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COMBINACIONES DE DERIVADOS DE PLANTAS PARA REDUCIR LA CAMPYLOBACTERIOSIS EN BROILERSMarta Navarro, PhDThe University of Queensland, Centre for Nutrition and Food Sciences, Brisbane, Australia
Campylobacteriosis es la infección alimentaria más comúnmente declarada en el mundo (EFSA, 2007; WHO, 2000)
El consumo de carne de pollo insuficientemente cocinada y contaminaciones cruzadas en la preparación de alimentos relacionados con carne de pollo son los principales riesgos de contagio en humanos (Lindmark, et al., 2009; Sahin, et al., 2002; Wingstrand, et al., 2006).
75nutriNews Marzo 2015 | Extractos vegetales: uso en la reducción del estrés
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Más del 80% de los pollos que entran en las plantas procesadoras están infectados con Campylobacter, y más del 80% de las muestras de carne post-procesado siguen siendo positivas
colonias) por gramo de contenido intestinal (Newell and Fearnley, 2003). Extrapolando estos datos, una nave de 20.000 pollos infectados entrando en el matadero contiene sobre 1013 ufc, lo cual supone un considerable riesgo potencial para la salud pública (Lee and Newell, 2006) si tenemos en cuenta que la dosis infectiva para humanos susceptibles es alrededor de 500 ufc (Robinson, 1981).
La reducción de la prevalencia de Campylobacter en los pollos en granja es la estrategia más aceptada en la comunidad científica para reducir la contaminación de los alimentos y el número de casos de campylobacteriosis en humanos (Pasquali, et al., 2011). Se puede recuperar Campylobacter de
casi todos los puntos del intestino, pero principalmente se encuentran en los ciegos, a niveles de 109 ufc (unidades formadoras de
Una reducción de 2 log10
de las ufc en la canal del pollo puede reducir hasta 30 veces la frecuencia en la campylobacteriosis humana (Rosenquist, et al., 2003).
76nutriNews Mayo/Junio 2016 | Campylobacteriosis y extractos vegetales
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ESTRATEGIAS PARA REDUCIR CAMPYLOBACTER EN BROILERS
La estricta aplicación de las medidas de bioseguridad como tratamiento del agua de bebida, aislamiento de la granja contra las moscas, roedores, animales salvajes y estricto control de las visitas humanas, así como la descontaminación de la yacija, son pasos básicos, aunque Newell, et al. (2011) concluyeron que la implementación sostenida de estas medidas era difícil de mantener y son necesarias medidas complementarias para poder llegar a controlar Campylobacter.
Reducción del estrés, incremento de la resistencia del pollo a Campylobacter mediante vacunas, competencia excluyente y selección genética de líneas de pollos más resistentes a la colonizaciones son estrategias innovadoras en estudio, aunque ninguna de ellas ha llegado a una posible aplicación comercial todavía (Bull, et al., 2008; Li, et al., 2010; Swaggerty, et al., 2009).
Aplicación de medidas de bioseguridad y medidas complementarias
Las estrategias de intervención en granja son las que pueden conseguir mayor reducción de la contaminación de la carne del pollo
Medidas de Bioseguridad
Mejoras de la resistencia del ave
! Aislamiento contra roedores
Las estrategias de intervención en granja son las que pueden conseguir mayor reducción de la contaminación de la carne del pollo, y para poder ser implementadas deben ser económicamente viables, sostenibles, legales y aceptadas por los consumidores (Ganan, et al., 2012).
Tratamiento del agua
Control de visitas humanas
Resistencia a Campylobacter
Selección genética
Gráfica 1. Medidas de bioseguridad y mejoras de resistencia del ave.
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El uso de alternativas antimicrobianas como bacteriófagos, probióticos, ácidos orgánicos y compuestos derivados de plantas son alternativas prometedoras para reducir e incluso llegar a eliminar la colonización por Campylobacter en broiler.
BacteriófagosLos bacteriófagos son entidades virales bacterio-específicos que parasitan y destruyen la célula huésped, aunque han sido probados para tratar enfermedades animales con éxito (infecciones de Salmonella y Escherichia en pollitos) (El-Shibiny, et al., 2007; Loc Carrillo, et al., 2005).
Campylobacter ha demostrado desarrollar rápidas resistencias a los bacteriófagos
ProbióticosEl modo de acción de los probióticos podría estar relacionado con una competencia por los nutrientes, por el punto de anclaje en el intestino o por la producción de compuestos antimicrobianos como acidos orgánicos o ácidos grasos volátiles (Callaway, et al., 2008).
Algunos probióticos como Bifidobacterium o Lactobacillus tienen cierta actividad contra Campylobacter in vivo e in vitro
Ácidos OrgánicosDiversos autores han conseguido aislar bacterias acido-láctico positivas (Lactobacillus salivarius) productoras de bacteriocinas con actividad contra Campylobacter (Nazef, et al., 2008; Stern, et al., 2006).
Similares resultados se han descrito con organismos como Paenibacillus polymyxa (Stern, et al., 2005) o Enterococcus faecium (Svetoch, et al., 2008).
Sin embargo, se ha demostrado que Campylobacter puede desarrollar resistencias a las bacteriocinas (Hoang, et al., 2011a; Hoang, et al., 2011b).
Estrategias antimicrobianas
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En general, los ácidos orgánicos tienen una fuerte actividad bactericida in vitro contra Campylobacter, pero en experimentos con broilers muestran tener un efecto muy limitado (de los Santos, et al., 2008; de los Santos, et al., 2009; Hermans, et al., 2010; Hilmarsson, et al., 2006; Mohyla, et al., 2007; Molatová, et al., 2010; Skånseng, et al., 2010; Thormar, et al., 2006).
OtrosChitosan es otra posible alternativa antimicrobiana contra Campylobacter (Friedman and Juneja, 2010; Ganan, et al., 2009; Mengíbar, et al., 2011).
Aunque el mecanismo tóxico no está bien establecido, se relaciona con cambios en la permeabilidad de la membrana celular que conllevan pérdida de componentes celulares (Friedman & Juneja, 2010).
Campylobacter necesita anclarse en el tejido gastrointestinal para ser infectivo. Compuestos anti-adhesivos como la okra (Abelmoschus esculentus (L.) Moench) se han probado utilizando modelos in vitro del epitelio intestinal de pollo con éxito, aunque cuando se aplicó en animales, los resultados fueron decepcionantes (Lengsfeld, et al., 2007).
Les presentamos algunos de nuestros productos especialmente indicados para combatir el estrés, períodos de calor y para favorecer la respuesta inmune: Aksitran ® Tranquilizante multiespecie natural Indicado en períodos de calor, agrupamientos, disminución ingesta por estrés, etc.
Hepabest ® Hepatoprotector natural Indicado como inmunopotenciador, hepatoprotector, regulador metabólico y frente a problemas digestivos.
Stebiotec ® Formulado a partir de Stevia Rebaudiana A partir de hojas de Stevia (un 70 % con más propiedades que productos formulados en base al palo de la
planta). Edulcorante, antioxidante, bactericida, regulador metabólico, etc.
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Los ácidos orgánicos tienen una fuerte actividad bactericida in vitro contra Campylobacter, pero en experimentos con broilers muestran tener un efecto muy limitado
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Numerosas publicaciones han demostrado ampliamente que Campylobacter es sensible a diferentes aceites esenciales y fitoquímicos
Literalmente, hay centenares de publicaciones relacionadas con las propiedades antimicrobianas de los aceites esenciales, extractos de plantas o sus derivados.
En los últimos años, se han buscado nuevas fuentes de compuestos derivados de plantas en los residuos procedentes del procesado de plantas y frutas de la industria alimentaria.
Nuevos compuestos y fuentes más económicas de antimicrobianos naturales están surgiendo en esta área (Balasundram, et al., 2006; Moure, et al., 2001; Schieber, et al., 2001). Numerosas publicaciones han demostrado ampliamente que Campylobacter es sensible a diferentes aceites esenciales (Tabla 1) y fitoquímicos (Tabla 2).
La literatura sobre las sinergias antimicrobianas en derivados de plantas disponible es escasa y difícil de interpretar
Actividad antimicrobiana de extractos de plantas, aceites esenciales y fitoquímicos
TABL
AS
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Anise myrtle Syzygium anisatum Anetol 0.125 Navarro et al., 2015
Anís Pimpinella anysumα-Pinene, linalool, cis-anethole, trans-anethole, safrole, anisaldehyde, acetoanisole
1 Cwikla, et al., 2010
>1 Smith-Palmer, et al., 1998
AlcachofaCynara cardunculus var. scolymus
Cynarin, Chlorogenic acid 1 - 2 Castillo, et al., 2011
Albahaca Ocimum basilicumLinalool, geraniol, citral, alcanfor, eugenol, timol
0.4. – 0.5 Castillo, et al., 2011
Ajo elefanteAllium ampeloprasum var. ampeloprasum
0.21 - 0.67Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Ajo Allium sativum Allicin (70%)
0.01 – 1Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
>1 Smith-Palmer et al.; 1998
0.05 Navarro et al., 2015
Albahaca sagrada
Ocimum tenuiflorumOleanoli acid, ursolic acid, rosmarinic acid, eugenol, carvacrol, linalool, β-caryophyllene (8%),β-elemene (11%),germacrene d (2%)
1.67 - >2Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Ajedrea Satureja montanaCarvacrol (45%), Carvacrol methyl eter (11%), p-cimene (12.6%), y-terpinene (8.1%), Borneol (4.8%), Timol (3.9%)
0.60 Djenane, et al., 2012
Bergamota Citrus aurantium sp bergamotCitral (0.7%), Limonenen(45%),Linalool (15%)
>4 Fisher & Philips, 2006
Blue australiana Eucalyptus radiata 1,8-Cineole 0.1 Navarro et al., 2015
Blue gum Eucalyptus globulus 1,8-Cineole 0.2 Navarro et al., 2015
Blue malee Eucalyptus polybractea 1,8-Cineole 0.2 Navarro et al., 2015
Canela Cinnamomum verum
Cinnamaldehyde (73.35%),Β-caryphyllene (4.09%), Linalool (3.55%), Cinnamyl acetate (2.96%)
0.05Smith-Palmer, et al., 1998
Eugenol (2.68%) 0.42-1Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
0.05 Navarro et al., 2015
Ciruela chino Prunus salicina 4.0 - 6.0 Castillo, et al., 2011
Clavo Syzygium aromaticumEugenol (64%), Eugenyl acetate (16.3%),Caryophyllene (14.5%)
0.05 Smith-Palmer, et al., 1998
0.06 – 0.25Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
0.02 Navarro et al., 2015
Coriandro Coriandrum sativum
Linalool (58.22%),Geraniol (17.87%),Neryl acetate (12.7%),n-Decanal (2.53%),Dodecanal (2.35%),Camphor (2.15%), (E)-2-decen-1-ol (1.32%), Borneol (1.19%)
0.03 - 0.06Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Espinillo blanco Acacia farnesianaMethyl salicylate, anisaldehyde, geraniol, nonadecane, benzaldehyde, geranial
0.2 - 0.75 Castillo, et al., 2011
EstafiateArtemisia ludoviciana Nutt.
Oxygenated monoterpenes (48.8 – 76.6%) 0.05 - 0.06 Castillo, et al., 2011
Frambuesa Rubus idaeaus
Cyaniding-3-sophoroside, cyaniding-3-(2(-G)-glucosylrutinoside), cyaniding-3-gluco-side, danguiin, lambertianin C, ellagic acid, hydroxycinnamate
>1 Castillo, et al., 2011
Gran galangal Alpinia galanga 1,8-Cineole (20.95%),β-bisabolone (17.95%),β-caryophyllrnr (13.16%), β-selinene (10.56%),α-selinene (9.67%),farnesene (7.47%),germacrenen B (6.10%).
0.25 - 1 Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Hierba limón Cymbopogon citratus Geranila (45.7%), myrcene (3.9%), 6-methyl-hept-5-en-2-one (2.7%)
0.42 - 1.33 Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
>0.5 Castillo, et al., 2011
0.125 Navarro et al., 2015
Hibisco Hibiscus sabdariffa Anthocyanins, protocatechuic acid, gossypetin, hibiscetine, sabdaretine, daphniphylline
0.002 – 0.015 Yin & Chao, 2008
Inula Inula graveolens 0.20 Djenane, et al., 2012
Jenjibre chino Boesenbergia rotunda α-Citral (40%),trans-geraniol (20%), eucalyptol, camphor, β-linalool, methyl cinnamate
0.83 - 1.67 Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Lima Kaffir Citrus Hystrix Citronellol (10.7%), limonene (73%), linalool (5.8%)
1-feb Rattanachaikunsopon & Phumkhachor, 2010
Laurel Laurus nobilis 1.8-Cineole (46-59%), Sabinene (7-14%), α-terpinyl acetate (12-25.70%), α-Terpinenol 1.42-6.83%)
0.60 Djenane, et al., 2012
Lentisco Pistacia lentiscus α-Pinene, myrcene, trans-caryophyllne, germacrene D
0.60 Djenane, et al., 2012
Limón Citrus limon Limonene (45%), Linalool (15%), Citral (0.7%) >4 Fisher & Philips, 2006
0.025 Navarro et al., 2015
Mandarina Citrus reticulata Limonene 0.025 Navarro et al., 2015
Mango Mangifera indica Xanthone glycoside, isomangiferin, tannins, gallic acid.
>0.5 Castillo, et al., 2011
Menta Mentha X piperina Menthol (7-48%), menthone (20-46%), menthyl acetate (3-105), menthofuran (1-17%), 1,8-cineol (3-6%), limonene, eucalyptol, pulegone, caryophyllene, pinene
0.05 Cwikla, et al., 2010
Mirto limón Backhousia citriodora Citral (98%) 0.01 Kurecki, et al., 2013
Naranja Citrus sinensis Limonene (73%), Citral (3%), Linalool (0.3%) Castillo, et al., 2011
0.025 Navarro et al., 2015
Naranja amarga Citrus aurantium spp amar
Limonene 0.025 Navarro et al., 2015
Niaouli Melaleuca quinquenervia 1,8 Cineole 0.1 Navarro et al., 2015
Nopal Opuntia ficus-indica 0. 03 -4 Castillo, et al., 2011
Orégano Oreganum vulgare Carvacrol (72%), Gamma-terpinenen (4.4%), Beta-carophyllene (3.97%), Linalool (2.24%)
0.006 Cwikla et al., 2010
0.2 Ravinshankar et al (2008)
0.0037 Navarro et al., 2015
Nombre común
Nombre oficial Constituyentes principales CIM (%) Referencia
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Anise myrtle Syzygium anisatum Anetol 0.125 Navarro et al., 2015
Anís Pimpinella anysumα-Pinene, linalool, cis-anethole, trans-anethole, safrole, anisaldehyde, acetoanisole
1 Cwikla, et al., 2010
>1 Smith-Palmer, et al., 1998
AlcachofaCynara cardunculus var. scolymus
Cynarin, Chlorogenic acid, 1 - 2 Castillo, et al., 2011
Albahaca Ocimum basilicumLinalool, geraniol, citral, alcanfor, eugenol, timol
0.4. – 0.5 Castillo, et al., 2011
Ajo elefanteAllium ampeloprasum var. ampeloprasum
0.21 - 0.67Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Ajo Allium sativum Allicin (70%)
0.01 – 1Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
>1 Smith-Palmer et al.; 1998
0.05 Navarro et al., 2015
Albahaca sagrada
Ocimum tenuiflorumOleanoli acid, ursolic acid, rosmarinic acid, eugenol, carvacrol, linalool, β-caryophyllene (8%),β-elemene (11%),germacrene d (2%)
1.67 - >2Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Ajedrea Satureja montanaCarvacrol (45%), Carvacrol methyl eter (11%), p-cimene (12.6%), y-terpinene (8.1%), Borneol (4.8%), Timol (3.9%)
0.60 Djenane, et al., 2012
BergamotaCitrus aurantium sp bergamot
Citral (0.7%), Limonenen(45%),Linalool (15%)
>4 Fisher & Philips, 2006
Blue australiana Eucalyptus radiata 1,8-Cineole 0.1 Navarro et al., 2015
Blue gum Eucalyptus globulus 1,8-Cineole 0.2 Navarro et al., 2015
Blue malee Eucalyptus polybractea 1,8-Cineole 0.2 Navarro et al., 2015
Canela Cinnamomum verum
Cinnamaldehyde (73.35%),Β-caryphyllene (4.09%), Linalool (3.55%), Cinnamyl acetate (2.96%)
0.05Smith-Palmer, et al., 1998
Eugenol (2.68%) 0.42-1Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
0.05 Navarro et al., 2015
Ciruela chino Prunus salicina 4.0 - 6.0 Castillo, et al., 2011
Clavo Syzygium aromaticumEugenol (64%), Eugenyl acetate (16.3%),Caryophyllene (14.5%)
0.05 Smith-Palmer, et al., 1998
0.06 – 0.25Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
0.02 Navarro et al., 2015
Coriandro Coriandrum sativum
Linalool (58.22%),Geraniol (17.87%),Neryl acetate (12.7%),n-Decanal (2.53%),Dodecanal (2.35%),Camphor (2.15%), (E)-2-decen-1-ol (1.32%), Borneol (1.19%)
0.03 - 0.06Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Espinillo blanco Acacia farnesianaMethyl salicylate, anisaldehyde, geraniol, nonadecane, benzaldehyde, geranial
0.2 - 0.75 Castillo, et al., 2011
Estafiate Artemisia ludoviciana Nutt. Oxygenated monoterpenes (48.8 – 76.6%) 0.05 - 0.06 Castillo, et al., 2011
Frambuesa Rubus idaeaus
Cyaniding-3-sophoroside, cyaniding-3-(2(-G)-glucosylrutinoside), cyaniding-3-gluco-side, danguiin, lambertianin C, ellagic acid, hydroxycinnamate
>1 Castillo, et al., 2011
Gran galangal Alpinia galanga
1,8-Cineole (20.95%),β-bisabolone (17.95%),β-caryophyllrnr (13.16%), β-selinene (10.56%),α-selinene (9.67%),farnesene (7.47%),germacrenen B (6.10%).
0.25 - 1Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Hierba limón Cymbopogon citratusGeranila (45.7%), myrcene (3.9%), 6-methyl-hept-5-en-2-one (2.7%)
0.42 - 1.33Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
>0.5 Castillo, et al., 2011
0.125 Navarro et al., 2015
Hibisco Hibiscus sabdariffaAnthocyanins, protocatechuic acid, gossypetin, hibiscetine, sabdaretine, daphniphylline
0.002 – 0.015 Yin & Chao, 2008
Inula Inula graveolens 0.20 Djenane, et al., 2012
Jengibre chino Boesenbergia rotundaα-Citral (40%),trans-geraniol (20%), eucalyptol, camphor, β-linalool, methyl cinnamate
0.83 - 1.67Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Lima Kaffir Citrus HystrixCitronellol (10.7%), limonene (73%), linalool (5.8%)
1-febRattanachaikunsopon & Phumkhachor, 2010
Laurel Laurus nobilis1.8-Cineole (46-59%), Sabinene (7-14%), α-terpinyl acetate (12-25.70%), α-Terpinenol 1.42-6.83%)
0.60 Djenane, et al., 2012
Lentisco Pistacia lentiscusα-Pinene, myrcene, trans-caryophyllne, germacrene D
0.60 Djenane, et al., 2012
Limón Citrus limon Limonene (45%), Linalool (15%), Citral (0.7%)>4 Fisher & Philips, 2006
0.025 Navarro et al., 2015
Mandarina Citrus reticulata Limonene 0.025 Navarro et al., 2015
Mango Mangifera indicaXanthone glycoside, isomangiferin, tannins, gallic acid.
>0.5 Castillo, et al., 2011
Menta Mentha X piperina
Menthol (7-48%), menthone (20-46%), menthyl acetate (3-105), menthofuran (1-17%), 1,8-cineol (3-6%), limonene, eucalyptol, pulegone, caryophyllene, pinene
0.05 Cwikla, et al., 2010
Mirto limón Backhousia citriodora Citral (98%) 0.01 Kurecki, et al., 2013
Naranja Citrus sinensis Limonene (73%), Citral (3%), Linalool (0.3%) Castillo, et al., 2011
0.025 Navarro et al., 2015
Naranja amarga Citrus aurantium spp amar
Limonene 0.025 Navarro et al., 2015
Niaouli Melaleuca quinquenervia 1,8 Cineole 0.1 Navarro et al., 2015
Nopal Opuntia ficus-indica 0. 03 -4 Castillo, et al., 2011
Orégano Oreganum vulgare Carvacrol (72%), Gamma-terpinenen (4.4%), Beta-carophyllene (3.97%), Linalool (2.24%)
0.006 Cwikla et al., 2010
0.2 Ravinshankar et al (2008)
0.0037 Navarro et al., 2015
Nombre común
Nombre oficial Constituyentes principales CIM (%) Referencia
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Sin embargo, comparar la actividad antimicrobiana de un mismo compuesto entre diferentes publicaciones es a menudo difícil porque las diferencias pueden ser debidas a múltiples factores:
variaciones en el método de extracción,
la madurez de la planta en el momento de la recolecciones
o al tipo de test (difusión por disco o micro-dilución) utilizado en el laboratorio para determinar la actividad antimicrobiana del compuesto estudiado (Gutiérrez-Larraínzar, et al., 2012).
Por otra parte, desde hace tiempo se conoce que la interacción de antimicrobianos derivados de plantas puede producir sinergias, potenciando la actividad y reduciendo la toxicidad, la cantidad de compuestos en la fórmula final y consecuentemente el coste del antimicrobiano. Sin embargo, la literatura sobre las sinergias antimicrobianas en derivados de plantas disponible es escasa y difícil de interpretar (van Vuuren and Viljoen, 2011), y es todavía más acusado en relación a Campylobacter
Nombre común
Nombre oficial Constituyentes principales CIM (%) Referencia
Anise myrtle Syzygium anisatum Anetol 0.125 Navarro et al., 2015
Anís Pimpinella anysumα-Pinene, linalool, cis-anethole, trans-anethole, safrole, anisaldehyde, acetoanisole
1 Cwikla, et al., 2010
>1 Smith-Palmer, et al., 1998
AlcachofaCynara cardunculus var. scolymus
Cynarin, Chlorogenic acid, 1 - 2 Castillo, et al., 2011
Albahaca Ocimum basilicumLinalool, geraniol, citral, alcanfor, eugenol, timol
0.4. – 0.5 Castillo, et al., 2011
Ajo elefanteAllium ampeloprasum var. ampeloprasum
0.21 - 0.67Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Ajo Allium sativum Allicin (70%)
0.01 – 1Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
>1 Smith-Palmer et al.; 1998
0.05 Navarro et al., 2015
Albahaca sagrada
Ocimum tenuiflorumOleanoli acid, ursolic acid, rosmarinic acid, eugenol, carvacrol, linalool, β-caryophyllene (8%),β-elemene (11%),germacrene d (2%)
1.67 - >2Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Ajedrea Satureja montanaCarvacrol (45%), Carvacrol methyl eter (11%), p-cimene (12.6%), y-terpinene (8.1%), Borneol (4.8%), Timol (3.9%)
0.60 Djenane, et al., 2012
BergamotaCitrus aurantium sp bergamot
Citral (0.7%), Limonenen(45%),Linalool (15%)
>4 Fisher & Philips, 2006
Blue australiana Eucalyptus radiata 1,8-Cineole 0.1 Navarro et al., 2015
Blue gum Eucalyptus globulus 1,8-Cineole 0.2 Navarro et al., 2015
Blue malee Eucalyptus polybractea 1,8-Cineole 0.2 Navarro et al., 2015
Canela Cinnamomum verum
Cinnamaldehyde (73.35%),Β-caryphyllene (4.09%), Linalool (3.55%), Cinnamyl acetate (2.96%)
0.05Smith-Palmer, et al., 1998
Eugenol (2.68%) 0.42-1Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
0.05 Navarro et al., 2015
Ciruela chino Prunus salicina 4.0 - 6.0 Castillo, et al., 2011
Clavo Syzygium aromaticumEugenol (64%), Eugenyl acetate (16.3%),Caryophyllene (14.5%)
0.05 Smith-Palmer, et al., 1998
0.06 – 0.25Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
0.02 Navarro et al., 2015
Coriandro Coriandrum sativum
Linalool (58.22%),Geraniol (17.87%),Neryl acetate (12.7%),n-Decanal (2.53%),Dodecanal (2.35%),Camphor (2.15%), (E)-2-decen-1-ol (1.32%), Borneol (1.19%)
0.03 - 0.06Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Espinillo blanco Acacia farnesianaMethyl salicylate, anisaldehyde, geraniol, nonadecane, benzaldehyde, geranial
0.2 - 0.75 Castillo, et al., 2011
EstafiateArtemisia ludoviciana Nutt.
Oxygenated monoterpenes (48.8 – 76.6%) 0.05 - 0.06 Castillo, et al., 2011
Frambuesa Rubus idaeaus
Cyaniding-3-sophoroside, cyaniding-3-(2(-G)-glucosylrutinoside), cyaniding-3-gluco-side, danguiin, lambertianin C, ellagic acid, hydroxycinnamate
>1 Castillo, et al., 2011
Gran galangal Alpinia galanga 1,8-Cineole (20.95%),β-bisabolone (17.95%),β-caryophyllrnr (13.16%), β-selinene (10.56%),α-selinene (9.67%),farnesene (7.47%),germacrenen B (6.10%).
0.25 - 1 Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Hierba limón Cymbopogon citratus Geranila (45.7%), myrcene (3.9%), 6-methyl-hept-5-en-2-one (2.7%)
0.42 - 1.33 Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
>0.5 Castillo, et al., 2011
0.125 Navarro et al., 2015
Hibisco Hibiscus sabdariffa Anthocyanins, protocatechuic acid, gossypetin, hibiscetine, sabdaretine, daphniphylline
0.002 – 0.015 Yin & Chao, 2008
Inula Inula graveolens 0.20 Djenane, et al., 2012
Jenjibre chino Boesenbergia rotunda α-Citral (40%),trans-geraniol (20%), eucalyptol, camphor, β-linalool, methyl cinnamate
0.83 - 1.67 Rattanachaikunsopon & Phumkhachorn, 2010
Lima Kaffir Citrus Hystrix Citronellol (10.7%), limonene (73%), linalool (5.8%)
1-feb Rattanachaikunsopon & Phumkhachor, 2010
Laurel Laurus nobilis 1.8-Cineole (46-59%), Sabinene (7-14%), α-terpinyl acetate (12-25.70%), α-Terpinenol 1.42-6.83%)
0.60 Djenane, et al., 2012
Lentisco Pistacia lentiscus α-Pinene, myrcene, trans-caryophyllne, germacrene D
0.60 Djenane, et al., 2012
Limón Citrus limon Limonene (45%), Linalool (15%), Citral (0.7%) >4 Fisher & Philips, 2006
0.025 Navarro et al., 2015
Mandarina Citrus reticulata Limonene 0.025 Navarro et al., 2015
Mango Mangifera indica Xanthone glycoside, isomangiferin, tannins, gallic acid.
>0.5 Castillo, et al., 2011
Menta Mentha X piperina Menthol (7-48%), menthone (20-46%), menthyl acetate (3-105), menthofuran (1-17%), 1,8-cineol (3-6%), limonene, eucalyptol, pulegone, caryophyllene, pinene
0.05 Cwikla, et al., 2010
Mirto limón Backhousia citriodora Citral (98%) 0.01 Kurecki, et al., 2013
Naranja Citrus sinensis Limonene (73%), Citral (3%), Linalool (0.3%)Undetermined Castillo, et al., 2011
0.025 Navarro et al., 2015
Naranja amarga Citrus aurantium spp amar Limonene 0.025 Navarro et al., 2015
Niaouli Melaleuca quinquenervia 1,8 Cineole 0.1 Navarro et al., 2015
Nopal Opuntia ficus-indica 0. 03 -4 Castillo, et al., 2011
Orégano Oreganum vulgareCarvacrol (72%), Gamma-terpinenen (4.4%), Beta-carophyllene (3.97%), Linalool (2.24%)
0.006 Cwikla et al., 2010
0.2 Ravinshankar et al (2008)
0.0037 Navarro et al., 2015
Pimiento
Capsicum annuun Capsaicin 3-abr Castillo, et al., 2011
Capsicum annuunCapsaicin 6-oct Castillo, et al., 2011
var glabriusculum
Pomelo Citrus paradisi Limonene 0.025 Navarro et al., 2015
Romero Rosmarinus officinalisα Pinene (44%), linalool (20.5), gamma-ter-pinene (16.62%), β Pinene (3.61%), Timol (1.8%), Eucalyptol (0.64%)
0.05 Smith-Palmer et al.,1998
0.055 Navarro et al., 2015
Pimienta de Tasmánia
Tasmannia lanceolata Eugenol 0.05 Navarro et al., 2015
Tomillo Thymus vulgarisTimol (31.4%), p-cymene (17%), carvacrol (12.4%), Y-terpinene (11.1%)
0.04 Smith-Palmer, et al., 1998
0.006 Navarro et al., 2015
Zanahoria salvaje
Daucus Carota L. E-Methylisoeugenol/Elemicin 0.0125 – 0.0250 Rossi, et al., 2007
Tabla 1. Actividad anti-Campylobacter de aceites esenciales descritos en la literatura.
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Anetol Metoxy-benzeno No determinado 0.03% Navarro et al., 2015
Carvacrol Fenol monoterpenoide
Permeabiliza membranas celulares y vesículas
Afecta los ácidos grasos y los fosfolípidos de la membrana
10-30 mMKollanoor-Johny, et al.,
2010
Reduce la fluidez de la membrana 0.1% Ravishankar, et al., 2008
Disipa el gradiente pH y el potencial de membrana 0.004% Navarro et al., 2015
Consume el ATP intracelular
Citral Aldehído terpénico Toxicidad de la membrana celular 0.01% Navarro et al., 2015
Eugenol FenilpropenoInterfiere con enzimas esenciales. Reacciona con la
membrana celular. 20-30 mM
0.02%
Kollanoor-Johny, et al., 2010
Navarro et al., 2015
Timol Fenol monoterpenoide
Interfiere con las membranas y vesículas celulares. Reduce la temperatura de fusión y la entalpia de las membranas. Filtrado de iones H+ y K+ y ATP.
Despolarización de células. Afecta la morfología de la célula. Daña la ruta metabólica del citrato. Inhibe enzimas relacionados con la síntesis de ATP. Causa
daños en el perfil proteico de la membrana exterior. Altera la respuesta genética.
30 mM1000 µM0.006%
Kollanoor-Johny, et al., 2010; Hermans, et al.,
2011Navarro et al., 2015
Trans-Cinamaldehído
Aldehído10-30 mM
0.05%
Kollanoor-Johny, et al., 2010
Navarro et al., 2015
Cinamaldehído AldehídoDaño en la membrana, reducción del nivel ATP celular
ATP e inhibe la ATPase de la membrana.0.1% Ravishankar, et al., 2008
Ácido cafeico Ácido fenólico 2000 µM Hermans, et al., 2011Hermans, et al., 2011Hermans, et al., 2011
Ácido vanílico Ácido fenólico 1000 µM
Ácido gálico Ácido fenólico 2000 µM
Epigalocatequina galato
Proantocianidina125 µM
1000 ppmHermans, et al., 2011Kabuki, et al., 2000
Linalool Flavanol 0.06% Fisher & Phillips (2006)
Ácido protocatecuico
Ácido fenólico 22-44 µg/mL Yin & Chao (2008)
Compuesto
Compuestos derivados de plantas con actividad anti-Campylobacter
(Concentración Inhibitoria Mínima) descritos en la literatura
Clasificación química Mecanismo CIM Referencia
Tabla 2. Compuestos derivados deplantas.
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En nuestro laboratorio hemos adaptado y validado un sistema de micro-diluciones en placa a las condiciones de incubación de Campylobacter, que permite testar específicamente derivados de plantas con diferente solubilidad y sus combinaciones, de manera fácil y rápida.
Utilizando este método hemos determinado la actividad de diferentes aceites esenciales, fitoquímicos, residuos fermentados de sorgo procedente de la fabricación de biocombustibles y ácidos orgánicos, y buscar las potenciales sinergias de sus combinaciones contra Campylobacter.
¿A qué resulta más sensible Campylobacter?
Los resultados obtenidos mostraron una sensibilidad de Campylobacter muy alta por el aceite esencial de orégano y de tomillo y de sus principales constituyentes carvacrol y timol.
El romero y plantas nativas australianas (Mirto limón y Pimienta de Tasmania) mostraron también una interesante actividad contra Campylobacter.
De entre los ácidos orgánicos testados, el acido fórmico fue el más activo contra Campylobacter, seguido por el acido láctico, cítrico, málico y tartárico.
TESTANDO Y VALORANDOLOS RESULTADOS
El residuo de la producción de etanol a partir de la fermentación por levaduras de sorgo está disponible en grandes cantidades en algunos países, entre ellos Australia (Navarro, et al., 2015; Puri, et al., 2012), a un coste muy bajo.
En este estudio realizamos una primera aproximación para determinar la posible actividad antimicrobiana de este residuo, que contiene muchos de los compuestos fenólicos procedentes del sorgo.
Diferentes extracciones y concentraciones del residuo original fueron obtenidas usando una extracción de disolvente acelerado (ASE) o una simple evaporación por rotación, para comparar su actividad con el residuo original, siendo esta la primera vez que se describió actividad contra Campylobacter en un residuo de la industria de producción de etanol por fermentación de sorgo.
Los resultados obtenidos demostraron la existencia de actividad contra Campylobacter en un residuo de la industria de producción de etanol por fermentación de sorgo.
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El residuo industrial demostró tener actividad contra Campylobacter (CIM= 1%), siendo esta la primera vez que se describió actividad antimicrobiana en un residuo de la industria de producción de etanol por fermentación de sorgo.
Para tratar de identificar la fracción del residuo con mayor actividad, diferentes extracciones del residuo original fueron obtenidas usando una extracción de disolvente acelerado (ASE). Las extracciones con agua y metanol demostraron contener mayor actividad contra Campylobacter ( CIM = 4%) que el resto de extracciones (acetona, hexano o etanol), probablemente debido a la presencia de altos niveles de polifenoles hidrofílicos y a la presencia de péptidos con actividad antimicrobiana procedentes de la levadura utilizada en la fermentación del sorgo.
Las combinaciones de compuestos derivados de plantas para determinar sinergias fueron seleccionadas mediante un programa informático (Central Composite Design, Minitab Inc., State Collage, Pennsylvania) que generó una tabla con las concentraciones de cada substancia, dentro de la combinación, potencialmente más activas (Tabla 3).
Para evaluar el efecto de la combinación se categorizaron como sinérgicos, aditivos, indiferentes o antagónicos en base al resultado del índice calculado, siguiendo la metodología de la concentración inhibitoria fraccional (FIC).
Las combinaciones binarias del residuo fermentado de sorgo con orégano mostraron prometedores resultados con índice FIC de 0.55 (Table 4), muy cercano a un valor sinérgico.
Cuando el orégano se combinó con ácidos orgánicos, mostró sinergia con el ácido fórmico, aunque en una combinación terciaria fue la combinación de orégano, residuo fermentado de sorgo y ácido láctico, la que resultó sinérgica contra Campylobacter.
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Los valores CIM se obtuvieron contra ocho cepas de C. jejuni y tres cepas de C. coli (n=9 para cada cepa y tratamiento).
Evaluacion de las interactiones de oregano con otros derivados de plantas y acidos organicos contra C. jejuni 1016,
1065, 1119, 1132, y C. coli 1955 (Navarro et al., 2015)
Combinaciones de aceite esencial de orégano
Índice FIC Interpretación
Orégano (a)1 mas otro aceite esencial (b)2
Orégano/Tomillo 0.40 Sinergia
Orégano/Canela 0.40 Sinergia
Orégano/ Mirto limón 1.17 Aditivo
Orégano/Pimienta de Tasmánia 1.17 Aditivo
Orégano/Clavo 1.17 Aditivo
Orégano/Naranja 1.18 Aditivo
Orégano/Pomelo 1.02 Aditivo
Orégano (a)1 más un ácido orgánico (b)2*
Orégano/Ácido fórmico 0.48 Sinergia
Orégano/Ácido cítrico 1,35 Indiferente
Orégano/Ácido láctico 0.70 Aditivo
Orégano (a)1 más residuo fermentado de sorgo (b)2
Orégano/Jarabe de sorgo 0.55 Aditivo
Orégano (a) plus residuo fermentado de sorgo (b)
más ácido orgánico (c)**
Orégano/Jarabe de sorgo/Ácido láctico 0.47 Sinergia
Orégano/Jarabe de sorgo/Ácido fórmico 0.86 Aditivo
Orégano/Jarabe de sorgo/Ácido cítrico 0.92 Aditivo
Tabla 3. Evaluación de interacciones de oregano.
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Se ha especulado que el carácter lipófilo de los principales constituyentes del aceite esencial de orégano (carvacrol, timol and p-cymene) pueden ser responsables de una desestabilización de la membrana bacteriana (Ultee, et al., 2002; Xu, et al., 2008).
Nosotros sugerimos que esta desestabilización inicial puede permitir que los polifenoles hidrosolubles procedentes del sorgo y el ácido láctico penetren con más eficacia en la bacteria, destruyéndola más rápidamente.
La combinación de orégano con el residuo fermentado de sorgo y el ácido láctico reduce en un 80% la concentración del aceite esencial de orégano necesario para obtener la concentración inhibitoria mínima, reducción significativamente el coste del antimicrobiano.
CONCLUSIONES
Una combinación terciaria de orégano, residuo fermentado de sorgo y ácido láctico resultó sinérgica contra Campylobacter
La técnica de micro-placas utilizada en este estudio es un método robustos, simple y rápido para determinar la actividad anti-Campylobacter de diferentes tipos de productos derivados de plantas y ácidos orgánicos con diferentes solubilidades.
Este tipo de ensayo es también un buen método para cribar combinaciones de sustancias con potenciales sinergias contra Campylobacter.
Este tipo de ensayo es también un buen método para cribar combinaciones de sustancias con potenciales sinergias contra Campylobacter.
Artículo basado en la referencia:Navarro, M., R. Stanley, A. Cusack, and Y. Sultanbawa.
2015. Combinations of plant-derived compounds against Campylobacter in vitro. Journal of Poultry Applied Research,
24: 352-363.
*Bibliografia disponible bajo petición
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