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    Genética y Biología Molecular

    CICLO DE VIDA,

    MORFOLOGÍA EIDENTIFICACIÓN DE

    SEXOS

    ZAMBRANO ROSASFERNANDEZ FALLA

    UNIVERSIDAD DEL TOLIMALicenciatura en Ciencia Natura!e " E#ucaci$n A%&ienta!

    IBAGU' ( TOLIMA)*+

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    Genética y Biología Molecular

    INTRODUCCION

    Cada organismo desempeña un papel esencial para su desarrollo en cuantosu transmisión de información biológica claramente de los progenitoresdirectamente al progenie. La importancia radica que a través de losprincipios genéticos se a llegado a estudiar y comprender ciclos!morfología y dem"s características especí#cas de cada especie para así clasi#car los diferentes organismos! se a referenciado en este caso laespecie $. melanogaster o también conocida como la mosca de frutadebido a las venta%as que posee este para su estudio! porque su ciclo devida es corto pero se reproducen en gran cantidad y debido a que susfenotipos cumplen la función de marcadores genéticos! permiten esclarecerf"cilmente su genotipo

    La especie $. melanogaster es un insecto perteneciente al orden $ípteraque agrupa aquellos organismos en el que solo el primer par de alas es

    funcional y el segundo se a transformado en órganos de equilibrio!conocidos como alterios o balancines. &l ser moscas pequeñas y pr"cticaspara su estudio son muy utili'adas en traba%os e(perimentales por su f"cilmane%o! su corto ciclo de vida y gran cantidad de mutaciones que estapuede presentar )Ciencias Biologicas! Claude &. *elc + vol ,-ed. ///0.

    $rosopila melanogaster presenta varios estadios dentro de su desarrolloontogénico )1amos!233,0. 4l desarrollo embrionario de la mosca! que sigue a la fertili'ación y ala formación del cigoto! se produce dentro de las membranas del uevo5 lossiguientes estados son6 larva )2! y , estadío0! pupa! imago o adulto. La

    duración de estos estadíos varía con la temperatura! siendo la ideal entrelos /789C. La e(posición a temperaturas superiores a ,/9C e inferiores a2/ 9C puede provocar la esterili'ación y muerte de las moscas! adem"s deproducir efectos sobre el fenotipo! variaciones en la penetración oe(presividad de determinados genes )Me%ía! //30. 4n su "bitat natural laduración del ciclo es m"s variable! como resultado de los cambios clim"ticosy la adversidad del ambiente.

    OB-ETIVOS

      1econocer las diferentes etapas del ciclo de vida de D. melanogaster. 

    $eterminar las características morfológicas e(ternas de la DrosophilaMelanogaster. :denti#car las características que determinan el dimor#smo se(ual de

    D. melanogaster . Comparar las diferencias anatómicas entre embras y macos de

    esta especie. :denti#car las diferentes estructuras que acen parte y son

    características de la morfología e(terna e interna de D. melanogaster .

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    MARCO TEORICO

    4l género $rosopila contiene unas /// especies! por lo general bastantediversas en cuanto a "bitat! morfología! comportamiento! etc. 4ntre ellas lam"s conocida es $rosopila Melanogaster! que es una de las especies m"sestudiadas. ;u genoma fue secuenciado en el año /// )fue el < organismoeucariota que se consiguió obtener tras C. elegans0.Los drosofílidos est"ndistribuidos por todo el mundo! en "bitats tan variados como desiertos!ciudades! bosques! 'onas alpinas... si bien ay mayor n=mero de especiesen las 'onas tropicales.

    Cic!. #e /i#a

    La D. melanogaster  incluye cuatro fases6 uevos! larva pupa y adulto. La

    duración del ciclo varía con la temperatura del cultivo. & 25℃ ! el ciclo

    dura alrededor de 2/ días y a 20℃ ! puede durar alrededor de 28 días.

    >ero la temperatura adecuada y m"s recomendable para el cultivo es de25℃ .

    0ue/. 1*23%%24Las embras pueden poner uevos dos días después de emerger del estadode pupa! la puesta aumenta por día durante una semana asta 8/ o ?8uevos por día. Los ponen sobre la super#cie del alimento! seg=ncaracterísticas del uevo es ovoide! con dos pequeñas proyecciones queemergen de un e(tremo! est"n son aplanadas y su función es permitir aluevo no undirse en el medio de cultivo. Los uevos son perceptiblessobre la super#cie! y el desarrollo embrionario del uevo tarda

    apro(imadamente 2 día a 25℃ ! es cuando la larva emerge del uevo.

    Lar/a 1563 %%244s de color blanco y segmentada! esta tiene partes bucales de coloraciónnegra )gancos mandibulares0! corresponde a una región cef"lica estreca!no tiene o%os! estas larvas no tienen apéndices! respiran por tr"queas yposeen un par de espir"culos )poros aéreos0 en los e(tremos anteriores yposteriores del cuerpo. La fase larvaria es r"pido comer y crecer. Consisteen , estadios6

    • 4stadío 2 y . @erminan en mudas! cada muda implica unaeliminación completa de piel y partes orales de la larva y es elmecanismo por medio de la cual crece.

    • 4stadío ,. @ermina en la pupación! pero antes de la pupación la larvade%a de comer! se arrastra acia una super#cie seca! y se revierte sus

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    espir"culos anteriores. La fase larvaria dura alrededor de A días a25℃ ! es ese momento el tercer estadío y mide apro(imadamente

    A.8 mm de largo.

    7u8a 1 %%24

    La pupa se le considera la fase reorgani'ativa del ciclo de la mosca! puestoque la mayoría de las estructuras larvarias son destruidas! y las estructurasadultas se desarrollan a partir de te%idos embrionarios llamados anlagen)discos imaginables0. 4stos te%idos embrionarios an permanecido latentesen el animal desde su diferenciación e el uevo. 4l animal empupa dentrode la =ltima piel larvaria! la cual en su inicio es suave y de color blanco! perogradualmente se endurece y adquiere un color m"s oscuro. Los cambiosresultan en el desarrollo de un individuo con la forma corporal y las

    estructuras del adulto )imago0. La fase de pupa tarda de A días a 25℃ ! el

    adulto emerge del pupario.

    A#u!t. 1) %%24

    Considerado la fase reproductiva del ciclo. La mosca emerge o eclosiona delpupario for'ando su salida por el e(tremo anterior del pupario. 4n un inicio!la mosca adulta es de forma elongada con alas no e(pandidas. 4n una oralas alas se e(panden y el cuerpo gradualmente adquiere una forma adultom"s de#nido. 4n un inicio los adultos son de coloración claro! pero dentro delas primeras pocas oras se obscurecen y es cuando ya adquieren su colorcaracterístico.

    Los adultos D. melanogaster  pueden aparearse oras después de aberemergido del pupario. 4l esperma es almacenado en las espermatecas y enlos espir"culos ventrales de la embra y es liberado gradualmente aloviducto a medida que se producen los uevos pasados por el oviducto a lavagina. La embra empie'a a depositar uevos apro(imadamente a los días de aber emergido! puede depositar asta 8/ a ?8 uevos por díasdurante los primeros días. $espués la producción de uevos disminuye. 4l

    promedio de vida de las moscas adultas es de ,? días a 25℃ .

    Imagen 1. Ciclo Biológico y detalles de la anatomía del adulto

    (Imago) D. melanogaster

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    9tt8:;;

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    T$ra@

    4l tóra( asume las paredes de cada segmento involucran transversalmenteuna placa dorsal! una lateral en cada lado entre las alas y la base de laspatas! y en una placa ventral entre las bases de las patas. @odos lossegmentos del tóra( se encuentran casi fusionados formando una ca%a casisólida. 4l prototora( es muy reducido y sólo sirve de soporte para el primerpar de patas. La posición dorsal o notum es e(clusivamente un collarestreco que se e(tiende a través del tóra(! est" fusionando posteriormente

    con el mesonotum y lateralmente con los elementos pleurales de su propiosegmento! separados por un pliegue.Los esternitos dos pequeñas placas ventrales que separan las co(as de laspatas.Los grandes pelos del tóra( ocupan una posición casi de#nitiva y #%a! est"nformados por dos tipos de células! tricogénitas y termogénitas con funciónnutricional y sensorial respectivamente. Las setas dorsocentrales! lospostalares y los estructurales son importantes fenotípicamente. Lossegmentos desde donde aparecen las alas est"n estrecamente unidos yson llamados pterotóra(. ;e presentan un marcado alargamiento delmesotóra( y una reducción del metatóra(! por lo que las alas mesotor"cicastienen la función total del vuelo! mientras que las alas metator"cicas se an

    reducido a los alterios que funcionan como órganos de equilibrio. 4stos sedividen en tres partes6 una porción basal! una porción media y una porciónapical.

    Imagen ". #ista lateral y dorsal de cabea y tóra!

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    A.%en

    4n ambos se(os la segmentación a sido modi#cada por desarrollossecundarios! de manera que el n=mero primitivo de segmentos es difícil deencontrar! sin embargo! situados en la membrana pleural y cercana almargen ventral de los terguitos. 4n ambos se(os falta el esternito del primersegmento abdominal. La embra muestra ser m"s generali'ada5 el 9segmento no tiene espir"culos ni esternito de#nido. $espués de este solo seencuentra un pequeño segmento donde aparece el ano! la abertura genitalse encuentra entre los segmentos 9 y 39. 4n el maco es diferente. 4l ?9segmento desaparece aparentemente y queda representado sólo por elespir"culo y el 9 sólo por una placa pequeña en cada lado! el 39 est"fuertemente modi#cado! muestra un terguito muy grande y un eternito muypequeño y el 2/9 se encuentra representado por un par de placas situadasal lado del ano.

    Imagen $. Di%erencias entre mac&os y &embras en el abdomen('isión 'entral).

    Imagen . or%ología del ala

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    I%a>en 2 Di=erencia entre 9e%&ra " %ac9. en e! 8ri%er 8ar #e8ata

    Materia!e

    Moscas Drosophila melanogaster 

    ;olución de cloroformo o removedor de esmalte para sedar lasmoscas.

    Gotero >incel para e(traer m"s f"cilmente las moscas del frasco. 4stereoscopio 4mbudo 4spuma 'abra  @apa con algodón

    Met.#.!.>?a

    2. >ara observar el ciclo de vida de D. melanogaster  

    se dispone de Aestereoscopios! en el que se dispone en el siguiente orden6 uevos ylarvas del estadío 2! ! y , que se encuentran en solución salina y las

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    pupas e imagos que se encuentran en frascos de cultivo en elcepario. Con las cuales se pretende identi#car las característicasmorfológicas de cada una de ellas.

    . Las moscas est"n depositadas en un frasco de vidrio y para poderobsérvalas se debe tener en cuenta5 golpear el frasco contra unaespuma para que las moscas se retires del tapón y caigan al fondo deeste.

    ,. Luego se pasan las moscas al frasco eteri'ador para dormirlas! estose reali'a con la ayuda de un embudo donde se dispone de maneramuy r"pida para que no puedan escapar y así queden depositadas enel interior del frasco! este eteri'ador contiene una tapa en corco elcual tiene un algodón donde previamente de les agrego cloroformo oremovedor de esmalte para sedar las moscas.

    A. Ena ve' dormidas se disponen en una lamina blanca para observarlasen el estereoscopio! para posteriormente separarlas por genero)maco y embra0! el ob%etivo reali'ar las observaciones de acuerdo asus características descriptivas! diferencias y seme%an'as! rasgos.

    8. ;e anotan las observaciones con sus respectivos esquemas de losestadíos y morfología.

    RESULTADOS

    Cic!. #e /i#a " Eta#?. !ar/a!e:

    Imagen *.

    9tt8:;;>ete>2uni/a!!e2e#u2c.;329t%!

      Ta&!a N+

    Eta#?. Tie%8. #e eta#?.Fuevo )+ 9.raLarva 2 5 9.raLarva 9.raLarva , ++ 9.ra>upa 0ata )+ 9.ra:mago Cic!. c.%8!et. #e +*

    a +3 #?a

    http://geteg.univalle.edu.co/5.htmlhttp://geteg.univalle.edu.co/5.html

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    Ta&!a N ) 2 @iempo de cada estadío de las moscas seg=n sutemperatura.

    TEM7ERAT

    URA

    LARVA 7U7A TOTAL

    )* días ., 28)3 8 días A.8 7 8 3.8 + 2/+* 8? días+3 2 días

      O&er/aci$n en e! etere.c.8i. I%a>en 2

    0ue/.: seg=n características del uevo es ovoide! decolor blanco presenta dos gancos anteriores es decir

    pequeñas proyecciones que emergen de un e(tremo!est"n tienen forma aplanada y su función es permitiral uevo no undirse en el medio de cultivo! tiene unamembrana de corion! estos uevos son perceptiblessobre la super#cie del cultivo! el desarrollo embrionario

    del uevo tarda apro(imadamente 2 día a 25℃ ! es

    cuando la larva emerge del uevo.

      Micropilo Gancos

    Células e(agonales

      Eta#?. #e !a !ar/a2 I%a>en 2

    ;u coloración es blanca!tiene segmentos! seaprecia la parte bucal elcual es de color negrodenominado )gancosmandibulares0! estacorresponde a la regióncef"lica! no se aprecia loso%os! poseen un par deporos aéreos en lose(tremos anteriores yposteriores del cuerpo.

    Intetin. 8r.&$ci#e >anc9. a!i/a!eGanc9. cau#a!e

    Eta#?. + " )2 @erminan en mudas! cada muda implica una eliminacióncompleta de piel y partes orales de la larva y es el mecanismo por medio dela cual crece.

    Eta#?. 2 @ermina en la pupación! es alargada! traslucida con gancosde#nidos se arrastra acia una super#cie seca! revierte sus espir"culosanteriores. Mide apro(imadamente A.8 mm de largo.

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      7u8a2 I%a>en +*2

    4n este estadío la mosca ya presenta todos sus órganosde#nidos los cuales se desarrollan a partir de un te%idoembrionario llamado anlagen! esta pupación se da dentrode la =ltima piel larvaria! esta piel al inicio es suave yblanda pero luego se endurece y toma un color oscuro.

    &ntenas

    %os

    Cola posterior anal

     

    Ta&!a N Caracter?tica %.r=.!$>ica #e! %ac9. " 9e%&ra

    C&1&C@41:;@:

    C&;

    M&CF; F4MB1&;

    CABEZA O., %an#?&u!a, antena O., %an#?&u!a,antena

    O-OS C.%8uet. 8.r .ce!.,c.!.raci$n r..2

    C.%8uet. 8.r.ce!., c.!.raci$n

    r..2ANTENAS C.n 8e!. en.ria!e, en

    =.r%a #e r&.! in 9.a2C.n 8e!.en.ria!e, en=.r%a #e r&.! in9.a2

    MANDIBULA C.ntiene 8r.&$ci#e !ar>a "8e!. en.ria!e2

    7r.&$ci#ee%i!ar>a " 8e!.en.ria!e2

    CERDAS En !a ca&eHa, " t$ra@ #.ra!2 En !a ca&eHa, " t$ra@#.ra!2

    EXTREMOTERMINALDELABDOMEN

    Re#.n#ea#. F.r%a a!ar>a#a

    7ATAS C.n 8e!. C.n 8e!.TAMAO DELAS ALAS

    C.rta 8er. % !ar>a Juee! a.%en

    !ar>a

    K DE VENASEN LAS ALAS

    5 /ertica!e " ) tran/era!e 5 /ertica!e " )tran/era!e

    SEGMENTOSABDOMINALES

    3 SEGMENTOS SEGMENTOS

    CARACTERES C.n 8eine e@ua!e Carecen #e 8eine

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    SEXUALES0ALTERIOS1=a!a a!a4

    7.een 8.een

    DIFERENCIACION ENTRE SEXOS

    Características de las embras62.7 &bdomen en punta y m"s grueso que el del maco..7 $orso del abdomen con bandas transversales oscuras y separadas unasde otras asta el #nal del mismo.

    Características de los macos62.7 Menor tamaño que las embras..7 4(tremo del abdomen de forma redondeado.,.7 Las =ltimas bandas transversales del abdomen fusionadas! conapariencia oscura.A.7 >eine se(ual )quetas modi#cadas0 en el primer segmento tarsiano delprimer par de patas.

    Fi>ura ++2 A.%en #e una 9e%&ra " e! #e un %ac9. 14 #i&u. #eA!#i #e O"arH&a!4

    CONCLUSIONES

    • Con la reali'ación de este laboratorio observamos características

    genotípicas de la DROSOPHILA MELANOGASTER.• bservamos las diferencias entre maco y embra en las moscas

    así como el tamaño del peine se(ual! las bandas abdominales! formadel e(tremo abdominal! color de o%os y tipo de alas y numero devenas.

    • 4sta se alimenta de levaduras que fermentas y que se encuentran enlas frutas en descomposición! y adem"s es muy f"cil de mane%ar!cultivar! y mantener.

    • La $. melanogaster os ofrece una gran venta%a para e(perimentarcon ella ya que produce gran cantidad de descendientes! desde elestado larval se pueden apreciar sus te%idos y diferenciar sus

    características anatómicas como sus estructuras asta el estadoadulto.

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    Bi&!i.>ra=?a ///! C. &.+v. ) ///0. Ciencias iologicas! . Ciencias Biologicas! C. &.+

    v. )s.f.0 Grupo de 4studio y @raba%o en Genética G4@4G. Eniversidad del Halle. >r"cticas de laboratorio de genética curso /227/2

    ttp6--ciber7genetica.blogspot.com-/22-/-guia7basica7para7el7uso7de7drosopila.tml

    G4D4@:C& de MACGRA 0ILL EDICION Manual de pr"cticas de genética y cuaderno de traba%o! Eniversidad

    &utónoma de Mé(ico! 4scrito por 1osario 1odrígue'7&rnai'! primeraedición //8

    Cita)me%ía! //30

    Lin i%>ene

    ttp6--III.unioviedo.es-esr-pp-cb2.pdf 

    http://ciber-genetica.blogspot.com/2011/02/guia-basica-para-el-uso-de-drosophila.htmlhttp://ciber-genetica.blogspot.com/2011/02/guia-basica-para-el-uso-de-drosophila.htmlhttp://www.unioviedo.es/esr/pp/cb1.pdfhttp://ciber-genetica.blogspot.com/2011/02/guia-basica-para-el-uso-de-drosophila.htmlhttp://ciber-genetica.blogspot.com/2011/02/guia-basica-para-el-uso-de-drosophila.htmlhttp://www.unioviedo.es/esr/pp/cb1.pdf