Application of a pore-blockage—Cake-filtration model to protein fouling during microfiltration

11
Application of a Pore-BlockageÐ Cake-Filtration Model to Protein Fouling During Micro®ltration Laura Palacio, 1 Chia-Chi Ho, 2 Andrew L. Zydney * 1 Department of Thermodynamics and Applied Physics, University of Valladolid, Valladolid, E-47071, Spain 2 Department of Chemical Engineering, University of Delaware, Newark, Delaware Received 9 July 2001; accepted 31 January 2002 DOI: 10.1002/bit.10283 Abstract: Although protein fouling is a critical factor governing the performance of micro®ltration systems, there have been relatively few studies comparing the fouling behavior of different proteins. Flux-decline data were obtained for the ®ltration of bovine serum albumin, lysozyme, pepsin, immunoglobulin G, and myoglobin through polycarbonate track-etch membranes. The data were analyzed using a recently developed model that accounts for simultaneous pore blockage and cake for- mation. The model was in very good agreement with the data for all ®ve proteins, demonstrating the general ap- plicability of this new theoretical framework. The initial fouling due to pore blockage is directly related to the concentration of protein aggregates in solution, which was measured independently by quasi-elastic light scattering. The results provide important insights into the mechanisms of protein fouling during micro®ltra- tion. ã 2002 Wiley Periodicals, Inc. Biotechnol Bioeng 79: 260± 270, 2002. Keywords: fouling; micro®ltration; membranes; sterile ®ltration; protein ®ltration INTRODUCTION One of the critical factors governing the overall perfor- mance of membrane processes in bioprocessing and biomedical applications is protein fouling (Marshall et al., 1993; Zeman and Zydney, 1996). Protein fouling in ultra®ltration systems is determined largely by con- centration polarization eects (Aimar and Field, 1992; Aimar and Sanchez, 1986). In contrast, protein fouling in micro®ltration is due primarily to the physical de- position of trace amounts of large protein aggregates on the membrane surface, which can cause very large ¯ux declines even during the ®ltration of relatively ``clean'' protein solutions (Belfort et al., 1994). Previous studies of protein fouling during micro®l- tration have generally focused on the behavior of a single model protein, most often bovine serum albumin (Chen, 1998; Kelly et al., 1993; Meireles et al., 1991; Tracey and Davis, 1994, Wu et al., 1999). There 1 have been several studies comparing the behavior of dierent macromolecular solutions during ultra®ltration (e.g., Howell et al., 1996; Van den Berg and Smolders, 1990), but quantitative comparisons of protein fouling during micro®ltration are more limited. Lee and Merson 1 (1975) used scanning electron microscopy to examine the structure of protein deposits formed on the membrane during both ultra®ltration and micro®ltration. Bovine serum albumin (BSA) and b-lactoglobulin both form sheet-like deposits on the membrane surface, while im- munoglobulin G forms deposits that appear to be composed of large protein granules or aggregates. No data were presented on the hydraulic resistance of the deposits formed by these dierent proteins. Palecek and Zydney (1994) compared the fouling behavior of bovine serum albumin, immunoglobulin G, hemoglobin, ribonuclease A, and lysozyme. In each case, the ¯ux appears to approach a quasi-steady value at long ®ltration times, with the highest ¯ux attained with lysozyme. Palecek and Zydney hypothesized that this long-time ¯ux was determined by the balance be- tween the drag force on the proteins associated with the ®ltrate ¯ow and the intermolecular repulsive interac- tions between the proteins in the bulk solution and those in the protein deposit on the surface of the membrane. Experimental data for the quasi-steady ¯ux vary linearly with the surface charge density of the proteins, in good agreement with this physical model. However, no anal- ysis was provided on the actual rate of ¯ux decline, the approach to steady-state, or the fouling mechanism. Kelly and Zydney (1997) compared the fouling be- havior of lysozyme, pepsin, cysteinylated bovine serum albumin, ovalbumin, and b-lactoglobulin through polyvinylidene ¯uoride membranes. The data were an- alyzed using a pore-blockage model, with pore blockage arising from the deposition of large protein aggregates on the membrane surface and the chemical attachment of native (monomeric) protein to the growing deposit. Correspondence to: Andrew Zydney *Current Address: Department of Chemical Engineering, The Pennsylvania State University, University Park, PA 16802-4400; tele- phone: 814-863-7113; fax: 814-865-7846; e-mail: [email protected] Contract grant sponsor: National Science Foundation ã 2002 Wiley Periodicals, Inc.

Transcript of Application of a pore-blockage—Cake-filtration model to protein fouling during microfiltration

���������� � � ��� �������� ���� ���������� ��� � �� ���� � ����������� �������������

����� ��������� �������� ���� ��� �! "#� #$

���������� � � ���������� �� ������� � ��������������� � ���������� ���������� �������� ���� ��������� � ! ������ �"�����"� ��������� � ����#���� $�#��%�����#���

&������� ' ()�� ���* �������� +� (�)��� ��

�,-. ��/��� 01��/�� 2+

�%&������ �������� ���� ����� � �� � ������� ��������� � � ��� ����� �� �� ����������� ������������ ���� ��� ��������� ��� ������� ����� � �������� � ������� �� ������ � ���� �� ���������� � ������� ����� �� �� ��� ������� �� ���� � ���� ������ ���������� ��� � ���� �������� �� � � �������� ������ ������� ��� ��� ����� ����� ��� !�� ������� � ������ ��� � � ��� ��� �������� ����� ��������� �� �� ������� ���� �� ���� ��� � � �� � �������� � !�� ����� ��� � ��� ���� ������ � ���� ������� �� ��� ��� ���� �� ���� ����� � ��� �� ��� ������������ �� ���� �� ���������� ������ � !�� � ���������� � ��� �� �� ���� ��� �� ������� ������ �� ����� �� ����� �� ���� ��������� � ������� � �������� ������� � ��� �� ��� �� "������������ ������������ �� !�� ������ ����� ����� � � ������ � ����� ����� ���� �� ���� ����� � ��� � ������������ � � #$$# %���� &���������� ' �� (������ �� (��� � '(� #)$*#+$� #$$#�) # ���&* ����� �, ����������� , ����� ��, ������������� , ���� �������

+,-./�0�-+/,

��� �� ��� ����� ����� ������� ��� ������ ���������� �� ������� ���� � � ������ �� ����������� ��������� ����� ������ ��� ������ ���� ����� ����� ��� ������� ��� !� "���� ������� ����#������ � ��� �������� ������ �� ������������ ����$���� �%��� �&�� ��� '���� ���(�&�� ��� )�����$� ��* !� +� ����� �� ����� ������� ���#������ ��� ����� �� ��� ��� ��� ����� ��� �� ���� ������ �� ���� ����� �������� ����� ������� ������ ,��� ��� ��� � ��� ���� -�.������ ���� ���� ��� #������ �� �������� //�����00����� ������ �1����� �� ���� ���2!�

"���� ���� �� ����� ������ ���� ���#������� ���� �������� ���� �� �� ��� ������ �� �

���� ����� ������ �� � ����� ����� ��� �������3���� ���*� 4���� �� ���� ����� ����� �� ���� �����5���� ��� 6�� � ���2� 7� �� ���� ����!� 5���� �������� ����� ���� ������� ��� ������ �� �%���������������� ������ ���� ����#������ ������8�,��� �� ���� ��� � 9�� ��� 1�� ��� )����� � ���:!���� ;��������� ����� �� �� ����� ������ �������#������ �� ��� ������ <�� ��� �� ��� ���=>!� �� ������ ������� ��� ���� �� �.���� ��� ������ �� ����� ���� � ����� �� ��� ����������� ���� ����#������ ��� ���#������� 1���� ��� ������ �1)&! ��� �������������� ���� ��� ������?� ���� � �� ��� ������� ������ ,��� ������������� @ ��� ���� � ���� ����� �� ������� �� �� ���� ����� ������ � �������� � A����� ,�� �� ����� �� ��� ������� � ����� �� ������� � ����� �� ��� � �%���� ����� �

"�����? ��� ������ ����2! ������� ��� ������������ �� ����� ��� ������� ������������ @����������� �������� � &� ��� �� �$���� +� ������ �� ��� -�. ����� �� ������� � ;�� � ����� ������� ���� #������ ��� � ,�� ��� ���� � -�. �������,�� �� �$���� "�����? ��� ������ ������� $�� ������ �������� -�. ,� �������� �� ��� ������� ����,��� ��� ��� ���� �� ��� ����� � ������ ,�� ���#����� -�, ��� ��� ����������� ���� �� ��������� ���,��� ��� ����� � ��� ���? ������ ��� ��� �� ��� ����� ���� � �� ��� ����� �� ��� ��������B.�������� ���� �� ��� ;�� � ����� -�. ��� ������,�� ��� ����� ����� ��� �� �� ��� ����� � � ������������ ,�� �� ��� ��� ������ 8�,���� �� ������ ,� ������ �� ��� ������ ��� �� -�. ������� ���������� �� ������ ����� � ��� ������ ������ ��

4���� ��� ������ ����=! ������� ��� ������ ������� �� �� �$���� ��� �� �� ��������� ����� ���������� ��������� ��� �������������� ������������������ -���� ������� � 5�� ���� ,�� ������$�� � �� � ��������?��� ������ ,�� ��� ����?���� �� ��� ��� ���� ��� �� ���� ����� �������� �� ��� ������� ����� ��� ��� ������� ������������ ����� ��������! ����� �� ��� ��,�� ���� ��

������������� �� &���, ������

C������ ������� 6�������� �� 3������ B�������� 5��

"��� ������ )���� D��� ��� D��� �� "�?� "& � *:(�22::� �����

�����E *�2�* ��=���� ��.E *�2�* >�=*2 � �����E $�����F����� �����

3������ ���� ��� �E A������ )����� '��������

� #$$# %���� &���������� ' ��

3������ ���������� ,� � ���� �� ���� �� ���������� �� ����������� � ��#�� ��?��� � "���� ,����� ��� �������� ���� ��� �$���� �� ����������1)&� ��� �� ��� ������������! �� ������ �� ������ � ����������� ��?��� � 5�� -�.������� ���� ,�� ��,� �� �� � ���� ;�������� �������� ,�� ��������� ���� ������ ��� �������� � ������ ���������� ��� ����?��� ,� �� �;������ ��,� �� ����������� ��� �� ��� ������ -�, ���� ���� ,������ ����� ������������ ��� ������ �� ��� ������������� -���� ������� �8� ��� ������� ����!�

@�G ��� ��� 6�� ���� ! �.����� ��� ������ �������� 1)&� ��������� ��� �� �$���� ���� ����� ��� ������ �.��� � 1���� ��� ������ ��, �� ������ ���� �� �$��� �� ���� ���� ������ ��� ������������� ������� � ,��� @�G ��� ��� 6�� �������� $�� � ���� ��� �� ��� ����� $� �� ��� �� �$����������� ����� �� ��� ��� ��, �8 ��8 ��>>! � �� ���� � �.������ � 5�� ���� ���� ��� � �,�� ���������� ���� � ,�� ��� ���� ������ ��� �� �������?��� ���H� ��� ��� ����� ��� ��� �������������� � �� ��� ��?� �������� A� ������� ,� ���� �� ����� �� ������ �� ��� �� ��� ����� �

8� ��� ������ �(:::! ���� ������� ��������� �������� ��������?��� ��� ��?��#������ ����� ������� ������� 5� ����� � �.������� ��������,�� -�.������� ���� �� ����� ��� ������� ��� ������������� �� �� ����� �� ���� ����� ���������?��,�� 5�� ��I����� �� �� ���� ,� �� ��������� ������ ������ �� ����� �%���� ����� � ,����� ���� �����$�� � �� ��� ��������� ����� ����������� 8� ��� ������ �(:::!� 5�� ����� �� ��� ������������ ,�� ���� � �� �� ����� �������� ��� ���� � ��� ��� ��� ������ ������� �� �� ��� �������� ����� �

��-1.+��2 �,� �1-�/�2

"�� ����� ��%��� ���� ������ �"1)! ��� ��� ��:�:�� 48("�2� :�:�� A�(8"�2 � =8(�� ��� :�:��A��8 ,�� ������ �� � ����� ��,����� ;������� �� ��� �������� ��� �)��� 3������ 3��� )��<�� � ��! � ��� �� �� ������ �� ����$�� ,���������� ��� � 1�� ���� ,��� ��#����� � ����1�� ����H5��������� 6���;��� +&! ,�� � ��������� ���� �* ����� )������ �8 ,� ��� ��� ��

,��� :�:� �8 ��� � �� �� &������ ��> �8 �����' �� )����#�� "�� ����� "&! ��� ��I� ��� �� =�2 �������� �� A��8 � ������� &�� ����� ������ ,����#����� ������ :�( �� ��� $� @����� )����(::������� �@����� )������ &�� &��� �+! �� ������ ��������� ��� ��� ����� ��� �� �� � ��

"���� ������ ,�� ������ �� � ����� ����� ������ ����� ��,��� ������� ��� )���3������ 3�� �)�� <�� � ��!� � ��� ��� ����� ��%� ������� &�� ����� ������ ,�� �� ��� ����������� ���� �.������ ��� � �� ,��� * � �� ���������� )��� ������� ����� � ����� ����� ������ ��� ������ ���� �� ��� �%���� ����� �������� � 5���� +�

��������� 13� ��4 �&

&�� #������ �.������ ,�� ��������� � �� � (>��������� ����#������ ���� ������ *:�:� &����3���! ��������� �� �� ����� ������ � ��� ����,� � �� �$�� �� �2 ?"�� 6��� ,�� ������� � ��:�( �� ������������ ���? ������ �"35B! ������� ������� ��� � ���� �<������ 3&!� 5�� �����#������ ���� ��� ������ � ��� ,�� ������ #����,�� "1)� ,�� ��� ���� -�. ��� ��� ���� ����� ���� ,� ������� �� ����� ,��� �: ��!� 5�� ����#������� ���� ,� ���� ;��?�� ������� �#���� ,�� �������� ������� ��� �������� �� � �� � � ��� ��������� �������� ����� ������� 5�� � ��� ,� ���� �$�� �,��� � ��! ��� ��� #����� -�, ��� ,� ��� ��� �� ���� ��������� � �� � ����� ��������)����� ����� �>*:� B���,���� AJ!� &� ��� ��� ����� #������� ��� ���� ,� � �� ,�� "1)� ��� ��� ����� ���� "1) -�. ,� ����������� &�� �.������ ,�� ������� �� ��� ��������� �(( K (�3! ���,����� ��� �� ���� ����� ��������� ���� ���#������ �� �4���� �� ���� ����� ����� �� ���� ����!�&������� ����� �� ��� �.�������� ������ �������� �� 8� ��� ������ �(:::!�

6����� ���� ������� �6<)! ��� ������ �� ���1)& ������ ,�� ������� � �� � A���� �*: � ��� �"����� )$�� )� ��� � )���� 1����� 3&!�;����� ,�� � �>��7 �� � ���� ��� � ��� ������������ ��������� �������� 5�� ������� ,� ������ �� ��� �� ��� ���� ������� �� � (:� ����� ����� ������ ���� �� ���� � ��� �� ���� �� ��� ���,�� ������� �'������� �%�����! � ������ ,��

����� �� "�� ��� ������� �� �� ����� �

"���� )��� ������� ����� )���� �������� ,���� �?6! + ������� �8

<� �$��� < *= 3��?�� ��� �2 ���:

"�� � " **= "� ������ � ��:

��@������ @>::� 1���� ��� �>> �:L*�:

&����� �1)&! &=�: 1���� ��� = 2�=

�������� �: �: 8� � �� ��� �= =�:

&�-�.'/ 0! �-�� � &/10�(-/.2��03.�20��'-!1�!'/4 5/60- !/ &1/!0'4 �/7-'4� #)8

��� ���� ������ � 6<) ��� �� ��� �����H�������%� �� ���M����� ,�� ��� ������ ������ ����������� � �� ��� )��?� �B� ��� �;����� �3��� ����!�5�� ������ $� � ������ ,� ��������� ��� ������ ��� ������������ ������� ��������� ��� � �:������ ���� � �� A���� ��������� ���,���

5�� ����� ������� �� �� ��� ����� ��� ������������� ,�� �� � �.����� �� ������ ���������� ����� '����� ������� ,�� ������ �� # �-� ��� ,�� �:: �< �� :�( ���#����� "1) �� �������� ����� ������ 5�� ����� ���� � ,� #.�� �� ��?�� ��� ������� � �� *� ������������� �������� �: ��� 5�� ������� ,�� ���� � �� ,�� "1)��� ��������� �� ������� ,� ��� � ������� ������� �� ���� ���� ���� �� ������������ ,�� ���#��� ,� ��� ���� � �� �::� �������� 5�� ������ ,�� � ��� �� 2�3� ������� �� ������ ��� � ������� ,�� � ��� ���� �� ���� ���� (> ?"� �� ��� �� � 6����� 9����� 6� ?�� ������H ������� ����6����� 9������ +���� ���� ��,�� AN!� ��� �����,�� � NB�<�*2: ������ ������� ��� ���� �N���D)&� +���� "������� �&! �� > ?9�

.120�-2 �,� �,��52+2

������ � ��6��� � �� � � ���� �&

'��� � ��, ������ �.�������� ���� �� ��� ������$�� -�, ��� ���� �����! ��� ��� �� -�. ������������� �����! � � ������� �� ��� ���� ��� ��� ������ ��� �" � �2 ?"� �( � !� #������ �� ������ ������ �������� �( ��� :�: �H<! � 1)& �( �H<!�<���� ���� ������� � �� � ��� � ��� ��:: ��! ��,�� ��� ��� ������ ������� ����� ��������� ���? �� ��� �� �%��� ,�� �������� � �� � ���� 5�� #����� -�,���� ���� ���� ���� �����$���� ��� ���� -�, ��� �� ��� ��� �� ��� #������� ,��O: ����� ��� ���� � �:�= �� �� �� ���� � �:�= �� ��

��� �� ��� ������ ������� �� ������� ��������5�� � �: ����� ,�� ��� ,��� �:� �� ��� ������ ���� ���� -�. ��������� I� � �� �� ,����� �� ��� ������ ������� 5�� ��� �� -�. ������ ���,� �����! ,� ��������� ������ ��� ��� #����� -�. ���� � E

� � � �

��

� ����

&�� ������� ,�� ��������� ��������� �� �%��������� ��� -�, ��� � � ��� ���� � '��� � � ��+�)< ����� 63)6BP �� ��?� ��� ������� �� � ��� �� ����, � ���� ��������� ���� ,�� #� �� ����, ����� 5�� ��� ��� ������ ���� �� ����� ����������� ��� ,�� �� �� ���� �� �;�������

5�� -�, ��� ������� ��� ����� �� ��� ( �H<�������� ������� ,�� ��� -�, ��� ������� �� (:��� � ���� ����� ,��� � �� �� #������� 5�� -�.������ �� ��� 1)& ������ ,� ���� �� ����������,�� ��� -�, ��� ������� �� (:� �� � ���� �����

���� ����� �: ��� 5�� ��� �� -�. ������ ����� � �������� �� �� ���� 1)& ��� ��������� 8�,������� ���� �� 1)& ��� ��� :�: �H< �������� ������ ��, � ���� �-����� ���� �� �� ��������� #���������� ,�� ��� ���� ���� ������� ��,� �� ��� ��� ��� ������� �� �� ����� ��� � +� ������� ��� ��� ��-�. ������ �� 1)& ����� ���� ���� �� ��� :�: �H<�������� ������ �� ��� ��� � Q �> ��!� ��� ������ � ��� �� ���� ��� � &� ��� ���� ��� � ��� ����� -�. ������ ������ ��� ����� ��� � ��� ��� ����$�� �� ��� �� ��� ������ ��� ��� �::��� #�������.����� � '��� ��

'��� ( ��, ������ ������� ������� ������ ������������ ������� � ��� �� �� #���������� ���� �> �� �� #������ �� � ( �H< 1)& ���������� ��� ���� �> �� �� #������ �� � ( �H< ��������

���� � A����$�� -�, ��� ���� �����! ��� ��� �� -�. ������

������� �����! ���� ��� #������ �� �������� ��� 1)& ������

��� "35B ������� �� �2 ?"�� 5�� ���� ����� �� ����� ����

��� ,�� ����������� �;��� �� ( �H< ��� ��� ��� ����� �� ��

:�: �H< ��������� )��� ��� ������ ���� �� ����� ����������

� �� ��� ���� ����� RB;� � !S ��� ��� ����.���� ������ RB;� �=!S�

� ���������

#)# ('/!0.94/-/�: �46 ('/04�'4001'4�� ;/-� +<� 4/� =� �7�7>! ?� #$$#

������� 5�� ������� � �� �� #��� ��� �������� ������ ���� � ���������� ������ ,�� ������,��� �.������ ���� ��� ��� ���� -�. ������ ����� ���� �� �� � ���� �����! �� ���� ���� ��

#������� 5�� ������� � �� �� ��� 1)& #������ ��, ���� ��,� ����?�� ��� � ��� ���� ,�� ������� ��,� ��� �� -�. ������ �� ��� 1)& �'�� �!�)��� ����� �������� ����� �� �� � ��� �� ��� ����� �� ���� ������� � �������� � ��� �M������ � ���� ��� ������ �������� ������ �� ������������� ��� �����

B.�������� ���� �� ��� #������ �� ( �H< ������ �� �� �$���� ���������� ��� ��� �� ����� ,�� � :�2 �H< ������ �� ��� �� �� ��,� � '��� �� 5�� ���� ������ ������� � ��� �����$�� #����� -�, ��� ���������! ��� ��� �� -�. ������ ������� �����!� 5�� �� ���� -�. ������ ,� ������� ,�� ��� ( �H< ��� � ������ ,��� ��� ��,� � -�. ������ ,� ������� ,���� �$���� 5�� ��� �� ��� #����� -�. �� ��� �� (:� ��� ���� ����� ����� ��� �� �� ��� � �� �:: ���� �� �$���� 5�� -�, ��� �� ��� ��� �� ��� �::���

���� �� )������ ������� ������� ��E ��! ����� "35B ����

����� ��! ���� #������ �� � ( �H< 1)& ������ �� �> ��� ��� ��!

���� #������ �� � ( �H< ������ �� �������� �� �> ������� �� A����$�� -�, ��� ���� �����! ��� ��� �� -�. ������

������� �����! ���� ��� #������ �� ( �H< ������ �� ��� ��

�� �$���� ��� ��������� ������ ��� "35B ������� �� �2 ?"��

6��� �� � :�2 �H< ������ �� ��� � �� �� � ��,� �� ����� ���

)��� ��� ������ ���� �� ����� ���������� � �� ��� ���� �����

RB;� � !S ��� ��� ����.���� ������ RB;� �=!S� � ���������

&�-�.'/ 0! �-�� � &/10�(-/.2��03.�20��'-!1�!'/4 5/60- !/ &1/!0'4 �/7-'4� #)=

#������ �� �� � ;��� �%����� ����� ��� (:� ����� ���� -�, ��� �� �� �$��� �� �� �� ��� ( �H<��� �� +� ����� � �� ��� ���� � '��� �� ��� ��� ��-�. ������ �� ��� � ����� ���� � ������ �� ��� ��� �� ��� #������� �� �� ������ � ���� ��.�������� ����� �� �� ����� ��� � 5�� ��.��� � ������ �� -�. ������ ���� �� ����� �� �� ��� ��������� � 5�� ��� �� -�. ������ �� ��� ( �H< ��� �,� ��#������ ���� ���� ���� �� ��� ���� �� ���,� ���� �% ��� ���� �� ������

��4%� � ��� �������� �� ��� ���������� ��� �

5� ���� ���� ��� �%����� � ������ ������ �� ����%���� ����� � ��� -�. ������ ���� ��,� �'��� � ��� � ,�� #� �� ��� ������� ��������?������ ��?��#������ ����� ��������� �� 8� ��� �������(:::!� 5�� ���� -�. ������ � �� ����� � � �������?��� �� ��� ������� ��� �� ��� ��� ���� ����� ���� ����� �������� �� ��� ������� �����E

� ����

�� ��������� �(�

,��� ���� ��� ����� �� ��� ��� ��� �������� -�,��� �� ��� ���� ��� � �� ��� ���? ����� ������������� ��� � �;��� �� ��� ��� ��� ����?�� �� ����� �� ����� ��������� �� ��� ������� ������D��?� �� � �� ��� ����?��� ����� � ��� � ��������� �� � ���� �� ����, ��� -�� -�, ������ �������?�� ��� � 5�� � ����� �� ��� ����� ���� ���!������� �� ���� � ,�� ��� � �������� ����� ��������� �� ��� ������� �����E

���

�� � ������������ ���

,��� � � ��� ������ �� ����� � ��� ���? ���������� �������� �� ��� ��,�� �� ��� �. ��� ���� �� ��

��� ���#� ����� ���� � ������ ��� ������� ���#����� -�. ������ ��� ����� �� ������ �����?��!��� �� ��� ������� ������ 5�� ����� �.������������� �� ��� ����������� � ��� � ����� �� �������� ���� ���� � � ����� � ��� ���� � ���� ��, ��� ��� ��� ������ �L�! ,��� � ��� ��� �� ,������� ������� ���� ,� # � ������ �� � �����

��������� �� ��� �� ��������� �� �������� �� B;� ��!,��E

������� � ������ � ��� �2�

�� ��� �8� ��� ������� (:::!E

�� � ��� � ��:������������������������������������������������������� (��������

���� � ��:�(�� ��

�� �� �>�

,��� �� ��� ��� ������� �� ��� � ��� ������� � �� ��� �� ��� � ����� �� ��� ����� ��������� ��� ��: ��� � ����� �� ��� # � ���� �� �������� ���� �� 5�� #����� -�, ��� ������ ��� ������������� �� ��� ���� #������ ��� ��� �� �.�� ��� E

� ��:

��.� � �����

���

� �

��

:

�����

���� � ��� �.�������

����

� ���

�� �

,�� �� ��������� ��� B;� �>!� 5�� # � ��� � B;� � ! ��� -�, ��� ������ ��� ���� ��� ��� �;�������� �� ��� ��� ��� ��� ����?��� ������ 5�� �������� � B;� � ! ��� -�, ������ ��� ����?�� ��� �5�� �������� ��� � ������� �� ��� ��� �������������?��� �� ��� ������� ������ 5�� -�, ��� ��� �� ���� �� ���� ?�� ������� E � ��� ����?���������� �� ��� ���� � ����� �� ��� ����� ���� ���:� ��� ��� ��?� ��,�� ������� � ��� �8� ���������� (:::!�

5�� �� ��#� ����� �� ��� ������� �� � ���� ��� ��:

�� ��� ������� ����� ,�� �������� �� ���$����� �� �� ��� ;���� � ���� ���,��� ��� #����� -�,��� ���� � '��� � ��� � ��� ��� ���������� ������ ����� RB;� � !S � �� ��� ������ �� ����� � �� �����5�� � ��� �� ����$�� � 5���� ++� ,�� ��� ��� ����� �������� ������ ��� ��� ��� � ;��� �����$����� 5�� ����� ���������� �� � ��� ������������ ,�� ��� ���� �� ��� ����� � 5�� ������� �� ��� � ��� �������� ,�� ��� �������� ��� ���

����� ��� 1� � #� ����� �� ����� ������� �� �%���� ����� �

� ��: � ��� � ��� ���! ��� ���!

"���� ��( ?���! ���� � �:��:! �� ?��� � �:���! �OB<)!

�����

���� �������! �OB<)!

<� �$��� :�(� K :�:� ��= K :� ��� K :�� :�:::( :�:* >�: (>:

��������� :��� K :�:� ��: K :�* � K ( :�� :�:( �(=: >::

"�� � ��( K :�( >�= K :�> =2 K � :�:( :�:= �:2: �>*

�������� =�* K :�* *( K > (�( K (: T ��: �*: T

1)& :�2� K :�:( 2: K ( (2 K ( :�:::� �� �*: �*:

#)@ ('/!0.94/-/�: �46 ('/04�'4001'4�� ;/-� +<� 4/� =� �7�7>! ?� #$$#

���� �� ��� ( �H< ������ � ,�� ��� � ��� ������������ � �� �� ����� ��� � ��� �� ��� ��,� ����������������� 5�� ����� ���������� ,�� ���� ��.������� �������� ,�� ��� #����� -�. ����� ����������� ���#����� �� ��� ������ +� ������� �������� ,� ���� �� ��� ��������� �� ��� ��� � ��� �� ��� ��� �� -�. ������ �� ��� #�� ����� � ���������� �� ���� �� � ���� ��.��� � ��� ��� �� -�.������ �� ��� �� ���������� ��� �� �$���� A��� ������� ��� ��� ��� ����?��� ����� ,���� ��� � ��� ������� �� -�. ������ ��������� ��� #������� ,��� ������ ���� ���� ,�� ��� �.�������� � ��� �

&������� B;� � ! �������� �� � �� �������� ����������� 8� ��� ������ �(:::! ���� �� � ��������� ����� ���� ��������� ������ �� ��� #����� -�, ����� � ���� � ����� ��.��� � ����� �� �������� ���� ��� ��� ������ ���� �� ��� ��������D �� �� � ������� ��� ���M���� ��������� ����.�������� � ��� ���������� ������ � B;� � ! ������� � ��� ���� ��� ��� �� ������ ��� �� �� ��� ������� �� ���E

� � �:

��.� � �����

���

� �

� ��

�� � ���� �.� � �����

���

� �� ��=�

5�� ��.��� � ����� �� ��� ����� ���� �� ����� ��� ��� �� ��������� � �� B;� �>! ,�� � � :�5�� ������� �� ��� ����.���� ������ � �� ���������� ��,� � 5���� ++ �� ��,� � ��� ���������� � '��� � ��� �� 5�� ����.���� ������ ����� ��� �� ��� ���� ����� �� 1)& ��� ���������'�� �!� ,�� ������ ���� ������� ��� �� ��� ������ � '��� �� 5�� ���� �������� ���,��� ��� ��������� ��� ��� ����.���� ������ ��� �� ��� ����������� ������ ������ � ��� ��?� ��,�� ���� �5�� � ���� �� ��� ������� ,�� ��� ���?� � ���� ����� ��� ����� � -�.� ������ �� ��� ��,� � ��� �� ��?���,��� 5�� ����.���� ������ ��,�� ����� � ������ ����� -�. ���� ��� ���� ����� ����� � �������.���� ������ �� �� �� ��� ��.��� � ������ �� ��� ����� ���� ��� ��� ���� ������� ������ 5�� ������� ���,��� ��� ����.���� ������� ��� ��� ���� ����� �� ���� � �� �� �$���� ,��� � ���� � ��� �� ��� �������� ��, ��� �� ��?� ��,��� ���� � ��� �����! �� �� ������ 5� ���� ��� ����?� ��,�� ����� ��� ����������� ������� �� ����� ��?� ��,�� ���� � ���� �� ��� �� � ������,�� ��� � ������ ���� �� ����� ��� ���������� ������

5�� �%���� ������ ��� � '��� � ��� � ��� ������ ���� �� �.����� ��� ������ ��� �� -�. ������� � ������ ,�� ��� ����?��� ��� ��?� ��������5�� ��� �� -�. ������ � ������ ,�� ��� ����?��� ��������� ��� B; � � ! � �=! � ���� ���� ��?���,�� ��������� ���� � ��� � :E

����� � �����

���

��:

�� � ��:

� ��*�

,��� ����� �� ���� ��������� �� � :� 5�� ��� ��-�. ������ � ������ ,�� ��?� ��,�� ��������� ������������� ��� �.�� �� �� ��� -�, ��� ��������� ����?�� ��� R��� ����� ��� � B;� �=!S ,�� ����.�������� ��� ?��� ��� ����E

���� � ��������

���� � ��:�(���

A��� ���� B;� ��! ����� ��� ��.��� ����� ������� ,��� ,� ��������� �� ��?�� ��� ������� �� � :� 5�� ��� �� ����� �� ���� �� ��� ������������ #������ �.������ �������� ��� B; � �*!��� ��! � �� ��� �� ��#� ����� �� ��� ����� �������� �� ��,� � 5���� ++� 5�� ����� �� ����������� 1)& �� ��#������ ����� ���� ���� ����������� ��� ��� ����?��� ������ �� �� ���� ��?� ��������� 5�� ��� � ������ ��� ,�� �� �$���� ���������� ��� ��� �� ��� � �� ��� ��� �� ��?���,�� �� ��� � ����� ���� ���� �� ��� ���� ����� � � ��� ��� �� -�. ������ �� ��� ��� �� ���#������ ��� � ��� ��,� ����� �� '��� �� 5�� �� �������� ��.��� � � ���� ,�� ������������� ���� ,�� ��� ��� ���� ��� �� �����H����

��������� �� �� ������

���3�� ��� ���#&�&

&����� ������� ���� ��� �� � �� �� �����$� ��������� ������ � �� ������ ��� #����� -�. ���� ���� ��� �(H��( � � �H�� � ������� ���� ��� ��8���� ��� 1���� ���� !� 5�� �;��� ������� ,�� ��������� � ��� �� ��� #����� -�.E

��� �

���:�

�(

��(� �

�(����

5�� -�.������� ���� �� ��� #�� ����� �� ��,� �'��� 2� ,�� ��� ��� ���� ��� ����� ��� ���� �����R�B;� !S � �� ��� �� ��#� ����� �� ��� ������ �������� ��,� � 5���� ++� &� ���� �H��� ��� ������ �� ��� #������ ��� � ��� ���� �� 1)& ��� ������������ ���� ������ �� ,�� ���� �� ��� ������� ������ ����.������ (� 5�� ���� �� ��� �� ���������� ���� ������� �� �$���� ��, � � ���� ���������� ������ ��� #������ ��� � 5�� ���� � � ( �.����� ��������� ������� �� ��� ��� ��� ��� ����?��� ������8� ��� ������ �(:::! ���� ��,� ���� ��� ���������� ��� ������� ���� � � ��� ��� -�, ������ �������?�� ��� ��� ��� ��,�� �� ��� ����� ��?� �����1��� �� ��� � ��������� �� ��� ��������� ��

&�-�.'/ 0! �-�� � &/10�(-/.2��03.�20��'-!1�!'/4 5/60- !/ &1/!0'4 �/7-'4� #)?

��� �� ���������� ��� �� �$��� ��� �� ��� ���� ����� �� ��: ��� ��� ����� ������ ��� �� ��?� ��,��� ����� ��� �� �����H����! �� ��� � ����� �

&� ���� ��� � ��� ���� ��� ��� ����� ����� � $�� ���� ��� ���� ,�� ��� ��� ��� ��?� #������ ������5� $�� ���� ������ ��� � ��� ���� �� ��� � ����� �$���� ,��� ��� �������� ���� ����� �� ��, � ���� ����� � �� ��� ���� ��� � 5�� �������� ����� �� �(H��( �� �������� �� ��� ���� ( ��� ���������� ����� ���� ��� � �� �� �$���� ,��� ��� ���� ,�� ��� ���� �������� � ��� �� ��#� ����� �� ��� ��?� ��,�� ������� �����! �� ��� � ����� �5�� ��� ��� ���,��� ��� ��� ����?��� ��� ��?� #������� ���� � ��� � � ��.��� ����� �� �(H��(

�����,�� �� � ������� ����� 5�� �� ���� �� �� ��.��� �� � ��������� �� �������� ��� 1)&����� � ��� � �,� ����� ���� ��� ����� � ����� �������H����� +� ����� �� ��� ��.�� �� ��� ���� ������ �� I� � ����� � ���� ,�� ��� ���� �� �� ��$��� ������� �� ��, � ����� ���� � � �(H��(

��������� ��� #������ ��� �� ��� ��� ���� ����� ����: �� �� ������ 5�� �. ����� �� � ��.��� � ������� �� �(H��( � � �H�� ��� ��������� �� ���� ����� ������� ��� ����?���T��?��#������ ������A��� ���� �� ���������� ������ �� ���� ;�����������.������ �� ��� �� ��� ��� ��� ������ ����� � ��� ��,��� ����� � ���� �� � ���� �� �(H��( � � �H�� ���� ����� ���� � �;��� �� $���

������ ����4 � �&

&������� ��� ���� ������ ������� ,�� ��������������������� �� #���� ��� ����� ���������� �� ����.�������� #����� -�,���� ����� ��� ������ ��� �

����� �� ��� � ��� ��� �� �.����� � �����, � +� �������� ��?� ����� �� �� �� ��� �� �������� � ������� ���#� � ����� �� ��� ����� ���� � ����� �������� �� ��� � ����� �� ���� �������� � E

�� � ��:

������ ���� ��(�

����� � �� ��#��� � ��� ��?� � ����� �� ��� �� �� ���� 5�� ��������?��� ������� � ������ ������� �� ��� ������ �� ����� �� ��� � ��� ���? ������� � ��� ��� �� ���� ����� �������� � � !E

� � � ����

��������

,��� ���� ��� ��� �� ���� ���� B;����� ��(! ������! ��� �� ������� �� ���E

� ����(�������:

� �(��� ��2�

,��� ���� ��� ��� ���� ���� ���� ��������� � ��� �� ��� ��� ��� �������� �� � ���� ����� �� � ����� � 5�� ���������� ����� �� ���� ����������� B;� ��2! � �� ��� �� ��#� ����� �� ��� ������������� �� ��,� � 5���� ++ �� ��� #�� ����� �5�� ���� � �������� ��� ,� ����� �� ����������,�� � ����� ��� ���� ��� ���� ������� �� ����������

+���������� � ����� �� ��� $� ��� �� ������ ����� ����� �������� ,�� ������� �� ;�� ���� ������ �������� 5�� ���� �� ,������ ������ $� � ������� �� 1)&� �� �$���� ���������� ��� ��� � �� ��,� � '��� >� 5�� �������� ������ ,� ��� ������ ������ �� ����� �� ������� ����� 5����������� ������ ��� ��� ���� � ������ ,��� ���1)& ��� �� �$��� ��� ��� ����� � ������ � � ��� ������ ���������� ��� ���� ,�� ��� ����� �� ���� ����������� �� ��� � ����� � �� B;� ��2!� 5�� ����������� �� ���! ��� �� ������ �� ��� ������ $� ���! � E

�� � ��� �

������� ����� � ����� �����

�(

��>�

���� ������� ,��� ��� �%����� � ������� ���.���,��� ��� ����� �������� ��� ������ ����� �� ��� ����� ��� �� �� ������� ������ �� $� �� ���� ��� �������� �� ��� ������� �����E

� � 2���

��(

� ��� �

,��� � � ���� ��� ������� ���. �� ��� �������� � 2** �� ��� ,��������� �� ��� ������� ���� � �:� ��� ������� ������

5�� ���� �� ,������ ������� $� � ������ ,��� �� �� �������� ��� ������ �������� �� ,�� ���� ��� ��,� � ��� �� � ������ �� 5���� ++� 5�� ���

���� �� '��.������� ����� �� ��� �%���� ����� ������ � B.�

�������� ���� �� ��� '��� � ��� �� )��� ���� �� ����� ����

������� � �� ��� ������� ��������?��� ��� ��?��#������ ������

#)) ('/!0.94/-/�: �46 ('/04�'4001'4�� ;/-� +<� 4/� =� �7�7>! ?� #$$#

�� ��� �������� � ��� �� �$���� ���������� ��� 1)& ������ �������� ��� ��� ����� ������� ���� ����� ����� � ����� �� ( ����� ���� ��� ����� ��������� ��� ��� ������ ������� � 5� � ���������� �� ��� � ��� �� ��� ���� ���� � ������ � ��� $� �� ��� �������� � �� '�� >! ��� ��� �%����,������ � ������ ,�� ��� ���� �� ������� � �������� ������� ���� ��� ��� ����� ������� �������� ��� ������ ������ &����� �� ��� �.�������� ���� ��� ����� ��?� ���� ��� ��� ����� ��� ������ ���� ��� ��� ��� ���� ������� ���!� ,���,���� ���� �� ���� � ��� ����� �� �� ������ �� ������������ ��� ��: � ���� �� B;� ��(!� 5� ����������� �� �� �.���� ��� ����� �� ( � ������� ��� ����� �������� ��, ��� �� ������ �:�! �� ��� ������������� ���?������� ������� � 5�� ���� ���� � �������� ��� ,�� ��� � ��� �� � �� � � ��� �� ������� $� � ������ � �� ������� +� �� �� �� ������ ��� ����� �������� ��� �� ���� �� �� ��������� ������?�� ��� ��� ��� ��� �� ��� ��,�� ���� ��,��� ,���� ���� �� ���� � ��� ����� �� � � ���� �������� ����� ,��� ��� �� ��� ���� �! ������ �� �������� �� �� 5� ,���� ��#������ ���� � ��� ������

����� ����� �� ���� �� �� �� B;� ��2!� ��� ���� ,�� ����.�������� �� ������ �

5�� ����� ������� ���� ��� �� � �� � �� �� � �������� ������ �� ����� �� ��� � ��� ��� �� ������������ � ,�� ��� ���������� ����� ��,� � 5����++� 5�� � ����� �� � ��� ���� �� � �� �� ����� � ��� ����� �� ��� ��������?��� ������� � ,�� ����� �� ��� ����� �������� ���������� ��� ��� ���� � �� � ���� ���� ���� ������ 5� ��� � �:�� �( ?��� �� �� �$��� ��� � � :�2 �( ?��� ��1)&� ���� �� ,��� �� � ���� �������� ,�� ����� ��#� ����� �������� ��� ��� ������ ����� +������ �� ��� ���������� ����� �� � �� ��������� ��� �� �( ?���! ��� ��� � �� � �* �( ?���! ����� ���� �� ��� �� �������� ����� ���� �������� �������� ��� ��� ������ ����� 5�� ��� ���� � ������� ������� �������� � ��� �� �������� ��� ��� ����� ���� ����������� �� �������� ��������� �� ���� �� ��� � ����� �� �� �� ��� ����� ������� ����� �

5�� ����� ������� �� ��� �%���� ����� ,���� � �� ������ ������ �� ��� �������� ��� ���������� ������ �� ��� ������������ � '� �.���

���� �� O�� ���� �� ���� ������� � ��� �� ��� ������� ���� �� � � ������� �� $� �� ��� ��� �� �� �$���� ���������� ��� 1)&

������ �

&�-�.'/ 0! �-�� � &/10�(-/.2��03.�20��'-!1�!'/4 5/60- !/ &1/!0'4 �/7-'4� #)+

���� ��� ���� �%����� � ������ ������ �� �� ��$��� ��� 1)& �'� � � ��� �! � ���� � ��� �� ������� �%����� � ��� ����� ���� � ����� � ������: ��� � ���� ,��� �� (: ��� ����� �� 1)& ������ �� �$���� 5�� ��� �� �� �������� � ���������� � ����� ������� �������� � ��� �� ������ ����� ��� ����������� ��� �� �� ��� �� �$��� �:�:(=3 ��( ������� �� :�:�* 3 ��( �� 1)&� 4���� ���������� ���=!� 1���� ��� ������ �� � ���� ����� ����������� � ��#�� ��?��� � ��� ��� � ��������� �� � ����� ���?�� �� ��� ����� �������� ,������ ��������� �������� �� ��� ��,� � ��� ����������� ��� �� �� ��� �� ��� ����� �.����� � �� ���� ��������� � ������� �������� �� �8 =!�,��� ��� ���� ,�� ��� ��� ���� ����� �� ��: ���� ���!� "���� ���� � ,�� �������� ���� � ���� ���#� � ����� �� ��� ������� ���� ��� �� ������ ������ ��� �� ��� ������� � ����������������� ���� ���� �� ���,��� ����� ,��� ��� ����� � ���� ��� � ������� �"�����? ��� ����������2!�

1 ��& � ���� � ��# � . &�&���

5�� �%��� �� ��� ����� ���� � ����� �� ��� -�.������� ������ �� �.����� � ��� ����� � '��� ��� =� +� ���� �� � � ������� ,�� ������� ,��� � :�2� �( ?��� ��� � � � :�:::� � ������������� �� �� 1)&� '��� �.���� ��� ������ ��������� �� �,�� ��: � 2�: � �:�� ���! ��� '��� =�.���� ��� ������ �� ������� ��: �,�� �� � : ��������� ��� ������ �� ��� ��?� ��,��!� 5�� � ��� ��

��� �������� ����� � ��� ���� ! ��� ����.���� ������� ��� ��� ���� ! �� ������� �� ��� ��� ��� � ���� �H��! ����� � ��� -�. �������� �� �������?��� ��� ��� ���� � ����� �� ��� ����� ���� ����� ��� � ������� � ,�� ����� ��������� ������ ����� ��?� �������� )��� � ������� �� ���� '��� �� ��������� ��� ��� ���� P�� ,�� �������.���� ������ ���������� ��� ����� �� �(H��( ����� � ��� � ������ �� � ����� ��?� � ��������� �� �� ���� ������ �� ��� ��� �� -�. �������5�� ������� ,�� �� ,�� : �� ��� �� ��� � ���� '��� 2 �� 1)&� 5�� ��.��� ����� �� �(H��(

���� � ,�� ���� �� ��� ��� ��� ������� �� �����.��� ����� �� � ���� ����� �� �H��� 5� ������� ������������ ������ ���� ����� � ���-�. ������ ��� ����?�� ��� ����� � ����� ,������ ���#� ��?� � ����� ����� 5�� ��� � ��� ������� �� ��� -�, ���� ������ ��� ���� ��� � ,�� ������ �� -�. ������ �������� �� ��� ��� �� �������?��� ��� �� � ���� ����� �� �H�� ���� �������� � ����� #����� -�.!� 5�� � ������� ����� �� �(H��( ������� �� ���� ��� ������ ��������� �� ��

����� � ��� -�. � �� ���� �������� ������ ����� ��?��#������ ������ �� 5�� ����.���� ������� ������� �� ��� ���� ����� ,��� ������� � �� ������ �������� ��� ������� -�. ���� ���,��� ����� ����� �H�� ���,��� ����! ��������� ������� #�������

5�� ������� �� ��� ���� �� �(H��( � � �H�� �� ���,��� ������� ,��� ��� ���#� ��?� � ����� $��� 5�� ����� �� �(H��( ��� ��, � ��.���� ������� �� ����� ��� ������� ��?��#������ �������� ���� ��� � +� ����� ��� #����� -�. �������� � ���

���� �� )������� ��,�� ��� �%��� �� ��� ���#� ����� ����

� ����� ���! �� ��� -�. ������ �� � � :�2� �( ?��� ��� � � �:�:::� ��� ��: � 2 � �:�� ����

���� �� )������� ��,�� ��� �%��� �� ��� ���� ����� ����

� ����� ���:! �� ��� -�. ������ �� � � :�2� �( ?��� ��� ���� � :�

#)A ('/!0.94/-/�: �46 ('/04�'4001'4�� ;/-� +<� 4/� =� �7�7>! ?� #$$#

������ ����� ,�� �(H��( � ����������� ���� �� $���5� ������ ��� �� ���� ��� � '��� 2 ����������� ���� ��� ���� ��� #����� -�. �� �� ����� ��� ������� � ������ ���� �� ���� ��� � 5� ������ � �� �� � ��� ����� �� �;������� 5���� ���� �� � ������ ���� -�. ,�� ��� � �(H��( �� �������� $�� �� � #��� ����� �� �H�� � ������ �� ����������� ������ ������ � � ������ ��� �� ������ ����� ��� ����� � ��������� ������� ��������� �.����� ��� �. ����� �� � ������ ���� -�. � ���������� ���� �

5�� �%��� �� ��� ���� ����� ���� � ����� �� ���-�. ������ ������ �� �.����� � '��� =� 5�� �� ��� ,�� ��: � ����� �� ��� ��� ��� ��������?��� ����� ����� � ���� �� ����� ��� -�,������ ��� ����?�� ��� � D��� ��� � ������� � ��� ������� �� ���� ��� ��� ���� ���� �� �H�� ,�� � ���� �� ��� ������� ���� �;��� �� (� 5�� ���� �������� ��, � � ���� ��.��� � �(H��(� ��� ��� ������ �� ����� ������� � �������� � ������� ��� ����� �� ���� �� ��� ��?��#������ ����������� +� �������� #����� -�. �������� � ������ ���� ����� �� ������� � ,�� �(H��( ��������� $�� � ��� ������� ����� ������ ����� ������� 5�� ��.��� ����� ���(H��( ���� �� ����� �H�� ����� #������-�, ���!� ��� ���� � ����� �� ��� ����� ���� � ����� � �+� ������� ��� ���� ���� �� ��� ������� ���� ����� � � ��: ����� � � 5� �.����� ��� ������ ��� ������ �� �� �� �$���� ,�� ��� ���� ����� �� ��: �������� � ����� ��� �� -�. ������ � ��� �� ��� #����� ���� �� -�, ������ ��� ����?�� ��� � A��� ���� ��� ���� �� ��� ���� �� �(H��( � � �H�� �� ���� ��: ���,��� � ��� ��>� ,��� ��� ���� ,�� ��� �������� �� ��� ������� ����� ������ 5�� � ��� ��������� �� � �� ��?�� � �������� #����� -�,���� ������� � ����� ���� �� �������

& �������� ����� ��� ��� ���� ������ � �(H��( �� �������� �� ���� ��� ����� �H��! ����� ���� � ��� �� ���� �� � ������ ���� -�. �� ��� ����#������ ��� � 4���� ��� ������ ����=! ����#�� � ������ ���� -�. ���� #������ �� � ����� �� ������ � �� � ���#�� ��������?��� ������ ,�� ������ ����� ��� =�: � �:� � �� �� �>�( � �:� � ��

�� �� �$���� 5�� � ��� ���� �� �H�� � �� L��> ��:* ��� �� ��� #������ � ��� � �� � �� �����5�� ������ ���� ����� �������� �� �� �$��� ��H��� ��> � �:* ���! ���� ���� ���� ��� ���� ������ �� �H�� ������� � ��� � �.������ � ��� � ��� �� �� ���� ���� ,� �� ������� �� � ������ ���� -�. �� �� ����� � �� �.������ � 5�� ��� ��� �� ��� �� ���������� ��� 1)&� 8�,���� ������� � �H�� �� �������� �� ���� � �.����� �;��� ����� ����� ���� -�, ��� ��������� ������������ ��4���� ��� ������ ����=!� ,��� ��� ���� ,����� ������ � �(H��( ����� ��� �� ��� ��� �� ����������� #������ �.������� &������� ���� ��

����� #������ ��� � ��� ������ �� ����� ����� �� ������� ,���� �� ������ �� ������� ��� �� ������ �� ����! �� � ������ ���� -�. �� ��� ���� ����� ������ �

�/,��02+/,2

5�� ���� ������� � �� ���� ������ ����� �������� ��� ������� ��������?��� ��� ��?��#����������� ������� ��������� �� 8� ��� ������ �(:::!��� ��������� �� ��� ��� ������ ������� �� �� ������ �� ����� � 5�� ���� -�. ������ � ��� � � ��� ��� �� ��� ����?��� � ������ ,�� ����� ���� �� ���� �������� � ��� ����� ������ �1���� ��� ������ ��� �������� ��� �������� ���� ������ � ���� � ����� �� #������� ���� ��� � ��� ������ � ��� #����� -�. ������� �� ����� ��� ��� ��������?��� ������� +� ����� �� ����������� � ����� �� �� �$���� ��� �� ��� ���������� ,�� ��� � �������� �� ��� � ����� �� ����������� 5� ��#������ ����� ��� �������� ����� ���� ��������?��� �%���� ��� � ��� � �� � ���� ��.��� � ��� ��� �� -�. ������ ���� �������� #�������

5�� ��� ��� ��� ��� ����?��� �� ��?� #���������� ��� #������ �� 1)& ��� �������� ������ ��� � ��� ���� �� �(H��( � � ������� �� �H��� 5���� ���� �� � ��.��� � �(H��(� � ,��� � ��� �������� ���� �� ��� ������� ���� I� � �� � �� ��.������ ��� ,��� �� ���� �� ��� ������� ��������?����T��?��#������ ������ 5� ��.��� ������ ��� � ��� ������ ���� �� ��� �� ���������� ����� �$��� ����� � ��� ��� �� -�. ������ ��� �� �������?��� � ���� ����� ���� ��� ��� �� -�. ��������� �� ��?� ��������

5�� ��� �%���� ������ ������� �� ��� ,�� ����%���� ����� � ���� � ��� �� ��� �%����� ���� �������� ��� ��� ������� �� �� ��� ����� ������ � ������� ��� ����� ��� $� �� ��� ������������� ��� ��� � ����� �� ��� � ����� ��?� �����"���� ���� �1����� �� ���� ���2� "�����? ��� �������� ���2! ���� ��,� ���� ��� �.���� �� ����� ���������� ��� ��� ���#� ����� ���� � ����� ����� � ������ ��� ������ �� ��� ������ ����������� �������� ��� ������ �8 ��� ��� ������� ��� �������� � ����������� ������ ���� ���� ��� +�������� ���� ����� ���� � �� ����� ����� ������� ��� ���#� � ����� �� ��� ����� ��?� ���� ����� � ���� ������� �� ��� ��� ������� �� ���'���� ���� ,�� �� �;��� �� ;������ ��� �%��� ����� � ������� ������� �� ��� ������ ������ ���%���� ����� ��� �� ��� ���������� �� ��� �������� ��������?���T��?��#������ ����� �� �� ������ ������ ������� �� ��� ��� ���� ���� �� �.��������� ������� �

&�-�.'/ 0! �-�� � &/10�(-/.2��03.�20��'-!1�!'/4 5/60- !/ &1/!0'4 �/7-'4� #)<

. � � &

&�� "� '��� P� ���(� <���� -�. � ������� ������� E &

����� �� �� �� ��� � �� �� ���������� �� ��� �� ��� ��

���M����� 3��� B�� )� 2=E>=�L>* �

&�� "� )�����$ 9� ��* � A���� ������� �� ����� ���������

���� ����#������ �� ������������ � +�� B�� 3��� '���

(>E=*�L=�*�

1����� @� 6�� P8� ������ &<� ���2� 5�� ������ �� � ��� ��

��� ������������ ������ � �� -�, ���#������� N

���� )� � E�L>*�

3��� 9� ���*� "�������� �� ������� �������� ���#������

������� ���� ��,������� ������� � N����)� �2=E( >L(=*�

3�� 1� ����� <� � ���� �������E 1� � ������ ��� ������� (��

��� )�� 6���E &������ "� �

@���� 3� 6�� P8� ��� � ������� ������ ���� ���#������ ��

����� �.��� � N ���� )� ���E( ��

8���� "8� 1���U 8<� ��� � "����� �� ��� ����������� �����

���� �� ��� ������� �� #������� N )�� 3��� +�� >>5E��

8� 33� ������ &<� ����� 5�������� ����� �� ��� �%��� �� ����

���� ��������� �� ������ ���� ���#������� )�� )� 5���

�2E(2 ��

8� 33� ������ &<� (:::� & ������� ��� ����?��� ��� ��?� #��

����� ����� �� ����� ������ ���� ���#������( � N 3���

+���� )� (�(E�*�L����

8�,��� N� '��� P� 6���. 7� ��� � D���#������ �� ����� �� ��

������ E 5�������� ����������� ��� �.�������� #���� �

3��� B�� )� >�E�2:>L�2�>�

4���� )5� ������ &<� ���=� "���� ������ ���� ���#������E

3�������� ������ �� �%���� ����� ����� � 1��������

1���� >>E��L�::�

4���� )5� ����� 7)� ������ &<� ����� 5�� �-����� �� �����

�������� �� ��� ������ �� ���#������ ������� ����

��� ���� #������� N ���� )� *:E�=>L�*=�

<�� 6A� �� �� P<� ��=>� B.������� �� ������� ���� � ,��� ��

������ ������� ��� ����E ������ �� �� ������� ������

���� ����#������� N 6�� )� >*E�2(��

�� ���� &6� ���� "&� 5����� @� ����� 5�� �%��� �� �����

������ � ���#������ ��� ����#������ �� ������� -�.�

����� ������� ��� ��������E & ������� ���,� 6� �������

��E >�

����� �� &�� "� )�����$ 9� ����� &����� ���������� ����

����#������E �%��� �� ������� ������� ��� ��� �;����� ��

������� ������� 1�������� 1���� �*E>(*�

"�����? )"� ������ &<� ���2� +����������� ������ ���� ��������

��� ��� �%��� �� -�. ��� ����� ���� ��� ���� ����� #��

������ 1�������� "�� �:E(:=L(���

5���� B�� 6�� P8� ���2� 1)& '����� �� ���?������� �������

������ ���#������ ������� � N 3��� +���� )� � =E�:2L�� �

9�� ��� 1�� @1� )����� 3&� ���:� '��. ������ � ����#������

���� � � 6� ������� ==E�:�L����

7� 6V� 8�,��� N&� '��� P7� ����� 3���� -�. ��� ������ ��

����� ������ � N ���� )� �>(E*��

����� <N� ������ &<� ��� � ���#������ ��� ����#������E

"����� ��� ��������� � A�, J�?E ����� 6�??��

,/�1,���-0.1

��� ������� ��� ����?�� �� � ���� �������� �(

���� ��� �� ������?�� ������! ������� �(

�� ���? ����� ����������� � <��

� �������� ������ �� ����� ����� �� ��� � ��������

� � �������� ������ �� ����� ����� ���� �������� �� ���� �

��,��

� ������� ����� ���

� ��� �� -�. ������ ��

���� �� �� � ���� �������� ?�

�� ��� ������� �� �� A ��(

� �������� -�, ���� �� ��

����� �������� -�, ��� ������ ��� ���� ��� �� ��

���� $� �� ��� ����� �������� �

����� ������� ��� $� �

�� � ����� �� ��� ����� �������� ���

�� � ����� �� ��� ����� ���� � ���

��: � ����� �� � ���� ����� ��������� ���

�� ���#� ����� ���� � ����� � ?���

#������ ���

� ����� ��������� #����� ������ ��

����� �����

� ��������?��� ������� �( ?���

#+$ ('/!0.94/-/�: �46 ('/04�'4001'4�� ;/-� +<� 4/� =� �7�7>! ?� #$$#