Controllo di Qualità HER2 Controllo di Qualità HER2 Regione VenetoRegione Veneto

Angelo P. Dei Tos M.D.Angelo P. Dei Tos M.D.Departments of Pathology & OncologyDepartments of Pathology & Oncology

Treviso, ITALYTreviso, ITALY

MilestonesMilestones• HER2 assessment of all primary HER2 assessment of all primary

breast carcinomas – at the time of breast carcinomas – at the time of therapy planningtherapy planning

• Re-evaluation of metastatic disease Re-evaluation of metastatic disease (different status in almost 15% of (different status in almost 15% of the patients)the patients)

• Choice of the assayChoice of the assay• Meaningful reporting (FDA score or Meaningful reporting (FDA score or

alternative options?)alternative options?)

HER2 assessmentHER2 assessmentSt GallenSt Gallen

• Two technologies recognizedTwo technologies recognized– IHC and FISHIHC and FISH

• Strong IHC stainingStrong IHC staining– 3+ in > 30% of neoplastic cells3+ in > 30% of neoplastic cells

• Gene amplification by FISH or CISHGene amplification by FISH or CISH– FISH > 2.2 ratioFISH > 2.2 ratio– CISH > 6 signals per cellCISH > 6 signals per cell

Validated IHC assay

Positive 3+>30% of cells

Negative

FISH

+-

Herceptin

Breast Cancer Specimen

Equivocal(2+ or 3+ in less than 30%)

Herceptin

EquivocalFISH ratio 1.8-2.2

HER3 gene copy 4-6

IHC Interpretation CriteriaIHC Interpretation Criteria• Review controlsReview controls• Infiltrating carcinomaInfiltrating carcinoma• More than 30% positive cells More than 30% positive cells • Membrane staining intense and Membrane staining intense and

uniformuniform• ““Chicken wire” patternChicken wire” pattern• Ignore incomplete or pale staining Ignore incomplete or pale staining • Reject if normal ducts and lobules Reject if normal ducts and lobules

shows intense stainingshows intense staining

Wolff’s replyWolff’s reply

• Why > 30%?Why > 30%?• Because < 30% pathologists are Because < 30% pathologists are

unreliableunreliable• But consider that 10% cutoff also But consider that 10% cutoff also

did not have a rationaledid not have a rationale

Statement 22: Statement 22: determinazione di determinazione di HER2HER2• L’iperespressione/amplificazione di L’iperespressione/amplificazione di

HER2 deve essere valutata in ogni HER2 deve essere valutata in ogni carcinoma invasivo mammario carcinoma invasivo mammario primitivo all’atto della prima primitivo all’atto della prima diagnosi o della recidivadiagnosi o della recidiva

Statement 1Statement 1 refertazione HER2 refertazione HER2

• Lo stato di HER2 deve essere espresso Lo stato di HER2 deve essere espresso mediante lo scoring system (0, 1+, 2+, mediante lo scoring system (0, 1+, 2+, 3+ secondo FDA e/o linee guida 3+ secondo FDA e/o linee guida ASCO/CAP) e, possibilmente, anche ASCO/CAP) e, possibilmente, anche con la valutazione descrittiva che tenga con la valutazione descrittiva che tenga conto della percentuale di cellule conto della percentuale di cellule positive e della completezza ed positive e della completezza ed intensità della colorazione di membranaintensità della colorazione di membrana

Statement 23.Statement 23. Integrazione dei Integrazione dei parametri morfologici e biologiciparametri morfologici e biologici

• Il patologo è responsabile della patologo è responsabile della congruità dei parametri congruità dei parametri diagnostici, prognostici e predittividiagnostici, prognostici e predittivi

Statement 24.Statement 24. Controlli di Controlli di qualitàqualità

• E’ fortemente raccomandata la E’ fortemente raccomandata la partecipazione a programmi di partecipazione a programmi di controllo esterno della qualità controllo esterno della qualità (VEQ) per la determinazione di (VEQ) per la determinazione di ER, PR, HER2 e Ki67ER, PR, HER2 e Ki67

ProceduraProcedura• 4 preparati4 preparati• 3+; 2+; 1+; 03+; 2+; 1+; 0• Conferma FISHConferma FISH• AnonimizzazioneAnonimizzazione• Rivalutazione centralizzataRivalutazione centralizzata

3+3+

2+2+

1+1+

00

MetodicheMetodiche• Oracle Leica: 2Oracle Leica: 2• HercepTest: 5HercepTest: 5• Policlonale Dako: 2Policlonale Dako: 2• Ventana (FDA): 4Ventana (FDA): 4• Ventana: policlonale 4B5: 1 Ventana: policlonale 4B5: 1

RisultatiRisultati• 3+ = 15/163+ = 15/16

– 1+1+• 2+ = 14/162+ = 14/16

– 0; 1+0; 1+• 1+ = 3/161+ = 3/16

– 1+1+• 00 = 9/16= 9/16

– 00

00

RisultatiRisultati• 3 + mancato: Ventana3 + mancato: Ventana• 3+/2+: Dako = Ventana3+/2+: Dako = Ventana• Dako e Ventana discordanti su Dako e Ventana discordanti su

0/1+0/1+

ConclusioniConclusioni• Metodologia semplice ed economicaMetodologia semplice ed economica• Risultati lusinghieriRisultati lusinghieri• Necessità di un sistema di VEQ su Necessità di un sistema di VEQ su

base regionalebase regionale• Estensione ai principali marcatori di Estensione ai principali marcatori di

predizionepredizione– HER2, ER, PR e Ki67HER2, ER, PR e Ki67