metodos biofisicos

8/16/2019 metodos biofisicos

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MÉTODOSDE PESQUISA NA

BIOFÍSICA


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MÉTODOS BIOFÍSICOS DESTUDO

São métodos utilizados com base noconhecimento físico que se aplica nabiologia, com o objetivo de obter métodosdiagnósticos e de tratamento para oauxílio da Biomedicina e outras áreas deSa de! "xistem tr#s tipos de método deestudo para diagnóstico :


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MÉTODOS IN VIVO:Usam o próprio paciente:

Exemplos: fotogra a, endoscopia(usa-se um endoscópque atua como uma fonte de luz para obser ar partesinternas atra !s de uma micro-c"mera#$

densitometria óssea (analisa a densidade mineral óss pode usar tanto raios-%$ quanto raios e ultra-som: (não d& informa' es sobreforma, e sim sobre o funcionamento#)

*adiogra a,tomogra a computadorizada(+ #,ultrassonogra a, cintilogra a e * .(resson"nciamagn!tica nuclear#)


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RADIOGRAFIA


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MÉTODOS IN VITRO:

usam uma mostra do paciente (sangue, fezes,urina,biópsia)))#) Exemplos: espectofotometria,centrifuga'ão (separa mol!culas combase nadensidade#$

! necess&rio criar um campo gra itacional ,eletroforese(separa mol!culas com base na diferen'

potencial el!trico#$

! necess&ria a presen'a de carga el!trica resultante)


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ESPECTROFOTOMETRIA

01* E21 34 ES0E +*151+1 E+*24,1 01.E.+ES 3ES 1.6E 231S 3E U 4

S17U891 013E SE* 23E.+252 431S 01*SEUS ES0E +*1S 3E 1* )


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a t!cnica óptica mais usado nas in estiga' es biológicaf;sico-qu;micas)

+!cnica colorim!trica que permite detectar a concentra'ão compostos presentes em uma solu'ão)

4 energia utilizada ! a luminosa < se baseia na absor'ão

pelo composto a ser medido0or meio da espectrofotometria, componentesdescon=ecidos de uma solu'ão podem ser identi c

por seus espectros caracter;sticos)


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O olho humano per e!e ore" en#re a"$a%&a"

'e ()) a *+) nm


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ABSOR,-O DA .U/

4 luz ! uma forma de radia'ão eletromagn!tica que p

caracter;sticas de onda e de part;cula (fóton# 4 intera'ão da luz com a mat!ria depende da estrutuqu;mica dos compostos

ompostos corados < cromóforo

*eagente cromog>nico 4 rea'ão entre o composto cromóforo e o reagentecromog>nico origina um produto colorido < quconcentrado $ maior quantidade de luz ele absorve


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4 ES0E +*151+1 E+*24 1.S2S+E E :

Usar o espectro radiante (luz# para inspecionar sistebiológicos, principalmente solu' es)

Um feixe de energia atra essa a solu'ão e a suaabsor'ão oferece informa' es sobre a qualidade equantidade dos omponentes do sistema )

%uz &onocromática' a luz utilizada em expere em medidas espectrofotom!tricas ! aquela de um?nico comprimento de onda)


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&()*+* +""S "-).*/*)*&").01

3e absor'ão:

@) - o processo fundamental$A) -0assagem de um feixe de luz pela solu'ão e mede

sua absor'ão$

B4parel=o utilizado ! o espectrofotCmetro que d produzir a luz e medir a luz absor ida pelas so

MÉTODO DE


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MÉTODO DEESPECTROFOTOMETRIA


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Cur0a 'e a!"or12o e"pe #ral perm%#e

2denti car subst"ncias - são uma Dimpressão dig2denti car grupamentos qu;micos2denti car a pureza de subst"ncias - quando a curafasta do esperado

2denti car os comprimentos de onda para dosagemsubst"ncia - escol=er comprimento de onda que seespeci camente absor ido por aquela subst"ncia


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DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO D


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DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DSUBSTÂNCIA:

um dos m!todos mais sens; eis e precisos$

Guanto mais c=oques entre o feixe de energia e a maabsor ente, mais energia ! absor ida) dependente dfatores:

@) +raFeto ópticoA) oncentra'ão

BGuando a concentra'ão da subst"ncia ! constante, a absdepende do comprimento do traFeto óptico) E quando o óptico ! constante, a absor'ão depender& da concentra'ão


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3 4 CROMATO5RAFIA!todo de separa'ão e identi ca'ão de

componentes dos sistemas biológicos(misturas# que consiste em mo imentar osistema, em condi' es apropriadas e separaespacialmente os componentes: a cada

componente uma posi'ão no traFeto)

4s subst"ncias ão se mo imentar pelo sistem elocidades diferentes e se separarem


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1corre pela passagem de uma mistura atra !de duas fases: uma estacion&ria ( xa# eoutra mó el)

Esses sistemas podem ser: sólido


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4 cromatogra a ! um dos m!todos de an&lise tem grande utiliza'ão de ido a sua facilidade eefetuar a separa'ão, identi ca'ão e quanti ca'ão

das esp!cies qu;micas $ uma t!cnica que separa os componentes pordiferen'a de peso molecular, carga iCnica e

a nidade)

4 cromatogra a pode ser feita de &rios modomais comuns são: em colunas e em placas)

&ét d t g á2


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&étodos cromatográ2cos


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romatogra a de adsor'ão: 4dsor'ão ! a adesão f;sica ou liga'ão de ;ons emol!culas na superf;cie de uma outra mol!cu

romatogra a em amada 3elgadaUtiliza-se pequena quantidade de amostra

(microgramas a miligramas#

4s manc=as podem ser re eladas por meio dluz UH, apores de iodo, solu' es de cloretof!rrico e tiocianoferrato de pot&ssio,Iuoresc>ncias, radioati idade, etc)


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3 ELETROFORESE


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3- ELETROFORESE a separa'ão de componentes de um sistema atra

da aplica'ão de um campo eletromagn!tico0ermite a separa'ão de fra' es de mol!culasorg"nicas como *.4, 3.4, prote;nas e enzimas 1 princ;pio b&sico consiste na migra'ão desubst"ncias de acordo com suas cargas el!tricas:

1. - Com o!"!#"$ %" &'()' !")'#*+' m*)('(,o '(' oo o o$*#*+o

2. - Com o!"!#"$ %" &'()' o$*#*+' m*)('(,o '(' oo o !")'#*+o.


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3e e-se le ar em conta , al!m das cargasel!tricas o peso molecular das part;culas a seseparadas:

BGuanto maior o peso molecular, mais lenta smigra'ão da part;cula pelo gel e menor ser& adist"ncia percorrida por ela)

FATORES QUE CONDICIONAM A MI5RA O E ETROFORÉTICA


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FATORES QUE CONDICIONAM A MI5RA,-O E.ETROFORÉTICA :

4 elocidade de migra'ão das part;culas ai dependdos seguintes fatores: Fo( ' %o &'m o ' *&'%o C'()'/ #'m'!0o " o(m' %'$ mo & '$ 4*$&o$*%'%" / 5 " #"m "('# (' %o m"*o

4 oltagem aplicada ao sistema de e ser adequada3e e ser o mais r&pido poss; el, para e itar que ocomponentes se difundam e se espal=em no sistem.ão pode ser muito alta, pois $ "('6 "&" o $*

("7 %*&'!%o ' $" '(' ,o %o$ &om o!"!#"$.


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EM 5E.: - 1 mais usado ! a poliacrilamida

5iltra'ão pelos poros do )" 8$" '(' o( #'m'!0o %mo & '9/ ' m %' $" '(' ,o o( &'()'$.

EM 5E. DE PO.IACRI.AMIDA COM SDS:0rote;nas são tratadas com sódio-3uodecil-Sulfato para igualar suas cargas (negati as#

Serão separadas pelo peso molecular 4s mais le es c=egarão primeiro ao polo positi o)

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