Acto bioi. Colomb., Vol. 125, 2007 27 - 40

HEMATOlOGIA Y QUIMICA SANGUINEA DEJUVENllES DERUBIO (Sa/minus affinis PISCES: CHARACIDAE) DEL RIO SINU

Hematology and Blood Chemistry of Juveniles Rubio(Sa/minus affinis Pisces: Charaeidae) Captured in the River Sinu

ViCTOR ATENCIO-GARCiA', M.5c.; FERNANDO GENES LOPEZ',Profesional en Acuicultura; DIANA MADARIAGA MENDOZN,Profesional en Acuicultura; SANDRA PARDO CARRASC01", Ph. D.'Centro de lnvestigacion Pisdcola, Universidad de Cordoba, CINPIC,Monte-fa, Cordoba, Colombia.<FCAjDPA, Universidad Nacional de Colombia, Sede Medellin."Autor para correspondencia: sandrapardocarrasco@hotmail.coCarrera 59A No. 36-20, bloque 50, Medellin, Antioquia, Colombia.

Presencado 28 de mayo de 2007, aceptado 22 de julio de 2007, corregido 29 de agosto de 2007.

RESUMEN

Rubio Sa/minus affinis es un pez reofltico, distribuido en rtos de Colombia y Ecuador.Se estudiaron caracrerlsticas hemarologicas y qurmica sangufnea buscando generarinformacion basica para desarrollar tecnologlas de producci6n pisctcola. Fueronexaminados diez rubies juveniles aparentemenre sanos (117,S±38,6 g de peso y17,6±3,3 cm de longitud total) capturados en el rfo Sinu. Los peces se tranquilizarondurante cinco minutes en agua a 18°C Yse tomaron 2 mL de sangre por vacutecniacon EDTA (Vacuette®, Greiner Bio-one, USA). La qufmica se decermino utilizandoreaccivos para cada parametro (ByoSystems SA, Espana) y el hemograma se desa-rroll6 can tecnicas tradicionales, a excepci6n del recuento total de leucocitos y trom-bocitos en el que se utilize el reactivo de Natt y Herricks. Los frotis sanguineos fuerontefiidos con Wright y en ellos se determinaron las dimensiones celulares. EI recuenrototal de erirrocitos fue 2,2±O,4x1 06/mm3, los trornbocitos 2S,4±4,4x1 03/mm3 y los leu-cociros fueron estimados en 6,1 ±2,Ox103/mm3. EI con teo diferencial de leucocitos fue68,8±S,9% linfocitos, 28,S±S,2% neutrofilos, 2,1±O,9% monocitos, O,4±1,3% baso-filos y 0,2±0,4% eosin6filos. La hemoglobina en 12,53±2,2 gjdL y el hernatocrito36,2%. Los indices eritrocitarios: volumen corpuscular medic (VCM) 163,8±22,6 fl.,concentracion de hemoglobina corpuscular media (CHCM) 35,0±7,5 gjdL y hemo-globina corpuscular media (HCM) de 58,5±19,7 pg. Las proteinas totales fueron3,8±5,9 gjdL, glucosa 128,9±21,9 mgjdL, colesterol 277,8±92,7 mgjdL, trigliceridos192,0±109,1 mg/dl.v albumina 2,0±0,3 gjdL. Los resultados sugieren que las carac-tcrtsticas hernarologicas de rubio escan en el rango reportado para peces neotro-picales aparenremenre sanos.

Palabras clave: hematologfa, qutmica sangutnea. Sa/minus affinis, peces neotropicales,leucocicos.

28 Articulo - Hematologfa y qulmica sallgu/nea de juveniles de Rubio (Salminus affinis Pisces: Characidae)del do Simi. Atencio-Carda, et al.

ABSTRACT

Rubio Sa/minus affinis is distributed in Colombia and Ecuador rivers. To develop newtechnologies of fishery production, hematological and blood chemistry of 10 juvenileRubios captured in Sinu river, apparently healthy were examined (117.5+38.6 g ofweight and 17.6+3.3 cm of total length). Fishes were calmed during five minutes inwater at 18°C and 2 mL of blood samples were taken in EDTA (Vacuette®). Thechemistry was determined using ByoSystems INC (Spain), reagents and blood countwere developed with traditional techniques with the exception of total leukocyte andthrombocyte for which the reagent of Natt and Herricks was used. The blood smearswere dyed with Wright and cellular dimensions were determined. The totalerythrocytes were of 2.2+0Ax106jmm3, thrombocytes 25.4+4.4x103jmm3 andleukocytes were estimated in 6.1 +2.0x1 03jmm3. The differential count ofleukocytes wereof 68.8+5.9% Lymphocytes, 28.5+5.2% necrrophils, 2.1+0.9% rnonocytes, 0.4+1.3%basophils and 0.2+0.4% eosinophils. The hemoglobin in 12.53+2.2 gjdL, and thehematocrit 36.2%. The erythrocyte index: Mean corpuscular volume (MCV) 163.8+22.6fL; mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) 35.0+7.5 g/dL and meancorpuscular hemoglobin (MCH) 58.5+19.7 pg. Total proteins were 3.8+5.9 gldL,glucose 128.9+21.9 mgjdL, cholesterol 277.8+92.7 mgjdL, triglycerides 192.0+109.1mgjdL and albumin 2.0+0.3 gldL. The results suggest that the hematologicalcharacteristics of Rubio are in range for neotropical apparently healthy fishes.

Key words: Sa/minus affinis, haematology, blood chemistry, freshwater fish; hematocrit;leucocytes.

INTRODUCCION

EI rubio (Sa/minus affinis Steindachner 1880) se distribuye en Colombia en las cuencasde los nos Magdalena, San Jorge, Sine, Cauca, Cesar y Rancherfa y en Ecuador en elrfo Santiago (Lima eta!., 2003). Mojica eta!. (2002) 10 catalogaron como una especievulnerable a Ia extinci6n en la cuenca del rio Magdalena par la fuerte presion pes-quera que ha sufrido este recurso y anotaron que su situaci6n en la cuenca del rioSinu merece especial atencion en virtud de los cambios introducidos por la cons-trucci6n y operacion de la Hidroelectnca Un-a (HU). Entre los principales impactosocasionados par la HU, sobre las especies reofllicas, se destacan: interrupcion de lamigraci6n reproductiva, perdida de las areas de maduraciony desove aguas arriba,alteraci6n de la calidad del agua en las areas de maduraci6n y desove aguas abajo yperdida del potencial reproductive (Atencio-Garda, 2000). En atenci6n a esta situ a-cion, es de inreres estudiar los aspectos basicos de su biologia para avanzar en el de-sarrollo de recnologras de producci6n en cautiverio, intentado su recuperaci6n ycultivo (Mejfa y Navarro, 2006; Pardo-Carrasco eta!., 2007; Hernandez-Munoz, 2007;Lozano-Perez, 2007); aunque desde inicios de la decada del 70 Dahl (1971) la senalocomo una especie can potencialidad para la piscicultura continental colornbiana.Conocer la hematologfa de los peces es de importancia para el conocimiento delestado sanitaria de las poblaciones naturales de peces (Adhikari et al., 2004) perc

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tam bien resulta de interes para el manejo nutricional en cautiverio; ya que puede serevaluada la interaccion entre los nutrientes buscando los mejores beneficios para laespecie. asf como en toxicologfa [a presencia de toxicos y sus efectos hematologicos(Lim etal., 2000). Affonso etal. (2002) senalan su uso en estudios ambientales para ladeterminacion de susrancias contaminantes como agentes estresantes para peces yMartins et 01. (2000) reportan que en sangre puede ser medido el estres generadodurante los procesos de confinamiento, captura y manipulacion. contribuyendo a es-tablecer protocolos menos perturbadores para los peces. Todo 10 anterior se consti-tuye en valiosa informacion para el desarrollo de tecnologfas de produccion en loscampos de la nutricion, la reproduccicn y la sanidad. La escasez de informacion sobrelas consrantes hemarotogicas basicas en peces tropicales de America del Sur limita suuso en todas las areas relacionadas anteriormente. Por tanto este estudio tiene comoproposito ofrecer informacion sabre la hemarologia y algunos valores de qufmica san-gufnea de juveniles de rubio como una herramienta valiosa para el establecimiento delos controles sanitarios que favorezcan el desarrollo pisdcola de esta especie, as! comoinformacion b asica de la especie que contribuya con futures estudios ambientales.

M ETODO LOG fA

Los peces analizados fueron capcurados con atarraya en la parte baja del rio Sine entremarzo y diciembre de 200S y trasladados en una hera en un tanque con aireacion, allaboratono de Sanidad Acufcola del Centro de lnvescigacion Pisdcola de la Universidadde Cordoba (CINPIC, Monterfa, Colombia) donde permanecieron en tanques de con-creto de 2.000 Lentre 48 y 72 horas, con agua del no Sinu. can el propcsito de reducirlos efectos del estres generado par la manipulaci6n y cambia de arnbiente. Las condi-ciones del agua en los tanques de adaptaci6n al cautiverio, como oxrgeno disuelto (7±1mglL), temperatura (2S±2 'C), pH (7± 0,5), dureza (50±10 mg/L). alcalinidad (SO±10mglL) y amonio total (menor de 0,1 mglL) se mantuvieron dentro del rango confortpara las especies de la cuenca del rfo Sinu (Atencio-Garda, 2001). Para la extracci6n dela sangre los animales fueron tranquilizados en agua a 18°C durante cinco rrunuros. Seutiliz6 vacutecnia, puncionando e! paquete vascular caudal a una altura media entre lalinea lateral y la base media de la aleta anal, se extrajeron 2 mL de sangre y fue recibidaen tubos para vacutecnia con anticoagulante EDTA (Vacuette®, Greiner Bio-one, USA).Posteriormente la sangre fue dividida en dos porciones, una de elias se dejo completapara hacer el hemograma y la otra porcion se centrifug6 a 12.000 rpm durante cincominutes para la extracci6n del plasma en el cual se determine la qufmica sangufnea.

EI recuento total de eritrocitos, leucocitos y trombocitos se realize en camara deNeubauer de 0,0025 mm2 (Optic Labor, Alemania), para el conteo de eritrocitos se uti-liz6 como diluyente soluci6n salina fisiol6gica y para trombocitos y leucociros se utilizeel reactivo de Natt-Herrick (Conroy, 1998), en ambos casas la diluci6n fue de 1:200.Se determinaron hematocrito (Ht) en microcenrrifuga; hemoglobina (Hb) con el reac-tivo de Drabkin siguiendo la metodologfa de la cianometahemoglobina y leyendo enespectrofotometro a 546 nm y los fndices eritrodticos volumen corpuscular medio(VCM), hemoglobina corpuscular media (HCM) y concentraci6n de hemoglobina

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corpuscular media (CHCM), aplicando las formulas descritas por Conroy y Conroy(1987). Para realizarel recuento diferencial de leucocitos se hicieron frotis sangufneostenidos can coloracion tipo Ramanawsky (Wrigth) (Canroy y Conroy, 1987). Se to-maron fotograffas de cada tipo celular con ayuda de un microscopio optico (CarlZeiss, Axioestar 4.3, Alemania) con camara fotografica digital incorporada (CanonPower Shot G5,Jap6n) y las mediciones celulares se realizaron con un analizador deimagenes (Carl Zeiss, AxioVisi6n 4.3, Alemania). Glucosa, protema total, trigliceridos,colesterol y albumina fueron determinados utilizando reactivos para cada paramerrodel laboratorio Biosystem SA (Espana). Las leccuras, por separado para cad a para-metro, se realizaron por medic de un analizador de qurmica (Awareness TechnologyInc. Stat Fax 3300, Alemania) a longitudes de onda de sao nm para glucosa, colesreroly trigliceridos, 545 nm para protefna total y 630 nm para albumina, de acuerdo con lasindicaciones del fabricante para cad a paramerro.

RESULTADOS

Solo fue posible examinar diez rubios juveniles debido a la dificultad para capturarejemplares de esta especie en la cuenca del rfo Sine, los cuales presentaron valoresprornedio de 19,63±3,3 em de langitud total y 117,S±38,6 g de pesa. EI sexa no fuedeterminado par cuanto los ejemplares no fueron sacrificados y no se observ6 dimor-fismo sexual en Ia talla analizada. Los ejemplares analizados se observaron aparente-mente sanos presenrando nado en linea horizontal y equilibrada, color de la pielnormal, aletas caudal y anal roja y branquias de color rojo brillante. En la tabla 1 sepresentan los resultados del hemograma para rubio. Los eritrocitos son las celulassangufneas mas abundantes representando el 98,8%. Estas celulas se caracterizaronpor presentar forma ovoide y nucleo de igual apariencia; el cual se encontr6 en elcentro de la celula formado par una masa compacta de cromatina; el citoplasma eshornogeneo, acid6filo y ocupa gran parte de la celula, presentando una relaci6n enarea de 4,5 (citoplasma/nucleo}. El area celular se estim6 en 73,2 IJm2 por 10 que sepuede considerar una celula de camano medio con respecto a las otras (Fig. 1A).

Los trombocitos fueron el 1,1% del total de las celulas sangulneas. Son usual mentepequenos con form as que varian de redondas a fusiformes, pero can predominanciade estas ulcimas. EI nucleo es frecuentemente largo siguiendo el contorno de la celulay esparcido en el citoplasma; el cual fue escaso, poco visible y sin granulaciones. Larelaci6n citoplasma/nucleo fue de 0,8 y el taman a celular se estimo en 41,7 IJm2

considerandose la celula sangufnea mas pequena (Fig. 1B). Los linfocitos represen-taron el mayor porcentaje del grupo de las celulas blancas (68,8 %); son celulas detamano y forma variables, observandose pequenas, grandes, redondas y ligeramenteredondas; citoplasma escaso agranular, frecuentemente irregular y bas6filo. El nucleoes grande, ocupa gran parte de la celula y la relaci6n citoplasma/nucleo fue de tres.EI area celular se estimo en SO,S IJm2 (Fig. 1C). Los monocitos representaron el 2,1%de las celulas blancas, de mayor tamano que los linfocitos, son celulas esfericas cuyonucleo presenta forma variable entre redonda y ovalada y es frecuente observar unaligera invaginacion en forma de rinon; la cramatina se encontr6 un poco dispersa.

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......................................... " ....Parametres Promedio Maximo Minima OS 0/............................... ! ..................................•......................... ., _-..

:······-~l:~i·i~·~~-~~!(~,~-tr~·J)+, ,}} ,.·········,}i···..· ,.... ,~:~ :..:.:: :.::~::~:.::.. :.,.. ~;:~·····He-m-~·t~~~·it~··"(%)"..·..·,··.. 36,2 43 30 4,0 ",0\iCM(iL)'" 163,8 197,4 136 22.6 13,8

"HeM (pg) 58.5 94,1 ,6 19,7 33,7"'CHCM (g/dL) 35,0 47,8 26.3 7,5 21,5"

:"···'T~o·m'hodto·~··{~~j"'·;'1··0l/;:;:;·;:;:;:i) 25,4 3' ,0 '8.,0" ...."4;4... ....•.... , 7,'···"Le·~·~~~-it·~·~·'"(~~i"';·1·0:;/~'~lS"·,,·...~ 6,' 9,0 3,9 2,0 32,2

i' ..--Li'~'f~d·t~s··(%f- " ..,.,..,.. ,.. . ········68,8····· j •• ·······j"ij"········ ",.. 62 ., 5,9 18,1

'..:::~~~::t~~::(~L:··:·::·:::'.:::.::::::.:::::::.:::....~_.t~ -! 3~ L 1~ ~ ~} ,... : ~:~

Bas6~1;;;(§L , 0,44 ,6:1,3- 316,2Eosinofilos (%) 0,3 1 ° 0,5 210,8

Tabla'. Hemagrama de juveniles de rubio S. affinis capturados en el rio Sinu (DS, desviacion esrandar;0/, coeficienre de variacion).

Se estim6 una relaci6n citoplasma/nucieo de dos. El citoplasma presento aspecto ba-sofilo y vacuolas en su interior fueron evidences. El area celular fue de 85,9 I-Jm"(Fig.1D). Los bas6filos represencaron el 0,4% de los leucocitos, de forma redonda, con cite-plasma basofilo debido a la presencia de granules esfericos oscuros que generalmentecubren el nucleo; el cual se mostr6 excentrico y presenro una relaci6n citoplasrna/nucleode 3,7. Presencaron un area de 103,7 I-Jm2resultando en las celulas de mayor tamafio(Fig. 1E). Los neurrofllos son el segundo grupo de leucoeitos mas abundante (25,8 %),se presentaron de forma redonda y semirredonda; el nucleo se enconrro excentrico, re-dondo, segmentado, generalmence bilobulado, con cromacina ligeramente compacta-da. La relaci6n del citoplasrna/nucleo fue de 1,7. EI citoplasma present6 basofilia ygranules redondos que se tineron poco. EI area celular se estim6 en 89,4 I-Jm"(Fig. 1F).Los eosinofilos fueron las celulas sangufneas de menos abundancia (0,2%), morfologi-camente se observaron redondas y relarivamente grandes, su nucleo es excentrico, a me-nudo bilobulado. Se caracterizaron por un citoplasma con presencia de granules alar-gados numerosos y eosinofllicos (Fig. 1G). La Tabla 2 muestra las mediciones de largo,ancho y area de la celula del nucleo y del citoplasma de cada una de los diferentes tiposde celulas de S. affinis; mientras que la Tabla 3 registra los valores de los parametresqufmicos en la sangre periferica del rubio en condiciones aparentemente normales yprocedentes de su ambiente natural.

DISCUSION

Los estudios hematol6gicos de las diferentes especies de peces son de inreres fisiol6gicoy ecologico, en virtud que posibilitan entender la relaci6n entre las caracterfsticas sanguf-neas can variables como sexo, estadio gonadal, estres, filogenia, actividad ffsica, habitaty adaptabilidad al ambiente (Larson et af., 1976; Rambhaskar y Srinivasa-Rao, 1987).

Estes facto res provocan que cada especie presente sus propios parametros hemato-16gicos; es sabido que existen diferencias sangufneas entre especies de distintos medios

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Figura 1 Celulas sangufneas de rubio Sa/minus affinis. Eritrocitos (a) Trombocitos (b) Linfocitos (c).Monocitos (d). Basofilos (e). Neutr6filos (f). Eosinofitos (g). Tinci6n Wrigth, 1000X).

osm6ticos como las encontradas entre peces marines y estuarinos, los cuales presen-tan una mayor cantidad de hemoglobina y eritrocitos en comparaci6n can los de aguadulce (Romestend et al., 1982). tgoalmenre, la temperatura es otro parametro queafecta los indices hernarologicos: especies de un mismo media osrnotico pero en dife-rentes grados terrnicos presentan grandes diferencias en el cuadro hernatico, debido alefeeto inversamente proporeional de la temperatura con la solubilidad del oogeno di-suelto en el agua.

""" Celula (pm) Nucleo (fJm) Area (fJm2)

"""" ""',',""

, Largo' """"'"

Largo Ancho Ancho Celula i r,i, ....~lic.I.~.?....

"""""

Eritrocicos 12,O±O,6 7,9 ±O,4 5,7±O,4 2,8±O,2 73,2±6,9 59,9±1,1 13,3±6,7,,'"Trombocitos 11,4±1,6 4,7±O,9 7,5±O,9 3,9±O,7 41,8±9,2 18,5±4,6, 23,2±6,9

.... ,. ., .... ,.

Linfocitos 8,4±O,9 7,9±O,8 5,5±O,5 5,2±O,7 ,50,5±8,9 28,4±4,4 22,1±9,8"""" ........

Monociros 10,7±O,8 10,2±O,7 6,5±O,8 5,6±1,O 85,9±10 57,9±5,5 28,1±7,9

Basofilos 11,9±O,9 11,1 ±1,1 5,6±0,5 5,4±O,4 f,'C13,7±14 81,4±3,1 22,3±13

Neutrofilos 11,2±0,7 , 10,2±O,9 7,7±O,9 6,0±1,0 89,4±12 56,5±8,2 32,9±9,8"", .. , ,..........

Tabla 2. Dimensiones de las celulas sanguineas de juveniles de rubio 5. affinis (Promedio ± desviacionestandar).

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Debido a la amplia relaci6n de estas variables con los valores hematol6gicos; es im-portance considerar que, los resultados del presence estudio fueron comparados conespecies de teleosteos que com parten preferencias rerrnicas y osrnoticas, en particularcon otros caracidos. EIvalor promedio de eritrocitos en juveniles de Sa/minus affinis fuede 2,2xl06/mm\ valor similar al reportado para Sa/minus rnaxillosus (2,lxl0f>jmm3)

capturado en ambience natural (Ranzani-Paiva et aI., 2001), para Prochilodus scro{fa(2,lxl0'/mm'; Ranzani-Paiva et al., 1999) y P. magdalenae (1,8 xl O'/mm'; Argel-Borjay Quintero-Dtaz, 2007), estos dos ultirnos procedentes de cautiverio. Tambien hayreportes de valores inferiores a los obtenidos en el presente trabajo, para Ga/axiasmaculatus, especie que habita en aguas Frias. Jaramillo-Schadebropt (2005) reporto1,1xl 06jmm3, quien justific6 este valor por la conducta sedentaria de la especie y con-sidero que los parametres hemarol6gicos son directamente proporcionales a la activi-dad del pez. De la misma manera, Martins et al. (2004a) reportaron 1,7xl06jmm3

para Oreochromis niloticus. Valores superiores se reportaron para Piaractus mesopotamicus(2,9xl0'/mm') por Tavares-Dias y Mataqueiro (2004) y para Brycon amazonicus (=B.siebenthalae; 3,8x106jmm3

) par Benavides (2002). Ademas de tratarse de especiesdiferentes, est as variaciones pueden ser explicadas por diferencias en las condicionesarnbientales, el origen (cautiverio versus natural) y los procedimientos a los que fue-ron sometidos.

En el presente esrudio no fueron incluidos los trombocitos en el recuento diferencialde globules blancos; a cambio, el reactive Natt y Herrick per-nitio en una misma di-luci6n diferenciar leucocitos y trombociros permitiendo el recuento total de estas doscelulas. EI recuento total de trornbociros enconrrado en 5. affinis fue de 2S,4xl O'yrnrrr',similar al reportado por Tavares-Dias et 01. (2004) en Cyprious carpio (28,2xl O'/mm').En ambos trabajos el conteo de trombocitos fue excluido del conteo diferencial deleucocitos y se utilize la misma tincioo, por 10 que es posible que no se haya pre-sentado confusion entre linfocitos pequeiios y trombociros redondos. Sin embargo,Tavares-Dias y Mataqueiro (2004), reporcaron para P. mesopotamicus trombocitos encanridades superiores (56,6xl 03jmm3

) realizando el conteo de esta celula en la mismaforma. Esto sugiere que es posible que estas variaciones esten asociadas a facto res detipo interespedfico. Tavares-Dias et al. (2002a) y Tavares-Dias et 01. (2003) incluyendolos trombocitos en el recuento diferencial, encontraron en Piaractus mesopotamicus por-cenrajes de trombocitos entre 67,8 y 74,8 en cada publicaci6n respectivamente y noreportaron valores de recuento total por 10 cual se imposibilita su comparaci6n. EInumero de leucocitos en tele6steos tropicales de aguas continentales se ha reportadomuy variable, con valores entre 6A a 72,5xl OJ/mmJ (Tandon y Joshi, 1976; Ranzani-Paiva et aI., 1999) presenrandose incluso variaciones intraespedficas en los teleosteos(Ueda et aI., 1997; Tavares-Dias et aI., 1999a; Tavares-Dias et aI., 1999b; Tavares-Diaset a/., 1999c; Tavares-Dias et aI., 2000). En el presenre estudio, el valor promedio deleucocitos para 5. affinis fue de 6,1x103 jmm\ valor que se encuentra en el limite in-ferior del rango anotado anreriormente; sin embargo, para P. mesopotam;cus, se hanreportado valores mucho menores (4,6xl 03/mm3; Tavares-Dias et aI., 2002a). Los in-dices hematol6gicos calculados para 5. affinis presentaron datos compatibles con losreportados en peces neotropicales.

34 Articulo - Hemato!ogfa y qufmica sangufnea de juveniles de Rubio (Salminus affinis Pisces: Characidae)del rio 5;/1(/. Atencio-Garda, er al.

Tabla 3. Qufmica sangumea de juveniles de rubio S. affinis (DS, desviaci6n estandar; 0/, coeficientede variacion).

EI hematocrito para la especie en estudio fue de 36,2 %, valor superior a los repor-tados para C. carpio 34,3 % (Tavares-Dias eta!., 2004) y para P. mesopotamicus 31,9 %(Tavares-Dias y Mataqueiro, 2004); las tres especies mencionadas son de ambientes16ticos y fueron evaluadas en condiciones aparentemente saludables. En general existeuna correlacion entre la hemoglobina y el hematocrito puesto que sus valores tambienestan relacionados con la actividad y el habitat de los peces. Se ha encontrado quelos valores menores se han registrado en peces primitivos, en peces que habitan am-bientes lent-cos. sedentarios y bent6nicos; mientras que los mayores ocurren en espe-cies marinas, pelagicas (Larson etal., 1976) y activas (Tavares-Dias y Moraes, 2004).Molnar y Tamassy (1970) anotaron que los peces predadores (carnfvoros), poseenmayor concentraci6n de hemoglobina cuando se comparan con herbrvoros y omni-voros. Sin embargo, la hemoglobina en S. affinis fue de 12,5 g/dL valor similar al repor-tado para ommvoros como B. amazonicus 13,7 g/dL (Benavides, 2002); B. hilari 12,2g/dL, y P. mesopotamicus 12,8 g/dL (Tavares-Dins et al., 2003). EIVCM para S. a{finls fue163,8 fL similar al encontrado para P. mesopotamicus 163,1 fL (Ranzani-Paiva et al.,1999); la CHCM fue de 35,0 g/dL similar a 10 reportada para B. hil/ari 33,9 g/dL(Tavares-Dias et aI., 2003) Y el valor de la HCM fue de 58,5± 19,7 pg.

En el conteo diferencial de leucocitos fueron observados linfocitos, neutrofilos. monoci-tos, basofilos y eosinofilos; siendo los linfociros y los neutrofilos las celulas mas fre-cuentes en los frotis de S. affinis, situaci6n que coincide con 10reportado en S. maxiliosus(Ranzani-Paiva et al., 2003); P. mesopotamicus (Tavares-Dies et aI., 2002a; Tavares-Dias yMataqueiro, 2004) y B. amazonicus (Benavides, 2002). EI porcentaje de linfocitos y neu-tr6filos fue de 68,8±S,9 y 28,4±5,2% respectivamente. Estos resultados y los reportadosen la literature muestran que la cantidad de estes dos tipos de celulas es muy variable.En Leponnus macrocephalus fue establecido 29,4 % linfocitos (Martins et al., 2004b),11,61 % para Rhamdia quelen (Tavares-Dias et aI., 2002a); para neutr6filos se encontr692,3% para Prochilodus scrofa (Ranlani-Paiva et 01., 1999); Y 1,1% para Piaractusmesopotamicus (Tavares-Dias et al., 2002b). Esta variabilidad puede atribuirse a que lapresencia de las mismas esta sujeta a variaciones interespecfficas de cada individuo(Tavares-Dias y Moraes, 2004). Tambien es posible atribuir esta variabilidad en elconteo de /eucocitos, a procesos patologicos. Se ha reportado por diversos autoresque la linfopenia en los peces es consecuencia de estres por deficit de oXlgeno, sep-ticemias bacteriales e infecciones por hongos (Conroy, 1972; Satchell, 1991; Stoskopf,1993). La neutrofilia es habitual en diversas patologfas, observandose en inflama-ciones, situaciones de estres, infecciones bacterianas y protozoarias (Stoskopf, 1993;

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Olabuenaga, 2000; Fernandez et at., 2002). Sin embargo, los peces analizados en elpresente esrudio proven fan de su medic natural, se mostraron aparentemente san os, ypara reducir el estres fueron adaptados a! cautiverio, para 10 cual se mamuvieron enrecipiences con agua con caracterfsticas similares a las del ambiente natural. Losmonocitos fueron las celulas seguidas en abundancia con 2,1%, resultado algo similaral reportado para B. arnazonicus (Benavides, 2002) con 1,4%; Fernandez et al. (2002)senalaron que estas celulas se incrementan cuando existen tejidos inflamados. La abun-dan cia de basofilos y eosinofilos puede estar relacionada con enferrnedades. pueswque en condiciones normales (peces sanos), son escasas y en algunos casos ausentes.Los basofilos en los extendidos de S. affinis fueron de 0,4 %, resultados similares a losreportados par Martins et al. (2004a) para 0. niloticus y Benavides (2002) para B.amoronicus, can 0,5 % para ambas especies. Tambien se reporta la ausencia de est ascelulas en el coespecffico S. maxil/osus (Veiga et aI., 2000; Ranzani-Paiva et al., 2003).Los eosinofilos fueron las celulas menos frecuentes (0,3 %), 10 cual sugiere un buenestado de salud de los ani males analizados. La eosinofilia esca asociada a la ocurren-cia parasitaria en peces, como 10 registran los reportes de Martins et at. (2004b) enLeporinus rnacrocefalus (13,3%) YRanzani-Paiva et al. (1999) en Colossoma macropornum yPiaractus mesopotamicus can 13,6 y 55,7% respectivamenre. En S. affini5 el coeficiente devariaci6n (CV) de leucociros, permite sugerir que el Cv de linfocitos (8,6%) mostro ho-mogeneidad de los valores de estas celulas en los ejemplares analizados; mientras quelos resultados de neutr6filos (18,1%) y monocitos (41,7%) se podrfan considerar here-rogeneos, sin que ann signifiquen enfermedad, Pero el coeficiente de variaci6n enbas6filos (316,2%) y eosin6filos (210,8 %) se considerarfa extremadamente variable.Se sugiere como explicacion la presencia escasa de estas celulas en los ejemplares ana-lizados y cuando se observa causa una elevaci6n considerable del coeficiente de varia-ci6n. Valores elevados del CV en eosinofilos y basofilos tam bien fueron observadospor Tavares-Dias y Mataqueiro (2004), quienes sefialaron que estes valores son habi-tualmente encontrados en peces.

MORFOLoclA CELULAR SANGUINEA

La morfologia de los diferentes tipos celulares sanguineas en S. affinis coincide con lareportada para otras caracidos. Las caracterfsticas morfol6gicas de los eritrocitos ytrombocitos es similar a la reportada para S. rnaxillosus (Veiga et al., 2000; Ranzani-Paiva et al., 2003) y B. amazonicus (Benavides, 2002). En los trombociws predomina-ron las formas fusiformes sabre las ovaladas y redondas; aunque segun Ellis (1977),esrudiando las celulas sangufneas en Pleuronectes platessa, encontr6 que las formasfusiformes en las trombocitos representaron celulas inmaduras y no tan abundantescomo las ovaJadas y redondas, en forma contraria a 10 observado en este rubio. Lamorfologfa de los linfocitos y eosin6filos para S. affinis coincide con la reportada paraB. amazonicus (Benavides, 2002); para S. maxil/osus (Veiga et al., 2000; Ranzani-Paivaetal., 2003); de igual manera las caracterfsticas de los bas6filos coinciden con las deB. amazonicus (Benavides, 2002). Registros morfometricos de celulas sangufneas enespecies neotropicales (Caracidos) son escasos en la li[eratura. Se destaca el reportereciente de mediciones de largo y ancho total de la celula y del nudeo en los eritrocitos,[rombocitos y leucocitos para Galaxias maculatus Qaramillo-Schadebrodt, 2005). La mor-

36 Articulo - Hematologfa y qutmica sangufnea de juveniles de Rubio (Salminus affinis Pisces: Characidae)del rio Simi. Atencio-Garda, et al.

fometna de las celulas sangufneas de rubio se podrfa considerar el primer registro enpeces reofllicos de una cuenca colombiana. En terminos generales el tamafio de las celu-las sangufneas de S. affinis es mayor que las reportadas para alevinos de G. maculatus(jaramillo-Schadebrodr, 2005). Esta diferencia de tarnano podrfa estar asociada a dife-rencias interespectficas, de arnbiente 0 al estado de desarrollo biologico del pez.

QUfMICA SANGufNEA

Los estudios de qufmica sangurnea en peces tropicales suramericanos son muy escasos,a pesar de que estos permiten realizar evaluaciones diagnosticas con fines preventivoscuando se refiere al planeamiento de medidas de control de parologras. La concen-tracion de proteinas esta alramenre relacionada con el estado nutricional y la calidaddel alimenro. La concentraci6n de prorema para la especie en estudio fue de 3,8 gldL,concenrracion similar a la reportada para Oreochrarnis niloticus 3,1 g/dL (Bittencourt et01.,2003); mientras que para B. amaronicus (Benavides, 2002) se reporto una concentra-ci6n de 7,2 gldL en animales mantenidos en cautiverio y alimentados con dos racionesdiarias de alimento con 24% de protefna bruta. Para 5. affinis la albumina se encontr6en 2 gidL, mientras que en juveniles en cautiverio de P. brachypomus fue de 0,9 g/dl.(Sakamoto et at., 2001) y trucha arco iris present6 valores mas similares de 1,65 gidL(Miller etal., 1983). Los niveles de glucosa pueden presentar variaciones intraespecf-ficas, como consecuencia de talla, edad, peso, temperatura, estado nutricional, esta-do reproductive y estres. EI valor de la glucosa en rubio fue de 128,9 mg/dL para estaespecie; mienrras que en otras especies se han reportado valores que van desde 147,6mg/dL para B. amazonicus (Benavides, 2002); 108,23mg/dL para P. brachypomus (Es-lava y Hernandez, 1995); 74,8 mg/dL para P. mesopotamicus (Tavares-Oias et al.,2002a); hasta 60,32 mg/dL para 0. niloticus (Bittencourt et al., 2003). Generalmentelos niveles de lrpidos decrecen en el plasma despues del desove y y de per(odos deayuno; pero se incrementan dclicamente con la alimentaci6n en la epoca no repro-ductiva y son especialmente elevados antes del desove. Por esta raz6n, se presentanniveles altos de fosfolipidos asociados con gametogenesis, debido a la movilizaci6nde reservas de grasas para el desarrollo gonadal (Groff y Zinkl, 1999). EI nivel decolesterol para juveniles de S. affinis fue de 277,8 mg/dL similar al reportado parajuveniles B. amazonicus 299,5 mgldL (Benavides, 2002); ambos estudios se realizaronen animales juveniles can g6nadas inmaduras. Los niveles de trigliceridos para 5.a{finis, P. brachypomus (Eslava y Hernandez, 1995) y B. amazonicus (Benavides, 2002)fueron de 192,0, 203,5 Y328,3 mg/dL respectivamente, el valor relativamente bajo delos trigliceridos en 5. offinis puede atribuirse a que son animales mucho mas jovenesque las otras dos especies. Los resultados del presente estudio permiten concluir quelas caracterfsticas hematologicas y los parametros qufmicos de juveniles de S. affinisestan dentro de los rangos reportados para teleosteos neotropicales evaluados encondiciones ambientales normales y aparentemente saludables.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen a la profesora Pied ad Osorio de la Facultad de Medicina Vete-rinaria y Zootecnia de la Universidad de Cordoba su colaboraci6n en los anal isis

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sangufneos. Este estudio fue financiado en su cotalidad por la Unidad de Investi-gacion y Extension de la Universidad de Cordoba (proyecto FMZ-02-04, 1120143).

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