colorantes. coloraciones y anticoagulantes
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Colorante. Coloraciones y
AnticoagulantesLic, Christiam Albornos Andrade
Instituto Superior Tecnológico Daniel A.
Carrión
Curso: Hematología I
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Colorantes y Coloraciones
O Coloración: es el proceso mediante el
cual un cuerpo es teñido por una
sustancia colorante sin perder el color
cuando es lavado con el disolvente
utilizado al preparar la solución colorante.
O Colorante: son aquellas sustancias que
pueden conferir color a otros cuerpos. Es
una estructura molecular no saturada
(sales neutras)
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Tipos de Coloración
OProgresiva: es aquella en donde se hace
actuar el colorante hasta que llegue a su
punto optimo teniendo un control en los
tiempos de coloración (Hematoxilina de
Mayers)
ORegresiva: es en donde se realiza
primero una sobre coloración y luego se
elimina el resto del colorante por medio d
diferenciadores. (Diferenciación)
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O El mecanismo fisicoquímico de la coloración
tisular esta vinculado a la formación de uniones
intermoleculares por atracción electrostática
(entre cargas contrarias-electro adsorción) o por
fuerzas d tensión superficial (interacción
molecular entre los líquidos por fuerzas de
gravitación generadas al dispensar las moléculas
muy próximas entres si)
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Tinciones de Romanowsky
O Tinción Giemsa (protozoos)
1g colorante, 66ml metanol y 66 ml
glicerol
Buffer a pH 6.8
O Tinción Wright
0.3g colorante, 97ml metanol y 3 ml
de glicerol.
Buffer a pH 7.2
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O Tinción de May-Grünwald o Jenner
(variante del Wright), no produce efecto
cromático pero si ayuda a observar las
granulaciones leucocitarias.
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Característica General
O 1879: Paul Ehrlich comenzó con una combinación de colorantes básicos y ácidos
O 1891: Ernst Malchowski y Dimitry Leonidovich Romanowsky
O Conformados por:
O Colorante catiónico (Azur B)
O Colorante aniónico (Eosina)
O Metanol (disolvente) – Fijación => Leishman y Wright
O Adición de glicerol => Giemsa (aumentar estabilidad)
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Anticoagulantes usados en Hematología
O Anticoagulante: sustancia que bloquea el
mecanismo de coagulación evitando la
formación de fibrina (coagulo)
O Uso: obtención de plasma
O Mantienen la morfología y fisiología
sanguínea.
O No usarlo por mas de 24h a 4°C
O Los mas usado son: EDTA, Heparina sódica,
Heparina de litio, citrato trisodico, ACD,
Oxalato de potasio.
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EDTA (C10H16N2O8)
O Presentación: disodica, dipotasica o tripotasica. (etilendiaminotetraacético)
O Acción quelante (Ca++)
O Uso: recuentos celulares, Hematocrito y frotis sanguíneo.
O Sales de potasio tienen ventaja sobre las de sodio (solubilidad)
O ICSH recomienda la sal dipotasica
O K2EDTA .2H2O (PM:404,1g) 1g quela 100 mg de calcio iónico y el pH para una solución al 1% es de 4.8+/-1,0
O Cantidad: 1.5 – 2.2 mg por ml de sangre
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HEPARINA SODICA, HEPARINA DE LITIO
O Anticoagulante fisiológico
O Impide la transformación de protrombina a
trombina.
O No es recomendado para el usado de
frotis sanguíneo.
O Proporción es de 0.1 ó 0.2 mg a 1mg por
ml de sangre
O Usado para pruebas de fragilidad
osmótica.
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Citrato Sódico (C6H5O7Na3)
O Impide que el calcio se ionice.
O Utilizado para las pruebas de hemostasia
y pruebas de sedimentación
O Proporción 9: 1 (hemostasia)
O Proporción 4:1 (pruebas de
sedimentación)
O Se utiliza en una concentración de de
0.106 mol/l (31,3 g/L de
C6H5O7Na3.2H2O).
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ACD
O Usado fundamentalmente en Banco de
Sangre para la conservación de unidades.
O Proporción usada: un volumen de ACD
con 4 volúmenes de sangre
O Composición:
O Acido Cítrico 0.9 g, Citrato disódico 2 g,
Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 ml.