugiej studzienki dodawany jest bufor testowy. Kaseta jest następnie wprowadzana do czytnika ASPECT Reader w celu inkubacji, a białko ST2 jest oznaczane ilościowo z wyświetleniem wartości przez czytnik. Wartość ilościowego oznaczenia białka ST2 z wykorzystaniem testu ASPECT-PLUS ST2 generowana jest za pomocą standardowej analizy regresji liniowej i liniowej krzywej kalibracyjnej specyficznej dla każdej partii testu ASPECT-PLUS ST2, która zakodowana jest na etykiecie RFID dołączonej do każdej kasety testowej. Sygnał fluorescencyjny na linii testowej oceniany jest w porównaniu do krzywej kalibracyjnej w celu obliczenia stężenia białka ST2.

MATERIAŁY DOSTARCZANEZestaw testowy ASPECT-PLUS ST2 zawiera wszystkie odczynniki niezbędne do wygenerowania wyników dla pomiaru białka ST2 w próbce surowicy, osocza krwi żylnej pobranej na EDTA lub antykoagulowanej heparyną.

Kaseta testowa ASPECT-PLUS ST2 i fiolka bufora testowego ASPECT-PLUS ST2 zawierają:

Kaseta testowa ASPECT-PLUS ST2 h X• Mysie przeciwciała monoklonalne przeciwko ST2• Kozie przeciwciała poliklonalne przeciwko mysim IgG• Barwnik fluorescencyjny

Bufor testowy ASPECT-PLUS ST2 h X• Stabilizatory• Substancje pomocnicze

MATERIAŁY WYMAGANE, NIEDOSTARCZANE• Czytnik ASPECT Reader (nr kat.: READ0001)• Elektroniczna kontrola jakości (EQC) (nr kat.: EQC0001)• Kontrole ST2, poziom 1 i poziom 2 (nr kat.: LQC1111)• F Odporny na przebicie pojemnik na odpady stanowiące zagrożenie

biologiczne i odpady ostre• Zegar• Rękawiczki• Wykalibrowana pipeta

OSTRZEŻENIA I ŚRODKI OSTROŻNOŚCI1. Do diagnostyki in vitro.2. Do użytku profesjonalnego.3. Wyniki należy interpretować z uwzględnieniem danych klinicznych oraz

wyników innych badań laboratoryjnych.4. Kasety testowej ASPECT-PLUS ST2 nie należy używać do celów innych niż

opisane we wskazaniach do stosowania.5. Kasetę testową ASPECT-PLUS ST2 należy pozostawić w zamkniętej torebce

do momentu bezpośrednio przed użyciem. Wyrzucić po jednorazowym użyciu.

Σ=20PLUS0001-01

Σ=1PLUS0001-03

6. Nie używać po dacie ważności podanej na opakowaniu.7. F Produkt zawiera materiał pochodzenia zwierzęcego; należy traktować

go jako produkt zdolny do przeniesienia choroby zakaźnej. W trakcie pracy z próbkami krwi, próbkami osocza pobranymi na EDTA oraz powiązanymi elementami należy postępować zgodnie z wytycznymi dotyczącymi kontroli zakażeń. Części zestawu stykające się z krwią lub osoczem są uznawane za stanowiące zagrożenie biologiczne i mogące potencjalnie przenosić choroby zakaźne, nawet po przeprowadzeniu czyszczenia i dezynfekcji.

8. Zawiera składnik czynny (0,05% Proclin 300) jako biobójczy środek konserwujący.

9. Należy unikać kontaktu odczynników lub próbki ze skórą, oczami lub błonami śluzowymi. W przypadku kontaktu z oczami lub skórą zanieczyszczone miejsce należy natychmiast przemyć wodą.

10. Po wykonaniu testu należy dokładnie umyć ręce.11. Odpady należy utylizować jako substancje potencjalnie zakaźne i zgodnie z

lokalnymi przepisami.

POBRANIE I PRZYGOTOWANIE PRÓBKI1. Używać wyłącznie surowicy osocza krwi żylnej pobranej na EDTA lub osocza

antykoagulowanego heparyną. Inne typy próbek, metody pobierania ani antykoagulanty nie były badane. Próbkę należy przygotować niezwłocznie po pobraniu próbki.

2. Próbkę pobraną od pacjenta należy zbadać w ciągu 48 godzin od momentu pobrania, jeśli jest ona przechowywana w temperaturze pokojowej (18-25°C). Jeśli wykonanie testu w ciągu 48 godzin nie jest możliwe, próbkę należy przechowywać w lodówce (2-8°C) do siedmiu (7) dni lub zamrozić (<-20°C) na maksymalnie 18 miesięcy.6

Warunki przechowywania (temperatura) Stabilność próbki

20˚C 48 godzin

4˚C 7 dni

od -20˚C do -80˚C 18 miesięcy

3. Jeśli próbka musi zostać przetransportowana do laboratorium w celu zbadania, należy przetransportować ją w temperaturze pokojowej (18°-25°C) lub w lodówce (2°-8°C) w ciągu 48 godzin od momentu pobrania. Unikać narażenia na temperatury >25°C.

UWAGA: aktualny stan zdrowia może wpłynąć na wyniki testu lub doprowadzić do uzyskania nieprecyzyjnych wyników. Przy odczytywaniu wyniku testu i ustalaniu sposobu postępowania należy uwzględnić pewne czynniki dotyczące stanu zdrowia. PRZECHOWYWANIE I POSTĘPOWANIE Test ASPECT-PLUS ST2 zachowuje stabilność do 18 miesięcy, o ile przechowywany jest w określonym poniżej kontrolowanym środowisku:

Kasety należy przechowywać zapakowane w szczelnych torebkach foliowych do momentu uzyskania gotowości do użycia i upływu daty ważności wydrukowanej na opakowaniu:• Kasety nie wolno używać, jeśli torebka jest rozerwana, nakłuta lub

niewłaściwie zamknięta. Kasetę należy wyrzucić i użyć innej.• Kasety testowe ASPECT-PLUS ST2 należy przechowywać w temperaturze od

2°C do 8°C (35-46°F).

• Przed użyciem przechowywanych w lodówce kaset testowych ASPECT-PLUS ST2 należy pozostawić poszczególne kasety do osiągnięcia temperatury pokojowej przez 15 minut.

• Nie używać po dacie ważności podanej na opakowaniu.

UWAGA: kasety należy użyć w ciągu dziesięciu (10) minut po otwarciu torebki foliowej.

INFORMACJE DOTYCZĄCE KONTROLI JAKOŚCI Każda kaseta testowa ASPECT-PLUS ST2 zawiera jedną kontrolę wewnętrzną (linia kontrolna na kasecie testowej), która analizowana jest automatycznie dla każdej próbki pobranej od pacjenta, zewnętrznego roztworu kontroli lub próbki służącej do badania biegłości w celu sprawdzenia, czy przepływ w kasecie testowej ASPECT-PLUS ST2 jest prawidłowy. Jeśli automatyczne sprawdzenie tej wbudowanej kontroli wykaże, że odpowiada ona limitom, czytnik ASPECT Reader wyświetli wynik dla badanej próbki. Jeśli automatyczne sprawdzenie tej wbudowanej kontroli wykaże, że nie odpowiada ona limitom, wynik testu nie zostanie wyświetlony. W zamian za to czytnik wyświetli ostrzeżenie lub komunikat o błędzie, który opisano w podręczniku użytkownika czytnika ASPECT Reader.

Dobra praktyka laboratoryjna sugeruje, aby kontrole zewnętrzne badać dla każdej nowej partii lub dostawy materiałów testowych lub co 30 dni i zgodnie z innymi wymaganiami, wynikającymi ze standardowych procedur kontroli jakości obowiązujących w danym laboratorium. Kontrole należy badać tak samo jak próbki pobrane od pacjenta. Jeśli w trakcie analizy próbek pobranych od pacjenta lub kontroli zewnętrznych test nie powiedzie się z jakiejkolwiek przyczyny (usterka wbudowanej kontroli lub kontrola zewnętrzna poza zakresem) nie zostaną wyświetlone wyniki dla próbki pacjenta.

Użytkownicy powinni przestrzegać rządowych wytycznych (np. wojewódzkich lub lokalnych) i/lub wymagań akredytacyjnych dotyczących kontroli jakości.

ELEKTRONICZNA KONTROLA JAKOŚCI (EQC) EQC należy użyć w celu zapewnienia prawidłowego działania czytnika ASPECT Reader. Badanie EQC należy wykonywać w następujących sytuacjach: • W przypadku wstępnej konfiguracji czytnika ASPECT Reader.• Po przetransportowaniu lub przeniesieniu czytnika ASPECT Reader.• Zawsze w razie wątpliwości dotyczących sprawności czytnika ASPECT Reader.• Zawsze, jeśli jest to wymagane przez przepisy danego laboratorium

dotyczące kontroli jakości. • Jednorazowo przy rozpoczęciu każdego dnia pracy.

UWAGA: EQC jest wrażliwa na światło. Po każdym użyciu EQC należy przechowywać w dostarczonej torebce foliowej.UWAGA: EQC jest gotowa do wykonania testu. Nie jest wymagana próbka ani bufor testowy.UWAGA: pełne instrukcje dotyczące korzystania z EQC można znaleźć w podręczniku użytkownika czytnika ASPECT Reader.

WYKONANIE TESTU Przed przystąpieniem do wykonywania testu należy przeczytać wszystkie informacje zawarte w niniejszej instrukcji obsługi. • Symbole stosowane w tej instrukcji opisano w punkcie „Symbole”. • Przygotować niezbędne przedmioty (patrz „Materiały dostarczane” i „Materiały

wymagane, niedostarczane” powyżej).• Należy przestrzegać odpowiednich wytycznych dotyczących kontroli zakażeń

na wypadek pracy z próbkami krwi i przedmiotami stykającymi się z krwią.

1. Kasetę testową ASPECT-PLUS ST2 należy wyjąć z lodówki i ogrzewać do temperatury pokojowej przez 15 minut. NIE OTWIERAĆ torebki foliowej zanim kaseta osiągnie temperaturę pokojową.

2. Przygotować próbkę. Patrz punkt „Pobranie i przygotowanie próbki”3. W czytniku ASPECT Reader: a. Wprowadzić odpowiednie informacje, nacisnąć ZALOGUJ i

wykonać test. b. Na ekranie głównym kliknąć ANALIZUJ PACJENTA. c. Wpisać ID pacjenta i kliknąć ANALIZUJ PACJENTA.4. Wyjąć kasetę testową z torebki foliowej.

UWAGA: kasety należy użyć w ciągu 10 minut od momentu otwarcia torebki foliowej.

5. Za pomocą wykalibrowanego mikropipetora odpipetować 35 µl próbki pobranej do pacjenta do studzienki próbki, tj. środkowej studzienki oznaczonej symbolem [ ].

6. Po upływie 60 sekund dodać 2 krople (~110 μl) buforu testowego do studzienki bufora testowego, która znajduje się obok studzienki przeznaczonej na próbkę, na brzegu kasety testowej. NIE DODAWAĆ buforu do studzienki przeznaczonej na próbkę. Bufor testowy można dodać WY‎ŁĄCZNIE do studzienki bufora testowego w kasecie testowej.

7. Po 40 sekundach wprowadzić kasetę, w której umieszczono próbkę pobraną od pacjenta i bufor testowy, do czytnika.

UWAGA: kasetę testową należy wprowadzić do czytnika w ciągu 60 sekund po dodaniu bufora. Opóźnienie dłuższe niż 60 sekund po dodaniu bufora testowego może doprowadzić do uzyskania niedokładnych wyników.

8. Zamknąć szufladkę czytnika. Urządzenie rozpocznie analizę. 9. Wyniki zostaną wyświetlone na ekranie po około 20 minutach.

UWAGA: pełne instrukcje dotyczące sposobu wykonania testu można znaleźć w podręczniku użytkownika czytnika ASPECT Reader.F Wszystkie przedmioty, które zetknęły się z próbką należy wyrzucić Należy przestrzegać właściwych wytycznych dotyczących kontroli zakażeń.

ODCZYT WYNIKÓW Czytnik ASPECT Reader dokonuje pomiaru białka ST2 automatycznie. Wyniki wyświetlane są na ekranie. Operator ma możliwość wydrukowania wyników. Wartość wyrażona w ng/ml odzwierciedla stężenie białka ST2 w próbce.

UWAGA: stężenia białka ST2 poniżej 12,5 ng/ml lub powyżej 250 ng/ml zostaną wyświetlone jako <12,5 ng/ml i >250 ng/ml.Dalsze informacje można znaleźć w podręczniku użytkownika czytnika ASPECT Reader.

INTERPRETACJA WYNIKÓW • U zdrowych ochotników, normalnych pacjentów, międzykwartylowe wartości

białka ST2 wynoszą od 15 do 25 ng/ml.• Stężenie 35 ng/ml wypada pomiędzy 90. a 95. centylem populacji normalnej.1 • U pacjentów, u których zdiagnozowano OZS lub NS bądź u których stężenia

białka ST2 wynoszą ≥35 ng/ml ryzyko wystąpienia zdarzeń niepożądanych, np. hospitalizacji lub zgonu w ciągu jednego (1) roku jest większa niż u pacjentów, u których stężenia białka ST2 są niższe. Ryzyko zgonu wzrasta ze wzrostem stężenia białka ST2.2,3,4

• Wykazano, że u osób bez objawów i widocznie zdrowych podwyższone stężenie białka ST2 wskazuje ponad dwukrotny wzrost ryzyka rozwoju niewydolności serca.5

• Mimo iż ujemny wynik testu ST2, <35 ng/ml, u pacjentów z NS lub OZS można wykorzystać do zaklasyfikowania pacjentów i innych osób do grupy niskiego ryzyka wystąpienia zdarzeń niepożądanych, np. ponownej hospitalizacji lub zgonu, należy prowadzić odpowiednie leczenie kliniczne.

• Przy ustalaniu rozpoznania i sposobu prowadzenia pacjenta wyniki pomiaru białka ST2 należy wykorzystywać wraz z innymi danymi klinicznymi i diagnostycznymi.

STANDARYZACJA Wyniki dotyczące stężenia uzyskane za pomocą kasety testowej ASPECT-PLUS ST2 są identyfikowalne względem referencyjnych roztworów wzorcowych, zawierających określone stężenia białka ST2. Kaseta testowa ASPECT-PLUS ST2 i kontrole ST2 są identyfikowalne względem tych samych referencyjnych roztworów wzorcowych.

OGRANICZENIA1. Testy w badaniach ograniczono do osób w wieku powyżej 18 lat.2. Zwalidowano je w przypadku surowicy oraz osocza krwi żylnej pobranej na

EDTA i koagulowanej heparyną.3. Obecność ludzkiego przeciwciała antymysiego (HAMA) może doprowadzić do

uzyskania fałszywie niskiego stężenia ST2.4. Istnieje możliwość, że czynniki takie jak błędy techniczne i dotyczące

procedury, a także niewymienione poniżej substancje dodatkowe obecne w próbkach krwi, mogą zakłócać przebieg testu i doprowadzić do uzyskania błędnych wyników.

SUBSTANCJE ZAK‎ŁÓCAJĄCE Wymienione niżej anality przetestowano osobno i wykazano, że nie zakłócają one wyników oczekiwanych do maksymalnych, niżej wymienionych stężeń:

Substancja Stężenie

Bilirubina 0,1 mg/ml – 0,3 mg/ml

Cholesterol (całkowity) 1,5 mg/ml – 5 mg/ml

Hemoglobina 1 mg/ml – 2 mg/ml

Białko (BSA) 15 mg/ml – 60 mg/ml

Trójglicerydy/lipidy (całkowite) 1,5 mg/ml – 30 mg/ml

Wymienione niżej leki przetestowano osobno i wykazano, że nie zakłócają one wyników oczekiwanych po dodaniu do osocza pobranego na EDTA: acetaminofen, kwas acetylosalicylowy, allopurinol, ambroksol, amiodaron, bezylan amlodypiny, ampicylina, kwas askorbinowy, atenolol, biwalirudyna, kofeina, kaptopryl, chloramfenikol, cynaryzyna, cyklosporyna A, digitoksyna, digoksyna, diltiazem, dopamina, dipirydamol, maleinian enalyprylu, eplerenon, erytromycyna, fluwastatyna, furosemid, gliburyd, heparyna sodowa, chlorowodorek hydralazyny, hydrochlorotiazyd, indometacyna, lizynopryl, nikotyna, nifedypina, nitrofurantoina, oksytetracyklina, fenytoina, sól sodowa prawastatyny, probenecyd, chlorowodorek prokainamidu, chlorowodorek (S)-(-)-propranololu, chinidyna, symwastatyna, spironolakton, sulfametoksazol, teofilina, L-tyroksyna, trimetoprim, chlorowodorek werapamilu i warfaryna.

Swoistość zbadano względem rozpuszczalnego receptora ludzkiej interleukiny 1 typu I (IL-1 sR-1), rekombinowanej ludzkiej IL-Iα i rekombinowanej ludzkiej IL-Iβ. Żadna z

tych zbadanych cząstek, nawet w stężeniu pięciokrotnie przekraczającym zmierzone stężenie białka ST2, nie wykazała mierzalnej reaktywności krzyżowej.

PARAMETRY UŻYTKOWE PRECYZJAPrecyzję oznaczenia ustalono zgodnie z wytycznymi CLSI EP5-A2, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline — Second Edition (ocena precyzji ilościowych metod pomiarowych; zatwierdzone wytyczne — wyd. 2). Do oceny tej wykorzystano trzy próbki, próbkę osocza pobraną na EDTA oraz dwie (2) kontrole ST2. Precyzję w obrębie oznaczenia, pomiędzy oznaczeniami oraz precyzję całkowitą obliczono dla każdej badanej próbki. Wyniki dotyczące precyzji zestawiono w Tabeli 1. Oznaczenie spełnia dopuszczalne kryteria parametrów analitycznych, przy czym średni CV wynosi 10,4% w przypadku zmienności w obrębie oznaczenia oraz 13,6% pomiędzy oznaczeniami i jest wolny od błędu obciążonego dotyczącego precyzji w badanym zakresie stężenia. Precyzję zwalidowano w badaniu pomiędzy laboratoriami zgodnie z wytycznymi CLSI EP15-A3, User Verification of Precision and Estimation of Bias (weryfikacja precyzji przez użytkownika i szacowanie błędu obciążonego). Pomiary przeprowadzano w czterech (4) laboratoriach raz na dobę w trzech (3) powtórzeniach dla dwóch próbek (osocza) w dwóch (2) stężeniach oraz obu poziomów płynnej kontroli przez pięć (5) dni. Badanie to nie wykazało istotnej różnicy w porównaniu do wartości przedstawionych w Tabeli 1.

Tabela 1: Podsumowanie analizy precyzji

Poziom ST2 CV w obrębie oznaczenia

CV pomiędzy oznaczeniami

CV całkowity

Niski (20 ng/ml) 15,4% 16,3% 22,4%

Kliniczny (32 ng/ml) 4,9% 13,3% 14,2%

Podwyższony (81 ng/ml) 10,8% 11,1% 15,5%

CZUŁOŚĆ ANALITYCZNACzułość analityczną ustalono zgodnie z protokołem EP17-A opracowanym przez instytut Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline (protokoły ustalania granic detekcji i granic oznaczenia ilościowego; zatwierdzone wytyczne). W celu określenia granicy ślepej próby (LoB) bydlęcą surowicę płodową (FBS) wykorzystano jako materiał źródłowy niezawierający endogennego białka ST2. Zgodnie z protokołem ustalania LoB zestaw 60 powtórzeń próbek FBS mierzono przez 4 dni (15 powtórzeń dziennie). Po ustaleniu LoB określono granicę detekcji (LoD). W celu ustalenia LoD 60 powtórzeń z 4 próbek osocza ludzkiego o różnym niskim stężeniu białka ST2 zmierzono w zestawach po 15 powtórzeń każdego z 4 kolejnych dni. Na podstawie ustalonej LoD określono granicę oznaczenia ilościowego (LoQ). W celu obliczenia LoQ pomiary tej samej próbki, które wykorzystano do ustalenia LoD, wykorzystano do oszacowania błędu obciążonego i niedokładności. Ponieważ wartość LoQ jest mniejsza niż wartość LoD, zgodnie z protokołem LoQ jest definiowana jako równa LoD przy stężeniu 12,5 ng/ml.

LINIOWOŚĆLiniowość oznaczenia ustalono zgodnie z protokołem CLSI EP6-A, Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline (ocena liniowości procedur pomiarów ilościowych: podejście statystyczne; zatwierdzone wytyczne). Mrożonych próbek osocza ludzkiego pobranego na EDTA użyto do utworzenia zbiorczych próbek osocza, z wykorzystaniem których przeprowadzono analizę. Górny limit liniowości testu ASPECT-PLUS ST2 wynosi 250 ng/ml. Dla tej analizy próbkę zbiorczą o wysokim stężeniu przygotowano na poziomie 425 ng/ml, a próbkę zbiorczą o niskim stężeniu — na poziomie 13,6 ng/ml. Utworzono serię jedenastu (11) próbek zbiorczych poprzez połączenie różnych ilości próbek zbiorczych o wysokim i niskim stężeniu. Każdą próbkę zbiorczą mierzono w trzech (3) powtórzeniach. Analiza wyników uzyskanych dla tych próbek zbiorczych metodą regresji liniowej wykazała, że korelacja pomiędzy przewidywanymi a zmierzonymi wynikami jest liniowa do 257 ng/ml, przy czym wartość R2 wynosi 0,9927, a równanie liniowe ma postać y = 1,0x + 3,6; Rysunek 1.

Rysunek 1: Liniowość testu ASPECT-PLUS ST2

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

War

tośc

i zm

ierz

one

Oczekiwane stężenie białka ST2 [ng/ml]

Przebiegliniowy

EFEKT WYSOKIEJ DAWKIBrak efektu do 2000 ng/ml.

ANALIZA ZGODNOŚCIWyniki pomiaru stężenia białka ST2 są powszechnie wykorzystywane, wraz z oceną kliniczną, jako pomoc przy ocenie rokowania u pacjentów z rozpoznaną przewlekłą niewydolnością serca lub ostrym zespołem wieńcowym (OZS), a także przy ustalaniu ryzyka rozwoju niewydolności serca u osób, u których nie występują objawy. Oznaczenie Presage® ST2 (ELISA) to oznaczenie referencyjne dla testu ASPECT-PLUS ST2. W celu zweryfikowania zgodności testu ASPECT-PLUS ST2 z oznaczeniem Presage ST2 przeprowadzono analizę próbek osocza pobranych na EDTA od 60 dawców. Analiza wykazała wartość R2 wynoszącą 0,92, a analiza porównawcza metod z wykorzystaniem regresji Passinga-Babloka wykazała, że te dwie metody

są porównywalne. Równanie regresji dla tej analizy ma postać y = 1,01x + 5,8. Test CUSUM dla liniowości nie wykazał istotnego odchylenia od liniowości (p=0,75).

POLITYKA ZWROTÓW W razie problemu dotyczącego testu ASPECT-PLUS ST2 użytkownik może zostać poproszony o zwrot niewykorzystanych kaset w torebce foliowej. Przed zwrotem kaset należy pobrać numer autoryzacji zwrotu od lokalnego dystrybutora. W celu dokonania zwrotu numer autoryzacji zwrotu należy umieścić na opakowaniu transportowym.

POMOC LUB DODATKOWE INFORMACJE W celu zamówienia produktu należy skontaktować się z lokalnym dystrybutorem lub działem obsługi klienta firmy Critical Diagnostics pod numerem telefonu +353 1 691 7061. Aby uzyskać pomoc techniczną, należy skontaktować się z lokalnym dystrybutorem lub firmą Critical Diagnostics pod numerem telefonu +353 1 691 7061 lub adresem e-mail [email protected].

PIŚMIENNICTWO1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States population.

Clin Chim Acta. 2010 Nov 11; 411(21-22):1825-6.2. Felker GM, et al. Soluble ST2 in Ambulatory Patients with Heart Failure: Association with Functional Capacity and

Long-Term Outcomes. Circ. Heart Fail. 2013; 6: 1172-11793. Ky B, et al. High Sensitivity ST2 for Prediction of Adverse Outcomes in Chronic Heart Failure. Circ. Heart Fail. 2011

Mar;4(2):180-7.4. Kohli P, et al. Role of ST2 in Non–ST-Elevation Acute Coronary Syndrome in the MERLIN-TIMI 36 Trial. Clin Chem.

2012 Jan;58(1):257-66.5. Wang T, et al. Prognostic Utility of Novel Biomarkers of Cardiovascular Stress: The Framingham Heart Study.

Circulation 2012 Sep 25;126(13):1596-604.6. Dieplinger B, et al. Long-term stability of soluble ST2 in frozen plasma samples. Clin Biochem. 2010 Sep;43(13-

14):1169-1170.

M Producent

V Urządzenie medyczne do diagnostyki in vitro

i Patrz instrukcja obsługi

D Nie używać ponownie

h Numer katalogowy

X Zawartość wystarczająca do przeprowadzenia <n> testów

r Limit temperatury

g Kod serii/numer partii

H Data ważności

F Zagrożenie biologiczne: Elementy jednorazowe stanowią zagrożenie biologiczne.

Numer pacjenta

C Znak CE

Kaseta testowa ASPECT-PLUS ST2

Bufor testowy ASPECT-PLUS ST2

Instrukcja obsługi

KANTİTATİF YATAY AKIŞ ST2 TESTİLütfen testi gerçekleştirmeden önce talimatların tamamı için bu kullanım talimatlarındaki bilgilerin tümünü okuyun. Sorularınız olursa yardım için Critical Diagnostics Ürün Destek Birimini arayın. (Yardım bölümüne bakın).

KULLANIM ENDİKASYONLARI ASPECT-PLUSTM ST2 Testi, serum, venöz EDTA veya heparin antikoagüle edilmiş plazmada kantitatif ST2 determinasyonu için ASPECT ReaderTM ile kullanılacak hızlı bir yatay akış immünolojik tahlildir ve yalnızca sağlık çalışanları tarafından kullanılmak üzere tasarlanmıştır. Test, kalp yetersizliği (HF) veya akut koroner sendrom (ACS) hastalarının risk stratifikasyonu için bir yardımcı olarak kullanılır. Test ayrıca asemptomatik ve görünüşte sağlıklı olan bireylerde gelişen kalp yetersizliği riskini değerlendirmek için de kullanılabilir.

GİRİŞ Kalp hastalığı her yıl milyonlarca hastayı etkilemektedir ve tüm dünyada başta gelen bir ölüm nedenidir. Örneğin kalp hastalığı Birleşik Devletler’deki tüm ölümlerin yüzde 25’inden sorumludur ve bu rakam, tüm kanser türlerinden toplam ölümden daha fazladır. Koroner arter hastalığı (CAD) ve/veya akut koroner sendrom (ACS) tedavisi gören pek çok hastada sonunda kalp yetmezliği gelişmektedir. Kalp yetmezliği, kalbin gereken kardiyak çıkışı sağlama yeteneğinin zayıfladığı ve böylece kalbin vücudun metabolik taleplerini desteklemeye yeterli kanı pompalama yeteneğinin bozulduğu ilerleyici bir hastalıktır. Kalp yetmezliği prevalansı tüm dünyada artmaktadır ve hastane bakım maliyetlerine büyük bir yüktür. Bu yükün başlıca bileşenlerinden biri, ilerlemiş kalp

TR

yetmezliğinden muzdarip hastalarda hastaneye yatırılma ve kaynak kullanımı oranlarının yüksek olmasıdır ve benzer şekilde yüksek bir ölüm riskiyle karşı karşıya olmalarıdır.

TEST PRENSİBİ ASPECT-PLUS ST2 Testi, bir kantitatif tabakalı monoklonal yatay akış immünolojik tahlildir. Serum, venöz EDTA veya heparin antikoagüle edilmiş plazma, anti ST2 antikor kaplı şeritten aktığı numune kuyusuna yüklenir. Tahlil tamponu ikinci kuyuya eklenir. Kaset ardından inkübasyon için ASPECT Reader’a takılır ve okuyucu tarafından ST2 kantitatif olarak belirlenir ve rapor edilir. ASPECT-PLUS ST2 Testi kullanarak kantitatif ST2 değerinin belirlenmesi, her test kasetinin eklendiği RFID etiketinde kodlanan ASPECT-PLUS ST2 Testinin her lotu için benzersiz doğrusal kalibrasyon eğrisinden standart doğrusal regresyon analizi ile yapılır. ST2-konsantrasyonunu hesaplamak için test hattında ölçülen floresan sinyali kalibrasyon eğrisine göre değerlendirilir.

SAĞLANAN MALZEMELER:ASPECT-PLUS ST2 Test kitinde serum, venöz EDTA veya heparin antikoagüle edilmiş plazma numunesinde ST2 ölçümü test sonuçlarını oluşturmak için gerekli tüm reaktifleri bulunur.

ASPECT-PLUS ST2 Test kaseti ve ASPECT-PLUS ST2 Test tamponu flakonu şunları içerir:

ASPECT-PLUS ST2 Test kaseti h X• ST2’ye karşı murin monoklonal antikorlar• Murin lg-G’ye karşı keçi poliklonal antikorlar• Floresan boya

Σ=20PLUS0001-01

ASPECT-PLUS ST2 Test tamponu h X• Stabilizatörler• Ara Maddeler

GEREKLİ OLAN ANCAK SAĞLANMAYAN MALZEMELER• ASPECT Reader (REF: READ0001)• Elektronik Kalite Kontrol (EQC) (REF: EQC0001)• ST2 Kontrolleri, Düzey 1 ve Düzey 2 (REF: LQC1111)• F Biyolojik tehlike içeren ve keskin alet atığı için delinmeye karşı dayanıklı

atık kabı• Zamanlayıcı• Eldivenler• Kalibre edilmiş pipet

ÖNLEMLER VE UYARILAR1. Test tüpü içinde teşhis kullanımı için.2. Sağlık çalışanlarının kullanımı için.3. Sonuçlar, klinik bulgular ve diğer laboratuvar sonuçlarıyla birlikte

yorumlanmalıdır.4. ASPECT-PLUS ST2 Test kasetini Kullanım endikasyonlarında belirtilenlerin

dışında kullanmayın.5. ASPECT-PLUS ST2 Test kasetini kullanıncaya kadar mühürlenmiş torbada

saklayın. Tek kullanımdan sonra atın.6. Paket üzerinde basılı son kullanım tarihinden sonra kullanmayın.7. Fİnsan serumundan türetilen materyal içerir ve enfeksiyöz hastalık

bulaştırma olanağı olan materyal olarak işlem görmelidir. Tüm kan örneklerine, EDTA plazma numunelerine ve ilgili öğelere işlem yapmak için uygun enfeksiyon kontrol kılavuzlarını uygulayın. Kan veya plazmaya temas eden kit

Σ=1PLUS0001-03

parçaları biyolojik olarak tehlikeli değerlendirilir ve temizleme ve dezenfekte işleminden sonra bile enfeksiyöz hastalıkları bulaştırabilir.

8. Biyosit koruyucu olarak aktif Proclin 300 içerik maddesi (%0,05) içerir.9. Tahlil reaktifleri veya numunenin cilt, gözler ya da mukoz membranlara

temasından sakının. Cilt veya gözlerle temas durumunda hemen suyla yıkayın.

10. Testi yaptıktan sonra ellerinizi iyice yıkayın.11. Atığı potansiyel olarak enfeksiyöz etkenler olarak ve yerel gereksinimlere

göre imha edin.

NUMUNE ALMA VE HAZIRLAMA1. Yalnızca serum, venöz EDTA veya heparin kullanın. Diğer numune türleri,

çekme yöntemleri veya antikoagülanlar değerlendirilmemiştir. Numunenin hazırlanması mümkün olduğunca numune alındıktan hemen sonra yapılmalıdır.

2. Numune oda sıcaklığında saklandığında (18-25°C) hasta numunesi alındıktan sonra 48 saat içinde test edilmelidir. 48 saat içinde test edilemezse yedi (7) güne kadar buzdolabında (2-8°C) veya maksimum 18 aya kadar dondurulmuş (< -20°C) olarak saklayın.6

Depolama Koşulu (sıcaklık) Numune Stabilitesi

20°C 48 saat

4°C 7 gün

-20°C ila -80°C 18 ay

3. Numunenin test için bir laboratuvara nakledilmesi gerekirse numune alındıktan sonra 48 saat içinde oda sıcaklığında (18°-25°C) veya buzdolabında (2°-8°C) nakledin. 25°C üzerindeki sıcaklıklara maruz kalmasından sakının.

NOT: Mevcut sağlık durumu test sonuçlarını etkileyebilir veya hatalı sonuçlara neden olabilir. Test sonuçlarını okurken ve bir hareket tarzını belirlerken sağlık faktörlerinin dikkate alınması önemlidir.

DEPOLAMA VE TAŞIMA ASPECT-PLUS ST2 Testi, aşağıdaki gibi kontrollü bir ortamda depolandığında 18 aya kadar stabildir:

Kasetleri kullanıncaya kadar ve paket üzerinde basılı son kullanım tarihine kadar mühürlü folyo poşette paketlendiği gibi saklayın:• Folyo poşet yırtılmış, delinmiş veya tamamen mühürlenmemişse kaseti

kullanmayın. Kaseti atın ve başka bir kaset kullanın.• ASPECT-PLUS ST2 Test kasetlerini 2°C ila 8°C’de (35-46°F) saklayın. • Buzdolabındaki ASPECT-PLUS ST2 Test kasetlerini kullanmadan önce tek tek

folyo poşet içindeki kasetlerin 15 dakika oda sıcaklığına ulaşmalarını bekleyin.• Paket üzerinde basılı son kullanım tarihinden sonra kullanmayın.

NOT: Folyo poşeti açtıktan sonra on (10) dakika içinde kaseti kullanın.

KALİTE KONTROLÜNDE DİKKATE ALINACAK HUSUSLAR Her ASPECT-PLUS ST2 Test kasetinde, ASPECT-PLUS ST2 Test kasetinde uygun akış olduğunu kontrol etmek için her hasta numunesiyle otomatik olarak çalışan bir adet dahili kontrol denetimi (test kasetindeki kontrol çizgisi), harici sıvı kontrol

solüsyonu veya yeterlilik test numunesi bulunur. Bu dahili kontrolün otomatik denetimi bir sınır içinde olduğunu gösterirse ASPECT Reader test edilen numune için bir sonuç rapor eder. Bu dahili kontrolün otomatik denetimi sınırlar içinde olmadığını gösterirse bir test sonucu rapor edilmez. Bunun yerine okuyucu ASPECT Reader Kullanım Kılavuzunda açıklanan bir uyarı veya hata mesajı görüntüler.

Good Laboratory Practice, harici kontrollerin her yeni test malzemesi lotu veya sevkiyatı ile ya da her 30 günde bir veya laboratuvarınızın standart kalite kontrol prosedürlerinin gerektirdiği şekilde test edilmesini önermektedir. Kontroller hasta numunelerine yapıldığı gibi test edilmelidir. Hasta numuneleri veya harici kontrolleri üzerinde çalışırken bir test herhangi bir nedenden (dahili kontrol hatası veya bir harici kontrol aralık dışı) başarısız olursa hiçbir hasta sonucu rapor edilmez.

Kullanıcılar kalite kontrolü için devlet yönetmelikleri (ör. federal, eyalet veya yerel) ve/veya akreditasyon gereksinimlerini uygulamalıdır.

ELEKTRONİK KALİTE KONTROL (EQC) ASPECT Reader’in doğru çalıştığından emin olmak için EQC kullanın. Aşağıdaki durumlarda EQC testi yapın: • ASPECT Reader’in ilk kurulumu.• ASPECT Reader nakledildiğinde veya taşındığında.• ASPECT Reader’in performansıyla ilgili belirsizlik olduğunda.• Laboratuvarınızın kalite kontrol gereksinimleri gerektirdiğinde. • Her gün başlangıcında bir defa.

NOT: EQC ışığa hassastır. EQC’yi her kullanımdan sonra birlikte verilen folyo poşet içinde saklayın.

NOT: EQC test için hazırdır. Numune veya test tamponu gerekli değildir.NOT: EQC kullanımıyla ilgili tüm talimatlar için ASPECT Reader Kullanım Kılavuzuna bakın.

BİR TEST YAPMA Lütfen bir test yapmadan önce bu kullanım talimatlarındaki tüm bilgileri okuyun. • Bu talimatlarda kullanılan semboller, Semboller Bölümünde tanımlanmıştır. • Gerekli öğeleri toplayın (Yukarına Sağlanan Malzemeler ve Gerekli Olan

Ancak Sağlanmayan Malzemeler bölümlerine bakın).• Tüm kan örneklerine ve kana temas eden her şeye işlem yapmak için uygun

enfeksiyon kontrol kılavuzlarını uygulayın. 1. Buzdolabında ASPECT-PLUS ST2 Test kasetini çıkarın ve 15 dakika oda

sıcaklığına ulaşmasını bekleyin. Kaset oda sıcaklığına ulaşıncaya kadar folyo poşeti AÇMAYIN.

2. Test örneğini hazırlayın. Numune Alma ve Hazırlama bölümüne bakın.3. ASPECT Reader’da: a. İlgili bilgileri girerek OTURUM AÇ’ı seçin ve bir test yapın. b. Ana ekrandan HASTAYI ÇALIŞTIR’ı seçin. c. Hasta Kimliğini girin ve ardından HASTAYI ÇALIŞTIR’ı seçin.4. Test kasetini folyo poşetten çıkarın.

NOT: Folyo poşeti açtıktan sonra kaseti 10 dakika içinde kullanmanız gerekir.

5. Kalibre edilmiş bir mikropipet kullanarak, [ ] ile orta kuyuda olan numune kuyusuna 35 uL hasta numunesi pipetleyin.

6. 60 saniye sonra test kaseti kenarında bulunan numune kuyusu tarafındaki kuyu olan test tamponu kuyusuna 2 damla (~110 μL) test tamponu ekleyin.

Numune kuyusuna tampon eklemeyin. Test tamponu YALNIZCA test kaseti tampon kuyusuna eklenmelidir.

7. 40 saniye sonra, hasta numunesi ve test tamponu yerleştirilmiş test kasetini takın.

NOT: Test kaseti, tampon eklendikten sonra 60 saniye içinde okuyucuya takılmalıdır. Test tamponu ekleme işleminden sonra 60 saniyeden uzun bir gecikme hatalı sonuçlara neden olabilir.

8. Okuyucu çekmecesini kapatın. Okuyucu analize başlayacaktır. 9. Sonuçlar ekranda yaklaşık 20 dakika görüntülenir.

NOT: Testin nasıl yapılacağına dair tüm talimatlar için ASPECT Reader Kullanım Kılavuzuna başvurun.F Numuneye temas eden tüm öğeleri imha edin. Doğru enfeksiyon kontrol kılavuzlarını uyguladığınızdan emin olun.

OKUMA SONUÇLARI ASPECT Reader, ST2’yi otomatik olarak ölçer. Sonuç ekranda görüntülenir. Operatörün sonuçları yazdırma seçeneği vardır. ng/mL cinsinden bir değer numunedeki ST2 konsantrasyonunu gösterir.

NOT: 12,5 ng/mL’den az veya 250 ng/mL’den fazla ST2 seviyeleri <12,5 ng/mL ve >250 ng/mL olarak rapor edilir.Daha fazla bilgi için ASPECT Reader Kullanım Kılavuzuna bakın.

SONUÇLARIN YORUMLANMASI • Sağlıklı olduğunu beyan eden bireyler ve normal hastalarda ST2 çeyrekler

arası değeri 15 ila 25 ng/mL’dir.

• 35 ng/mL değerinde bir konsantrasyon, normal popülasyonun %90-95’i arasındadır.1

• ACS veya HF teşhisi almış ve ST2 konsantrasyonları ≥35 ng/mL olan hastalarda bir (1) yıl içerisinde hastaneye yatırılma veya mortalite riski bu düzeyin altında ST2 konsantrasyonları olan hastalardan fazladır. Mortalite riski artan ST2 konstrasyonlarıyla artış gösterir.2,3,4

• Asemptomatik ve görünüşte sağlıklı olan bireylerde, yüksek ST2 konsantrasyonu iki yattan fazla artan gelişen kalp yetersizliği belirtisini gösterir.5

• HF veya ACS hastalarındaki negatif ST2 sonucu (<35 ng/mL) hastaları ve bireyleri yeniden hastaneye yatırılma veya ölüm gibi yan etkiler açısından düşük riskli olarak sınıflandırmak için kullanılabilmesine rağmen, klinik olarak uygun terapi izlenmelidir.

• ST2 sonuçları bir teşhis oluşturmak ve hasta yönetimi için diğer klinik ve teşhis bilgileriyle birlikte kullanılmalıdır.

STANDARDİZASYON ASPECT-PLUS ST2 Test kaseti konsantrasyon sonuçları, tanımlanmış ST2 protein konsantrasyonu içeren referans standart solüsyonlara göre izlenebilir. ASPECT-PLUS ST2 Test kaseti ve ST2 Kontrolleri aynı referans standart solüsyonlara göre izlenebilir.

SINIRLAMALAR1. Araştırmalardaki testler 18 yaş ve üzerindeki kişilerle sınırlandırılmıştır.2. Serum ve venöz EDTA ve heparin antikoagüle plazma numuneleriyle

doğrulanmıştır.3. İnsan anti fare antikorunun (HAMA) varlığı hatalı olarak düşük ST2

konsantrasyonu sonucuna neden olabilir.4. Kan numunelerindeki aşağıda listelenmeyen ilave maddelerin yanı sıra teknik

veya yöntemsel hatalar gibi faktörlerin testi etkileyebilme ve hatalı sonuçlara neden olabilme ihtimali vardır.

ETKİLEYEN MADDELER Aşağıdaki analitler ayrı olarak test edilmiştir ve aşağıda gösterilen konsantrasyonlara kadar beklenen sonuçları etkilememektedirler:

Madde Konsantrasyon

Bilirubin 0,1 mg/mL – 0,3 mg/mL

Kolestrol (Toplam) 1,5 mg/mL – 5 mg/mL

Hemoglobin 1 mg/mL – 2 mg/mL

Protein (BSA) 15 mg/mL – 60 mg/mL

Trigliseritler/Lipidler (Toplam) 1,5 mg/mL – 30 mg/mL

Aşağıdaki ilaçlar ayrı olarak test edilmiştir ve EDTA plazmaya katıldığında beklenen sonuçları etkilememektedirler: asetaminofen, asetilsalisilik asit, allopurinol, ambroksol, amidoadron, amlodipin besilat, ampisilin, askorbik asit, atenolol, bivalirudin, kafein, kaptopril, kloramfenikol, sinnarizin, siklosporin A, dijitoksin, digoksin, diltiazem, dopamin, dipiridamol, enalapril maleat, eplerenon, eritromisin, fluvastatin, furosemid, glyburide, heparin sodyum, hidralazin hidroklorür, hidroklorotiazit, indometazin, lisinopril, nikotin, nifedipin, nitrofurantoin, oksitetrasiklin, fenitoin, pravastatin sodyum, probenesid, prokainamid hidrolorür, (S)-(-)-propranolol hidroklorür, kinidin, simvastatin, spironolakton, sülfametaksazol, teofilin, L-tiroksin, trimethoprim, verapamil hidroklorür ve varfarin.

Özel etken oranı insan interlökin-1 çözünür reseptör türü I (IL-1 sR-1), rekombinant insan IL-Iα ve rekombinant insan IL-Iβ’ya karşı test edildi. Ölçülen 5x ST2

konsantrasyonu yüksekliğindeki konsantrasyonda bile üç molekülün hiçbiri test edilmedi, ölçülebilir çapraz reaktiflik sergilendi.

PERFORMANS KARAKTERİSTİKLERİ HASSASİYETTahlil hassasiyeti, Kantitatif Ölçüm Yöntemleri Hassasiyet Performansı CLSI EP5-A2 Değerlendirmesine (Onaylanmış Yönerge-İkinci Bölüm) göre belirlendi. Bu değerlendirme için iki (2) ST2 Kontrolüyle birlikte üç test numunesi ve EDTA plazma numunesi kullanıldı. Test edilen her numune için intra tahlil, inter tahlil ve toplam hassasiyet hesaplandı. Hassasiyet sonuçları Tablo 1’de özetlenmiştir. Tahlil kabul edilebilir analitik performans kriterlerini karşılamaktadır (intra tahlil için %10,4 ve inter tahlil varyasyonu için %13,6 ortalama CV sergileyerek) ve test edilen konsantrasyon aralığında herhangi bir hassasiyet eğilimi göstermemektedir. Hassasiyet performansı, Eğilim Hassasiyeti ve Tahmini CLSI EP15-A3 Kullanıcı Doğrulamasına uygun “İnter Laboratuvar” testiyle doğrulanmıştır. Ölçümler, her iki (2) konsantrasyonda ve beş (5) günde her iki günlük sıvı kontrol düzeyinde iki numunenin (plazma) üç (3) replikatıyla günde bir defa dört (4) laboratuvarda gerçekleştirilmiştir. Bu test, Tablo 1’de özetlenen değerlerden önemli bir fark göstermemiştir.

Tablo 1: Hassasiyet Analizi Özeti

ST2 Seviyesi İntra Tahlil CV İnter Tahlil CV Toplam CV

Düşük (20 ng/mL) %15,4 %16,3 %22,4

Klinik (32 ng/mL) %4,9 %13,3 %14,2

Yüksek (81 ng/mL) %10,8 %11,1 %15,5

ANALİTİK HASSASİYETAnalitik hassasiyet, Saptama Sınırlarının ve Kantitatif Sınırların Belirlenmesi için Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü protokolü EP17-A Protokollerine (Onaylanmış Yönerge) belirlenmiştir. Boş Limitini (LoB) belirlemek için, endojen ST2 içermeyen malzeme kaynağı olarak fetal sığır serumu (FBS) kullanılmıştır. LoB belirleme protokolüne göre, FBS numuneleri 60 tekrar seti günde 15 replikatla 4 günden fazla ölçülmüştür. LoB belirlemesinin ardından Saptama Sınırı (LoD) onaylanmıştır. LoD’u belirlemek için 4 farklı düşük ST2 konsantrasyonu insan plazması 60 replikatı art arda 4 günden fazla 15 tekrar seti halinde ölçülmüştür. LoD belirlemesinin ardından Nicelleştirme Sınırı (LoD) elde edilmiştir. LoQ’yu hesaplamak için LoD belirlemesinde kullanılan aynı numune ölçümleri kullanılarak eğilim ve kesinsizlik tahmin edilmiştir. LoQ değeri LoD değerinden düşük olduğundan protokol başına LoQ 12,5 ng/ml’de LoD’a eşit olarak tanımlanacaktır.

DOĞRUSALLIKTahlil doğrusal performansı Kantitatif Ölçüm Prosedürleri Doğrusallığının Değerlendirilmesi: Bir İstatistiksel Yaklaşım (Onaylanmış Yönerge) CLSI EP6-A protokolüne göre belirlenmiştir. Bu analizi gerçekleştirmek üzere plazma havuzları oluşturmak için dondurulmuş insan EDTA plazma numuneleri kullanılmıştır. ASPECT-PLUS ST2 Testi 250 ng/mL üst doğrusal sınırıyla tasarlanmıştır. Bu analiz için 425 ng/mL konsantrasyonda yüksek konsantrasyon havuzu ve 13,6 ng/mL bir konsantrasyona sahip bir düşük konsantrasyon havuzu hazırlanmıştır. Yüksek ve düşük konsantrasyonlu stok havuzlarının her birisinden değişen miktarlarda alınıp hepsi birleştirilerek on bir (11) havuz içeren bir seri oluşturuldu. Her havuz üç (3) replikat olarak ölçüldü. Bu havuzlardan gelen sonuçların doğrusal regresyon analizi tahmin edilen ve ölçülen sonuçlar arasındaki korelasyonun 0,9927 R2 değeri ve y = 1,0x + 3,6 doğrusal eşitliği ile 257 ng/mL’ye kadar doğrusal olduğunu göstermektedir (Şekil 1).

Şekil 1: ASPECT-PLUS ST2 Testinin doğrusallığı

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

Ölç

ülen

değ

erle

r

Beklenen ST2 (ng/ml)

Doğrusal

KANCA ETKİSİ2000 ng/mL’ye kadar etkisizdir.

UYUM ANALİZİST2, asemptomatik bireylerde gelişen kalp yetersizliği riskinin belirlenmesinin yanı sıra kronik kalp yetersizliği veya akut koroner sendrom (ACS) teşhisi konulan hastalarda prognoz değerlendirmesinde bir yardımcı olarak klinik değerlendirmeyle birlikte kullanmak üzere iyi yapılandırılmıştır. Presage® ST2 Tahlili (ELISA formatı) ASPECT-PLUS ST2 Testi için referans tahlildir. ASPECT-PLUS ST2 Testinin Presage ST2 Testi ile uyumluluğunu doğrulamak için 60 donörden alınan EDTA plazma analizi gerçekleştirildi. bu analiz 0,92 R2 değerini gösterdi ve Passing-Bablok regresyonuyla yöntem karşılaştırma analizi iki tahlil tekniğinin karşılaştırılabilir olduğunu gösterdi.

Bu analiz için regresyon eşitliği y = 1,01x + 5,8’dir ve doğrusallık için Cusum testi doğrusallıktan belirgin sapma göstermemektedir (p=0,75).

İADE POLİTİKASI ASPECT-PLUS ST2 Testinde bir sorun olursa folyo poşet içindeki kullanılmamış kasetleri iade etmeniz istenebilir. Kasetleri iade etmeden önce lütfen yerel distribütörünüzden bir iade onay numarası alın. Bu iade onay numarası iade sevkiyat kutusunun üzerinde olmalıdır.

YARDIM VEYA İLAVE BİLGİLER Ürün sipariş etmek için lütfen yerel distribütörünüzle veya +353 1 691 7061 numaralı telefondan Critical Diagnostics Müşteri Hizmetleriyle irtibata geçin. Teknik Destek için, lütfen yerel distribütörünüzle veya +353 1 691 7061 numaralı telefondan ya da [email protected] e-posta adresiyle Critical Diagnostics ile irtibata geçin.

REFERANSLAR1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. İngiltere popülasyonundan çözünebilir ST2 için referans

aralıklarının yapılandırılması. Clin Chim Acta. 11 Kas 2010; 411(21-22):1825-6.2. Felker GM, et al. Kalp Yetersizliği olan Ambulatuar Hastalarda çözünebilir ST2: İşlevsel

Kapasite ve Uzun Dönem Sonuçlarla Bağlantı. Döngüsel Kalp Yetersizliği. 2013; 6: 1172-11793. Ky B, et al. Kronik Kalp Yetersizliğinde Yan Etki Sonuçlarının Tahmini için Yüksek Hassasiyetli

ST2. Döngüsel Kalp Yetersizliği. Mar 2011; 4(2):180-7.4. Kohli P, et al. MERLIN-TIMI 36 Deneyindeki ST Yükselmesi Olmayan Akut Koroner

Sendromda ST2’nin Rolü. Klinik Kimyası. Oca 2012; 58(1):257-66.5. Wang T, et al. Kardiyovasküler Stres Özgün Biyo İşaretçilerinin Prognostik Yararı:

Framingham Kalp Çalışması. Sirkülasyon Eyl 2012 25;126(13):1596-604.6. Dieplinger B, et al. Dondurulmuş plazma numunelerinde uzun dönem çözünür ST2 stabilitesi.

Klinik Biyokimya. Eyl 2010; 43(13-14):1169-1170.

M Üretici

V Test Tüpü İçinde medikal cihaz

i Kullanım talimatlarına bakın

D Tekrar kullanmayın

h Katalog Numarası

X <n> test için yeterli malzeme içerir

r Sıcaklık sınırlaması

g Parti Kodu/Lot Numarası

H Son kullanma tarihi: (tarih)

F Biyolojik Risk: Tek kullanımlık öğeler biyoloji risk oluşturmaktadır.

Hasta Numarası

C CE İşareti

ASPECT-PLUS ST2 Test kaseti

ASPECT-PLUS ST2 Test tamponu

Kullanım talimatları

КОЛИЧЕСТВЕН ТЕСТ НА ЛАТЕРАЛЕН ПОТОК ЗА ST2Моля, прочетете цялата информация в тези инструкции за употреба за пълни инструкции преди извършването на теста. Ако имате въпроси, обадете се за съдействие на поддръжка на продукти за Critical Diagnostics. (Вижте раздел „Съдействие“).

УКАЗАНИЯ ЗА УПОТРЕБА Тестът ASPECT-PLUSTM за ST2 е бързодействащ имуноанализ на латерален поток, който ще се използва с ASPECT ReaderTM за количествено определяне на ST2 в серум, венозна ЕДТА или хепарин антикоагулирана плазма и е предназначен за употреба само от здравни специалисти. Тестът се използва като помощно средство за стратификация на риска при пациенти със сърдечна недостатъчност (СН) или остър коронарен синдром (ОКС). Тестът може да се използва за оценка на риска от развиване на сърдечна недостатъчност при иначе асимптоматични лица, които изглеждат привидно здрави.

ВЪВЕДЕНИЕ Сърдечните заболявания са основна причина за смърт по света, като от тях ежегодно заболяват милиони пациенти. Сърдечното заболяване например е причина за смъртта на 25% от починалите в САЩ, като това е повече от всички форми на рак, взети заедно. Много пациенти се лекуват за заболяване на коронарната артерия (ЗКА) и/или ОКС, но в крайна сметка развиват сърдечна недостатъчност. Сърдечната недостатъчност е хронично, прогресиращо

BG

заболяване, при което способността на сърцето да предоставя нужните сърдечни обеми отслабва, като по този начин се затруднява способността на сърцето да изпомпва достатъчно кръв, за да поддържа метаболитните нужди на тялото. Широкото разпространение на сърдечната недостатъчност нараства в целия свят и е много голям разход за болничните грижи. Този разход до голяма степен се дължи на факта, че пациентите, страдащи от напреднала сърдечна недостатъчност, се хоспитализират с висока честота и за тях са необходими много ресурси, като също така са изложени на висок риск от смърт.

ПРИНЦИП НА ТЕСТА Тестът ASPECT-PLUS за ST2 представлява количествен „сандвичообразен“ анализ на латерален поток с моноклонални антитела. Серум, венозна ЕДТА или хепарин антикоагулирана плазма се зарежда в пробата, откъдето преминава през лента, потопена в анти-ST2 антитяло. Към втората ямка се добавя буфер на анализа. След това касетата се поставя в ASPECT Reader за инкубация и ST2 се определя количествено и се докладва от четеца. Определянето на количествена стойност за ST2 с помощта на тест ASPECT-PLUS за ST2 се извършва чрез стандартен линейно-регресионен анализ чрез линейна калибрационна крива, която е уникална за всяка партида от тестове ASPECT-PLUS за ST2 и се кодира върху RFID етикета, включен във всяка тестова касета. Флуоресцентният сигнал, измерен на тестовата чертичка, се оценява спрямо калибрационната крива с цел изчисляване на концентрацията на ST2.

ПРЕДОСТАВЕНИ МАТЕРИАЛИ:Комплектът за тест ASPECT-PLUS за ST2 съдържа всички реагенти, необходими за получаването на резултати от теста за измерването на ST2 в серум, венозна ЕДТА или хепарин антикоагулирана плазмена проба.

Касетата за тест ASPECT-PLUS за ST2 и буферното шишенце за тест ASPECT-PLUS за ST2 съдържат:

Касета за тест ASPECT-PLUS за ST2 h X• Миши моноклонални антитела срещу ST2• Поликлонални антитела на коза срещу миши Ig-G• Флуоресцентно багрило

Буфер за тест ASPECT-PLUS за ST2 h X• Стабилизатори• Помощни вещества

НЕОБХОДИМИ, НО НЕДОСТАВЕНИ МАТЕРИАЛИ• ASPECT Reader (REF: READ0001)• Електронен качествен контрол (EQC) (REF: EQC0001)• ST2 контроли, ниво 1 и ниво 2 (REF: LQC1111)• F Непробиваем контейнер за биологични и остри отпадъци• Таймер• Ръкавици• Калибрирана пипетка

ПРЕДПАЗНИ МЕРКИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ1. За ин витро диагностична употреба.2. За употреба от здравни специалисти.3. Резултатите следва да се тълкуват съвместно с клиничните находки и

други лабораторни резултати.4. Касетата за тест ASPECT-PLUS за ST2 да не се използва за цели,

непосочени в указанията за употреба.

Σ=20PLUS0001-01

Σ=1PLUS0001-03

5. Касетата за тест ASPECT-PLUS за ST2 да се пази в запечатан плик, докато не стане готова за употреба. Да се изхвърли след еднократна употреба.

6. Да не се използва след срока на годност, отпечатан на пакета.7. F Съдържа материал от животински произход и с него следва да се

борави като с материал, способен да предава инфекциозни заболявания. Да се следват подходящите насоки за контрол на инфекциите при боравене с кръвни проби, ЕДТА плазмени проби и свързани материали. Части от комплекта, които встъпват в контакт с кръв или плазма, се считат за биологично опасни и могат да предадат инфекциозни заболявания дори след почистване и дезинфекция.

8. Съдържа активна съставка (0,05%) Proclin 300 като биоциден консервант.9. Да се избягва контакт на аналитичните реагенти или проби с кожата,

очите или лигавиците. В случай на контакт с кожата или очите, незабавно измийте с вода.

10. Ръцете да се измиват щателно след извършването на теста.11. Изхвърляйте отпадъците като потенциално инфекциозни агенти и в

съответствие с местните изисквания.

СЪБИРАНЕ И ПОДГОТОВКА НА ПРОБА1. Да се използва само серум, венозна ЕДТА или хепарин антикоагулирана

плазма. Други видове проби, методи за изтегляне или антикоагуланти не са оценени. Пробата трябва да се подготви възможно най-скоро след вземането на образеца.

2. Пробата на пациента трябва да се тества в срок от 48 часа след вземането й, когато пробата се съхранява при стайна температура (18 °C – 25 °C). Ако тестът не може да се извърши в рамките на 48 часа, да се

съхранява в хладилник (при 2 °C – 8 °C) до седем (7) дни или във фризер (при < -20 °C) за максимум 18 месеца.6

Условия на съхранение (температура) Стабилност на пробата

20 ˚C 48 часа

4 ˚C 7 дни

-20 ˚C и -80 ˚C 18 месеца

3. Ако пробата трябва да се изпрати до лаборатория за тестване, транспортирайте при стайна температура (18 °C – 25 °C) или в замразено състояние (2 °C – 8 °C) до 48 часа от нейното вземане. Да се избягва излагане на температури >25 °C.

ЗАБЕЛЕЖКА: Текущото здравословно състояние може да повлияе на резултатите от теста или да доведе до неточност в резултатите. Важно е да се вземат под внимание някои здравословни фактори при отчитане на резултатите от теста и задаване на насоки за действие. СЪХРАНЕНИЕ И БОРАВЕНЕ Тестът ASPECT-PLUS за ST2 е стабилен до 18 месеца при съхранение в контролирана среда, както следва:

Касетите да се съхраняват пакетирани в запечатани пликове от фолио, докато не станат готови за употреба и до отпечатване на срока на годност на пакета:• Касетата да не се използва, ако пликът от фолио е скъсан, пробит или не

е запечатан докрай. Изхвърлете касетата и използвайте друга.

• Касетите ASPECT-PLUS за ST2 да се съхраняват при температура от 2 °C до 8 °C (35 °F – 46 °F).

• Преди да се използват касети за ASPECT-PLUS за ST2, да се позволи на отделни касети, запечатани в плик от фолио, да достигнат стайна температура 15 минути преди употреба.

• Да не се използва след срока на годност, отпечатан на пакета.

ЗАБЕЛЕЖКА: Касетата да се използва до десет (10) минути преди отварянето на плика от фолио.

СЪОБРАЖЕНИЯ ЗА КАЧЕСТВЕН КОНТРОЛ Всяка касета за тест ASPECT-PLUS за ST2 включва една вътрешна контролна проверка (контролна черта на тестовата касета), която се провежда автоматично с всяка проба на пациент, външен разтвор за контрол на течността или проба за изпитване на ефективността за проверка на това дали потокът през касетата за тест ASPECT-PLUS за ST2 преминава правилно. Ако автоматичната проверка на тази вградена контрола сочи, че показанията са в границите на нормалното, ASPECT Reader ще докладва резултат за изпитваната проба. Ако автоматичната проверка на тази вградена контрола посочи, че показанията не са в границите на нормалното, няма да бъде отчетен резултат от теста. Вместо това четецът ще изпише предупреждение или съобщение за грешка според описаното в ръководството на потребителя на ASPECT Reader.

Добрата лабораторна практика предполага, че външните контроли следва да се изпитват с всяка нова партида или доставка на тестови материали или на всеки 30 дни и както се изисква по друг начин от стандартните процедури за качествен контрол на вашата лаборатория. Контролите следва да се тестват по същия начин както при изпитването на проби на пациенти. Когато се провеждат проби

на пациенти или външни контроли, ако тестът не бъде направен по каквато и да е причина (неуспех на вградената контрола или ако външната контрола е извън обхват), няма да бъдат докладвани никакви резултати на пациента.

Потребителите трябва да следват насоките на държавно, регионално местно ниво и/или изискванията на акредитационни агенции за качествен контрол.

ЕЛЕКТРОНЕН КАЧЕСТВЕН КОНТРОЛ (ЕКК) Използвайте ЕКК, за да гарантирате правилното функциониране на ASPECT Reader. Извършвайте ЕКК тестване по следните причини: • Първоначална настройка на ASPECT Reader.• Когато ASPECT Reader е бил транспортиран или местен.• Когато съществува несигурност по повод представянето на ASPECT

Reader.• Когато това се изисква от изискванията за качествен контрол на вашата

лаборатория. • Веднъж в началото на всеки ден.

ЗАБЕЛЕЖКА: ЕКК е чувствителен на светлина. Съхранявайте ЕКК в предоставения плик от фолио след всяка употреба.ЗАБЕЛЕЖКА: ЕКК е готов за тестване. Не се изисква никаква проба или буфер за тест.ЗАБЕЛЕЖКА: Вижте ръководството на потребителя на ASPECT Reader за пълни инструкции относно употребата на ЕКК.

ИЗВЪРШВАНЕ НА ТЕСТ Моля, прочетете цялата информация относно тези инструкции за употреба, преди да извършите теста.

• Символите, използвани в тези инструкции, се определят в раздела „Символи“.

• Съберете необходимите елементи (вж. „Предоставени материали“ и „Необходими, но недоставени материали“ по-горе).

• Да се следват подходящите насоки за контрол на инфекциите при боравене с кръвни проби и всичко, което встъпва в контакт с кръвта.

1. Премахнете касетата за тест ASPECT-PLUS за ST2 от хладилното помещение и я оставете да се стопли на стайна температура в течение на 15 минути. НЕ ОТВАРЯЙТЕ плика от фолио, докато касетата не достигне стайна температура.

2. Подгответе пробата на теста. Вижте раздел „Събиране на проби и подготовка“.

3. В ASPECT Reader: a. въведете подходящата информация за ВХОД В СИСТЕМАТА и

извършване на тест. б. от основния екран изберете ТЕСТВАНЕ НА ПАЦИЕНТ. в. въведете пац. ID, след което изберете ТЕСТВАНЕ НА

ПАЦИЕНТ.4. Извадете тестовата касета от плика от фолио.

ЗАБЕЛЕЖКА: Трябва да използвате касетата в течение на десет (10) минути от отварянето на плика от фолио.

5. Като използвате калибриран микропипетор, поставете 35 uL от пробата на пациента в ямката на пробата, която се явява средната ямка с [ ].

6. След 60 секунди добавете 2 капки (~110 μL) от буфера на теста в ямката на буфера на теста, която се явява ямката до ямката на пробата в края на касетата за теста. НЕ добавяйте буфер в ямката на пробата. Буферът

на теста трябва да се добави САМО към ямката на буфера на касетата за теста.

7. След 40 секунди поставете касетата на теста, заредена с пробата на пациента и тестовия буфер.

ЗАБЕЛЕЖКА: Тестовата касета трябва да се постави в четеца в рамките на 60 секунди след добавянето на тестов буфер. Закъснение с над 60 секунди след добавянето на буфера може да доведе до неточни резултати.

8. Затворете чекмеджето на четеца и той ще пристъпи към анализ. 9. Резултатите ще се покажат на екрана след приблизително 20 минути.

ЗАБЕЛЕЖКА: Вижте ръководството на потребителя на ASPECT Reader за пълни инструкции относно това как да направите теста. F Изхвърлете всички елементи, които са били в контакт с пробата. Уверете се, че следвате надлежните насоки за контрол на инфекциите.

ОТЧИТАНЕ НА РЕЗУЛТАТИТЕ ASPECT Reader измерва ST2 автоматично. Резултатът се показва на екрана. Операторът има възможност да разпечата резултатите. Стойността в нг/мл представлява концентрацията на ST2 в пробата.

ЗАБЕЛЕЖКА: Нивата на ST2 под 12,5 нг/мл или над 250 нг/мл ще се докладват като <12,5 нг/мл и >250 нг/мл.За допълнителна информация вж. ръководството за потребителя на ASPECT Reader.

ТЪЛКУВАНЕ НА РЕЗУЛТАТИ • При лица, считащи себе си за здрави, при нормални пациенти,

интерквартилните стойности за ST2 са от 15 до 25 нг/мл.• Концентрация от 35 нг/мл е между 90-ия и 95-ия перцентил на

нормалното население.1 • При пациенти, диагностицирани с ОКС или СН, чиято концентрация

на ST2 е ≥35 нг/мл, рискът от настъпване на нежелани реакции, като например хоспитализация или смъртност в срок от една (1) година, е по-голям при пациенти с концентрации на ST2 под това ниво. Рискът от смъртност се увеличава при увеличаване на концентрациите на ST2.2,3,4

• При асимптоматични и привидно здрави хора наблюденията сочат, че повишената концентрация на ST2 е показателна за над двукратно повишен риск от развитие на сърдечна недостатъчност.5

• Въпреки отрицателния ST2 резултат, <35 нг/мл, при пациенти със СН или ОКС може да се използва за категоризиране на пациенти и лица като лица със слаб риск от развитие на нежелани реакции, като например повторна хоспитализация или смърт, като следва да се извърши клинично подходяща терапия.

• Резултатите за ST2 следва да се използват с друга клинична и диагностична информация за съставяне на диагноза и за управление на пациенти.

СТАНДАРТИЗАЦИЯ Резултатите за концентрация на касетата за тест ASPECT-PLUS за ST2 са проследими по отношение на референтните стандартни разтвори, които съдържат определена концентрация на протеин ST2. Касетата за тест ASPECT-PLUS за ST2 и ST2 контролите са проследими към същите референтни стандартни разтвори.

ОГРАНИЧЕНИЯ1. Тестването в проучвания е ограничено до лица на възраст 18 или повече

години.2. Валидира се със серум и венозна ЕДТА и хепарин антикоагулирани

плазмени проби.3. Наличието на човешки немиши антитела (ЧНА) може да създаде

фалшиво ниска концентрация на ST2.4. Съществува вероятност фактори, като например технически или

процедурни грешки, а също допълнителни вещества в кръвните проби, които не са изброени по-долу, да се намесят в теста и да причинят грешни резултати.

НАМЕСВАЩИ СЕ ВЕЩЕСТВА Следните аналитични вещества се изпитват отделно и не се намесват с очакваните резултати до показаните концентрации:

Вещество Концентрация

Билирубин 0,1 мг/мл – 0,3 мг/мл

Холестерол (общ) 1,5 мг/мл – 5 мг/мл

Хемоглобин 1 мг/мл – 2 мг/мл

Белтък (BSA) 15 мг/мл – 60 мг/мл

Триглицериди/Липиди (общо) 1,5 мг/мл – 30 мг/мл

Следните лекарства се изпитват отделно и не влияят на очакваните резултати от теста, когато навлязат в ЕДТА плазмата: ацетаминофен, ацетилсалицилова киселина, алопуринол, амброксол, амидоадрон, амлодипин безилат, ампицилин, аскорбинова киселина, атенолол, бивалирудин, кофеин, каптоприл, хлорамфеникол, цинаризин, циклоспорин А, дигитоксин, дигоксин, дилтиазем, допамин, дипиридамол, еналаприл малеат, еплеренон, еритромицин, флувастатин, фуросемид, глибурид, хепарин натрий, хидралазин хидрохлорид, хидрохлоротиазид, индометацин, лизиноприл, никотин, нифедипин, нитрофурантоин, окситетрациклин, фенитоин, правастатин натрий, пробенецид, прокаинамид хидрохлорид, (S)-(-)-пропранолол хидрохлорид, кинидин, симвастатин, спиронолактон, сулфаметоксазол, теофилин, L-тироксин, триметоприм, верапамил хидрохлорид и варфарин.

Специфичността се тества срещу човешки интерлевкин-1 разтворим рецептор тип I (IL-1 sR-1), рекомбинантен човешки IL-Iα и рекомбинантен човешки IL-Iβ. Нито една от трите тествани молекули, дори при концентрация, петкратно по-висока от измерената концентрация на ST2, не показва измерима напречна реактивност.

ХАРАКТЕРИСТИКИ НА ИЗПЪЛНЕНИЕТО ПРЕЦИЗНОСТПрецизността на пробата се определя съобразно CLSI EP5-A2, „Оценка за прецизността на количествените методи за измерване“; Одобрени насоки—Второ издание. За тази оценка се използват три тестови проби, ЕДТА плазмена проба заедно с двете (2) ST2 контроли. За всяка тествана проба се изчисляват прецизност в хода на анализа, прецизност между отделните анализи и обща прецизност. Резултатите за прецизност са обобщени в Таблица 1. Анализът

отговаря на приемливите критерии за аналитично представяне, като се посочва средна вариация на концентрацията (CV) от 10,4% в хода на анализа и 13,6% за вариациите между отделните анализи и не взема под внимание отклонението в прецизността в рамките на изпитвания концентрационен обхват. Представянето от гледна точка на прецизността се валидира чрез „междулабораторно“ изпитване съгласно CLSI EP15-A3, „Проверка на прецизността и оценка на отклонението от страна на потребителя“. Измерванията бяха извършени в четири (4) лаборатории веднъж дневно с три (3) копия на две проби (плазма) във всяка от двете (2) концентрации и на двете нива на течни контролни маркери веднъж дневно в рамките на пет (5) дни. Това тестване не показа съществени различия от стойностите, описани в Таблица 1.

Таблица 1: Резюме на анализ на прецизността

Ниво на ST2 CV по време на анализ

CV между отделните анализи Общо CV

Ниско (20 нг/мл) 15,4% 16,3% 22,4%

Клинично (32 нг/мл) 4,9% 13,3% 14,2%

Повишено (81 нг/мл) 10,8% 11,1% 15,5%

АНАЛИТИЧНА ЧУВСТВИТЕЛНОСТАналитичната чувствителност се определи съгласно протокола EP17-A на Института за клинични и лабораторни стандарти (CLSI), „Протоколи за определяне на граници на установяване и граници за количествено измерване“; Одобрени насоки. За да се определи лимитът на празното (LoB), се използва

фетален говежди серум (FBS) като източник на материал без ендогенен ST2. В съответствие с протокола за определяне на LoB, в срок от 4 дни се измерват 60 реплики от FBS проби, по 15 реплики на ден. След определянето на LoB се определи лимитът на установяване (LoD). За да се определи LoD, 60 реплики на 4 различни човешки плазмени проби с ниска концентрация на ST2 бяха измерени в групи от 15 реплики в 4 поредни дни. След определянето на LoD се изведе лимитът на количествено определяне (LoQ). За да се изчисли LoQ, същите измервания на проби, използвани за определянето на LoD, бяха използвани за оценка на отклонението и непрецизността. Тъй като стойността на LoQ е по-ниска от тази на LoD, тогава съгласно протокола LoQ ще се определи като равен на LoD при 12,5 нг/мл.

ЛИНЕЙНОСТОпределя се линейното представяне на анализа съгласно протокол CLSI EP6-A, „Оценка на линейността на процедурите за количествено измерване: Статистически подход“; Одобрена насока. Замразени човешки ЕДТА плазмени проби се използват за производството на плазмени групи, с които да се извърши този анализ. Тестът ASPECT-PLUS за ST2 е създаден с горен линеен лимит от 250 нг/мл. За този анализ се изготвя група с висока концентрация от 425 нг/мл и група с ниска концентрация от 13,6 нг/мл. Серия от единадесет (11) групи бяха създадени чрез комбинирането на различни количества от всяка от групите с висока и ниска концентрация. Всяка група беше измерена на реплики от три (3). Линейно-регресионният анализ на резултатите от тези групи сочи, че корелацията между прогнозните и измерените резултати са линейни до 257 нг/мл със стойност за R2 0,9927 и линейно уравнение от y = 1.0x + 3.6, Фигура 1.

Фигура 1: Линейност на тест ASPECT-PLUS за ST2

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

Изм

ерен

и ст

ойно

сти

Очаквана стойност на ST2 (нг/мл)

Линейност

ЕФЕКТ НА КУКАТАНяма ефект при концентрация до 2000 нг/мл.

АНАЛИЗ НА СЪОТВЕТСТВИЕТОST2 е признат за употреба с клинично оценяване като помощно средство за прогнозна оценка на пациенти, диагностицирани с хронична сърдечна недостатъчност или остър коронарен синдром (ОКС), както и за определяне на риск от развитие на сърдечна недостатъчност при асимптоматични лица. Presage® ST2 кит (формат ELISA) е анализът за справка за целите на теста ASPECT-PLUS за ST2. За проверка на съответствието на теста ASPECT-PLUS за ST2 с предходния Presage ST2 кит, беше извършен анализ на ЕДТА плазма от 60 донори. Този анализ посочи стойност от 0,92 за R2 и анализът на съпоставка на методите съгласно регресията на Пасинг-Баблок посочи, че двете аналитични техники са съпоставими. Регресионното уравнение за този анализ е y = 1,01x +

5,8 и тестът на Кузум за линейност показва, че няма значителни отклонения от линейността (p=0,75).

ПОЛИТИКА НА ВРЪЩАНЕ Ако с теста ASPECT-PLUS за ST2 има проблем, може да бъдете помолени да върнете неизползваните касети в плика от фолио. Преди да върнете касетите, моля, получете номер на разрешение на връщането от местния представител. Този номер на разрешение на връщането трябва да се посочи на опаковката, в която ще се върнат касетите.

СЪДЕЙСТВИЕ ИЛИ ДОПЪЛНИТЕЛНА ИНФОРМАЦИЯ За да поръчате продукта, моля, свържете се с местния представител или със Службата за работа с клиенти за Critical Diagnostics на тел. +353 1 691 7061. За техническа поддръжка, моля, свържете се с местния представител или Critical Diagnostics на тел. +353 1 691 7061 или на имейл [email protected].

БИБЛИОГРАФИЯ1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a

United States population. Clin Chim Acta. 2010 Nov 11; 411(21-22):1825-6.2. Felker GM, et al. Soluble ST2 in Ambulatory Patients with Heart Failure: Association with

Functional Capacity and Long-Term Outcomes. Circ. Heart Fail. 2013; 6: 1172-11793. Ky B, et al. High Sensitivity ST2 for Prediction of Adverse Outcomes in Chronic Heart Failure.

Circ. Heart Fail. 2011 Mar;4(2):180-7.4. Kohli P, et al. Role of ST2 in Non–ST-Elevation Acute Coronary Syndrome in the MERLIN-

TIMI 36 Trial. Clin Chem. 2012 Jan;58(1):257-66.5. Wang T, et al. Prognostic Utility of Novel Biomarkers of Cardiovascular Stress: The

Framingham Heart Study. Circulation 2012 Sep 25;126(13):1596-604.6. Dieplinger B, et al. Long-term stability of soluble ST2 in frozen plasma samples. Clin

Biochem. 2010 Sep;43(13-14):1169-1170.

M Производител

V Ин витро диагностично медицинско изделие

i Вижте инструкциите за употреба

D Да не се използва повторно

h Каталожен номер

X Съдържа достатъчно за <n> теста

r Температурно ограничение

g Код на партида/партиден номер

H Да се използва преди (дата)

F Биологичен риск: Артикулите за еднократна употреба представляват биологични рискове.

Номер на пациента

C CE маркировка

Касета за тест ASPECT-PLUS за ST2

Буфер за тест ASPECT-PLUS за ST2

Инструкции за употреба

เครองวดปรมาณการไหลผาน ST2กรณาอานขอมลทงหมดในคมอการใชงานนเพอทำาความเขาใจวธใชทงหมดกอนเรมการทดสอบ หากคณมขอสงสย กรณาโทรตดตอฝายสนบสนนผลตภณฑ Critical Diagnostics เพอขอรบความชวยเหลอ (ดสวนความชวยเหลอ)

ขอบงชการใชงาน เครองวด ST2 ASPECT-PLUSTM เปนการวดปรมาณดวยวธอมมวโนเอสเสยแบบการไหลผานตอเนอง ซงนำา ไปใชกบ ASPECT ReaderTM เพอคำา นวณปรมาณของ ST2 ทอยในพลาสมาทตอตานการคอนจเกตซรม EDTA ทเสนเลอดดำา หรอเฮพารน และสรางขนเพอรองรบการใชงานของบคลากรทางการแพทยเทานน การทดสอบดวยเครองวดนใชเพอชวยในการตรวจวดระดบความเสยงของผปวยภาวะหวใจลมเหลว (HF) หรอภาวะกลามเนอหวใจขาดเลอด (ACS) อกทงยงสามารถนำาการทดสอบนไปใชในการประเมนความเสยงตอการเกดภาวะหวใจลมเหลวในกลมผทไมแสดงอาการและมลกษณะแขงแรงสมบรณ

บทนำา โรคหวใจเปนสาเหตหลกของการเสยชวตทวโลกและสงผลกระทบตอผปวยหลายลานคนทกป ซงเหนไดจากตวอยางอตราการเสยชวตในสหรฐอเมรกาทกวา 25 เปอรเซนตเกดจากโรคหวใจ เปนจำานวนทสงกวามะเรงทกชนดรวมกนเสยอก มผปวยจำานวนมากเขารบการรกษาโรคหลอดเลอดหวใจ (CAD) และ/หรอภาวะกลามเนอหวใจขาดเลอด (ACS) แตยงคงประสบภาวะหวใจลมเหลวในภายหลง หวใจลมเหลวเปนโรคเรอรงตอเนองซงสงผลใหหวใจมความสามารถในการสงออกเลอดลดลง และขดขวางความสามารถในการสบฉดเลอดไปหลอเลยงใหเพยงพอตอการเผาผลาญของรางกาย ความชกของภาวะ

TH

หวใจลมเหลวกำาลงเพมขนทวโลกและเปนภาระคาใชจายหลกของโรงพยาบาลตางๆ ซงปจจยหลกทกอใหเกดภาระนมาจากการทผปวยภาวะหวใจลมเหลวอยางรนแรงมอตราการอยโรงพยาบาลทสงและใชสอยทรพยากรมาก อกทงมความเสยงตอการเสยชวตทสง

หลกการทดสอบ เครองวด ST2 ASPECT-PLUS เปนการวดปรมาณดวยวธอมมวโนเอสเสยแบบการไหลผานแซนวชโมโนโคลนอล พลาสมาทตอตานการคอนจเกต ซรม EDTA ทเสนเลอดดำา หรอเฮพารน จะถกเตมลงในชองใสตวอยางซงไหลผานแถบเคลอบแอนต ST2 แอนตบอด สารเอสเสยบฟเฟอรจะถกเตมลงในชองตวอยางทสอง จากนนตลบทดสอบจะถกปอนลงใน ASPECT Reader เพอการฟกตว เครองอานจะคำานวณจำานวนของ ST2 และรายงานผล การคำานวณปรมาณคา ST2 ดวยเครองวด ST2 ASPECT-PLUS น จะใหผลออกมาเปนการวเคราะหการถดถอยเชงเสนอยางงายผานกราฟความเขมขนมาตรฐานเชงเสนซงการทดสอบ ST2 ASPECT-PLUS แตละลอตจะออกมาไมซำากนตามทเขารหสไวบนแทก RFID ซงตดอยบนตลบทดสอบแตละตลบ สญญาณฟลออเรสเซนทวดอยบนเสนการทดสอบจะถกประเมนเทยบกบกราฟความเขมขนมาตรฐานเพอคำานวณหาความเขมขนของ ST2

อปกรณทมมาให:ชดเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ประกอบดวยตวทำา ปฏกรยาทกชนดทตองใชเพอใหไดผลการทดสอบการวด ST2 ในตวอยาง พลาสมาทตอตานการคอนจเกตซรม EDTA ทเสนเลอดดำา หรอเฮพารน

ตลบทดสอบของเครองวด ST2 ASPECT-PLUS และขวดแกวบฟเฟอรของเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ประกอบไปดวย:

ตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS h X• โมโนโคลนอลแอนตบอดของหนไมซซงตานทาน ST2• โพลโคลนอลแอนตบอดของแพะซงตานทาน Ig-G จากหนไมซ• สารสยอมประเภทเรองแสง

Σ=20PLUS0001-01

บฟเฟอรเครองวด ST2 ASPECT-PLUS h X• สารชวยใหอยตว• สารทำาอมลชนแท

อปกรณทจำาเปนตองใชแตไมมมาให• ASPECT Reader (REF: READ0001)• ตวควบคมคณภาพอเลกทรอนกส (EQC) (REF: EQC0001)• ตวควบคม ST2 ระดบ 1 และระดบ 2 (REF: LQC1111)• F ภาชนะบรรจของเสยแบบกนรวสำาหรบทงขยะตดเชอและมคม• เวลา• ถงมอ• ปเปตตแบบใชตวง

ขอควรระวงและคำาเตอน1. ใชสำาหรบการวเคราะหในหลอดแกว2. รองรบใชงานของบคลากรทางการแพทย3. ควรแปลผลลพธควบคกบอาการของผปวยและผลวเคราะหจากทางหอง

ปฏบตการอนๆ4. หามนำาตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ไปใชดวยวธอนใดนอก

เหนอไปจากทระบไวในขอบงชการใชงาน5. เกบรกษาตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ไวในซองปดผนกจนกวา

จะนำามาใช ทงตลบหลงจากใชแลว6. หามนำามาใชงานหากเลยวนหมดอายดงทระบไวบนบรรจภณฑแลว7. Fประกอบดวยวตถทไดจากสตวและควรดแลจดการราวกบเปนสารทสามารถ

แพรโรคตดเชอได ปฏบตตามแนวทางการควบคมการตดเชอทถกตองทกครงทจดการกบตวอยางเลอด ตวอยางพลาสมา EDTA และสงตางๆ ทเกยวของ เมอชนสวนใดๆ ในชดเครองวดนสมผสกบเลอดกบพลาสมา จะถอวาชนสวนดงกลาวตดเชอและสามารถแพรโรคตดเชอได แมวาคณจะทำาความสะอาดและฆาเชอแลวกตาม

Σ=1PLUS0001-03

8. ประกอบดวยสารออกฤทธ (0.05%) Proclin 300 ซงใชเปนสารชวฆาตกนเสย9. หลกเลยงไมใหผวหนง ตา หรอเยอเมอกสมผสกบตวทำาปฏกรยาวเคราะหหรอ

สงสงตรวจตางๆ หากสมผสกบผวหนงหรอตา ใหลางดวยนำาทนท 10. ลางมอใหสะอาดหลงดำาเนนการทดสอบ11. กำาจดขยะในลกษณะเดยวกนกบการจำากดสารทอาจมเชอกอโรค และปฏบต

ตามขอกำาหนดภายในประเทศ

การเกบและเตรยมตวอยาง1. ใชเฉพาะพลาสมาทตอตานการคอนจเกตซรม EDTA ทเสนเลอดดำา หรอเฮพา

รน ตวอยางชนดอน วธเกบแบบอน หรอสารกนเลอดเปนลมชนดอนจะไมถกนำามาประเมน ควรดำาเนนการเตรยมตวอยางทนททเกบสงสงตรวจ

2. ตวอยางทเกบไดจากผปวยควรไดรบการทดสอบภายใน 48 ชวโมงนบจากเวลาทเกบ ในกรณทตวอยางดงกลาวถกรกษาไวในอณหภมหอง (18-25 องศาเซลเซยส) หากไมสามารถนำาไปทดสอบภายใน 48 ชวโมง สามารถแชเยน (2-8 องศาเซลเซยส) ไวไดเปนเวลาเจด (7) วน หรอแชแขง (< -20 องศาเซลเซยส) ไดสงสดไมเกน 18 เดอน6

การเกบรกษา (อณหภม) ความคงสภาพของสงสงตรวจ

20 องศาเซลเซยส 48 ชวโมง

4 องศาเซลเซยส 7 วน

-20 องศาเซลเซยสและ -80 องศาเซลเซยส 18 เดอน

3. หากจำาเปนตองขนยายตวอยางไปยงหองปฏบตการเพอทำาการทดสอบ ใหขนยายทอณหภมหอง (18-25 องศาเซลเซยส) หรอทอณหภมแชเยน (2-8

องศาเซลเซยส) ภายใน 48 ชวโมงนบจากเวลาทเกบ หลกเลยงการสมผสกบอณหภม >25°C

หมายเหต: สถานะสขภาพในปจจบนอาจสงผลตอผลการทดสอบหรอทำาใหผลคลาดเคลอน ดงนนจงตองพจารณาปจจยดานสขภาพบางประการเมออานผลการทดสอบและวางแผนการดำาเนนการตอไป การเกบรกษาและการจดการ เครองวด ST2 ASPECT-PLUS เกบไดถง 18 เดอนเมอเกบรกษาในสภาพแวดลอมทไดรบการควบคมดงน:

เกบรกษาตลบทดสอบไวตามสภาพทบรรจลงในซองททำาจากฟอยลปดผนกจนกวาจะนำามาใชและจนกวาจะถงวนหมดอายดงทระบไวบนบรรจภณฑ:• อยานำาตลบทดสอบมาใหหากซองททำาจากฟอยลฉกขาด เปนร หรอปดผนก

ไมสนท กำาจดตลบทดสอบดงกลาวและใชตลบใหม• เกบรกษาตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ไวท 2 องศาเซลเซยส

ถง 8 องศาเซลเซยส (35-46 ฟาเรนไฮต) • กอนนำาตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ทผานการแชเยนมาใช ให

รอจนกวาซองททำาจากฟอยลแตละซองจะปรบอณหภมใหเทากบหองเปนเวลา 15 นาทกอนการใชงาน

• หามนำามาใชงานหากเลยวนหมดอายดงทระบไวบนบรรจภณฑแลว

หมายเหต: นำาตลบทดสอบไปใชภายในสบ (10) นาทหลงจากเปดซองททำาจากฟอยล

ขอควรคำานงในการควบคมคณภาพ ตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ทกตลบประกอบดวยตวตรวจสอบการควบคมภายใน (แถบควบคมบนตลบทดสอบ) หนงตวซงทำางานโดยอตโนมตรวมกบตวอยางทเกบไดจากผปวยทกคน วธการควบคมของเหลวจากภายนอก หรอความ

สามารถในการทดสอบตวอยางเพอตรวจวาการไหลในตลบทดสอบ ST2 ASPECT-PLUS เปนไปอยางถกตองหรอไม หากการตรวจสอบอตโนมตของการควบคมในตวแสดงใหเหนวาอยในขอบเขตทรบมอได ASPECT Reader จะรายงานผลของตวอยางททดสอบ หากการตรวจสอบอตโนมตของการควบคมในตวแสดงใหเหนวาเกนขอบเขตทรบมอได ตวอานจะไมรายงานผลการทดสอบ แตจะแสดงขอความเตอนหรอขอความแสดงขอผดพลาดตามทระบในคมอผใช ASPECT Reader

ระบบคณภาพของหองปฏบตการทางการแพทยระบไววาควรทดสอบการควบคมภายนอกกบวตถทดสอบแตละลอตหรอแตละการขนสง หรอทดสอบทกๆ 30 วน หรอตามทกระบวนการควบคมคณภาพมาตรฐานของหองปฏบตการของคณกำาหนดไว การควบคมควรไดรบการทดสอบในลกษณะเดยวกบการการทดสอบสงสงตรวจทเกบไดจากผปวย เมอทดสอบตวอยางทเกบไดจากผปวยหรอดำาเนนการควบคมภายนอก หากเกดผลลพธผดพลาดไมวาจะดวยเหตผลใดกตาม (การควบคมภายในลมเหลวหรอเกนขอบเขตของการควบคมภายนอก) จะไมมการรายงานผลลพธผปวย

ผใชควรปฏบตตามขอกำาหนดของภาครฐ (เชน สหพนธรฐ จงหวด หรอในทองถน) และ/หรอขอกำาหนดการรบรองคณภาพการควบคม

ตวควบคมคณภาพอเลกทรอนกส (EQC) ใช EQC เพอใหแนใจวาเครอง ASPECT Reader ทำางานไดอยางถกตอง ดำาเนนการทดสอบ EQC ในกรณตอไปน: • การตงคาเรมตนบน ASPECT Reader• เมอขนยายหรอเคลอน ASPECT Reader• เมอใดกตามทเกดความไมแนนอนขนกบการทำางานของ ASPECT Reader• เมอใดกตามทขอกำาหนดการควบคมคณภาพของหองปฏบตการของคณ

กำาหนด • หนงครงในชวงตนของแตละวน

หมายเหต: EQC ไวตอแสง เกบรกษา EQC ในซองททำาจากฟอยลทมมาใหหลงการใชงานในแตละครงหมายเหต: EQC พรอมใชในการทดสอบ โดยไมตองใชตวอยางหรอบฟเฟอรทดสอบหมายเหต: กรณาดคมอการใชงาน EQC ฉบบเตมในคมอผใช ASPECT Reader

ดำาเนนการทดสอบ กรณาอานขอมลทงหมดในคมอการใชงานนกอนเรมการทดสอบ • คำาจำากดความสญลกษณตางๆ ทใชในคมอนระบอยในสวนสญลกษณ • รวบรวมสงทจำาเปน (ดเนอหาในสวนอปกรณทมมาใหและสวนอปกรณทจำาเปน

ตองใชแตไมมมาใหดานบน)• ปฏบตตามแนวทางการควบคมการตดเชอทถกตองทกครงทจดการกบตวอยาง

เลอดและสงใดกตามทสมผสกบเลอด 1. นำาตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ออกจากตแชเยนและวางทงไว

15 นาทเพอปรบใหเทากบอณหภมหอง หามเปดซองททำาจากฟอยลจนกวาอณหภมของตลบทดสอบจะเทากบอณหภมหอง

2. เตรยมตวอยางการทดสอบ ดสวนการเกบและเตรยมตวอยาง3. ทเครอง ASPECT Reader: ก. ปอนขอมลทถกตองเพอลงชอเขาใช (ลงชอเขาใช) และดำาเนน

การทดสอบ ข. ทหนาจอหลก ใหเลอก ดำาเนนการผปวย ค. ปอนรหสผปวย (ID ผปวย) จากนนเลอก ดำาเนนการผปวย4. นำาตลบทดสอบออกจากซองททำาจากฟอยล

หมายเหต: คณตองนำาตลบทดสอบไปใชภายในสบ (10) นาทหลงจากเปดซองททำาจากฟอยล

5. ใชไมโครปเปตตทปแบบใชตวงดดตวอยางทเกบไดจากผปวย 35 uL แลวเตมลงในชองตวอยาง ซงอยในชองตวอยางตรงกลางและมรป [ ]

6. เมอผานไปแลว 60 วนาท ใหเตมบฟเฟอรทดสอบ 2 หยด (~110 μL) ลงในชองตวอยางบฟเฟอรทดสอบ ซงเปนชองตวอยางขางๆ ชองตวอยางทใสตวอยางไวซงอยบรเวณขอบตลบทดสอบ หามเพมบฟเฟอรลงในชองตวอยางทใสตวอยางไว เพมบฟเฟอรทดสอบลงในชองตวอยางบฟเฟอรของตลบทดสอบเทานน

7. หลงจาก 40 วนาท ปอนตลบทดสอบทมตวอยางทเกบไดจากผปวยและบฟเฟอรทดสอบ

หมายเหต: ตองปอนตลบทดสอบเขาไปในตวอยางภายใน 60 วนาทหลงจากเพมบฟเฟอร การปอนเมอเกน 60 วนาทหลงจากเพมบฟเฟอรทดสอบไปแลวอาจทำาใหไดผลลพธทคลาดเคลอน

8. ปดลนชกตวอาน จากนนตวอานจะเรมการวเคราะห 9. ผลลพธจะแสดงขนบนหนาจอภายในประมาณ 20 นาท

หมายเหต: กรณาดคมอดำาเนนการทดสอบฉบบเตมในคมอผใช ASPECT ReaderF กำาจดสงตางๆ ทงหมดทสมผสกบตวอยาง ตรวจสอบใหแนใจวาคณไดปฏบตตามแนวทางการควบคมการตดเชอทถกตอง

การอานผล ASPECT Reader จะวด ST2 โดยอตโนมต ผลลพธจะแสดงขนบนหนาจอ ผควบคมเครองสามารถเลอกพมพผลลพธออกมาได คาทแสดงเปนหนวยนาโนกรม/มลลลตร คอความเขมขนของ ST2 ในตวอยาง

หมายเหต: ระดบ ST2 ทตำากวา 12.5 นาโนกรม/มลลลตร หรอสงกวา 250 นาโนกรม/มลลลตร จะถกรายงานเปน <12.5 นาโนกรม/มลลลตร และ>250 นาโนกรม/มลลลตรดขอมลเพมเตมไดในคมอผใช ASPECT Reader

การแปลผล • สำาหรบบคคลทประเมนตนเองวาเปนผมสขภาพดและผปวยทวไป คาอนเตอรค

วอไตลของ ST2 ทไดจะอยท 15 ถง 25 นาโนกรม/มลลลตร• ประมาณรอยละ 90 และ 95 ของประชากรปกตมความเขมขนอยท 35 นาโน

กรม/มลลลตร1 • ผปวยทไดรบการวนจฉยวาเปน ACS หรอ HF รวมถงผทมความเขมขนของ

ST2 อยท ≥35 นาโนกรม/มลลลตรมความเสยงตอเหตการณไมพงประสงคตางๆ อาท การพกรกษาในโรงพยาบาลหรอเสยชวตภายในชวงระยะเวลาหนง (1) ปทสงกวาผปวยซงมความเขมขนของ ST2 ตำากวาระดบดงกลาว ยงมความเขมขนของ ST2 ทสง อตราเสยงตอการเสยชวตกจะยงสงขน2,3,4

• ในกลมผทไมแสดงอาการและมลกษณะแขงแรงสมบรณ ความเขมขนของ ST2 ทเพมมากขนจะบงบอกถงความเสยงตอการเกดภาวะหวใจลมเหลวทเพมสงขนกวาสองเทา5

• แมวาจะสามารถจดใหผปวย HF หรอ ACS ทไดผลลพธ ST2 เปนลบหรอ <35 นาโนกรม/มลลลตรเปนผปวยและบคคลทมความเสยงตำาตอการเกดเหตการณไมพงประสงคตางๆ อาท การพกรกษาในโรงพยาบาลอกครงหรอเสยชวตไดกตาม บคคลเหลานควรไดรบการรกษาทางคลนคอยางเหมาะสม

• ควรใชผลลพธ ST2 ควบคกบขอมลทางคลนคและขอมลวเคราะหอนๆ ในการวนจฉยและจดการผปวย

การเทยบมาตรฐาน สามารถนำาผลความเขมขนของตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS ไปพสจนตดตามดวยสารละลายมาตรฐานสำาหรบการอางองซงมความเขมขนของโปรตน ST2 ตามทกำาหนด สามารถนำาตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS และตวควบคม ST2 ไปพสจนตดตามดวยสารละลายมาตรฐานสำาหรบการอางองตวเดยวกนได

ขอจำากด1. จำากดการทดสอบเพอคนควาเฉพาะในกลมบคคลทมอาย 18 ปเปนตนไป

เทานน2. ยนยนตวอยางดวย EDTA ทเสนเลอดดำาและซรม และพลาสมาทตอตานการ

คอนจเกตเฮพารน3. แอนตบอดตานทานเชอจากหน (HAMA) ของผปวยอาจสงผลใหผลตรวจ

ความเขมขนของ ST2 ออกมาตำากวาความเปนจรง4. มความเปนไปไดทปจจยตางๆ อาท ปจจยทางเทคนคและขอผดพลาดในการ

ดำาเนนขนตอน รวมถงสารอนๆ ในเลอดสงตรวจทไมไดระบอยในรายการดานลางน จะสามารถรบกวนการทดสอบและสงผลใหเกดผลลพธทผดพลาดได

สารรบกวนตางๆ สารทวเคราะหตอไปนไดรบการทดสอบแยกกนและไมจะรบกวนผลลพธทคาดหวงหากมความเขมขนตามคาระบ:

สาร ความเขมขน

บลรบน 0.1 มลลกรม/มลลลตร – 0.3 มลลกรม/มลลลตร

โคเลสเตอรอล (ทงหมด) 1.5 มลลกรม/มลลลตร – 5 มลลกรม/มลลลตร

ฮโมโกลบน 1 มลลกรม/มลลลตร – 2 มลลกรม/มลลลตร

โปรตน (BSA) 15 มลลกรม/มลลลตร – 60 มลลกรม/มลลลตร

ไทรกลเซอไร/ไขมน (ทงหมด)

1.5 มลลกรม/มลลลตร – 30 มลลกรม/มลลลตร

ยาตอไปนไดรบการทดสอบแยกกนและจะไมรบกวนผลลพธทคาดหวงเมอถกเตมลงในพลาสมา EDTA: acetaminophen, acetylsalicylic acid, allopurinol, ambroxol, amidoadrone, amlodipine besylate, ampicillin, ascorbic acid,

atenolol, bivalirudin, caffeine, captopril, chloramphenicol, cinnarizine, cyclosporine A, digitoxin, digoxin, diltiazem, dopamine, dipyridamole, enalapril maleate, eplerenone, erythromycin, fluvastatin, furosemide, glyburide, heparin sodium, hydralazine hydrochloride, hydrochlorothiazide, indomethacin, lisinopril, nicotine, nifedipine, nitrofurantoin, oxytetracycline, phenytoin, pravastatin sodium, probenecid, procainamide hydrochloride, (S)-(-)-propranolol hydrochloride, quinidine, simvastatin, spironolactone, sulfamethoxazole, theophylline, L-thyroxine, trimethoprim, verapamil hydrochloride และ warfarin

ทดสอบความจำาเพาะในตวรบแบบละลายอนเตอรลวคน-1 ชนด I (IL-1 sR-1) ของมนษย, รคอมบแนนท IL-Iα ของมนษย และ รคอมบแนนท IL-Iβ ของมนษย โมเลกลทไดรบการทดสอบทงสามชนดจะไมแสดงปฏกรยาขามทสามารถตรวจวดได แมวาความเขมขนจะสงเปน 5 เทาของความเขมขนของ ST2 ทวดไดกตาม

คณลกษณะทางประสทธภาพ ความเทยงตรงความแมนยำาในการวเคราะหจะคำานวณตาม CLSI EP5-A2, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline—Second Edition นอกจากนยงใชสงสงตรวจสามรายการ ตวอยางพลาสมา EDTA รวมถงตวควบคม ST2 สอง (2) ตวในการประเมนดวยเชนกน ชวงขณะวเคราะหตวอยาง ชวงการวเคราะหระหวางตวอยาง และความแมนยำาโดยรวมทงหมดจะถกคำานวณสำาหรบการทดสอบสงสงตรวจแตละตว โดยผลความเทยงตรงจะสรปอยในตารางท 1 การวเคราะหนผานเกณฑประสทธภาพเชงวเคราะห โดยแสดงคาเฉลย CV อยท 10.4% สำาหรบชวงขณะวเคราะหตวอยาง และ 13.6% สำาหรบชวงการวเคราะหระหวางตวอยาง และไมพบความเอนเอยงใดๆ ในชวงความเขมขนททดสอบ ประสทธภาพความเทยงตรงถกตรวจสอบโดยการทดสอบ "ระหวางหองปฏบตการ" ซงดำาเนนการตาม CLSI EP15-A3, User Verification of Precision and Estimation of

Bias การวดตางๆ ไดรบการดำาเนนการในหองปฏบตการส (4) แหงวนละหนงครง โดยใชสำาเนาของสงสงตรวจ (พลาสมา) สองชดเปนจำานวนสาม (3) สำาเนาทความเขมขนแตละระดบจากทงหมดสอง (2) ระดบ โดยระดบของเหลวทงสองไดรบการควบคมทกวนเปนเวลาหา (5) วน การทดสอบแสดงใหเหนวาไมพบความแตกตางอยางมนยสำาคญในคาตางๆ ดงทสรปในตารางท 1

ตารางท 1: สรปผลการวเคราะหความเทยงตรง

ระดบ ST2CV ชวงขณะ

วเคราะหตวอยาง

CV ชวงการวเคราะหระหวาง

ตวอยางCV ทงหมด

ตำา (20 นาโนกรม/มลลลตร) 15.4% 16.3% 22.4%

เชงคลนก (32 นาโนกรม/มลลลตร) 4.9% 13.3% 14.2%

สง (81 นาโนกรม/มลลลตร) 10.8% 11.1% 15.5%

ความไวในการทดสอบเชงวเคราะหความไวในการทดสอบเชงวเคราะหจะคำานวณตามสถาบนหองปฏบตการทางวทยาศาสตรและการแพทย (CLSI) โพรโตคอลท EP17-A, Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline เพอคำานวณหาคาสงสดทตรวจพบ (LoB) จงมการใชซรมทไดจากตวออนโค (FBS) เปนแหลงทมาของสารโดยไมเกดขนภายใน ST2 เพอใหสอดคลองกบโพรโตคอลการคำานวณ LoB จงมการนำาสำาเนาตวอยาง FBS จำานวน 60 ชดมาวดเปน

เวลา 4 วน โดยวดสำาเนา 15 ชดตอวน เมอคำานวณ LoB แลว จงมการสบคนคาตำาสดทตรวจพบ (LoD) เพอคำานวณหา LoD จงมการนำาสำาเนาจำานวน 60 ชดของตวอยางพลาสมาของมนษยทมความเขมขนของ ST2 ตำาสแบบมาวดโดยแบงวดวนละ 15 ชดเปนจำานวน 4 วนตอเนอง เมอคำานวณ LoD แลว จงหาคาตำาสดทสามารถรายงานคาเปนตวเลขได (LoQ) เพอคำานวณหา LoQ จงใชการวดแบบเดยวกบทคำานวณหา LoD เพอประเมนความเอนเอยงและความไมเทยงตรง เนองจากคา LoQ ตำากวาคาของ LoD ดงนน LoQ ในแตละโพรโคอลจะถกกำาหนดใหเทากบ LoD ท 12.5 นาโนกรม/มลลลตร

ความเปนเสนตรงประสทธภาพการวเคราะหเชงเสนจะคำานวณตาม CLSI โพรโตคอล EP6-A, Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline ตวอยางพลาสมา EDTA ของมนษยแบบแชแขงถกนำามาใชเพอใหไดมาซงแหลงรวมพลาสมาสำาหรบใชในการวเคราะหน เครองวด ST2 ASPECT-PLUS ไดรบการออกแบบมาใหมขดจำากดเสนสงสดท 250 นาโนกรม/มลลลตร สำาหรบการวเคราะหน แหลงรวมเลอดซงมความเขมขนสงจะถกจดเตรยมทความเขมขน 425 นาโนกรม/มลลลตรและแหลงรวมเลอดซงมความเขมขนตำาจะถกจดเตรยมไวทความเขมขน 13.6 นาโนกรม/มลลลตร แหลงรวมจำานวนสบเอด (11) ชดถกสรางขนจากการนำาแหลงรวมความเขมขนสงและตำาทเกบไวมารวมกนในสดสวนทแตกตางกนออกไป แตละแหลงรวมจะถกวดในสาม (3) สำาเนา การวเคราะหความถดถอยเชงเสนของผลลพธจากแหลงรวมเหลานแสดงใหเหนถงความสมพนธระหวางผลลพธทคาดการณไวและผลลพธทวดไดเชอมกนเปนเสนไปจนถง 257 นาโนกรม/มลลลตร โดยมคา R2 อยท 0.9927 และสมการเชงเสนเปน y = 1.0x + 3.6 ดงรปท 1

รปท 1: ความเปนเสนตรงของเครองวด ST2 ASPECT-PLUS

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

คาทวด

ได

ทคาดหวง ST2 (ng/ml)

เชงเสน

HOOK EFFECTไมพบผลใดไปจนถง 2000 นาโนกรม/มลลลตร

การวเคราะหความสอดคลองST2 ไดรบการยอมรบใหใชรวมกบการประเมนผลทางคลนกโดย ST2 ถกนำามาใชเพอชวยประเมนการพยากรณในผปวยทไดรบการวนจฉยวามภาวะหวใจลมเหลวเรอรงหรอมภาวะกลามเนอหวใจขาดเลอด (ACS) รวมถงใชเพอคำานวณความเสยงตอการเกดภาวะหวใจลมเหลวกลมผทไมแสดงอาการ การวเคราะห ST2 Presage® (รปแบบ ELISA) เปนการวเคราะหอางองสำาหรบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS เพอตรวจสอบความสอดคลองของเครองวด ST2 ASPECT-PLUS กบการวเคราะห ST2 Presage จงมการดำาเนนการวเคราะหพลาสมา EDTA จากผบรจาค 60 ราย การวเคราะหนแสดงคา R2 ท 0.92 และการวเคราะหเปรยบเทยบวธการโดยใชความถดถอย Passing-Bablok แสดงใหเหนวาเทคนคการวเคราะหทงสองรปแบบสามารถเทยบเคยงกนได

สมการความถดถอยของการวเคราะหนคอ y = 1.01x + 5.8 และการทดสอบ Cusum สำาหรบความเปนเสนตรงไมพบคาเบยงเบนอยางมนยสำาคญใดจากความเปนเสนตรง (p=0.75)

นโยบายการคนสนคา หากมปญหาเกดขนกบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS คณสามารถขอสงคนตลบทดสอบทไมไดใชงานและยงอยในซองททำาจากฟอยลได กรณาขอรบหมายเลขอนมตการสงคนจากผจดจำาหนายในประเทศของคณกอนสงคนตลบทดสอบ หมายเลขอนมตการสงคนนตองระบอยบนกลองทจดสงคนสนคา

ความชวยเหลอและขอมลเพมเตม หากตองการสงซอสนคา กรณาตดตอผจดจำาหนายในประเทศของคณ หรอตดตอฝายบรการลกคาของ Critical Diagnostics ท +353 1 691 7061 หากตองการความชวยเหลอทางเทคนค กรณาตดตอผจดจำาหนายในประเทศของคณ หรอตดตอ Critical Diagnostics ท +353 1 691 7061 หรออเมล [email protected]

เอกสารอางอง1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States

population. Clin Chim Acta. 2010 Nov 11; 411(21-22):1825-6.2. Felker GM, et al. Soluble ST2 in Ambulatory Patients with Heart Failure: Association with Functional

Capacity and Long-Term Outcomes. Circ. Heart Fail. 2013; 6: 1172-11793. Ky B, et al. High Sensitivity ST2 for Prediction of Adverse Outcomes in Chronic Heart Failure. Circ. Heart

Fail. 2011 Mar;4(2):180-7.4. Kohli P, et al. Role of ST2 in Non–ST-Elevation Acute Coronary Syndrome in the MERLIN-TIMI 36 Trial.

Clin Chem. 2012 Jan;58(1):257-66.5. Wang T, et al. Prognostic Utility of Novel Biomarkers of Cardiovascular Stress: The Framingham Heart

Study. Circulation 2012 Sep 25;126(13):1596-604.6. Dieplinger B, et al. Long-term stability of soluble ST2 in frozen plasma samples. Clin Biochem. 2010

Sep;43(13-14):1169-1170.

M ผผลต

V เครองมอแพทยชนดวเคราะหในหลอดแกว

i ดคมอการใชงาน

D หามนำามาใชซำา

h หมายเลขรายชอ

X เพยงพอตอการทดสอบ <n>

r จำากดอณหภม

g รหสชด/หมายเลขลอต

H ใชภายใน (วนท)

F ความเสยงทางชววทยา: สงทกำาจดมความเสยงทางชววทยา

หมายเลขผปวย

C เครองหมาย CE Mark

ตลบทดสอบเครองวด ST2 ASPECT-PLUS

บฟเฟอรเครองวด ST2 ASPECT-PLUS

คมอการใชงาน

정량 횡방향 유동량 ST2 검사이 사용 지침에 표시된 정보를 모두 읽고 지침을 모두 숙지한 후 검사를 실시하십시오. 궁금한 사항은 Critical Diagnostics 제품 서비스 부서에 문의하십시오. (지원 절을 참조하십시오.)

용도 ASPECT-PLUSTM ST2 Test는 고속 횡방향 유동 면역 측정 검사기로 ASPECT ReaderTM와 함께 사용하여 혈청, 정맥혈 EDTA 또는 헤파린 항응고화 혈장의 정량을 판별하는 데 사용하도록 되어 있으며 의료 전문가 전용입니다. 이 검사는 심부전(HF) 또는 급성 관동맥 증후군(ACS) 환자의 위험 부담을 계층화하는 데 보조 도구로 사용하는 것이 일반적입니다. 또한 이 검사를 통해 외견상 증상이 없고 건강해 보이는 환자의 진행 중인 심부전 질환의 위험도를 평가할 수도 있습니다.

개요 심장 질환은 매년 세계 곳곳에서 수백만 명에 달하는 환자를 사망에 이르게 하는 주요 사망 원인으로 대두되고 있습니다. 미국에서만 해도 심장 질환은 전체 사망자의 사망 원인 중 25%를 차지하며 각종 암으로 사망한 경우를 모두 합한 비율을 넘어섰습니다. 관상 동맥 질환(CAD) 및/또는 급성 관동맥 증후군(ACS)이 발병하면 대다수의 환자가 치료를 받지만 결국은 심장 질환으로 이어지기도 합니다. 심장 질환은 만성, 진행성 질병으로 심장의 본래 기능인 필수 심박출량을 제공하는 기능이 약해지는 것입니다. 따라서 온몸의 신진대사에서 필요로 하는 양만큼 충분히 혈액을 방출해 낼 심장의 기본 기능이 저하되게 됩니다. 심부전은 세계적으로 점차 널리 퍼지고 있으며 병원 치료 비용에 큰 부담을 안기는 요인이기도 합니다. 부담이 과중한 주요 이유를 들자면, 심부전이 이미 진행 상태인 환자의 경우 입원율이 매우 높고 병원의 자원을 많이 활용해야 하며, 그만큼 사망 위험성도 높기 때문입니다.

KO

검사 원칙 ASPECT-PLUS ST2 Test는 정량적인 방식의 샌드위치 단클론(Sandwich Monoclonal) 횡방향 유동량 면역 측정법입니다. 혈청, 정맥혈 EDTA, 또는 헤파린 항응고화 혈장을 샘플의 웰(well)에 채우면 이것이 항-ST2 항체로 코팅된 스트립을 통과하여 흐릅니다. Assay 버퍼(buffer)를 두 번째 웰에 추가합니다. 그런 다음 ASPECT Reader에 카세트를 삽입하여 배양시키고, 그러면 판독기에서 ST2를 정량 판별하여 보고합니다. 정량적 ST2 값을 판별하기 위해 ASPECT-PLUS ST2 Test를 사용하는 데에는 ASPECT-PLUS ST2 Test 제품의 각 세트마다 고유한 선형 캘리브레이션 곡선을 통해 표준 선형 회귀 분석을 거치게 되며, 이 곡선은 검사 카세트마다 동봉된 RFID 태그에 코드로 기록되어 있습니다. 검사 선에서 형광색 신호를 측정하여 캘리브레이션 곡선에 비교하여 평가함으로써 ST2 농도를 계산하게 됩니다.

제공되는 재료:ASPECT-PLUS ST2 Test 키트에는 인체의 혈청, 정맥혈 EDTA 또는 헤파린 항응고화 혈장 샘플에서 ST2를 측량하여 검사 결과를 도출하는 데 필요한 각종 시약이 모두 포함되어 있습니다.

ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트와 ASPECT-PLUS ST2 Test 버퍼 바이알에 동봉된 시약은 다음과 같습니다.

ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트 h X• ST2에 대응한 MAbs(Murine monoclonal antibodies, 쥐의 단클론 항체)• 쥐의 lg-G에 대응한 염소 다클론 항체• 형광 염색제

ASPECT-PLUS ST2 Test 버퍼 h X• 안정제• 첨가제

Σ=20

Σ=1

PLUS0001-01

PLUS0001-03

필요하지만 제공되지 않는 재료• ASPECT Reader(REF: READ0001)• Electronic Quality Control(EQC, 전자 품질 제어)(REF: EQC0001)• ST2 Controls, 레벨 1 및 레벨 2(REF: LQC1111)• F 생물학적 위험물 및 예리한 폐기물을 담을 수 있는 내관통 폐기물 용기• 타이머• 장갑• 보정된 피펫

주의사항 및 경고1. 체외 진단용으로만 사용하십시오.2. 의료 전문가가 다루어야 합니다.3. 도출된 결과는 임상적 발견과 기타 실험실에서 도출한 결과와 함께 연계하여 해석해야 합니다.4. ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트를 사용 목적에 명시한 것 이외의 다른 어떤 용도로도

사용하지 마십시오.5. ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트는 사용 직전까지 밀봉된 파우치에 넣은 상태로

두십시오. 일회용입니다. 사용 후 폐기하십시오.6. 포장지에 인쇄된 유효 기간이 지난 뒤에는 사용하지 마십시오.7. F 동물성 유래 물질이 들어 있으며, 감염성 질병을 옮길 가능성이 있는 물질로 간주하고

취급해야 합니다. 각종 혈액 샘플, EDTA 혈장 표본과 관련 품목 일체를 다룰 때에는 적절한 감염 제어 지침을 준수하십시오. 키트 구성품 중에서 혈액 또는 혈장에 직접 닿는 품목은 생물학적 위험물이며 감염성 질병을 옮길 가능성이 있습니다. 이는 세척과 멸균 처리를 거친 뒤에라도 마찬가지입니다.

8. 살생물성 방부제로서 활성제(0.05%)를 넣은 Proclin 300을 함유하고 있습니다.9. 검사용 시약이나 표본이 피부, 눈 또는 점막에 닿지 않도록 주의하십시오. 피부나 눈에

닿는 경우, 즉시 물로 씻어 내십시오. 10. 검사를 수행한 다음 손을 꼼꼼하고 철저하게 씻으십시오.11. 폐기물은 감염 위험 물질로 취급하시고, 현지 요건을 준수하여 폐기하십시오.

샘플 수집 및 준비1. 혈청, 정맥혈 EDTA 또는 헤파린 항응고화 혈장 전용입니다. 이 밖의 다른 샘플 유형,

추출 방식 또는 항응고화는 평가된 적이 없습니다. 샘플은 표본을 수집한 뒤 가능한 한 즉각적으로, 신속하게 준비해야 합니다.

환자 샘플은 반드시 수집 후 48시간 이내에 검사해야 합니다(샘플을 상온(18~25˚C)에 보관한 경우). 48시간 이내에 검사할 수 없는 경우, 최대 이레(7일)까지 냉장 보관(2~8˚C)하거나 최대 18개월까지 냉동 보관(-20˚C 미만)하십시오.6

보관 조건(온도) 표본 안정성

20˚C 48시간

4˚C 7일

-20˚C 및 -80˚C 18개월

2. 샘플을 검사하기 위해 실험실로 옮겨야만 하는 경우, 수집 후 48시간 이내에 상온(18°~25°C) 또는 냉장(2°~8°C) 상태로 이송하십시오. 25°C를 웃도는 온도에 노출되지 않도록 주의하십시오.

참고: 현재 건강 상태가 검사 결과에 영향을 미치거나 정확하지 않은 결과를 도출하는 원인이 될 수 있습니다. 검사 결과를 판독하고 후속 조치를 수립할 때 특정 건강 상태 요인을 감안하는 것이 매우 중요합니다. 보관 및 취급 ASPECT-PLUS ST2 Test는 다음과 같이 통제된 환경에서 최대 18 달 까지 안정성을 유지할 수 있습니다.

카세트는 사용 직전까지 밀봉된 알루미늄 포일 파우치에 포장된 상태 그대로 보관해야 하며, 포장지에 인쇄된 유효 기간까지만 보관해야 합니다.• 포일 파우치가 찢어졌거나 구멍이 났거나, 완전히 밀봉되지 않은 경우 카세트를 사용하지

마십시오. 그런 카세트는 폐기하고 다른 카세트를 사용하십시오.• ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트는 2°C~8°C(35~46°F)의 온도에 보관해야 합니다. • 냉장 보관해 두었던 ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트를 사용하는 경우, 사용하기

전에 15분간 상온에 두어 각 포일 파우치 안의 카세트에서 냉기가 가시도록 기다렸다가 사용하십시오.

• 포장지에 인쇄된 유효 기간이 지난 뒤에는 사용하지 마십시오.

참고: 포일 파우치를 개봉한 후 십(10)분 이내에 카세트를 사용하십시오.

품질 제어 고려 사항 ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트에는 포장 하나마다 내부 제어 확인기(검사 카세트의 제어 선)가 하나씩 포함되어 있습니다. 이것은 환자 샘플, 액체형 제어 용액 또는 기본 기능 검사용 샘플(ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트가 제대로 흐르는지 확인하는 용도)을 사용할 때마다 자동으로 실행됩니다. 이 내장 제어의 자동 확인을 통해 값이 한계 내에 있다고 나타난 경우, ASPECT Reader는 검사 중인 환자 샘플에 대한 결과를 알려줍니다. 이 내장 제어의 자동 확인을 통해 제어값이 한계를 벗어난 것으로 나타난 경우, 검사 결과는 보고되지 않습니다. 그 대신 ASPECT Reader에서는 ASPECT Reader 사용 설명서에 명시된 경고 또는 오류 메시지를 표시합니다.

우수 실험실 관리 기준(Good Laboratory Practice)에서는 검사 재료가 배송될 때 또는 신품을 사용할 때마다, 또는 30일에 한 번씩 검사할 것을 권장하며, 이외에도 각 실험실에서 필수로 지정한 표준 품질 제어 절차에 따라 필요한 기간을 두고 검사하는 것이 좋습니다. 제어 또한 환자 표본과 같은 방식으로 검사해야 합니다. 환자 샘플이나 외부 제어를 검사하는 경우, 검사가 어떤 이유로든 실패하면(내장 제어 결함이나 고장 또는 외장 제어가 범위를 벗어남) 환자 검사 결과를 보고하지 않습니다.

사용자는 각자의 현지 정부 지침(예: 연방, 주 또는 지방 자치 단체 정부) 및/또는 품질 제어 인가 요건을 준수해야 합니다.

전자 품질 제어(ELECTRONIC QUALITY CONTROL, EQC ) ASPECT Reader가 제대로 기능을 발휘하도록 하려면 EQC를 사용하십시오. 다음 상황에서 EQC 검사를 수행하십시오. • ASPECT Reader를 처음 설치하는 경우.• ASPECT Reader를 이송했거나 위치를 움직인 경우.• ASPECT Reader의 성능에 대해 의심이 드는 경우.• 각자의 실험실 제어 요건에 따라 필요한 경우. • 매일 일과를 시작할 무렵에 한 번씩.

참고: EQC는 빛에 민감한 물질입니다. 사용을 마친 EQC는 항상 제공된 포일 파우치에 담아 보관하십시오.참고: EQC는 곧바로 검사할 수 있습니다. 샘플이나 검사 버퍼를 사용할 필요가 없습니다.참고: EQC 사용법에 관한 지침 전문은 ASPECT Reader 사용 설명서를 참조하십시오.

검사 실시 방법 검사 진행에 앞서 이 지침에 명시된 정보를 모두 읽고 숙지하시기 바랍니다. • 본 사용 설명서의 기호는 기호 절에서 관련 내용을 확인할 수 있습니다. • 필요한 품목을 모두 준비하십시오(위에 있는 제공되는 재료 및 필요하지만 제공되지

않는 재료 참조).• 혈액 샘플 취급 시 적절한 감염 통제 지침을 따르십시오. 이는 혈액에 직접 닿는 모든

품목을 취급하는 경우에도 해당됩니다. 1. ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트를 냉장 보관된 장소에서 꺼내어 15분간 상온에

도달할 때까지 냉기가 가시게 두십시오. 카세트가 상온이 될 때까지 포일 파우치를 개봉하면 안 됩니다.

2. 검사 샘플을 준비하십시오. 샘플 수집 및 준비 절을 참조하십시오.3. ASPECT Reader에서 다음을 수행하십시오. a. 적절한 정보를 입력하여 로그인 하고 검사를 실시합니다. b. 메인 화면에서 환자 실행을 선택합니다. c. 환자 ID를 입력한 후 환자 실행을 선택합니다.4. 검사 카세트를 포일 파우치에서 꺼내십시오.

참고: 포일 파우치를 개봉한 후 10분 이내에 카세트를 사용해야 합니다.

5. 보정된 마이크로피펫터를 사용하여 환자 샘플을 35uL 피펫으로 추출하여 샘플 웰(well)에 넣으십시오. [ ] 표시가 있는 가운데 웰(well)입니다.

6. 60초가 지난 후 검사 버퍼 2방울(최대 110μL)을 검사 버퍼 웰에 넣으십시오. 이는 검사 카세트 가장자리에 있는 웰로 샘플 웰 옆에 있습니다. 버퍼를 샘플 웰에 넣지 마십시오. 검사 버퍼를 넣어도 되는 곳은 검사 카세트의 버퍼 웰뿐입니다.

7. 40초 후에 환자 샘플과 검사 버퍼를 넣은 검사 카세트를 삽입하십시오.

참고: 검사 카세트는 버퍼를 넣고 나서 60초 이내에 판독기 안에 삽입해야 합니다. 검사 버퍼를 넣은 뒤 60초 이상 지연되면 결과가 정확하지 않을 수 있습니다.

8. 판독기 서랍을 닫으면 판독기가 분석을 시작합니다. 9. 약 20분 안에 결과가 화면에 표시됩니다.

참고: 테스트 수행 방법에 대한 지침 전문은ASPECT Reader 사용 설명서를 참조하십시오.F 샘플에 직접 닿았던 품목은 모두 폐기하십시오. 적절한 감염 통제 지침을 반드시 준수하십시오.

결과 판독 ASPECT Reader는 자동으로 ST2를 측량합니다. 결과는 화면에 표시됩니다. 작동자는 결과를 인쇄해서 볼 수도 있습니다. 샘플 안의 ST2 농도는 ng/mL 단위로 표현한 값으로 표시됩니다.

참고: ST2 레벨이 12.5ng/mL 미만이거나 250ng/mL를 넘어설 경우 결과는 각각 <12.5ng/mL 및 >250ng/mL로 보고됩니다.자세한 정보는 ASPECT Reader 사용 설명서를 참조하십시오.

결과 해석 • 자칭 건강한 사람, 건강 상태가 양호한 정상인의 경우 환자의 ST2 사분위수 값은

15~25ng/mL입니다.• 농도가 35ng/mL이면 정상 인구의 90~95% 수준입니다.1 • ACS나 HF 진단을 받은 환자의 ST2 농도가 35ng/mL 이상인 경우, ST2 농도가 이

수준을 밑도는 환자에 비해 일(1)년 이내에 입원 또는 사망에 이를 확률이 높습니다. 치사율은 ST2 농도가 높을수록 그에 비례하여 높아집니다.2,3,4

• 증상이 없고 겉으로 보기에 건강해 보이는 사람의 경우 ST2 농도가 상승하면 심부전이 진행 중일 위험이 두 배 이상 높다는 것을 시사한다는 사실이 드러난 바 있습니다.5

• ST2 검사 결과가 음성으로 나온(35ng/mL 미만) 경우에도 HF 또는 ACS를 앓고 있는 환자의 경우 입원이나 사망 등 좋지 않은 결과를 낳을 위험이 낮은 환자로 분류되지만 임상적으로 적절한 치료를 받아야 합니다.

• ST2 결과는 반드시 기타 임상 및 진단 정보와 함께 사용하여 진단을 이루고 환자 관리에 활용해야 합니다.

표준화 ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트의 농도 검사 결과를 추적하면 ST2 단백질을 지정된 농도로 함유하고 있는 표준 용액으로 참조할 수 있습니다. ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트와 ST2 제어를 추적해도 같은 기준 용액에 대해 참조용으로 사용할 수 있습니다.

한도1. 연구 목적의 검사는 18세 이상의 대상자로만 한정되었습니다.2. 혈청, 정맥혈 EDTA 또는 헤파린 항응고화 혈장 샘플에 대해 검증을 거쳤습니다.3. HAMA(human anti-mouse antibody, 항마우스 항체)가 있으면 허위로 ST2 농도가

낮게 나올 수 있습니다.4. 기술적 오류 또는 절차상의 오류나 혈액 표본에 다른 물질이 첨가되어 있는 경우(아래에

나열된 물질 이외) 등 여러 가지 요인이 검사 결과에 영향을 미쳐 잘못된 결과를 도출할 가능성이 있습니다.

방해 물질 다음의 분해 물질은 개별적으로 검사하였으며 표시된 농도 이하로 함유되어 있으면 예측 가능한 검사 결과를 저해하지 않습니다.

물질 농도

빌리루빈 0.1mg/mL~0.3mg/mL

콜레스테롤(총) 1.5mg/mL~5mg/mL

헤모글로빈 1mg/mL~2mg/mL

단백질(BSA) 15mg/mL~60mg/mL

트리글리세라이드/지질(총) 1.5mg/mL~30mg/mL

다음 약물들은 개별적으로 검사를 거쳤으며 EDTA 혈장에 첨가하였을 때 예측된 결과를 저해하지 않는 것으로 드러났습니다. 아세트아미노펜, 아세틸살리실산, 알로퓨리놀, 암브록솔, 아미오다론, 암로디핀 베실레이트, 암피실린, 아스코르빈산, 아테놀롤, 비발리루딘,

카페인, 캡토프릴, 클로람페니콜, 항히스타민(cinnarizine), 사이클로스포린 A, 디기톡신, 다이곡신, 딜티아젬, 도파민, 다이피리다몰, 에날라프릴 말레산염, 인스프라(eplerenone), 에리트로마이신, 플루바스타틴, 푸로세미드, 글리부라이드, 헤파린류, 히드랄라진 염화수소산염, 히드로클로로티아지드, 인도메타신, 라이시노프릴, 니코틴, 니페디핀, 니트로푸란토인, 옥시테트라사이클린, 페니토인, 프라바스타틴 나트륨, 프로베네시드, 프로카인아마이드 염화수소산염, (S)-(-)-프로프라놀롤 염화수소산염, 퀴니딘, 심바스타틴, 스피로놀락톤, 설파메톡사졸, 테오필린, L-티록신, 트리메소프림, 베라파밀 염화수소산염 및 와파린.

특이성 검사 대상은 다음과 같습니다. 인체 인터류킨-1 가용성 수용체 유형 I(IL-1 sR-1), 재조합 인체 IL-Iα및 재조합 인체 IL-Iβ. 검사된 분자 셋 중 어느 것도 측정 가능한 수준의 교차 반응성을 보이지 않았습니다. 이는 측정된 ST2 농도를 5배까지 높인 농도에서도 마찬가지였습니다.

성능 특성 정밀도검사 정밀도는 CLSI EP5-A2(정량 측정 방식의 정밀도 성능 평가, 승인된 지침 - 제2판)에 따라 판정되었습니다. 이 평가에는 세 가지 검사 표본을 사용하였습니다. EDTA 혈장 샘플 하나와 ST2 제어 두(2) 개를 함께 사용하여 검사하였습니다. 내부 분석, 분석 간 및 총 정밀도를 각 검사 표본에 대해 따로 계산하였습니다. 정밀도 분석 결과는 표1에 요약되어 있습니다. 본 분석 방식은 허용되는 분석 성능 기준에 부합하며 내부 분석에 평균 10.4%의 CV, 분석 간 변화의 경우 13.6%의 값이 도출되었습니다. 검사 대상인 농도 범위 내에 걸쳐 정밀도 편향을 보인 바는 전혀 없습니다. 정밀도 성능 결과는 CLSI EP15-A3(정밀도 유효성 검증 및 편향 추산)에 따라 “실험실 간(Inter-Laboratory)” 검사를 거쳐 검증한 것입니다. 측정은 네(4) 곳의 실험실에서 하루에 한 번씩, 두 개의 표본을 두(2) 가지 농도로 각각 세(3) 개씩 복제하여 액체 제어 수준은 두 가지 모두로 하고 닷새(5일)간 수행하였습니다. 이 검사 결과 표1에 요약된 값과 크게 다르지 않은 결과가 나왔습니다.

표1: 정밀도 분석 요약

ST2 농도 내부 분석 CV 분석 간 CV 총 CV

낮음(20ng/mL) 15.4% 16.3% 22.4%

임상(32ng/mL) 4.9% 13.3% 14.2%

높임(81ng/mL) 10.8% 11.1% 15.5%

분석 감도분석 감도는 CLSI(국제진단검사표준 및 임상검사실 품질협회) 프로토콜 EP17-A(감지 한도 및 정량 한계 판별 프로토콜, 승인된 지침)에 따라 판정되었습니다. LoB(Limit of Blank)를 판별하기 위해 FBS(fetal bovine serum, 송아지 혈청)를 원재료로 사용하였으며 내생적 ST2는 포함하지 않았습니다. LoB 판별 프로토콜에 따라 FBS 샘플을 60개 복제하여 4일간, 하루에 복제 샘플 15개씩 측정하였습니다. LoB 판정에 이어 LoD(Limit of Detection)가 확정되었습니다. LoD를 판별하기 위해 4가지의 각기 다른, 낮은 ST2 농도의 인체 혈장 샘플을 60개 복제하여 4일간 연속하여 하루에 복제 샘플을 15개씩 묶어 측정하였습니다. LoD 판정에 이어 LoQ(Limit of Quantitation)가 확정되었습니다. LoQ를 계산하는 데에는 LoD 판정에 쓰였던 것과 같은 샘플 측정 방식을 사용하여 편차와 부정확성을 추산하였습니다. LoQ 값이 LoD 값보다 낮았기 때문에 프로토콜에 따라 LoQ는 12.5ng/ml에서 LoD와 동등한 것으로 규정됩니다.

선형성분석 선형 성능은 CLSI 프로토콜 EP6-A(정량 측정 절차의 선형성 평가: 통계적 접근법, 승인된 지침)에 따라 판정하였습니다. 냉동 인체 EDTA 혈장 샘플을 사용하여 혈장 풀을 만들어서 이 분석을 수행하도록 했습니다. ASPECT-PLUS ST2 Test는 선형 상한을 250ng/mL로 두고 설계한 제품입니다. 이 분석을 목적으로 농도가 높은 풀은 425ng/mL, 농도가 낮은 풀은 13.6ng/mL로 준비하였습니다. 고농도 및 저농도 풀에서 각기 다른 수량을 조합하여 열한(11) 개

풀을 마련하였습니다. 각 풀은 세(3) 개씩 복제하여 측정하였습니다. 이와 같은 풀에서 도출한 선형 회귀 분석 결과, 예측한 결과와 측정된 실제 결과 사이의 연관 관계는 선형 값 최대 257ng/mL(R2

값 0.0027) 및 선형 방정식 y = 1.0x + 3.6으로 나타났습니다(그림 1).

그림 1: ASPECT-PLUS ST2 Test 선형성

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

측정된 실제 결과

예측한 ST2 (ng/ml)

선형성

후크 현상(HOOK EFFECT)최대 2000ng/mL까지 아무런 현상도 일어나지 않습니다.

일치 분석ST2는 임상 평가와 함께 사용되는 도구로 정립되어 있으며, 만성 심부전이나 ACS(급성 관동맥 증후군) 진단을 받은 환자의 예후를 평가하는 보조 도구로서도 이미 자리를 잘 잡은 방식입니다. 이외에도 뚜렷한 증상을 보이지 않는 진행성 심장 질환 환자의 위험도를 판별하는 데에도 유용합니다. Presage® ST2 Assay(ELISA 형식)가 ASPECT-PLUS ST2 Test의 기준 분석입니다. ASPECT-PLUS ST2 Test와 Presage ST2 Assay의 일치 확인을 위해 60명의

도너로부터 추출한 EDTA 혈장을 분석하였습니다. 이 분석 결과 R2 값이 0.92였고, Passing-Bablok 회귀법과 비교하여 방법론 비교 분석을 수행한 결과 두 분석 기법이 서로 비슷한 것으로 드러났습니다. 이 분석의 회귀 방정식은 y = 1.01x + 5.8이며, Cusum의 선형성 검사 결과 선형성에 큰 편차가 없는 것으로 나타났습니다(p=0.75).

반품 정책 ASPECT-PLUS ST2 Test에 문제가 있을 경우, 사용하지 않고 포일 파우치에 담긴 상태의 카세트의 반품을 요청할 수 있습니다. 제어를 반품하기 전에는 대리점으로부터 반품 승인 번호를 받아야 합니다. 이 반품 승인 번호가 반품용 배송 상자에 명시되어야 합니다.

지원 또는 추가 정보 제품을 주문하려면 대리점 또는 Critical Diagnostics Customer Service(+353 1 691 7061)로 연락 주십시오. 기술 지원이 필요한 경우, 대리점 또는 Critical Diagnostics(전화: +353 1 691 7061 또는 이메일: [email protected])에 문의하십시오.

참고 문헌1. Lu J, Snider JV, Grenache DG. Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States

population(미국인 환자를 대상으로 가용성 ST2의 기준 간격 정립) Clin Chim Acta. 2010년 11월 11일, 411(21-22):1825-6.2. Felker GM 등저 Soluble ST2 in Ambulatory Patients with Heart Failure: Association with Functional Capacity

and Long-Term Outcomes(보행 가능한 심부전 환자의 가용성 ST2: 기능성과 장기적 결과와의 연관 관계) Circ. Heart Fail. 2013년 6월, 1172-1179

3. Ky B 등저 High Sensitivity ST2 for Prediction of Adverse Outcomes in Chronic Heart Failure(만성 심부전 환자의 악성 예후를 판단하기 위한 고감도 ST2) Circ. Heart Fail. 2011년 3월, 4(2):180-7.

4. Kohli P 등저 Role of ST2 in Non–ST-Elevation Acute Coronary Syndrome in the MERLIN-TIMI 36 Trial(MERLIN-IMI 36 시험판에서 ST를 높이지 않은 급성 관동맥 증후군의 ST2 역할) Clin Chem. 2012년 1월, 58(1):257-66.

5. Wang T 등저 Prognostic Utility of Novel Biomarkers of Cardiovascular Stress: The Framingham Heart Study(심혈관 스트레스의 Novel 생물 지표를 예측용으로 활용: Framingham 심장 연구) Circulation 2012년 9월, 25;126(13):1596-604.

6. Dieplinger B 등저 Long-term stability of soluble ST2 in frozen plasma samples(냉동 혈장 샘플에서 가용성 ST2의 장기적 안정성) Clin Biochem. 2010년 9월, 43(13-14):1169-1170.

M 제조업체

V 체외 진단용 의료 기기

i 사용 지침 참조

D 재사용 금지

h 카탈로그 번호

X <n>회 검사에 충분한 양

r 온도 제한

g 배치 코드/로트 번호

H 유효 기간(날짜)

F 생물학적 위험물: 폐기 가능한 품목에 생물학적 위험성이 있습니다.

환자 번호

C CE Mark

ASPECT-PLUS ST2 Test 카세트

ASPECT-PLUS ST2 Test 버퍼

사용 지침

ST2 定量侧流快速化验进行化验前，请详细阅读本使用说明中的所有信息。如果您有疑问，请咨询“Critical Diagnostics 产品支持服务 (Critical Diagnostics Product Support)”获取协助。（请参见协助部分）。

使用说明 ASPECT-PLUSTM ST2 化验是一种快速侧流免疫层析法，可以与 ASPECT ReaderTM 一同在血清、静脉 EDTA 或肝素抗凝血浆中进行 ST2 定量测定，仅供医护专业人员使用。该化验用于帮助对患有心脏衰竭 (HF) 或急性冠状动脉综合征 (ACS) 患者进行危险分层分析。该化验也可用于评估身体无症状或表面健康的人群发展成为心脏衰竭的风险。

简介心脏疾病是全世界导致人类死亡的首要原因之一，每年都会影响数百万名患者。例如，在美国，死于心脏疾病的人占到了 25%，比所有种类的癌症导致的死亡人数加起来还要多。许多患者因冠状动脉性心脏病 (CAD) 和/或急性冠状动脉综合征 (ACS) 接受治疗，但最终发展成为了心脏衰竭。心脏衰竭是一种慢性、进行性的疾病，在这种疾病中，心脏提供必需心输出量的能力被减弱，从而妨碍了心脏泵出足够血液来支持身体代谢需求的能力。全世界心脏衰竭的发病率正在增长，成为了医院护理成本的一个重要负担。这一负担的重要组成部分存在这样一个事实：晚期心脏衰竭的患者具有高住院率和高资源利用率，且同样也具有很高的死亡风险。

化验原理 ASPECT-PLUS ST2 化验是一种定量的单克隆抗体夹心侧流免疫层析法。血清、静脉 EDTA 或肝素抗凝血浆装入样品槽中，血浆在样品槽中流过涂有抗 ST2 抗体的条带。

ZH

将化验缓冲液加入第二个样品槽。然后将试剂卡插入 ASPECT 读卡器进行培育，读卡器即可对 ST2 进行定量测定并报告结果。使用 ASPECT-PLUS ST2 化验测定的 ST2 的量值，由标准线性回归分析通过线性定标曲线产生，该定标曲线对于每个化验试剂卡中所含 RFID 标签上编码的每批 ASPECT-PLUS ST2 化验均是唯一的。测试线上测量的荧光信号根据定标曲线进行评估，从而计算 ST2 浓度。

提供的材料ASPECT-PLUS ST2 化验套件包括生成化验结果所需的所有试剂，用于测定血清、静脉 EDTA 或肝素抗凝血浆中的 ST2。

ASPECT-PLUS ST2 试剂卡和 ASPECT-PLUS ST2 化验缓冲瓶包括：

ASPECT-PLUS ST2 试剂卡 h X· 小鼠抗 ST2 单克隆抗体· 山羊抗小鼠 Ig-G 多克隆抗体· 荧光染色

ASPECT-PLUS ST2 化验缓冲液 h X· 稳定剂· 赋形剂

未提供的必备材料· ASPECT 读卡器（参考：READ0001）· 电子质量控件 (EQC)（参考：EQC0001）· ST2 控件，1 级和 2 级（参考：LQC1111）· F 用于储纳具有生物危害和尖锐废弃物的防刺破废弃物容器· 计时器· 手套

Σ=20

Σ=1

PLUS0001-01

PLUS0001-03

· 校准吸管

注意事项与警告1. 供体外诊断之用。2. 供医护专业人员使用。3. 结果应与临床表现和其他实验结果一同说明。4. 请勿将 ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡用于使用说明中未认可的任何其他

情况。5. 在使用之前，请将 ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡保存在密封袋中。每次

使用后应丢弃。6. 在达到包装上印刷的有效期后，请勿使用。7. F 包含动物来源材料，应予以处理，以防传播传染病。处理所有血液样

本、EDTA 血浆样本和相关物品时，请遵循正确的感染控制指南。试剂盒中与血液或血浆接触的部件都被视为具有生物危害性，并有可能传播传染病，即便是在您已进行清洗和消毒之后。

8. 包含作为抗微生物防腐剂使用的活性成分 (0.05%) Proclin 300。9. 避免皮肤、眼睛或黏膜与化验试剂或样本接触。如果不小心接触皮肤或眼睛，

请即刻使用清水冲洗。 10. 化验完成后，请使用清水彻底清洗双手。11. 废弃物处置是潜在的感染源，请依据当地法规要求进行处理。

样本采集与制备1. 仅可使用血清、静脉 EDTA 或肝素抗凝血浆。其他样本类型、提取方法或抗凝

剂尚未评估。血浆的制备应在采集样本后尽快完成。2. 患者样本必须在采集后的 48 小时内（室温储存，18-25°C）完成化验。如

果无法在 48 小时内完成化验，可以冷冻储存 (2-8°C) 最多七 (7) 天，或冰冻储存(< -20ºC) 最多 18 个月。6

储存条件（温度）样本稳定性

20ºC 48 小时

4ºC 7 天

-20ºC 至 -80ºC 18 个月

3. 如果样本必须运输至其他实验室进行化验，请在采集后的 48 小时内以室温 (18°-25°C) 或冷冻 (2°-8°C) 条件进行运输。避免样本暴露在 25°C 以上的温度条件下。

注意：当前的健康状况可能会影响测试结果，或导致结果不准确。在读取样品化验结果和采取行动方案时，考虑一定的健康因素是非常重要。储存与处理当在受控环境中储存时，ASPECT-PLUS ST2 化验的稳定性最长为 18 个月，具体如下所示：

将试剂卡包装好，储存于密封铝箔袋直至准备使用，并直至达到包装上印制的有效期：· 如果铝箔袋裂口、破裂或未完全密封，请勿使用试剂卡。丢弃该试剂卡，使

用其他试剂卡。· 在 2°C 至 8°C (35-46°F) 的温度下储存 ASPECT-PLUS ST2 化验试

剂卡。 · 在使用冷冻的 ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡之前，请将铝箔袋包装的试剂

卡放置 15 分钟，使其达到室温，然后再使用。· 在超过包装上印刷的有效期后，请勿使用。

注意：请在打开铝箔袋的十 (10) 分钟内使用试剂卡。

质量控制注意事项每个 ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡包含一个内部控制检查（化验试剂卡上的质控线），其可针对每个患者样本、外部液体控制解决方案或熟练的化验样本自动运行，以检查 ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡流量是否合适。如果该内部控制的自动检查显示数值在限制范围内，则 ASPECT 读卡器将报告正在化验的样本的化验结果。如果该内部控制的自动检查显示控制值超过限制范围，则不会报告化验结果。同时，读卡器将显示警告或错误信息，如 ASPECT 读卡器用户指南中所描述。

实验室优化管理规则建议应使用新批号或新运送的化验材料对外部控制进行化验，或每隔 30 天进行一次外部控制化验，或根据您实验室标准质量控制流程的要求进行处理。如果化验多个患者样本，则应以相同方式对控制进行化验。在处理患者样本或外部控制时，如果化验因任何原因失败（内部控制失败或外部控制超出范围），则不会报告任何患者结果。

使用者应遵循政府指南（例如，联邦、州或当地）和/或认证的质量控制要求。

电子质量控件 (EQC) 使用 EQC 确保 ASPECT 读卡器正常运行。下列情况需要执行 EQC 测试： · 初次设置 ASPECT 读卡器时。· ASPECT 读卡器被搬运或移动后。· ASPECT 读卡器存在任何不确定情况时。· 所在实验室质量控制要求需要时。 · 每天使用之前。

注意：EQC 对光较敏感。每次使用后，请将 EQC 储存在提供的铝箔袋中。

注意：EQC 已准备好进行测试。无需样本或化验缓冲液。注意：请参阅 ASPECT 读卡器用户指南了解 EQC 的详细使用说明。

执行化验请在进行化验前阅读本使用说明中的所有信息。 · 本说明中所使用的符号均在“符号”一节中进行了定义。 · 收集所需的物品（请参见前面的“提供的材料”与“未提供的必备材料”部

分）。· 处理所有血液样本和任何与血液接触的物品时，请遵循正确的感染控制指南。 1. 从冷冻储存中取出 ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡，放置 15 分钟使其达到

室温。在试剂卡未达到室温之前，请勿打开铝箔袋。2. 制备化验样本。参见“样本采集与制备”部分。3. 在 ASPECT 读卡器上： a. 输入正确的信息，登录后执行化验。 b. 在主屏幕中，选择 “运行患者”。 c. 输入患者 ID，然后选择 “运行患者”。4. 从铝箔袋中取出化验试剂卡。

注意：您必须在打开铝箔袋的 10 分钟内使用试剂卡。

5. 使用校准后的微量移液器将 35 uL 患者样本转移到样本槽中，即中央带有 [ ] 的槽。

6. 60 秒后，在化验缓冲液槽（化验试剂卡边缘上样品槽旁边的槽）中添加 2 滴 (~110 μL) 化验缓冲液。请勿向样本槽中添加缓冲液。化验缓冲液必须且只能添加到化验试剂卡的缓冲液槽中。

7. 40 秒后，插入装有患者样本和化验缓冲液的化验试剂卡。

注意：化验试剂卡必须在添加缓冲液后的 60 秒内插入读卡器。如超过 60 秒，则可能导致结果不准确。

8. 关闭读卡器抽屉后读卡器将开始分析。 9. 大约 20 分钟后，屏幕上即会显示结果。

注意：请参阅 ASPECT 读卡器用户指南了解如何执行测试的完整说明。F 处理所有接触过血浆样本的物品。确保遵循所有适当的感染控制指南。

读取结果 ASPECT 读卡器自动测量 ST2。结果将显示在屏幕上。操作员可以选择打印结果。值（单位 ng/mL）代表样品中 ST2 的浓度。

注意：小于 12.5 ng/mL 或大于 250 ng/mL 的 ST2 水平将报告为 <12.5 ng/mL 和 >250 ng/mL。如需更多信息，请参阅 ASPECT 读卡器用户指南。

结果分析 · 在自我认为健康的人群和一般患者中，ST2 的四分位差为 15 到 25 ng/mL。· 在正常人群中，浓度值 35 ng/mL 的占比处于 90% 到 95% 之间。1 · 被诊断为 ACS 或 HF 且 ST2 浓度 ≥ 35 ng/ml 的住院患者，在一 (1) 年内

发生需要住院或死亡等不良事件的风险要大于 ST2 浓度低于此水平的患者。随着 ST2 浓度的增加，死亡率风险相应而提高。2,3,4

· 对于身体无症状和表面健康的个体，ST2 浓度升高则表明患心脏衰竭的风险提高 2 倍多。5

· 即使 ST2 结果为阴性 (<35 ng/mL)，患有 HF 或 ACS 的住院患者仍然可能被归为有较低风险发生不良事件（如再次住院或死亡）的患者和个体，因此应继续接受适当的临床治疗。

· ST2 的诊断结果应配合其他临床和诊断资讯综合使用做为恰当的诊断和患者治疗决策管理应用。

标准化 ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡的浓度结果可以使用包含规定的 ST2 蛋白质浓度的参考标准溶液进行追踪。ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡和 ST2 控件可以使用相同的参考标准溶液进行追踪。

限制1. 研究中进行的化验须限制为 18 岁或 18 岁以上人员进行。2. 使用血清和静脉 EDTA 以及肝素抗凝血浆样品进行检验。3. 如果有人抗鼠抗体 (HAMA)，则可能会错误地产生极低的 ST2 浓度。4. 技术或程序错误等因素，以及下文未列出的血液样本中含有的其他物质，均可

能干扰化验，并导致错误的结果。

干扰物质以下分析物已经过单独测试，不会干扰不高于以下所示浓度的预期结果：

物质浓度

胆红素 0.1 mg/mL – 0.3 mg/mL

胆固醇（总） 1.5 mg/mL – 5 mg/mL

血红蛋白 1 mg/mL – 2 mg/mL

蛋白 (BSA) 15 mg/mL – 60 mg/mL

甘油三酯/血脂（总） 1.5 mg/mL – 30 mg/mL

以下药物已经过单独测试，添加到 EDTA 血浆中时，不会干扰预期结果：对乙酰氨基酚，乙酰水杨酸，别嘌醇，氨溴索，胺碘酮，苯磺酸氨氯地平，氨苄西林，抗坏血酸，阿替洛尔，比伐卢定，咖啡因，卡托普利，氯霉素，桂利嗪，环孢菌素A，洋地黄毒苷，地高辛，地尔硫卓，多巴胺，双嘧达莫，依那普利，马来酸依普利酮，红霉素，氟伐他汀，呋塞米，格列本脲，肝素钠，盐酸肼屈嗪，双氢克尿噻，吲哚美辛，赖诺普利，烟碱，硝苯地平，呋喃妥因，土霉素，苯妥英，普伐他汀钠，丙磺舒，普鲁卡因胺盐酸盐，(S)-(-)-盐酸普萘洛尔，奎尼丁，辛伐他汀，螺内酯，磺胺甲恶唑，茶碱，L-甲状腺素，甲氧苄啶，盐酸维拉帕米，以及华法林。

特异性根据人可溶性白细胞介素-1 受体 I 型(IL-1 sR-1)、重组人 IL-Iα 和重组人 IL-Iβ 进行测试。即使在测得 ST2 浓度的 5 倍浓度条件下，所化验的三种分子均未显示出可测量的交叉反应。

表现特点精确度化验的精确度根据 CLSI EP5-A2 文件《定量测定方法的精确度表现评估》，以及第二版批准指南进行确定。此评估使用了三份化验样本、EDTA 血浆样本，以及两 (2) 个 ST2 控件，并且为每份化验的样本计算出了批内、批间和整体精确度。精确度结果汇总在表 1 中。化验符合可接受的分析表现标准，其中批内化验的平均 CV 为 10.4%，批间化验差异为 13.6%，并且在化验的浓度范围内未表现出任何精确度偏差。准确性表现通过“实验室间”化验按照 CLSI EP15-A3、精确度用户验证和偏差预估进行验证。测定由四 (4) 间实验室进行，每天一次，共两种样本（血浆），各三份，每种血浆样本均拥有两 (2) 种浓度，且这两种样本的浓度水平每天都进行控制，持续五 (5) 天。此化验结果表明与表 1 中汇总的值没有明显差异。

表 1：精确度分析总结

ST2 水平批内化验 CV 批间化验 CV 总 CV

低 (20 ng/mL) 15.4% 16.3% 22.4%

临床 (32 ng/mL) 4.9% 13.3% 14.2%

升高 (81 ng/mL) 10.8% 11.1% 15.5%

分析灵敏度分析灵敏度根据临床和实验室标准协会 (CLSI) EP17-A 文件《检出限和定量限测定文件》和批准指南进行确定。为了测定空白限 (LoB)，使用了小牛血清 (FBS) 作为不含内源性 ST2 材料的来源。根据 LoB 测定文件，需要分 4 天测定 60 份相同的 FBS 样本，每天 15 份。LoB 测定完成后，即可进行检出限 (LoD) 的确定。要测定 LoD，

需要 4 种不同的低 ST2 浓度人血浆样本，共 60 份，每 15 份一组进行测定，连续 4 天。LoD 测定完成后，即可得出定量限 (LoQ)。要计算 LoQ，需要使用用于测定 LoD 的相同样本测量结果来估算偏差和不精确度。由于 LoQ 值小于 LoD 值，则根据文件，LoQ 将规定为在 12.5 ng/ml 的浓度条件下等于 LoD。

线性度化验的线性度表现根据 CLSI EP6-A 文件《定量测定步骤的线性度评估：统计法》和批准指南进行确定。通过冰冻人类 EDTA 血浆样本制作血浆库，使用血浆库执行此分析。ASPECT-PLUS ST2 化验设计的线性度上限为 250 ng/mL。对于此分析，制备了浓度为 425 ng/mL 的高浓度血浆库，以及浓度为 13.6 ng/mL 的低浓度血浆库。通过混合不同量的高低浓度血浆库制成了十一 (11) 种血浆库。每个血浆库采三 (3) 份相同样本进行测定。这些血浆库结果的线性度回归分析表明，预测的和测定的结果之间的相关性为线性，最高浓度 257 ng/mL，R2 值 0.9927，线性方程 y = 1.0x + 3.6，参见图 1。

图 1：ASPECT-PLUS ST2 化验的线性度

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150 200 250

测定值

预期的 ST2 (ng/ml)

线性度

钩状效应浓度最高 2000 ng/mL 不会产生影响。

一致性分析ST2 广泛应用于临床评估之中，帮助评估诊断为慢性心脏衰竭或急性冠状动脉综合征 (ACS) 患者的预后，以及测定无症状个体患心脏衰竭的风险。Presage® ST2 化验（ELISA 形式）是 ASPECT-PLUS ST2 化验的参照化验。为验证 ASPECT-PLUS ST2 化验与 Presage ST2 化验的一致性，对 60 名捐赠者的 EDTA 血浆进行了分析。分析结果显示，R2 值为 0.92，采用 Passing-Bablok 回归法进行的方法比较分析表示，两种化验技术相似。此分析的回归方程为 y = 1.01x + 5.8，线性度累计总和 (Cusum) 检验表明，与线性度 (p=0.75) 没有明显差异。

退货政策如果 ASPECT-PLUS ST2 化验设备出现问题，您可能会被要求退回以铝箔袋包装、未使用的试剂卡。在将试剂卡退回之前，请从您的当地经销商处获取退货授权编号。该退货授权编号必须附在退货包装箱上。

帮助以及其他信息如需订购产品，请联系当地经销商，或致电 +353 1 691 7061 联系 Critical Diagnostics 客户服务。如需技术支持，请联系当地经销商，或致电 +353 1 691 7061 或发送电子邮件至 [email protected] 联系 Critical Diagnostics 客户服务。

参考文献1. Lu J, Snider JV, Grenache DG.Establishment of reference intervals for soluble ST2 from a United States

population.Clin Chim Acta.2010 Nov 11; 411(21-22):1825-6.2. Felker GM, et al.Soluble ST2 in Ambulatory Patients with Heart Failure:Association with Functional

Capacity and Long-Term Outcomes.Circ.Heart Fail.2013; 6:1172-11793. Ky B, et al.High Sensitivity ST2 for Prediction of Adverse Outcomes in Chronic Heart Failure.Circ.Heart

Fail.2011 Mar;4(2):180-7.4. Kohli P, et al.Role of ST2 in Non–ST-Elevation Acute Coronary Syndrome in the MERLIN-TIMI 36 Trial.

Clin Chem.2012 Jan;58(1):257-66.5. Wang T, et al.Prognostic Utility of Novel Biomarkers of Cardiovascular Stress:The Framingham Heart

Study.Circulation 2012 Sep 25;126(13):1596-604.6. Dieplinger B, et al.Long-term stability of soluble ST2 in frozen plasma samples.Clin Biochem.2010

Sep;43(13-14):1169-1170.

M 生产商

V 体外诊断医疗设备

i 请参阅使用说明

D 请勿重复使用

h 目录编号

X 包含足够 <n> 次化验使用的物品

r 温度限制

g 批次编号/批号

H 有效期限

F 生物风险：一次性用品具有生物风险。

患者编号

C CE 标志

ASPECT-PLUS ST2 化验试剂卡

ASPECT-PLUS ST2 化验缓冲液

使用说明

Critical Diagnostics, ASPECT-PLUS, and ASPECT Reader are trademarks of Critical Diagnostics. All trademarks referenced are trademarks of their respective owner. Made and printed in Hungary. © 2016. AW201120 Rev.6

Critical Diagnostics LimitedBlock A, 5th FloorThe Atrium, Blackthorn RoadSandyfordDublin 18Irelandwww.criticaldiagnostics.com

M C

Page Left Intentionally Blank

QUANTITATIVE LATERAL FLOW ST2 TEST …criticaldiagnostics.com/OUS/products/aspect_pdfs/AW201120 Rev...

Documents

Transcript of QUANTITATIVE LATERAL FLOW ST2 TEST …criticaldiagnostics.com/OUS/products/aspect_pdfs/AW201120 Rev...