PCRPCR eVrification of speed up Effect adopting Real-Time PCR into Norovirus Detection !"#$%&' () *...

5
!"#$%&'()*+,-./0123456678 9 9

Transcript of PCRPCR eVrification of speed up Effect adopting Real-Time PCR into Norovirus Detection !"#$%&' () *...

Page 1: PCRPCR eVrification of speed up Effect adopting Real-Time PCR into Norovirus Detection !"#$%&' () * 89 7 % 56 34 01!2 /+,-. J KL IJ F GH 2 DE C< -@AB >? :;

������ PCR����

� ������������

������������� ���

Verification of speed up Effect adopting Real-Time PCR into Norovirus Detection

���������������� � ��� �������� ������������������� � �

�������

��������� �� �������������

������������ � !"#$%&'����

()� ��*+,-.� �/01!234%�567�89

:;<=>?-@ABC<�DE��2F�GHIJKLJ

KMN-OPQR�S-T�<�UV�WXYZ[\H]

�O9-�P�234%^�_I`aMN��bcWde

fg�d9hi<jkc8�*l

fgm��nopqr-OBcsCtuv-T8cwxy

m-O�z{?|}~j��d8�y�Lwxy m�������

��V���m-OBc�: �%<��()BC*���

fg-� ������ �C�-�z{?|}~j��

�:����cd9������ wxy m ��%����A�

��W-���bC��%���K�����K�f b

C*l

�������

���� ����

����!���¡¢£¤¥�� ������¦O§�̈ �V�

©Vª«�����¬�%y�Lwxym-T8c�­®¯°E¯¯

± ¯² ³´µ2¶�· ¸²¹ º�»�̈ ������%f¼m-

T8c�­®¯½E¯¯±½³´µ2¾¶�·¯¯¿½¿¿¯º�l»

-ÀÁcfgbC*l

������������� ����������� l

ÂæO§�Ä�Å1Æ�Çkc ¯¿ÈÉÊ�b�

¯¿Ë¿¿¿ÌÍθ¿ÎÏÐ ÑÒÓ%ÔÕ�Ö×Øf7�bC*ÙÚ�

ÛÜ-ÝbÞÜ%ßàÆ�Çk�K£�ÙV(áâãä�

åb�¯¿Ë¿¿¿ÌÍθ¿ÎÏÐ ÑÒbCÔÕ��æ�çè%��é

��(×ØbcA_ °¿È��êëì-íîb�

ï¿Ë¿¿¿ÌÍί¸¿ÎÏÐÑÒbCðg��ñ§òóÆ(ôõbcÖ

×Øf7�bC*ö÷øP��wùú²¿¿¿l�ûÈ�üxý�¿�ï�

���O9-Çkc��=���bC%��

¯¸Ë¿¿¿ÌÍΰ¿ÎÏÐ ÑÒbCð��òóÆ(ôõb�Ö×Øf

7�bC*l

]_%Ö×Øf7A_ �vüÎÍl ÏÌüýl yvl �ÏÐÏl

�Ï ��vúù���8cyv��¼b�uü����¤���ãV

��( uü�� ×Ø��b�yüÐ��ÎlÐ�ÐüÎ�Ì��ü�üyü�¦O§

��Í�Ìl�tÌÏÍ l�ly���Ì��l�ÌüÐ�tÌÏÍ ü���ÏÐ�Ï Ì���Ð���

8ctuv��®bC*l

������!"�����#$%&'()*'+,-.%�l

ÂÃA_sC tuv -T8c� x�ú¯��ú¯L��y�

x�ú¸��ú¸L��y% !%"#�£V(wxy�dBC*�Ä�

ö÷øP�ÙÚA_sCtuv-T8c�W�W�$�]�

����%~X<&�8�'(H]�C��xüÍ�Ï�lú¯ )

�¯� lwxy"#�£V-x�ú¯��ú¯L��y�¸Ð�lwxy"#�£V

-lú¯L����ú¯L��y��8�*�xüÍ�Ï�lú¸)�¯� lwxy"#�

£V-lx�ú¸��ú¸L��y�̧Ð�lwxy"#�£V-lú¸L����ú¸L��y

��8��(% Ð�� ��lwxy �dBC*�¦ wxy -�8C"

#�£V�+c ½’,--./0�<1;H]CW%(�2

�-rÁc3÷4÷��xw56�dBC*l

j�H]C wxy7��8�9�V�:�(;�<=

b����>!H?cA_�����@�-opb�

A BC-OPDEbC*wxy 7Ä<���KH]Cä��

�F-�"@�������V���ÓãGÚ�:¤�

�u�ú�1;"�V�� ½H�I���ÔqrH?�u�úl

ý�ÎÏÐ��t�Ð l�� �t Ï�ÐlJÏ �K��LÌÏÐ��Ìl�üÐÐL�ÏÎ���8

cf¼bC*�¦f¼"�V�-��ú��ÎÏM�ú¯L �̄ú¯L¸�

ú¯L°�ú¯Lï %N���¦O§ úO� ÎÏM�ú¸L¯�ú¸L¸�ú¸L°

%N���PQ-�8C*RS?-%TU�������

�V���m(V!�WbC����XYm(%V!�

bC*l

����/� ��01234�

j�H]Cwxy7Ä���xw56 ��-OBcZ�V"[µ

b�\Z�V"A_¯]�Ô%|}~-T8c�KÏ�u^�l

��ÌÎÏÐü �Ìl�°�¯lx^tý�l��_��ÐtÏÐ�l�Ï ��8C��@ª

K�Vª`��m-OP�vK�lwy���l°¹¹�vK��(a�bc

�dEbC*"#�£Vú¯L����ú¯L��y�ú¸L����ú¸L��y (

j�H]�ef�|}~gP%Ýhef� �)i56�

d8�|}~g�[jbC ��*l

����5�)678'9!"��l

¸�¯�¯ (sC tuv �k�"@VK�bc��ü_�üÐl

AÐÏ��Ì�üýl wxyl �v��ùyl ��l�vK�� ��8c vK�l wy�m�l

¹n¿¿o��vK��( wxy ������Eèqr�dBC*ú�f

� � �

���������� ������������

� ��� �

Page 2: PCRPCR eVrification of speed up Effect adopting Real-Time PCR into Norovirus Detection !"#$%&' () * 89 7 % 56 34 01!2 /+,-. J KL IJ F GH 2 DE C< -@AB >? :;

������������ ������� ������ ����

� �������������� �������������

������� ���������������������� ��

�������� !"�#��$�%&��'���

�()*���+,��-�!�$�%&��'���.

����/!"�$�%&��'� 0 1�' ���1�

'23����/ 4��� !��!"5

6!"7#8#�9� ��()*�����:$�5���%�5

;;<<5�:$��8 &=#>?�:��/�� !"5

5

�����������

@�1�'.�ABC'�( �2005D3E68�)*

+,8-F�.G-�!�H/-8008123#I4 JK

$�56+I�7L��!251�H��MN8��!"

�#9:�#,;� OP#<,"

PQ*=>RS 5 5 5 5 5 5 5 165�H

TUV?@#AWB?>RS 5 5 62�H

PQ*=>XYC5 5 5 5 5 5 5 5 9�H

TUV?@CDEF#Z[F,5 13�H

\]5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 2�H

G#I4PQ*=>RS� ̂ _`a26?@�bbHc

142�H/129:#defI#NV�ghJ3� def

I#JK$�KI+I� LMN`@13�Hi+L^_`

a10?@#OP10�H�jk!QR defI8169:

(GS/1,2,3,4,5,8,11 G/1,2,3,4,5,6,8,9,12) # NV �CD

lc 165�HmN8�n !"6! TUV?@#AWB

?>RS� AWB?>�+cToT)mpB���(H

�!11?@�CDlc�H��/!"XYC�Z[F,�

\]� G�68#�9�HU8# NV �$@�UVq�

N8��!"

nirs't�uPCRv#WXY�� PQ*=>RS

#I4defI�Z[\ �!�H#I4 149:#de

fI#NV�bbHc30�H�OP]����/!"

����

^_%t��iwc�x�9�` �� rs't�u

PCR v�+c@�1�'.# yq��v(4z 15 D 11

Ea{|wT}~`�1105001�)�WXY�!"6!G#

WXY�zb�!rs't�uPCRv�9#8 2.2�c

d!�H�N8��� NV �9��/ OP#ef8Bg

v/PCRvi+Lhi%���r������%v38�

��!QR�jk�M�!"

l ��(m/1�'.n@u#y3

o ��$/defIp#N�3

q �x�9��G�!��#�r�&���r�&

��������

������������ �����������������

������

������

������

������

������

������

�����

�����

������

������

�������

�������

�������

������

������

�������

�������

������

�������

��������

��������

��������

��������

�������

�������

��������

��������

�������

��������

��������

��������

��������

��������

�������

�������

��������

��������

�������

��������

��������

���������

��������

���������

������

������

������

������

������

������

������

�����

�����

������

������

�������

�������

�������

������

������

�������

�������

������

�������

��������

��������

��������

��������

�������

�������

��������

��������

�������

��������

��������

��������

��������

��������

�������

�������

��������

��������

�������

��������

��������

���������

��������

���������

���

� ��� �

Page 3: PCRPCR eVrification of speed up Effect adopting Real-Time PCR into Norovirus Detection !"#$%&' () * 89 7 % 56 34 01!2 /+,-. J KL IJ F GH 2 DE C< -@AB >? :;

����������� ����

����������� ��������������

������ !"#$%&'(�)*+,�)�-./�

0123456789:��9;<:=>??@A:BCDEFGG:HFIJKLMNO�P1

QQRSOTU$VPWOXSOT�45UYZ%[\]

^_#�`ab_�cde`S$\fg`hij_�klm

`no#V:

pqr��stuv�w/xy0z{_\S$�|}~7v

1]�����/z�0�1��]����{�g,��

1�(���`��_��l{�%"���`�g_#V:

P1��n�1{�i�����������1'(�

���{����1����)��"�����)��"#V:

:

�������� ���

����

�����

���

����������

������� �������

���

���

����������

���

������ ������������������� !"

�#���� �����������������$� !"

���

����������

������� �������

���

���

����������

���

������

������

������

������

������

������

�����

�����

������

������

�����

���������

�����������

��������� �

������

������

������

������

������

������

�����

�����

������

������

�����

���������

�����������

��������� �

���������� ������������

� ��� �

Page 4: PCRPCR eVrification of speed up Effect adopting Real-Time PCR into Norovirus Detection !"#$%&' () * 89 7 % 56 34 01!2 /+,-. J KL IJ F GH 2 DE C< -@AB >? :;

������������ ����������

������ ����� ��� �����������

�������� �!�"#��$%�& � '()& *

�(�+,-./0�12

34567�����$%89:+,-.�;<=>?@

A�+(B�CDEF�G�#�HI�H�=JA�9:+KL

M#0NOPQMR�1S+TU$VB�H�=JA WX�

��P����YZ.�12

[R+\.]^5%;<_P`abcE�dHe�H�=JA

L�9:+KL��E�fgEh4iajk./0/P2

�dle�H�=JAam0��$ nopAqPQMR�12

#'�]r� ��� s<���E������ ���

;<a#��67�H �����$%��dte�HIud*e�H�

=JA�9:+vw./0�1]r� ��� �C"#��

Ux%y�V�z+{|oBa}XMRB12

L����$E �H =JA+~.#0��%������

��� s<a��.�E�[�(�#��E������

�� �������� � ��YZ.�1yRM���%�6

7�NO%���s<������P.�%�]r������2

��� ��./0�������z�V��1[����

]r�������2���%;<V����E����LR

Bya�MoBa�������2�����E���������(

zP��"+�RBa���R�12

���������

]r��;<���67�����+�0/�����

�������.�NO�;<  �¡��RB¢£¤¥

�¦�A§¨a+©ª.�«¬­®1[�¯°���±u ¥E

t*d²³�������M´µ�¶���E���R�·O�¦

�A§Et�d�¸�a¹¹º���P���[���¦�A§

%­��¸V��12

������ ��� %»"����S�<Em0���

�;<E�#�#ByaE�RBE[�¼��»"��

+�� y.�¶%���#�#B1��½�¾.� ��

����»"��%��� ��¢£¤�� ���©ª.�

¯°�P�aP�Y<Em0a¡��R���+F��R/

0B ��E��¿# ���µ�0¢£¤¥ �8���G��

c�����R�12

[�������À�Á±������ ���À�Á���À�±��l

��wu��Á+�0/������������\�a./

0B¢£¤��«S+§�� A�§@A!",®+���

�#�#B(�#��E y�/0#0�#$oB��+�

��� �%�&��¢£¤�� '�Â(?)A(*>q

��.�1.�.�u ��o+/+'0/��%$�MR

#�����,-.- /0oB�1#cE��+�L

R/0�G�<#c�2�34+(Ba}XMRB1����

�����%56����(zP0ÃÄ7�pA?#���

Vz�¼Å /0oB�1�·8+(B9: ;<¹o0

a�R/0B�����(z=�.� ��Æ �>Ç�E��¯

°+?��:0/�BG�<EVB12

#'���±u ¥'()·O�¦�A§%���¦�A§

a©ª./@µa#B��µE������+�fr%¢£

¤¥+AS�"+s< no%BVB[�(�#���

·8 Em�#����P.R#012

�T(z��È+É�.� �� CD�¢£¤¥+�0/%�

¢£¤�����+ 4.��+EFEGH�pAq%#

���/�¢£¤¥ ��G�VBa��.�12

������������ !"#$%�

¯°a./���"# �� ��iI ©ªoBa¬J�K�

5za#��12

��� +(B��ÀÊL4M567�ËN]^5672 Ì

��l ��Á% ��d�¸V��E������� ��� %

�²d*¸a�ÃB�+TO.�1S+ËN]^567+'<B

;< %����À�Á±���������À�Á no���P

OE?������ � ��d²¸�M������ ��� �

*�d�¸L��H³Q�TO.�12

����������

���� ��� ������

���� � �����

���� � �����

���� � �����

���� � �����

���� � �����

����� � �����

���� �� �����

���� � �����

���� � �����

���� �� ����

��� � �����

��� � �����

���� � �����

���� � �����

����� � �����

�� ����

� ��� ����

����������

���������

� �

� ��� �

� �� ��

� �

� � ��

� � �

��

����������

�������

��� ��������

�������

������

��

� ��� �

Page 5: PCRPCR eVrification of speed up Effect adopting Real-Time PCR into Norovirus Detection !"#$%&' () * 89 7 % 56 34 01!2 /+,-. J KL IJ F GH 2 DE C< -@AB >? :;

������������� ����������������

������������� �� ��� � ! "�#$�%&'

(�)*+,-.�� ���/0!123����4�567�8

9:�;�� ����� �� �<=�&���>�?�9@�

�<AB<CD������3��EF :<�89

:(��GHFI3(����JK,LAB�M�NH��

F<��GMAF�O(��3PQMHF7

������������ ��������������

RS %&TU�VN����3EF����IHN���

��3���$�����K�-�)�- L!"K�(W�

�3AF�#����X���A$%(Y�#F7N�/:�

&'Z[A�\]^����_()*EFI3^PQD`

aF3�&'+'�',b���<c-db�eEF3f.

GHF7g</h�ijk0<lmn�����< /! - :

�)*EFo/pq���rs�\t0spq��EF31V�

�CDu3vVGH�7

����23&4b�;5F6)7n���>�GM�wx�

\�;5F�89:<b8^9:��FI3tPQF3�;<

y=>(�NHF7

������

����������� �����������

����������� !�"� #$%�&'(&)�#

$%�*+�&������������,-��� ./0

123456�789:;<=&�> ?@2����

4�AB�C������DEF�G�H�I�J�KL�

�M-NO=&PQ2�RST�UV���WXYZ[\

]^ _`�&'a

b�PQ�cd�>�����"UVefgh�)2�

ijk��[�lm]nopq �"rW])2���W

Xest�fgh�)2]^euv<=���Z[\�w

xyz�{���|}!]~;e�(=�'

�����

I<z�{|��?@ABC{|JK,L{|DE�O

FGz}HIJ�;����GH�DE�#��KLMN�

@AD<OP�QR���NE7

���� !�

�Ma����,ijk��[������,U��,����

��55(10),7-16(2005)

�MaKageyama T et al.:Broadly reactive and highly

sensitive assay for Norwalk-like viruses

based on real-time quantitative reverse

transcription-PCR,J.Clin.Microbiol.,41,1548-1557a

(2003)

�Ma��U�����k��[����,k��[T��

��������C���M(2000)

�Ma��U�����k��[����,k��[T��

��������C�3�M(2003)

 Ma¡¢£¤�,i�k¥�¦mk��[(NLV)�����

��§¨©ª«¬­lq® (̄SSCP)�°±,²³2k

��[,30(3),163-171(2002)

´MaKageyama T et al.:Coexistence of multiple

genotypes,including newly identified genotypes,in

outbreaks of gastroenteritis due to Norovirus� �

in Japan,J.Clin.Microbiol.,42,2988-2995(2004)

�����������

���� ���������

����� ��� ���

�� ���� ������� ��� ���

���� ���������������

������

���

��� ��!�

����

���������� ������������

� ��� �