A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93...

36
91 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 A5-1. YACON ROOTS INHIBIT HEPATIC LIPID ACCUMULATION BY ACTIVATING AMP-ACTIVATED PROTEIN KINASE. Mariano N. Alemán, Stella M. Honoré * , Erika B. Territoriale, Susana B. Genta, Sara S. Sánchez. INSIBIO-CONICET, Universidad Nacional de Tucumán. Chacabuco 461 (T4000ILI), San Miguel de Tucumán, Argentina. * [email protected] Non-alcoholic fatty liver disease, a further expres- sion of metabolic syndrome, strictly linked to obes- ity and diabetes mellitus, is characterized by insu- lin resistance, elevated serum levels of free fatty acids and liver fatty infiltration, which is known as hepatic steatosis. The purpose of the present study was to determine whether yacon roots have a ben- eficial effect against hepatic steatosis induced by a high-fructose-diet (HF-diet) and to elucidate its un- derlying molecular mechanisms in rats. Male Wistar rats maintained with a rat standard chow were ran- domly separated into a control group (water ad libi- tum) and a HF-group (fructose 10% w/v, p.o., ad libitum, HF). After 12 weeks, rats with a HF-diet were randomly distributed in two groups: HF-diet and HF-diet supplemented with yacon flour (340mg FOS/kg twice a day, HF+Y) during 8 weeks. The supplementation of yacon flour significantly low- ered plasma triglycerides (HF: 171.8 ± 18.6 mg/dl vs. HF+Y: 117.0 ± 17.3 mg/dl) and free fatty acids (HF: 1.06 ± 0.05mmol/l vs. HF+Y:0.89 ± 0.12 mmol/ l) but elevated the ratio of HDL-C/total-C (HF: 0.27 ± 0.02 vs. HF+Y: 0.32 ± 0.05) and adiponectin lev- els (HF: 2.52 ± 0.14 μg/ml vs. HF+Y: 7.03 ± 1.43 μg/ml). Yacon flour reduced hepatic weight (HF: 12.9 ± 0.6 g vs. HF+Y: 9.5 ± 1.1g), hepatic triglyc- eride content (HF: 9.31 ± 1.38 mg/g vs. HF+Y: 6.88 ± 1.42 mg/g) and ameliorated the hepatocyte de- generation and decreased the inflammatory cell in- filtration in the livers induced by HF-diet. Addition- ally, yacon roots significantly reversed the HF-in- duced decreases in the AMP-activated protein kinase (AMPK) expressions at protein levels and restored the HF-induced inhibitions in the AMPK phospho- rylation. Both processes are related to fatty acid beta- oxidation, in the hepatic tissue. Dietary supplemen- tation with yacon roots also reversed the HF-induced down-regulation of the peroxisome proliferator-ac- tivated receptor alpha (PPARα) and decreased the expression of the lipogenic genes fatty acid synthase (FAS), glycerol-phosphate acyltransferases (GPAT) and HMG-CoA reductase (HMGR). These results suggested that yacon roots improve liver fatty de- generation regulating lipid metabolism through an elevated AMPK protein expression and phosphor- ylation in the liver. Keywords: yacon roots - hepatic steatosis - metabolic syndrome. A5-2. EFECTOS DE REPELENCIA Y ATRAC- CIÓN DE COMPUESTOS VOLÁTILES DE FRUTOS DE SCHINUS AREIRA FRENTE A VARROA DESTRUCTOR. Sigfrido Alemán 1 , W. Villa 1 , M. Poma 1 , E. Galeán 1 , P. Luna Pizarro 2 , A. Molina 1 , C. Viturro 1* . 1 PRONOA. 2 CITA, Facultad de Ingeniería, Universidad Nacional de Jujuy. San Salvador de Jujuy, Jujuy, Argentina. * [email protected] La varoosis es una enfermedad causada por el ácaro parásito Varroa destructor que afecta a las abejas en todos sus estadíos. La tendencia actual es el uso de productos naturales, entre ellos aceites esencia- les (AE), en lugar de sintéticos, como parte de una estrategia de control integrado. Resulta importante generar información que permita determinar el com- portamiento del ácaro frente a compuestos volátiles de AE seleccionados que podrían alterar su fase reproductiva, interferir la invasión de las celdas con cría y generar nuevos métodos de control. Realiza- mos en la UNJu estudios sistemáticos empleando extractos de especies aromáticas y medicinales de la región. Se evalúan los efectos de Atracción (A), Repelencia (R) e Indiferencia (I) sobre el ácaro de AE de Schinus areira de la Quebrada de Humahuaca, Jujuy, obtenidos por hidroextracción de frutos de ejemplares Py1, Py2, Hua, TCe6, Tg2. Estos fueron caracterizados previamente en tipos químicos defi- A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and Biological Activity

Transcript of A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93...

Page 1: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

91

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

A5-1. YACON ROOTS INHIBIT HEPATICLIPID ACCUMULATION BY ACTIVATINGAMP-ACTIVATED PROTEIN KINASE.Mariano N. Alemán, Stella M. Honoré*, ErikaB. Territoriale, Susana B. Genta, Sara S.Sánchez. INSIBIO-CONICET, UniversidadNacional de Tucumán. Chacabuco 461(T4000ILI), San Miguel de Tucumán, Argentina.*[email protected] fatty liver disease, a further expres-sion of metabolic syndrome, strictly linked to obes-ity and diabetes mellitus, is characterized by insu-lin resistance, elevated serum levels of free fattyacids and liver fatty infiltration, which is known ashepatic steatosis. The purpose of the present studywas to determine whether yacon roots have a ben-eficial effect against hepatic steatosis induced by ahigh-fructose-diet (HF-diet) and to elucidate its un-derlying molecular mechanisms in rats. Male Wistarrats maintained with a rat standard chow were ran-domly separated into a control group (water ad libi-tum) and a HF-group (fructose 10% w/v, p.o., adlibitum, HF). After 12 weeks, rats with a HF-dietwere randomly distributed in two groups: HF-dietand HF-diet supplemented with yacon flour (340mgFOS/kg twice a day, HF+Y) during 8 weeks. Thesupplementation of yacon flour significantly low-ered plasma triglycerides (HF: 171.8 ± 18.6 mg/dlvs. HF+Y: 117.0 ± 17.3 mg/dl) and free fatty acids(HF: 1.06 ± 0.05mmol/l vs. HF+Y:0.89 ± 0.12 mmol/l) but elevated the ratio of HDL-C/total-C (HF: 0.27± 0.02 vs. HF+Y: 0.32 ± 0.05) and adiponectin lev-els (HF: 2.52 ± 0.14 µg/ml vs. HF+Y: 7.03 ± 1.43µg/ml). Yacon flour reduced hepatic weight (HF:12.9 ± 0.6 g vs. HF+Y: 9.5 ± 1.1g), hepatic triglyc-eride content (HF: 9.31 ± 1.38 mg/g vs. HF+Y: 6.88± 1.42 mg/g) and ameliorated the hepatocyte de-generation and decreased the inflammatory cell in-filtration in the livers induced by HF-diet. Addition-ally, yacon roots significantly reversed the HF-in-duced decreases in the AMP-activated protein kinase(AMPK) expressions at protein levels and restoredthe HF-induced inhibitions in the AMPK phospho-

rylation. Both processes are related to fatty acid beta-oxidation, in the hepatic tissue. Dietary supplemen-tation with yacon roots also reversed the HF-induceddown-regulation of the peroxisome proliferator-ac-tivated receptor alpha (PPARα) and decreased theexpression of the lipogenic genes fatty acid synthase(FAS), glycerol-phosphate acyltransferases (GPAT)and HMG-CoA reductase (HMGR). These resultssuggested that yacon roots improve liver fatty de-generation regulating lipid metabolism through anelevated AMPK protein expression and phosphor-ylation in the liver.Keywords: yacon roots - hepatic steatosis -metabolic syndrome.

A5-2. EFECTOS DE REPELENCIA Y ATRAC-CIÓN DE COMPUESTOS VOLÁTILES DEFRUTOS DE SCHINUS AREIRA FRENTE AVARROA DESTRUCTOR. Sigfrido Alemán1, W.Villa1, M. Poma1, E. Galeán1, P. Luna Pizarro2,A. Molina1, C. Viturro1*. 1 PRONOA. 2 CITA,Facultad de Ingeniería, Universidad Nacional deJujuy. San Salvador de Jujuy, Jujuy, Argentina.*[email protected] varoosis es una enfermedad causada por el ácaroparásito Varroa destructor que afecta a las abejasen todos sus estadíos. La tendencia actual es el usode productos naturales, entre ellos aceites esencia-les (AE), en lugar de sintéticos, como parte de unaestrategia de control integrado. Resulta importantegenerar información que permita determinar el com-portamiento del ácaro frente a compuestos volátilesde AE seleccionados que podrían alterar su fasereproductiva, interferir la invasión de las celdas concría y generar nuevos métodos de control. Realiza-mos en la UNJu estudios sistemáticos empleandoextractos de especies aromáticas y medicinales dela región. Se evalúan los efectos de Atracción (A),Repelencia (R) e Indiferencia (I) sobre el ácaro deAE de Schinus areira de la Quebrada de Humahuaca,Jujuy, obtenidos por hidroextracción de frutos deejemplares Py1, Py2, Hua, TCe6, Tg2. Estos fueroncaracterizados previamente en tipos químicos defi-

A5Farmacología y Actividad biológica

Pharmacology and Biological Activity

Page 2: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

92

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

nidos por la composición de los AE de frutos.Paramedir la A y R se siguió la metodología propuestapor Kraus con adaptaciones. Se emplearon ademásdos patrones comerciales: terpenos de naranja (96,1% limoneno) y de limón (71,4 % limoneno) y unAE enriquecido en sabineno (78,7 %). Se analiza laheterogeneidad de la composición de los AE ensa-yados para tratar de establecer correspondencia en-tre determinados compuestos y su actividad.Se ob-serva comportamiento diferencial entre los distin-tos AE, a pesar de corresponder a una misma espe-cie y al mismo tipo de material vegetal extraído. Elmás activo fue el AE de Tg2 (mirceno 38,7 %, α-felandreno 30,9 %) con un 100 % de R. El AE dePy1 (limoneno 35,7 %, mirceno 13, 3 %) exhibióun 83 % de R, valor semejante al obtenido con igualconcentración de limoneno proveniente de terpenosde naranjas. El menos activo es el AE Hua (β-felandreno 32,6 %, limoneno 28,8 %) con 42 % deR, 53% de A y 5% de I. Respecto a los patrones, sepuede concluir que tanto el sabineno como ellimoneno contribuyen positivamente al comporta-miento de repelencia de los AE de S. areira, aunquela presencia de otros compuestos en los AE pareceejercer acción antagonista o sinergista.Palabras clave: Varroa destructor - repelencia -Schinus areira.

A5-3. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE IN VITRODE VALERIANA CARNOSA. Hernán G. Bach1,2*,Rafael A. Ricco2, Gonzalo Roqueiro1, Renée H.Fortunato1,3, Marcelo L. Wagner2. 1 Instituto deRecursos Biológicos, INTA-Castelar. De losReseros y N. Repetto s/n (1686), Hurlingham,Provincia de Buenos Aires. 2 Cátedra de Far-macobotánica, Facultad de Farmacia y Bio-química, UBA. Buenos Aires. 3 CONICET.*[email protected] carnosa Sm. -Valerianaceae- conocidacomo “ñancolahuen” es una planta utilizada por lospueblos originarios de la Patagonia como sedante,antiespasmódica y antirreumática. Los compuestosantioxidantes actúan previniendo el estrés oxidativocausado por los radicales libres, principalmente lasespecies reactivas del oxígeno (ROS). Estas espe-cies reactivas se forman en condiciones fisiológicasnormales, pero cuando ocurre un desbalance entreellas a favor de las especies oxidantes pueden pro-ducirse daños que conduzcan a distintos desórde-nes fisiológicos y enfermedades, como, por ejem-

plo, insomnio, cáncer, enfermedades cardiovas-culares, enfermedades neurodegenerativas, artritis,y trastornos del sistema digestivo. Como parte delos estudios para corroborar los usos en etno-medicina de V. carnosa se estudió su actividadantioxidante. El método utilizado fue medir la ca-pacidad atrapadora del radical 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH). Se realizaron extractosmetanólicos 80 % con partes aéreas (PA) y subte-rránea (PS) de “ñancolahuen” en dos estadosfenológicos contrastantes, floración y finales delperíodo de crecimiento. Se midió la actividad en tresconcentraciones: 10 - 20 y 30 µg de material vege-tal/ml. Los resultados se expresaron como porcen-taje de inhibición del radical DPPH. Los resultadosmuestran que los mayores porcentajes de inhibiciónson directamente proporcionales con la concentra-ción; los valores obtenidos para 30 µg/ml fueron,para el estado de floración, 40 % en PA y 30 % enPS y para el estado de finales de período de creci-miento fueron del 80 % en PA y 50 % en PS. Losresultados preliminares muestran una mayor activi-dad de la parte aérea y cuando el ejemplar se en-cuentra a finales del período de crecimientoPalabras clave: Valeriana carnosa - actividadantioxidante - DPPH.Agradecimientos. Subsidio UBA 20020100100459(Programación Científica 2011-2014). PNHFA-INTA 1106094, 2012-2016.

A5-4. ACTIVIDAD ANTIMICÓTICA EN ÓR-GANOS SUBTERRÁNEOS IN VIVO E INVITRO DE SMILAX CAMPESTRIS. Stella M.Battista1, Oscar Romero2, Gabriela F. García1,Marcelo L. Wagner1, Ana Z. Rugna1*. 1 Cátedrade Farmacobotánica, Departamento de Farma-cología, Facultad de Farmacia y Bioquímica.Junín 956 Piso 4 (1113), Ciudad Autónoma deBuenos Aires, Argentina. 2 Laboratorio deMicropropagación Vegetal. Fundación PabloCassará. Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Ar-gentina. *[email protected] campestris Griseb. (Smilacaceae) es unaenredadera subleñosa, rizomatosa que crece en re-giones cálidas y templadas de la Argentina. En lamedicina popular se la utiliza como diurética,diaforética, antisifilítica y en algunas afecciones dela piel. También se determinó la presencia de acti-vidad antimicótica en las hojas y los rizomas de estaplanta. Esta especie es muy sensible a los cambios

Page 3: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

93

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

medioambientales, por lo que la micropropagacióncontrola los efectos que causan las variaciones am-bientales. En el presente trabajo se comparó la acti-vidad antimicótica entre órganos subterráneos deejemplares in vivo e in vitro de S. campestris. Seemplearon rizomas de ejemplares de S. campestriscolectados en Puerto Gaboto, Dto. San Jerónimo,Provincia de Santa Fe (Argentina). Los ejemplaresin vitro se obtuvieron por micropropagación utili-zando medio de Murashige & Skoog con macro-nutrientes diluidos al medio y concentración hor-monal 2 mg/L de BAP (bencil-amino-purina) y 0,4mg/L de AIA (ácido indol-acético). Se obtuvieronvástagos con hojas que fueron pasados a medio deenraizamiento que contenían 0,5 mg/L ANA (ácido1-naftalén-acético). Se utilizaron extractos enmetanol 80 % realizados con los rizomas de plantasin vivo y con la parte subterránea de los plantinesmicropropagados. Se determinó la actividadantifúngica de los extractos contra cepas de hongosambientales (Aspergillus niger y Penicillium sp.) yse la comparó con una curva patrón realizada conconcentraciones conocidas de ketoconazol del 0,1al 1 % para cada cepa. Los diámetros promedio alcuadrado obtenidos a partir de los extractos seextrapolaron en las curvas patrón. Se obtuvo comoresultado de esta medición un 99 % y 64 % de con-centración referida a ketoconazol 1 % para el A.niger y 97 % y 80 % para el Penicillum sp. de ejem-plares in vivo e in vitro respectivamente. Por lo tan-to, esta actividad antimicótica está presente tantoen los rizomas de las plantas silvestres como en losórganos subterráneos de los plantines que se desa-rrollan en cultivos en condiciones controladas aun-que los rizomas de las plantas silvestres resultaronser más activos frente a las cepas analizadas.Palabras clave: Smilax campestris - actividadantimicótica - ejemplares in vivo e in vitro.

A5-5. AISLAMIENTO DE UN FLAVONOIDECON ACTIVIDAD TRIPANOCIDA Y CITO-TÓXICA DE STEVIA SATUREIIFOLIA VAR.SATUREIIFOLIA. Maria F. Beer1, Renzo F.Martino2, Silvia I. Cazorla3, Laura C. Laurella1,Fernanda M. Frank3, Mariana G. Selener1, Gus-tavo C. Giberti2, César A. Catalán4, Claudia A.Anesini2, Virginia S. Martino1,2, María R. Alonso2,Valeria P. Sülsen1,2*. 1 Cátedra de Farmacognosia,Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA. Junín956 Piso 2 (1113), Buenos Aires, Argentina.

2 IQUIMEFA-CONICET, Facultad de Farmaciay Bioquímica, UBA. Buenos Aires, Argentina. 3

IDEHU-CONICET, Facultad de Farmacia yBioquímica, UBA. Buenos Aires, Argentina. 4

INQUINOA-CONICET, Facultad de Bioquímica,Química y Farmacia, UNT. San Miguel deTucumán, Argentina. *[email protected] enfermedad de Chagas es una enfermedad parasi-taria producida por el protozoo Trypanosoma cruzi.Esta parasitosis afecta a 10 millones de personas enel mundo y se estima que en la Argentina hay aproxi-madamente 2 millones de infectados. El cáncer esuna de las principales causas de muerte en nivel mun-dial. De acuerdo con la Organización Mundial de laSalud, esta enfermedad causó en 2008, 7,6 millonesde defunciones. Entre las enfermedades neoplásicas,los linfomas se sitúan en el quinto lugar como causade muerte en el mundo. Muchos de los fármacos quese utilizan actualmente en la terapéutica, han tenidosu origen en la naturaleza. En este sentido, y tenien-do en cuenta que no se cuenta con drogas efectivas yselectivas para el tratamiento de la enfermedad deChagas y el cáncer, el objetivo de este trabajo de in-vestigación fue aislar moléculas con actividadtripanocida y citotóxica de Stevia satureiifolia var.satureiifolia. El extracto diclorometánico de S.satureiifolia var. satureiifolia fue activo sobreepimastigotes de T. cruzi (90,9 % de inhibición a 10µg/ml) y sobre células de la línea EL-4 (linfoma Tmurino), inhibiendo en alrededor de un 80 % la pro-liferación celular a la concentración de 100 µg/ml.El perfil cromatográfico por HPLC del extracto acti-vo permitió detectar 3 compuestos mayoritarios. Elfraccionamiento del extracto se realizó por cro-matografía en columna y se obtuvieron siete fraccio-nes (SS1-7) que se evaluaron sobre T. cruzi por mediodel ensayo de incorporación de 3H-timidina. La frac-ción SS5 fue una de las más activas con un 85,2 % deinhibición del crecimiento de los parásitos a la con-centración de 10 µg/ml. A partir de esta fracción seaisló el compuesto SSf1. El análisis cromatográficoy espectroscópico de SSf1 nos indicó que se trataríade una flavona metoxilada. Este compuesto presentósignificativa actividad tripanocida (IC50 = 0.2 µg/ml)y fue activo sobre células de linfoma murino (CC50 =14.5 µg/ml). Se determinó por HPLC que SSf1 seencuentra presente en el extracto en una concentra-ción de 1,31 g %.Palabras clave: Stevia sp. - Trypanosoma cruzi -linfoma T murino.

Page 4: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

94

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

A5-6. EFECTO DE HUPERZIA SAURURUSSOBRE LA CONDUCTA SEXUAL MASCULI-NA DE LA RATA WISTAR. Marcela Birri1, Mi-guel A. Franco2, Mariana Vallejo1, Miguel Carro-Juárez2, Mariel Agnese1*. 1 IMBIV, CONICET yFarmacognosia, Departamento de Farmacia,Facultad de Ciencias Químicas, UniversidadNacional de Córdoba. Haya de la Torre y MedinaAllende, Ciudad Universitaria X5000HUA, Cór-doba, Argentina. 2 Laboratorio de Comporta-miento Reproductivo, Escuela de Medicina Ve-terinaria y Zootecnia, UAT. Tlaxcala, México.*[email protected] saururus (Lam.) Trevis. es proclamada enla medicina popular argentina por sus propiedadesafrodisíacas. Para avalar o descartar sus efectos, seestán desarrollando estudios en este sentido. Se tra-bajó con ratas Wistar macho, sexualmente expertaspara evaluar su acción sobre la conducta sexual. Losanimales, divididos en 10 grupos de 6 cada uno, re-cibieron por vía oral los siguientes tratamientos:Decocción (1; 3; 10 y 30 mg/Kg), Extracto Alcohó-lico (1; 3; 10 mg/Kg), Extracto Alcaloidal (0,5 y 2mg/Kg) y el grupo control recibió solución fisioló-gica. Una vez que al animal se le administró el tra-tamiento, se esperaron 30 min y se lo evaluó. Paraello se colocó al macho en una caja de acrílico trans-parente, se lo dejó aclimatar durante 10 min y luegose incorporó una hembra receptiva. Allí se evaluóel tiempo trascurrido hasta la primer monta (LM),el número de montas (NM), el tiempo hasta la pri-mera intromisión (LI), el número de intromisiones(NI), la latencia de eyaculación (LE) y el tiempotranscurrido desde la eyaculación hasta que reiniciócon la siguiente monta (PPE). El análisis de los re-sultados mostró entre otros, que en los tres extrac-tos se produjo una disminución estadísticamente sig-nificativa en el parámetro PPE con respecto al Con-trol (540 ± 60 seg), siendo los valores de 301 ± 78,02para la Decocción a 30 mg/Kg (p<0,05); 335,17 ±28,49 el Extracto Alcohólico a 3 mg/Kg (p<0,05);359,8 ± 21,14 y 305,5 ± 25,97 el Extracto Alcaloidala 0,5 y 2 mg/Kg (p<0,05), respectivamente, sin exis-tir diferencias estadísticamente significativas entrelos cuatro tratamientos (p>0,05). Dado que losalcaloides son los metabolitos secundarios más im-portantes de la especie, y que ellos están presentesen los tres tipos de extractos aquí ensayados, se po-dría inferir que son las sustancias responsables delefecto aquí mostrado. Estos resultados indican que

H. saururus posee un efecto sobre la conducta sexualque hace que los machos reinicien la copulación enmenor tiempo que los animales control. Esta dismi-nución en el PPE por parte de los tres extractos, se-ría congruente con los efectos proclamados por laetnomedicina.Palabras clave: Huperzia saururus - erección - efec-to afrodisíaco.

A5-7. ZANTHOXYLUM TINGOASSUIBA A. ST.HIL. (RUTACEAE) ESSENTIAL OIL: CHEMI-CAL INVESTIGATION AND BIOLOGICALEFFECTS ON RHODNIUS PROLIXUS NYMPH.Bruno Brick1*, Jeane A.P. Nogueira1, IzadoraDolabela2, Samanta C. Mourão3, LeandroRocha1, Marcelo S. Gonzalez2. 1 Fluminense Uni-versity (UFF), Laboratory of Natural ProductsTechnology (LTPN) - Mário Viana Street, 523,Santa Rosa 24241-000, Niterói - RJ, Brazil 2

Fluminense University (UFF), Laboratory of In-sect Biology, Niterói - RJ, Brazil 3 FluminenseUniversity (UFF), Department of Pharmaceuti-cal Technology, College of Pharmacy, Niterói -RJ, Brazil *[email protected] chemical investigation and bioassays against fifth-instar nymphae of the hematophagous insectRhodnius prolixus vector of Chagas disease wereconducted with the essential oil from Zanthoxylumtingoassuiba. The essential oil was analyzed on aGC-MS QP2010 (SHIMADZU) gas chromatographequipped with a mass spectrometer using electronimpact ionization detection. The main results maybe summarized as follows: (i) 54 components wereidentified, corresponding to 90.4% of the relativecomposition; sesquiterpenes (47.3%) and mono-terpenes (41.2%) are the major constituents; (ii)muurola-4,5-trans-diene and isodaucene are de-scribed for the first time as chemical constituents ofthe essential oil from leaves of this species; (iii) highlevels of toxicity and paralysis against R. prolixuswere observed by both topical application and feed-ing treatment at doses as low as 0.5 µL of the crudeessential oil. These results show that this specieshas a potencial activity against blood suckingtriatomine species and Chagas disease transmission.Key words: Rhodnius prolixus - Zanthoxylumtingoassuiba - essential oil.

A5-8. EFECTO DEL DECOCTO DE SOLIDAGOCHILENSIS MEYEN (ASTERACEAE) SOBRE

Page 5: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

95

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

ESTÍMULOS ALGÉSICOS INDUCIDOS ENRATONES. Alejandro Bucciarelli1, Mercedes L.Moreno1, Mario I. Skliar1, Susana Gorzalczany2*.1 Departamento de Biología, Bioquímica y Farma-cia, Universidad Nacional del Sur. Bahía Blanca,Buenos Aires, Argentina. 2 Departamento deFarmacología, Facultad de Farmacia y Bio-química, Universidad de Buenos Aires. Junín 956(C1113AAD), Ciudad Autónoma de Buenos Aires,Argentina. *[email protected] chilensis Meyen (Asteraceae) es una es-pecie sudamericana utilizada en medicina tradicio-nal como diurético, antiinflamatorio, vulnerario yanticefalálgico; hasta el momento existe escasa in-formación que permita correlacionar algunos de sususos populares con estudios farmacológicos. Porello, se propuso como objetivo evaluar la actividadantinociceptiva de un extracto vegetal seco obteni-do mediante secado por atomización a partir deldecocto de las inflorescencias de la planta. Median-te el empleo de estímulos algésicos, químicos y tér-micos se evaluó la actividad antinociceptiva delextracto en ratones Swiss de 18-23 g de peso corpo-ral. En el test de contorsiones inducidas por ácidoacético (estímulo químico), el extracto indujo unacompleta inhibición de la respuesta a dosis de 10mg/kg por vía intraperitoneal (i.p.), que produjo unainhibición del 74 % a dosis de 30 mg/kg v.o. (víaoral). Cuando el mecanismo de acción del extractofue investigado a través del pretratamiento de losanimales con diferentes drogas que interfieren enlos sistemas opiodes, serotoninérgicos y colinér-gicos, el pretratamiento con naloxona (5 mg/kg) yondansetrón (0,2 mg/kg) revirtió, en parte, el efectoantinociceptivo inducido por el extracto, mientrasque la atropina (5 mg/kg) no afectó esa actividad.Por otra parte, al evaluar el efecto del extracto fren-te a un estímulo térmico en el ensayo de la planchacaliente (56 ºC), se observó un aumento en el tiem-po de reacción tanto a dosis de 10 mg/kg v.o. (15,1± 2,0 s) como a 100 mg/kg v.o (18,9 ± 1,6 s) encomparación con el grupo control (8,7 ± 0,4 s).Además, cuando el estímulo algésico fue inducidopor la inyección de formalina al 2,5 % en la pata delratón, se determinó un efecto protector del extractoen forma dosis dependiente (10-100 mg/kg, v.o.),tanto en la fase inicial como en la tardía (DE50 = 30mg/kg v.o.). Estos resultados demuestran que el ex-tracto de Solidago chilensis presenta una actividadantinociceptiva en los modelos preclínicos emplea-

dos, en los que el sistema opiode y el serotoninérgicoson responsables, al menos en parte, del mecanis-mo analgésico inducido por el extracto. Estos ha-llazgos permitirían avalar el uso tradicional de laplanta como analgésico.Palabras clave: analgesia - extracto vegetal seco -Solidago chilenis.

A5-9. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE EX-TRACTOS POLARES DE POBLACIONES DEAPHYLLOCLADUS SPARTIOIDES DE JUJUY.Cabana Roxana, L. Celaya, L. Saluzzo, R.Rodriguez, C. Viturro*. PRONOA, Facultad deIngeniería, Universidad Nacional de Jujuy. ÍtaloPalanca 10 (4600), San Salvador de Jujuy, Jujuy,Argentina. *[email protected] spartioides es un arbusto de laprepuna. Tradicionalmente utilizado en el cuidadode la salud. Existen escasas investigaciones respec-to a la fitoquímica del género Aphyllocladus. Estu-diamos la composición de volátiles de dos pobla-ciones de A. spartioides de Jujuy. Las infusiones deestas especies presentaron una interesante actividadantioxidante. Resulta de importancia evaluar si lasdistintas condiciones de extracción influyen en laactividad antirradicalaria (AAR), medida con DPPH,de especímenes recolectados en diferentes gradosde fructificación. Para ello, se investigaron pobla-ciones de A. spartioides de la quebrada deHumahuaca: HN1212, HN1310 y HN1309. Se ob-tuvieron extractos acuosos (EAc) tras 10´de calen-tamiento a ebullición y etanol acuosos (EEA) con60´de sonicación a temperatura ambiente. Para eva-luar el efecto del tiempo de sonicación en la recu-peración de bioactivos, se sonicó 90’ para HN 1310.Si bien se observó mayor rendimiento en la extrac-ción, esto no se tradujo en mayor AAR, por tanto eltiempo se parametrizó a 60´. Se determinó ademásel contenido polifenólico como EAG (equivalentesde ácido gálico). Se obtuvieron mayores rendimien-tos en la extracción con agua a ebullición conformeavanza la fructificación (19,0 % a 24,6 %). En losEAc la AAR es mayor para la muestra en principiode fructificación (IC50

30’: 76,7 ppm frente a 123,9ppm). En todos los casos y siguiendo la cinética dereacción, se detectaron diferencias significativasentre los IC50

5‘ e IC5030‘, siendo mayor la pendiente

para el EAc obtenido en fructificación avanzado.Para esta especie los EEA son más antioxidantesque los EAc. En todas las poblaciones los mayores

Page 6: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

96

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

valores de EAG (7,42-9,04 mg/g extracto seco) selograron con las extracciones etanol acuosa y haycorrespondencia positiva con los valores de AAR(IC50

30’ 92,1- 63 µg/mL respectivamente). Aparen-temente los bioactivos polifenólicos de los EEA deHN1310 y HN1212 son comunes ya que no hay di-ferencias significativas entre sus IC50 por un lado yentre sus EAG, por el otro. En todos los casos losEAG determinados presentaron una buena corres-pondencia con las AAR, lo que implicaría un rolpreponderante de los compuestos polifenólicos enesta actividad biológica.Palabras clave: Aphyllocladus spartioides - activi-dad antioxidante.

A5-10. EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDADANTIMICROBIANA DEL ACEITE ESENCIALDE MINTHOSTACHYS VERTICILLATA Y UNODE SUS COMPUESTOS MAYORITARIOSSOBRE CEPAS AISLADAS DE MASTITISBOVINA. Laura N. Cariddi*, Ivana D. Monti-roni, Elina B. Reinoso. Departamento Micro-biología e Inmunología, UNRC. Ruta 36 Km 601(5800), Río Cuarto, Córdoba, Argentina*[email protected] mastitis bovina es la enfermedad infecciosa demayor importancia económica en la explotación le-chera, produciendo una marcada disminución en laproducción y en el valor biológico de la leche. Dis-tintas especies de bacterias son capaces de causar laenfermedad. La ineficacia de las medidas tradicio-nales aplicadas a la prevención y tratamiento demastitis ha dirigido la investigación hacia la bús-queda de métodos de control alternativos, como unenfoque racional para controlar infecciones enanimales utilizados en la producción de alimentos.Minthostachys verticillata (Griseb.) Epling, vulgar-mente conocida como “peperina”, es una especievegetal aromática utilizada en medicina populardebido a sus múltiples propiedades terapéuticas. Elaceite esencial obtenido de esta especie, cuyos com-ponentes mayoritarios identificados por croma-tografía gaseosa son pulegona, mentona y limoneno,tiene actividad antibacteriana frente a bacterias Gram(+) y Gram (-). El objetivo del presente trabajo fuedeterminar la actividad antibacteriana in vitro delaceite esencial de M. verticillata y uno de sus com-ponentes mayoritarios (limoneno) frente a patógenosbacterianos aislados de mastitis bovina. Partes aé-reas de M. verticillata fueron sometidas a un proce-

so de hidrodestilación para obtener el aceite esen-cial (δ = 0,91 g/mL). Limoneno ((R)-(+)-Limonene(δ = 0,84 g/mL, ≥ 99,0 %) fue obtenido comercial-mente. Aceite esencial y limoneno fueron disueltosen DMSO (< 0,03 % v/v) (1,2) y PBS. La actividadantibacteriana de aceite esencial (458, 45,8 y 4,58mg/mL) o limoneno (420, 42 y 4,2 mg/mL) fue en-sayada frente a cepas frecuentemente aisladas demastitis bovina como Staphylococcus aureus,Streptococcus uberis, Escherichia coli y estafilo-cocos coagulasa negativos (CNS), mediante el mé-todo de difusión en disco. La actividad antibac-teriana de aceite esencial o limoneno fue compara-da con la de aquellos antibióticos más utilizados enmastitis bovina (cefalotina, eritromicina, penicili-na, tetraciclina, oxacilina). El control del solventefue DMSO (< 0,03 % v/v). Tanto aceite esencialcomo limoneno fueron efectivos frente a las bacte-rias ensayadas, a concetraciones altas, presentandozonas de inhibición de 8,0 ( ± 0,70) a 23,0 (± 0,84)mm. Limoneno mostró mayor actividad antibacte-riana. Si bien los resultados obtenidos son prelimi-nares el presente estudio relevó un amplio espectrode actividad antibacteriana, mostrando una suscep-tibilidad bacteriana mayor frente a las fraccionesvegetales que frente a los antibioticos ensayados.Palabras clave: masitis bovina - Minthostachysvertillata - actividad antibacteriana.

A5-11. QUIMIOTIPO Y ACTIVIDAD ANTIMI-CROBIANA DE ACEITES ESENCIALES DEESPECIES DE LA FAMILIA ASTERACEAEPROVENIENTES DE LOS PÁRAMOS DEANTIOQUIA, COLOMBIA. Luis C. Carrillo*,Cristina Mora, Natalia Gómez, Rafael Álvarez,Fernando Alzate, Edison Osorio. Grupo de Inves-tigación en Sustancias Bioactivas, Sede de Investi-gación Universitaria, Universidad de Antioquia.Carrera 53 # 61-30 Lab 229, A.A. 1226, Medellín,Colombia. *[email protected] páramos son ecosistemas que se encuentran alo largo de la línea ecuatorial en las regiones deCentro y Suramérica, África y Oceanía. Se caracte-rizan por presentar una vegetación tipo matorral yestar ubicados entre los 3.000 y 5.000 m.s.n.m. Elambiente en el páramo establece condicionesecofisiológicas que retan el metabolismo vegetalhacia la expresión diferencial de sustancias respec-to a especies que crecen a baja altura, lo cual moti-va su estudio químico y biológico. Este hecho

Page 7: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

97

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

permitió plantear una estrategia investigativa conel fin de avanzar en el conocimiento químico deespecies de Asteraceae de páramo, y determinar suposible bioactividad. Por tanto, se planteó el estu-dio químico de los aceites esenciales de especies delos géneros Baccharis, Ageratina, Diplostephium yPentacalia, obtenidos por hidrodestilación y anali-zados mediante GC/MS, y la determinación de laMIC frente a Enterobacter cloacae,un microorga-nismo patógeno productor de β-lactamasas, aplican-do el método de microdilución en caldo. Entre losresultados más significativos se encuentra la deter-minación de la composición química de 8 especiesdiferentes mediante el uso de librerías y la compa-ración de los índices de retención de Kovats, y selogró identificar más de 150 compuestos en cadaaceite. En cuanto al estudio microbiológico las MICde los aceites evaluados, en todos los casos, fueronsuperiores a 10 µg/µL, con un porcentaje de inhibi-ción entre 40 y 91 %. Además, mediante la evalua-ción de 23 compuestos volátiles, se lograron identi-ficar los principales marcadores químicos de la ac-tividad, dentro los que se destacan: cinamaldehído,S (-) citronelal, 3-careno, carvacrol y timol, todoscon MIC inferiores a 5 µg/µL. En conclusión, pormedio de un análisis multivariado se lograron iden-tificar dos quimiotipos principales, uno de ellos con-formado por: dauceno, perileno y α-copaeno, y elsegundo por: δ-cadineno, los cuales agruparon lamayoría de las especies evaluadas. A su vez esteestudio permitió establecer los posibles componen-tes volátiles relacionados con la actividad antimi-crobiana de aceites esenciales frente a Enterobactercloacae.Palabras clave: Aceites esenciales - cromatografíagases masas (GC/MS) - concentración mínimainhibitoria (MIC).

A5-12. EFECTOS DE LOMATIA HIRSUTA SO-BRE PARÁMETROS CONDUCTUALES ENRATONES. María Cecilia Cremer*, S. Villate, M.Muzzio. Departamento Biomédico, Facultad deCiencias Médicas, Universidad Nacional delComahue. Toschi y Arrayanes (8234), Cipolletti,Río Negro, Argentina. *[email protected] usos etnomédicos de L. hirsuta (radal) señalanque sus infusiones se utilizan como adelgazante,antiasmático y antitusivo, antifúngico, purgante,antiinflamatorio, analgésico y antipirético. Algunosde estos usos populares estarían señalando posibles

efectos sobre el sistema nervioso, ya que tanto latemperatura corporal como el apetito se regulan aese nivel. Por otro lado, aquellas plantas que se uti-lizan como adelgazantes podrían tener efectosansiolíticos y así generar el efecto en la regulaciónde la ingesta. Sobre la base de estas observaciones ehipótesis se planteó el objetivo de evaluar el efectode L. hirsuta en parámetros conductuales en rato-nes. Las muestras vegetales fueron traídas de ElBolsón, identificadas taxonómicamente y se reali-zaron extractos acuosos de las hojas secas, utilizan-do dosis de 1 y 10 g %, que se administraron víaoral (acorde al uso popular) a ratones machos cepabalbC. Los resultados muestran que L. hirsuta mo-dificó la actividad conductual en el open field conla mayor dosis evaluada, se encontraron efectos sig-nificativos sobre la actividad de acicalamiento, sinhallarse diferencias significativas respecto al con-trol en las actividades de exploración, como loco-moción y rearing, ni en el tiempo de freezing. Elefecto del extracto sobre el estado de ansiedad eva-luado a través del elevated plus maze no evidenciódiferencias significativas entre los tratamientos conL. hirsuta y el control en el nº de entradas a los bra-zos abiertos ni en el tiempo en brazos abiertos,parámetros fundamentales para establecer posiblesefectos ansiolíticos, y no se encontraron diferenciassignificativas en el nº de bolos fecales. Los estudiosfitoquímicos muestran que el género Lomatia con-tiene flavonoides que han sido relacionados conefectos sobre el sistema dopaminérgico, estructuracentral vinculada con conductas de desplazamientodel estrés como el acicalamiento que fue la conduc-ta evaluada que resultó modificada por el tratamientocon L. hirsuta.Palabras clave: radal - efectos conductuales.

A5-13. AISLAMIENTO DE COMPUESTOSBIOACTIVOS DE PROPÓLEOS DE SANTIA-GO DEL ESTERO. Fatima C. Danert1*, M. I.Isla1,2,3, L. Maldonado4, E. Bedascarrasbure4, I.C.Zampini1,2,3. 1 INQUINOA - CONICET. San Lo-renzo 1469 (4000), San Miguel de Tucumán,Tucumán, Argentina. 2 Facultad de Bioquímica,Química y Farmacia. UNT. Tucumán. 3 Facultadde Ciencias Naturales e IML. UNT. Tucumán.4 INTA-Famaillá. Tucumán. Argentina.*[email protected] Noroeste argentino es una región con potencialen la producción de productos de la colmena por su

Page 8: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

98

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

biodiversidad vegetal. Las propiedades funcionalesde los propóleos están influenciadas por la variabi-lidad química de este material resinoso complejo,de allí la importancia de estudiar la composiciónquímica y las bioactividades de los propóleos de estaregión. El objetivo de este trabajo fue realizar unaislamiento biodirigido de metabolítos bioló-gicamente activos de una muestra de propóleos dela provincia de Santiago del Estero. Se seleccionóuna muestra de propóleos con demostrada activi-dad antioxidante, antiinflamatoria y antimicrobiana,se preparó un extracto etanólico y se fraccionó enuna columna de Sílica Gel usando como eluyenteun gradiente de éter de petróleo/acetato de etilo/agua; las fracciones obtenidas se analizaron porcromatografía en capa fina y se reunieron en 10 frac-ciones con perfiles químicos diferentes (FR-I a FR-X). Se analizó la actividad antioxidante de las frac-ciones mediante ensayo de depuración del radicalcatión ABTS y la actividad antimicrobiana median-te métodos de dilución y ensayos bioautográficosfrente a Staphylococcus aureus, Enterococcusfaecalis, Escherichia coli. Se seleccionó la fracciónactiva más abundante (FR-III), que fue sometida auna cromatografía líquida de alta presión (HPLC)preparativa y los compuestos purificados fueronluego identificados mediante CG-MS. A partir de lafracción activa FR-III se aislaron tres compuestoscon capacidad para depurar radicales libres e inhi-bir el crecimiento bacteriano que fueron identifica-dos como crisina, naringenina y pinocembrina. Loscompuestos aislados e identificados constituyencompuestos mayoritarios de la muestra de propóleosanalizada y serían los responsables de la actividadbiológica demostrada para el extracto crudo depropóleos de Santiago del Estero.Palabras clave: propóleos - aislamiento bioguiado -actividades biológicas.

A5-14. EVALUACIÓN DEL EFECTO BIOCIDADE UNA FRACCIÓN AISLADA DE HOJAS DERICINUS COMMUNIS L. EN EL CONTROLDEL BIODETERIORO DE DOCUMENTOSPATRIMONIALES. José de la Paz Naranjo1,Sandra Gómez de Saravia2,3*, Patricia Ba-ttistoni2, María Larionova4, Patricia Guiamet2,5.1 Museo Ernest Hemingway. La Habana, Cuba.2 Instituto de Investigaciones FisicoquímicasTeóricas y Aplicadas (INIFTA), UNLP, CCT LaPlata - CONICET. CC 16 Suc. 4 (1900), La Pla-

ta, Buenos Aires, Argentina. 3 Facultad de Cien-cias Naturales y Museo, UNLP - CICBA 4 Insti-tuto Superior de Medicina Militar “Dr. LuisDías Soto”. La Habana. Cuba. 5 Facultad deCiencias Veterinarias, UNLP - CONICET.*[email protected], insectos y roedores causan alte-raciones en documentos y objetos de interés patri-monial depositados en archivos, bibliotecas y mu-seos. Para combatirlos son empleados numerososmétodos. No obstante, algunos de estos, causan unimpacto negativo en el medio ambiente, dañan lasalud del personal que los aplica y aceleran el pro-ceso natural de deterioro de los materiales. Produc-tos naturales obtenidos de plantas (extractos, tintu-ras y aceites esenciales) son una elección efectivapara combatirlos pues, entre otros beneficios, no soncontaminantes para el ambiente. El objetivo de estetrabajo fue determinar el efecto biocida de un ex-tracto acuoso obtenido de las hojas del Ricinuscommunis L. en el control del biodeterioro del pa-trimonio documental. Para ello se evaluó su activi-dad antimicrobiana frente a microorganismos aisla-dos de documentos depositados en el Archivo Na-cional de la República de Cuba y en el Archivo His-tórico del Museo de La Plata, Argentina. Se deter-minó su efecto sobre la acidez y la reserva alcalinadel papel después de un proceso de envejecimientoacelerado y se calculó la dosis letal media (DL50) enratones machos B6D2F1 (18 - 20 g). El extracto sepreparó a partir de una fracción aislada de hojas deRicinus communis L. colectadas en Ciudad de LaHabana, Cuba, por extracciones sucesivas con sol-ventes orgánicos. El precipitado obtenido se disol-vió en agua destilada estéril para su evaluación. Lacaracterización química de la fracción se determinópor espectroscopía IR y cromatografía en silicagel.El espectro IR mostró una banda a los 2222 cm-1

atribuido al grupo nitrilo, y otra banda, a los 1.659cm-1 al grupo carboxilo. En la cromatografía se iden-tificaron 7 elementos entre los que predominaronricinina y rutina. La DL50 por vía oral fue calculadaen 388,8 mg/kg. Las concentraciones de 50 y100 mg/mL tuvieron efecto sobre Enterobacteragglomerans, Bacillus polimixa y Streptomyces sp.La concentración de 100 mg/ml no varió en formaestadísticamente significativa los valores de pH yreserva alcalina en los papeles evaluados. Los re-sultados obtenidos favorecen la continuidad de losestudios con el fin de tener un producto natural útil

Page 9: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

99

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

en el control del biodeterioro de documentos patri-moniales.Palabras clave: biocida - Ricinus communis L. -biodeterioro.

A5-15. EVALUACIÓN DE ACTIVIDADANTIBACTERIANA DE EXTRACTOS DEHETEROPHYLLAEA LYCIOIDES (RUSBY)SANDWITH SOBRE BACTERIAS GRAMNEGATIVAS. Jesica A. Dimmer1, Paulina L.Paez1, Inés Albesa1, Susana Núñez Montoya1,Caterine S Mendoza2, José Luis Cabrera1*. 1

IMBIV-CONICET Departamento de Farmacia,FCQ, UNC. Haya de la Torre y Medina Allende s/n, Ciudad Universitaria (X5000HUA), Córdoba,Argentina. 2 Departamento de Farmacia, FCQFyB,Universidad San Francisco Xavier de Chuquisaca,Sucre, Bolivia. *[email protected] los últimos años, los microorganismos tienden apresentar multirresistencia a las terapias convencio-nales, por lo cual se buscan nuevas estructuras quí-micas superadoras a las ya conocidas. En este senti-do, el reino vegetal ofrece una gran variedad de es-tructuras con posibles efectos antibacterianos y conpotencialidad para ser descubiertas. Previamente,nuestro grupo de trabajo demostró el efectoantibacteriano in vitro de algunos extractos de la es-pecie Heterophyllaea lycioides (Rusby) Sandwith(Rubiaceae) sobre bacterias Gram positivas. Con elfin de completar este estudio biológico, en el presen-te trabajo se evaluó la actividad antibacteriana in vitrode diferentes extractos de esta especie vegetal sobrebacterias Gram negativas. Dado que esta especie ve-getal está siendo también estudiada en nuestro labo-ratorio, desde el aspecto químico, se buscó además,asociar los resultados obtenidos de la actividad bio-lógica de los extractos ensayados con las estructurasquímicas encontrados en los mismos. Se determinóla concentración inhibitoria mínima y la concentra-ción bactericida mínima de extractos de polaridadcreciente de H. lycioides sobre distintas cepasbacterianas Gram negativas, mediante el método demacrodilución en caldo, de acuerdo con las normasdel Clinical Laboratory Standards Institute. Se esta-bleció la presencia de antraquinonas, las cuales fue-ron identificadas mediante dos técnicas cromato-gráficas contra testigos: cromatografía en capa del-gada (CCD) y cromatografía líquida de alta presión(CLAP). El extracto acetato de etilo inhibió el creci-miento de Proteus mirabilis, lo cual sumado al efec-

to bacteriostático y bactericida que exhibe sobreStaphyloccocus aureus meticilino sensible y resistente(Gram positivas), resulta ser el extracto más bioactivode esta especie vegetal. El análisis mediante CLAP yCCD de este extracto, nos permitió determinar la pre-sencia de bisoranjidiol, soranjidiol y trazas depustulina, estructuras aisladas previamente de H.pustulata. Este análisis químico permitió además,establecer la presencia de otros derivados antra-quinónicos que no corresponden a los testigos utili-zados, por lo que es necesario profundizar los estu-dios a fin de determinar la estructura de aquellos com-puestos que fehacientemente son responsables de laactividad del extracto.Palabras clave: Heterophyllaea lycioides - extrac-to Acetato de etilo - actividad antibacteriana.

A5-16. ESTUDIO DEL CONTENIDO DEPOLIFENOLES EN LIGARIA CUNEIFOLIA YSU RELACIÓN CON LA CAPACIDAD ANTI-OXIDANTE. Cecilia B. Dobrecky1*, D. More-no1, M. Garcés2, S. Lucangioli3, R. Ricco1, P.Evelson2, M. Wagner1. 1 Cátedra de Farmaco-botánica, Facultad de Farmacia y Bioquímica,Universidad de Buenos Aires. Junín 956 Piso 4(1113), CABA, Argentina. 2 Cátedra de Quími-ca General e Inorgánica IBIMOL UBA-CONI-CET, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Uni-versidad de Buenos Aires. CABA, Argentina.3 Departamento de Tecnología Farmacéutica-CONICET, Facultad de Farmacia y Bioquímica,Universidad de Buenos Aires. CABA. Argenti-na. *[email protected] cuneifolia es una especie hemiparásita vul-garmente conocida con el nombre de “muérdagocriollo”, “liga” o “liguilla”. Esta especie es utiliza-da popularmente como agente hipotensor y, debidoa su similitud morfológica, constituye el sustitutonatural del muérdago europeo (Viscum album L.).L. cuneifolia, al igual que las otras especies de lafamilia Loranthaceae, son ricas en flavonoides, es-pecialmente flavonoles, compuestos que podrían serdeterminantes de su acción biológica. El objetivodel presente trabajo consiste en valorar el conteni-do de polifenoles en diferentes extractos y evaluarla relación de estos compuestos con la actividadantioxidante. Para ello, se procedió a la cuan-tificación de fenoles totales, de ácidos hidroxi-cinámicos y de taninos condensados en las fraccio-nes acetato de etilo, butanólica y acuosa. En estas

Page 10: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

100

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

mismas fracciones se realizó también la determina-ción de actividad antioxidante total hidrosolublemediante el método de ABTS y la capacidadantioxidante total liposoluble mediante el métodode DPPH. Los resultados obtenidos permiten supo-ner que si bien la fracción butanólica presenta ma-yor contenido de taninos condensados de alto pesomolecular, lo cual le otorga una mayor capacidadantioxidante mediante el método de DPPH, la frac-ción acetato de etilo presenta la mayor cantidad deflavonoides totales, ácidos hidroxicinámicos yfenoles totales que se correlaciona con la mayorcapacidad antioxidante mediante el método de ABTSen comparación con las otras fracciones y un signi-ficativo poder antioxidante liposoluble.Palabras clave: capacidad antioxidante - Ligariacuneifolia - flavonoides.

A5-17. BIOPROSPECÇÃO DE ATIVIDADESANTIOXIDANTE E CITOTÓXICA DE PLAN-TAS MEDICINAIS. Edlene O. dos Santos1,3,Ademir E. do Vale1*, Evandro J. C. S. Neto1, Fe-lipe P. da S. Mendes1, Milena S. Campos3, EdnaM. P. de Araújo1, Jorge M. David2, Juceni P. Da-vid1. 1 Faculdade de Farmácia, UFBA. Rua Barãode Geremoabo s/n, Salvador, 40170-280, BA, Bra-sil. 2 Instituto de Química, UFBA. BA, Brasil. 3

Centro Universitário Estácio da Bahia. BA, Bra-sil. *[email protected] antioxidantes são substâncias que protegem ossistemas biológicos contra efeitos potencialmenteprejudiciais de processos oxidativos. Os antioxi-dantes são úteis na prevenção de várias patologiasrelacionadas ao stress oxidativo, como o câncer edoenças cardiovasculares, além de auxiliarem noretardamento do envelhecimento das células. Tes-tes de avaliação da capacidade anticancerígena deextratos e/ou substâncias puras, possuem custo ele-vado, além de serem laboriosos e exigirem mão deobra especializada. No entanto, bioensaios compa-rativos entre testes efetuados in vitro com linhagensde células cancerígenas e o teste da letalidade daArtemia salina realizados com diversas substânciasreconhecidamente citotóxicas, mostraram concor-dância razoável. O teste da letalidade da A. salinavem sendo adotado desde então como um ensaiopreliminar ao estudo fitoquímico, com o objetivode facilitar o isolamento de compostos biolo-gicamente ativos com potencial utilização comomedicamento anticancerígeno. O teste possui baixo

custo além de ser relativamente simples e rápido.Este trabalho teve como objetivo a bioprospecçãode atividades antioxidantes avaliadas pelos testes deseqüestro do radical livre e a determinação daletalidade à A. salina dos extratos etanólicos de plan-tas medicinais tradicionalmente utilizadas pelapopulação de Salvador, Bahia, Brasil. A atividadeantioxidante dos extratos das 10 plantas avaliadasno teste do DPPH variou na faixa de 4,1 % (Crotoncampestris) a 55,0 % (Zornia latifolia). Os valoresde IC50 variaram de 1,40 mg/L a 19,7 mg/L. O ensaioem A. salina sugere correlação com promissoraatividade antitumoral devido a IC50 calculadas paradiversos extratos menores que 1.000 µg/mL,concentração letal máxima para uma substância serconsiderada ativa, determinada a partir da plotagemda concentração em função da mortalidade de A.salina. Estes resultados revelam que frações testa-das apresentam substâncias bioativas com atividadescitotóxicas e antioxidantes, indicando a necessidadeda realização de outros estudos para confirmar o seureal potencial anticancerígeno e estabelecimento dasegurança do uso, bem como a identificação dassubstâncias ativas.Palavras chave: Artemia salina - atividadeantioxidante - plantas medicinais.

A5-18. CARACTERIZAÇÃO DA FRAÇÃO VO-LÁTIL E DETERMINAÇÃO DA ATIVIDADEANTIMICROBIANA DO ÓLEO FIXO DOSRESÍDUOS AGROINDUSTRIAIS DE PSIDIUMGUAJAVA (GOIABA). C. C. Edemilson1*, P. B.Nathalia1, L. G.Mythali2. 1 Universidade Federalde Goiás, Faculdade de Farmácia. Praça Univer-sitária nº 1166, Goiânia-CEP 74605-220, Goiás,Brasil. 2 Universidade Paulista. Goiânia, Goiás,Brasil. *[email protected] resíduos industriais provenientes do processa-mento da goiaba são comumente descartados emgrande quantidade e sem o devido aproveitamento.Este trabalho objetivou avaliar a atividade anti-microbiana do extrato dos resíduos do pro-cessamento da goiaba e a caracterização química dafração volátil. Para tanto, o resíduo obtido, foi mo-ído, percolado e o extrato resultante concentrado. Oóleo essencial foi extraído por hidrodestilação emaparato de Clevenger. Os compostos químicos pre-sentes no óleo essencial foram analisados por CG-EM e a atividade antimicrobiana do óleo fixo testa-da por micro diluição em caldo. A fração volátil

Page 11: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

101

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

apresentou vários compostos dentre eles: β-cariofileno (21,15 %), α-selineno (6,19 %), β-selineno (6,18 %), α-guaieno (3,49 %), α-humuleno(2,11 %) e α-Copaeno (1,70 %). Verificou-se ativi-dade moderada (500 UFC mL-1 ≤ CIM ≥ 100UFCmL-1) contra todas as bactérias gram-positivastestadas: Micrococcus roseus ATCC 1740, Bacillussubtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC6538, Staphylococcus aureus ATCC 25923,Streptococcus epidermidis ATCC 12229, contra asbactérias gram-negativas foram capazes de inibirmoderadamente (500 UFC mL-1 ≤ CIM ≥ 100UFCmL-1) a Escherichia coli ATCC8739, Enterobactercloacae HMA/FTA502, Pseudomonas aeruginosaATCC 9027 e apresentaram baixa atividade (CIM ≥1000UFC mL-1) contra as bactérias:Escherichia coliATCC11229, Enterobacter aerogenes ATCC13048,Salmonella spp ATCC19430, Serratia marcescensATCC 14756 e Pseudomonas aeruginosa SPM1.A atividade contra os fungos Cryptococcus sp ATCCD, Cryptococcus gatti L48, Cryptococcusneoformans L3, Candida albicans 63U, Candidaparapsilosis 86U, Candida parapsilosis ATCC22019 testados foi considerada moderada. Os óleosobtidos dos resíduos do processamento da goiabaapresentaram potencial antimicrobiano contra bac-térias e fungos. Acaracterização do óleo essencialpermitiu identificar compostos químicos responsá-veis por atividades biológicas importantes.Os da-dos obtidos até o momento tem relevância inovado-ra e agregam valor ao resíduo de modo a direcioná-los para a geração de novos bioprodutos, além decontribuir com aproveitamento sustentável.Palavras-chave: sustentabilidade - cromatografiaa gás - microbiologia.

A5-19. CARACTERIZACIÓN ELECTRO-FORÉTICA DEL EFECTO FIBRINOGE-NOLÍTICO PRESENTE EN EXTRACTOS DECUATRO ESPECIES DE BROMELIÁCEAS.María E. Errasti1*, Néstor O. Caffini1, AlejandraE. Rotelli2. 1 LIProVe-UNLP, calle 115 s/n (1900),La Plata, Buenos Aires, Argentina. 2 Laborato-rio de Farmacología, FQByF-UNSL. San Luis,Argentina. *[email protected] especies de la familia Bromeliaceae se ca-racterizan por producir endopeptidasas en cantida-des superiores a las fisiológicamente necesarias. Apartir de los frutos de Bromelia hieronymi Mez,Bromelia balansae Mez, Pseudananas macrodontes

(Morr.) Harms y Ananas comosus (L.) Merr., espe-cies todas ellas pertenecientes a la subfamiliaBromelioideae, se han aislado y caracterizado nu-merosas proteasas de tipo cisteínico. Las más cono-cidas son las obtenidas de A. comosus, de cuyos ta-llos se obtiene un extracto rico en proteasas deno-minado “bromelaína” o “bromelina” que ha mos-trado tener numerosos efectos farmacológicos:antiinflamatorio, antitrombótico, fibrinolítico,antitumoral, antimetastásico, inmunomodulador,promotor de la absorción de antibióticos, debridantede heridas y cicatrizante. En nuestro laboratorio seobtuvieron extractos por precipitación etanólica apartir de frutos de B. hieronymi (Bh), B. balansae(Bb) y P. macrodontes (Pm) que mostraron tenerefectos antiinflamatorios, antitumoral, anticoa-gulante y fibrinolítico, que fueron atribuidosmayoritariamente a la acción de sus proteasas. Elpresente trabajo tuvo como objetivos evaluar y com-parar con bromelina la acción de esos extractos so-bre el fibrinógeno. Los extractos Bh, Bb, Pm ybromelina fueron previamente caracterizados encuanto a su efecto anticoagulante y a su acciónproteolítica frente a caseína y fibrina. Luego de in-cubar Bh, Bb, Pm y bromelina con fibrinógeno du-rante diferentes tiempos a 37 ºC y pH 8, se realizóuna electroforesis desnaturalizante (Tricina-SDS-PAGE) seguida por un densitograma. Los perfileselectroforéticos obtenidos fueron similares entre sí:todos los extractos degradaron completamente lasubunidad α del fibrinógeno a los 2 min y lasubunidad β a los 30 min, en tanto que la subunidadγ fue la más resistente. La particular preferencia detodos los extractos por la subunidad α del fibrinó-geno podría explicar el efecto mostrado sobre elcoágulo de fibrina cuando los extractos son incuba-dos con plasma sanguíneo. Los resultados obteni-dos pueden ser de utilidad en futuros ensayos desti-nados a estudiar su posible uso como antitrom-bóticos.Palabras clave: antitrombóticos - bromeliáceas -proteasas.

A5-20. CANAVALIA ROSEA COMO CARDIO-PROTETOR ANTIOXIDANTE NA INJÚRIADE REPERFUSÃO. Maraísa B. J. Feitosa2,Lucas A. de Sá2, André L. B. S. Barreiros1*,Marizeth L. Barreiros1, Cecília R. A. Costa1,Itamar C. G. de Jesus2, Jucilene F. dos Santos2,Silvan Araújo2, Thássio Mesquita2, Grace K.

Page 12: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

102

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

Melo2, Carla Vasconcelos2, Charles S. Estevam2,Eduardo Conde-Garcia2, Sandra Lauton-San-tos2. 1 Departamento de Química. UniversidadeFederal de Sergipe. Sergipe, Brasil. 2 Departa-mento de Fisiologia. Universidade Federal deSergipe. Av. Mal. Rondon, s/n, Jardim Roza Elze,São Cristovão, 49100-000, Sergipe, Brasil.*[email protected] injúria de reperfusão cardíaca pode ocorrer nassíndromes coronarianas em geral e infarto domiocárdio. Substâncias que tenham caráter anti-oxidante são de grande interesse para a minimizaçãodas injúrias provocadas pela reperfusão. Neste con-texto, torna-se importante avaliar os efeitos bioló-gicos, bem como, o potencial antioxidante de pro-dutos naturais para a prevenção de danos causadospela injúria decorrentes de eventos isquêmicos.Desta forma, este trabalho tem como objetivo ava-liar a atividade antioxidante do extrato acetato deetila (FAE) das folhas de Canavalia rosea (Sw.) Dc.frente a injúria de reperfusão cardíaca em ratos. C.rosea é uma espécie pantropical encontrada emabundância no litoral do nordeste brasileiro. Estu-dos das partes aéreas desta planta revelaram a pre-sença do alcalóide guanidinico canarosina, além deesteróides e do flavonóide rutina. O material botâ-nico foi coletado em Aracaju-SE, seco ao ar, moídoe por maceração obtido o extrato MeOH. Este foisubmetido a partição Hexano/MeOH:H2O (9:1),CHCl3/MeOH:H2O (7:3) e AcOEt/H2O. A FAE foisubmetida ao teste de atividade antioxidante pelométodo de lipoperoxidação induzida por AAPH eFeSO4. Neste trabalho avaliaram-se, também, osefeitos contráteis e eletrocardiográficos da FAE emcorações isolados de ratos em sistema de perfusãodo tipo Langendorff. Foi, além disso, verificado oefeito desta fração na reperfusão de corações sub-metidos à isquemia global. De acordo com o índicede atividade antioxidante, a FAE apresentou poten-cial antioxidante potente nas diferentes concentra-ções testadas (50, 100, 150 e 200 µg.mL-1) A FAEreduziu em aproximadamente 75 % a lipopero-xidação induzida pelo AAPH e FeSO4, e quandocomparada ao TROLOX, mostrou ser tão potentequanto este antioxidante. Os resultados mostraramque a FAE provocou aumento médio de 25 % naduração dos intervalos PR e QT (intervalo entre adespolarização atrial e a despolarização ventricular;intervalo entre a despolarização ventricular e arepolarização), foi ainda, capaz de aumentar em 31%

a duração do complexo QRS (despolarizaçãoventricular), entretanto, não alterou o tempo entre adespolarização ventricular e o pico máximo da con-tração. Estes resultados, em conjunto, indicam queeste extrato pode ser um candidato a antiarrítmico.Palavras-chave: coração - injúria de reperfusão -Canavalia rosea.

A5-21. EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDADHIPOCOLESTEROLÉMICA DE INFUSIONESDE LIGARIA CUNEIFOLIA EN PACIENTESCON RIESGO CARDIOVASCULAR. MarianaFerrero1*, D. Crosetti1, M.J. Svetaz, M.L.Wagner4, L. Scaglione3, J. Petrucci3, J. Beloscar3,C.E. Carnovale2 y A. Luquita1. 1 Departamentode Fisiología, Facultad de Ciencias Médicas.Universidad Nacional de Rosario. Rosario, San-ta Fe, Argentina. 2 Departamento de Ciencias Fi-siológicas e Instituto de Fisiología Experimental-CONICET, Facultad de Ciencias Bioquímicas yFarmacéuticas, Universidad Nacional de Rosa-rio. Rosario, Argentina. 3 Servicio de Cardiologíadel Hospital Provincial del Centenario. Rosario,Santa Fe. 4 Cátedra de Farmacobotánica, Facul-tad de Farmacia y Bioquímica, Universidadde Buenos Aires. Buenos Aires, Argentina.*[email protected] cuneifolia (R. et P.) Tiegh. -Loranthaceae-(muérdago criollo) (Lc) se utiliza en medicina popu-lar “para producir aumento de la fluidez de la sangrey disminución del colesterol plasmático”. Objetivos:Analizar el efecto de la ingesta de infusiones del ex-tracto acuoso de hojas y tallos de Lc, sobre los nive-les plasmáticos de colesterol, fluidez de la sangre yfuncionalismo hepático (FH) en pacientes con riesgocardiovascular y colesterol sérico mayor a 200 mg/dl. Metodología: Se estudian pacientes (edad: 50 ±15 años) que asisten al consultorio externo del Servi-cio de Cardiología del Hospital Centenario para con-trol ambulatorio. Previo consentimiento escrito, seles extrajo sangre para las determinaciones basales(B). Se les entregó sobres (2,6 g c/u) de extractoliofilizado de Lc, para disolver en 100 ml de aguapotable caliente (infusión 5 %), que ingirieron tresveces/semana, durante 1 mes. Ese día se les extrajosangre para las determinaciones post-tratamiento conLc (TLc). Se estudiaron 3 mujeres (M) y 1 varón (V).Se determinaron: Co (método enzimático), CoHDLy CoLDL en plasma (mg %); viscosidad sanguínea(VS) y plasmática (viscosímetro rotacional, 37 ºC) y

Page 13: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

103

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

por cálculo VS relativa estandarizada a hematocritodel 45 % (VSrs); Fosfatasa Alcalina (ALP), Alaninoaminotransferasa (GPT) y Aspartato aminotransferasa(GOT) por métodos cinéticos (UI/l). Resultados:(media ± ES) Co: B: M1: 257, M2: 260, M3: 224, V:239. TLc: M1: 243, M2: 237, M3: 216, V: 208. CoHDL: B: M1: 63, M2: 68, M3: 64, V: 44. TLc: M1:66, M2: 62, M3: 69, V: 43. CoLDL: B: M1: 178, M2:181, M3: 138, V: 152. TLc: M1: 167, M2: 153, M3:139, V: 132. VSrs: B: M1: 4,11; M2: 2,98; M3: 3,27;V: 5,49. TLc: M1: 3,75; M2: 3,24; M3: 3,28; V: 5,80.ALP: B: M1: 49, M2: 49, M3: 64, V: 67. TLc: M1:50, M2: 52, M3: 63, V: 65. GOT: B: M1: 17, M2: 15,M3: 15 ,V: 21. TLc: M1: 17, M2: 17, M3: 17, V: 23;GPT: B: M1: 15, M2: 15, M3: 13,V: 38. TLc: M1:17, M2: 13, M3: 16, V: 33. Índice de Castelli (IC =Co/ Co HDL): B: M1: 4,08; M2: 3,82; M3: 3,5; V:5,43. TLc: M1: 3,68; M2: 3,82; M3: 3,13; V: 4,84.Conclusión: En los pacientes estudiados Lc produceun descenso de Co y CoLDL, sin promover altera-ciones en Co HDL, VSrs ni FH. La disminución delIC indicaría menor riesgo de enfermedad coronaria.Palabras clave: Ligaria cuneifolia - viscosidad san-guínea - colesterol plasmático.

A5-22. CHEMICAL ANALYSIS OF ESSEN-TIAL OIL AND BIOLOGICAL ACTIVITIESOF MYRSINE RUBRA FROM THE NATIONALPARK OF RESTINGA DE JURUBATIBA.Hildegardo S. França1*, Arthur L. Corrêa2,Adriana Cortadi3, Leandro M. Rocha2. 1 FederalInstitute of Education, Science and Technology.Av. Ministro Salgado Filho s/n, Soteco 29106-010,Vila Velha-ES, Brazil. 2 Fluminense University,Laboratory of Natural Products Technology.Niterói-RJ, Brazil. 3 National University ofRosario. Rosario, Santa Fe, Argentina.*[email protected] genera have been reported to containtriterpene saponins, steroid saponins, theiraglycons,benzoquinone and hydroquinone derivatives,anthraquinones, lignans, flavonoids, terpene-ben-zoic acid derivatives and megastigmane glycosides.Myrsine rubra (Myrsinaceae) is distributed in At-lantic Coast from Espirito Santo to Parana State,Brazil. To our knowledge, no biological activity hasbeen related to M. rubra and previews phytochemi-cal studies performed by our research group showedthe presence of myricetin 3-O-α-L-rhamno-pyranoside, quercetin 3-O-α-L-rhamnopyranoside,

Kaempferol 3-O-β-D-(6’’-galloyl) glucopyranoside,luteolin 3’-O-α-L-rhamnopyranoside. The aim ofthe present study was to perform chemical analysisof the essential oil from leaves and biological ac-tivities of the ethanol extracts from leaves andbranches and their fractions. The susceptibility testagainst bacterial strains of Staphylococcus aureus,Escherichia coli and fungal strain of Chalaraparadoxa were performed by diffusion disk test andminimum inhibitory concentration test (MIC). Theanticholinesterase activity was quantitatively evalu-ated. The antileishmanial activity was performedagainst Leishmania chagasi promastigotes. The es-sential oil has been extracted by hydrodistillationand the chemical composition was defined by GC/MS. The ethanol extracts from leaves and branches,as well as their fractions showed activity against thebacteria S. aureus 29213, with exception ofbuthanolic fraction of leaves. The MIC ranged from47.3 to 379.0 µg/mL and hexanic fraction of theleaves was the most active (47.3 µg/mL). All testedfractions presented MIC of 500 µg/mL against C.paradoxa. In the anticholinesterase assay, all sam-ples showed enzyme inhibition and hexanic frac-tion from leaves (250µg/mL) and branches (500µg/mL) were more active, respectively with 27.5% and13.8% of inhibition. The ethanol extract frombranches and its hexanic and dicloromethane frac-tions were active against L. chagasi promastigoteswith ED 50 of 40.4%, 73.7% and 36.5%, respec-tively, as well as the hexanic and dicloromethanefraction from leaves, with ED 50 of 77.4% and99.5% of inhibition. The essential oil from leavesyielded 0.033%, is mainly constituted by β-Caryophyllene (17.2%), γ-Muurolene (11,1%) andGermacrene B (10,0%). These are the first reportsregarding biological activities of Myrsine rubra andessential oil production from Myrsine species.Keywords: Myrsine rubra - Biological activity -Flavonoids - Essential oil.

A5-23. ACTIVIDAD ANTIFOULING DE COM-PUESTOS AISLADOS DE MAYTENUS VITIS-IDAEA Y M. SPINOSA, PLANTAS TERRES-TRES DEL NORTE ARGENTINO. MónicaGarcía1*, Guillermo Blustein1,4, Mirta Stupak1,Miriam Pérez1,2, Marianela Sánchez3, Jorge A.Palermo3. 1 Centro de Investigación y Desarrolloen Tecnología de Pinturas. Av. 52 e/ 121 y 122,La Plata, Argentina. 2 Facultad de Ciencias Na-

Page 14: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

104

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

turales y Museo, Universidad Nacional de LaPlata. 3 UMYMFOR, Departamento de QuímicaOrgánica, Facultad de Ciencias Exactas y Natu-rales, Universidad de Buenos Aires, Buenos Ai-res, Argentina 4 Facultad de Ciencias Agrarias yForestales, Universidad Nacional de La Plata.*[email protected] sustratos naturales y artificiales sumergidos enel mar son rápidamente colonizados por micro ymacroorganismos, este proceso es conocido como“biofouling”. El asentamiento produce importantespérdidas económicas:, por ejemplo, en los cascosde las embarcaciones provoca una reducción de lavelocidad debido a la pérdida de la hidrodinámica yaumento en la rugosidad, aumento en el consumode combustible, deterioro de la película protectorae inicio de los procesos de corrosión. También cau-sa perjuicios en granjas de maricultura provocandoel bloqueo de redes de cultivo y en cañerías redu-ciendo el diámetro interno y por lo tanto el flujo deagua. Las pinturas antiincrustantes han sido pormuchos años la mejor vía de protección de las em-barcaciones. En las formulaciones, tradicionalmen-te, se han incorporado compuestos tóxicos, pero lacreciente preocupación por los efectos perjudicia-les sobre la salud humana y el medio ambiente hanllevado a restringir e incluso a prohibir su utiliza-ción. En la actualidad, se tiende a controlar lasincrustaciones biológicas por medio de métodos al-ternativos utilizando sustancias naturales o artifi-ciales no tóxicas. La obtención de productos a par-tir de plantas abundantes en la naturaleza represen-ta una fuente sustentable de nuevas sustanciasbioactivas. En este sentido se extrajeron compues-tos puros de Maytenus vitis-idaea y M. spinosa, dosespecies colectadas en Salta (Argentina). Estos com-puestos fueron caracterizados por NMR y HPLCcomo celastroides, ellos son: tingenona, pristimerina,celastrol y escutiona. La actividad “antifouling” seestudió en laboratorio sobre larvas de Balanusamphitrite y en el mar incorporados a pinturasantiincrustantes de matriz soluble. Los ensayos detoxicidad indicaron que a partir de concentracionestan bajas como 20 µg/mL estos compuestos inhibenla actividad larval. Las pinturas se aplicaron sobrepaneles y se sumergieron en el puerto de Mar delPlata (Argentina) durante 45 días. Los resultadosdemostraron que todas las formulaciones inhibieronla fijación del “biofouling”, registrándose una mar-cada disminución en la densidad y diversidad de

organismos respecto de los controles (p < 0,05,ANOVA y test de Tukey). Esto indica que los com-puestos aislados son altamente efectivos y promi-sorios candidatos en tecnología “antifouling”.Palabras clave: biofouling - pinturas antiincrus-tantes - celastroides.

A5-24. POLIFENOLES TOTALES Y ACTIVI-DAD ANTIOXIDANTE DEL VÁSTAGO DESALPICHROA ORIGANIFOLIA (LAM.) BAILL.Katherine Guerrero Otálvaro1,2*, Gabriela F.Rocha1, Nancy M. Apóstolo1, Mónica Parisi1.1 Departamento de Ciencias Básicas, Univer-sidad Nacional de Luján. Ruta 5 y 7 (6700),Luján, Buenos Aires, Argentina. 2 Programade Biología, Facultad de Ciencias Básicas yTecnológicas, Universidad del Quindío.*[email protected] plantas medicinales constituyen un recurso va-lioso en los sistemas de salud de los países en desa-rrollo. En las estadísticas de la Organización Mun-dial de la Salud se informa que el 80 % de la pobla-ción mundial depende de las plantas medicinalespara la atención primaria de la salud. Los anti-oxidantes son sustancias que, cuando están presen-tes en los alimentos o en el organismo en bajas con-centraciones con relación a un sustrato oxidable,disminuyen o previenen su oxidación. El objetivode este trabajo es la evaluación del contenido depolifenoles totales y la determinación de la activi-dad antioxidante del vástago de Salpichroaoriganifolia (Lam.) Baill. Se prepararon infusionesacuosas y extractos etanólicos y metanólicos delvástago de la especie. En ellos se determinó el con-tenido de polifenoles por técnicas espectro-fotométricas de acuerdo con el método de Folin-Ciocalteu, y los resultados fueron expresados comomg equivalentes de ácido gálico por gramo de pesofresco (mg EAG/g PF). La actividad antioxidantese evaluó con el método de neutralización del radi-cal DPPH descripto por Brand-William, Cuvelier yBerset, y fue expresada como la concentración ne-cesaria para producir el 50 % de neutralización delradical (IC50). Los resultados mostraron que los ex-tractos de partes aéreas presentaban el mayor valorde polifenoles totales, y que la mayor extracción deestos compuestos se consiguió a partir de lasinfusiones con valores del orden de 5 mg de EAG/gPF. Por otra parte, todos los extractos tuvieron ca-pacidad para decolorar el radical libre DPPH. Sin

Page 15: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

105

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

embargo, la mayor actividad antioxidante se obser-vó en los extractos acuosos de las partes aéreas conIC50 = 50-100 µg.mL-1, mientras que la menor acti-vidad se encontró en los extractos etanólicos de lostallos (IC50 = 3.000 µg.mL-1). Sabiendo que losantioxidantes sintéticos pueden producir efectosnegativos sobre la salud el empleo de antioxidantesde origen natural resultan promisorios. Por estemotivo, la preparación de extractos de Salpichroaoriganifolia con actividad antioxidante inicia el es-tudio de esta especie vegetal nativa para la obten-ción de principios activos de origen natural.Palabras clave: vástago - fenoles - actividadantioxidante.

A5-25. EFECTO DE LOS POLIFENOLES DEGUNNERA TINCTORIA (NALCA) SOBRELA VIABILIDAD Y MORFOLOGÍA DEHELICOBACTER PYLORI. S. Hebel, A.García, L. Bustamante, L. Pinuer, E. Torres,A. Urbina2, E. Pastene1*. 1 Facultad de Farma-cia, Universidad de Concepción. VicenteMéndez 595, Chillán, Chile. 2 Facultad deAgronomía, Universidad de Concepción.Chillán, Chile. *[email protected] pylori (Hp) cuya prevalencia nacio-nal es 73 %, está involucrado en patologías gástricas.Para su erradicación se utiliza una triterapia que pre-senta falla terapéutica por la resistencia antibiótica,y así, se necesitan nuevas moléculas. El objetivofue identificar moléculas en extractos de pecíolo deGunnera tinctoria (nalca), determinando si estosinhibían el crecimiento y producían cambiosultraestructurales bacterianos. Se extrajo y fraccio-nó nalca y se realizó una asignación tentativa deidentidad para parte de sus componentes medianteHPLC-ESI-MS/MS. Se evaluó su efecto anti-Hp encepas 43504 y J99 mediante curvas de muerte ymicroscopía electrónica de transmisión. Se obtuvo4 fracciones desde el extracto total y se observómoléculas como galoil-hexahidroxidifenoilhexosa,p-cumaroilhexosa, hexósido del ácido ferúlico, áci-do elágico y digaloilhexosa. Los resultados más fa-vorables fueron sobre la cepa 43504; se observómuerte bacteriana en todos los casos, excepto la frac-ción 3. Esto ocurrió a las 3 horas para amoxicilina(control), 5 para fracción 2, 4 para fracción 4, 8 paraextracto total y, en la fracción 1, se observó que ensolo 2 horas presentó un efecto letal. La microscopíaelectrónica indicó que el extracto total y las frac-

ciones actuarían en nivel de la pared celular, provo-cando disrupción en la membrana, que daría paso alisis y muerte bacteriana. La actividad de nalca so-bre Hp hace pensar en su potencial uso comonutracéutico y/o ingrediente en productos fito-terapéuticos para manejo preventivo y/o comple-mentario de la terapia farmacológica.Palabras clave: Gunnera tinctoria - polifenoles -Helicobacter pylori.Agradecimientos: a Fondecyt N°11110442,CONICYT Beca de Magíster 2012 N°2212206,INNOVA BIOBIO 12.57-EM.TES (12.171) y DIUCNº 212.085.033-1.0.

A5-26. ESPECIES DE LA FAMILIAASTERACEAE ACTIVAS FRENTE A CEPASAISLADAS DE OTITIS CANINA. JudithHeredia4, Iris C Zampini1,2,3*, Clara Silva1, Ma-ría I Isla1,2, Roxana Ordoñez 1,2,3. 1 INQUINOA.CONICET. 2 Facultad de Bioquímica, Químicay Farmacia. 3 Facultad de Ciencias Naturales eIML, Universidad Nacional de Tucumán. San Mi-guel de Tucumán, Tucumán. 4 Facultad de Agro-nomía y Zootecnia. *[email protected] veterinaria, las bacterias responsables de diversasinfecciones han desarrollado resistencia a losantibióticos comerciales. Esto lleva a la búsqueda denuevos agentes antibacterianos. El objetivo del pre-sente trabajo fue evaluar el efecto de extractoshidroalcohólicos de nueve especies de la familiaAsteraceae que crecen en ambientes áridos de la Ar-gentina sobre bacterias aisladas de otitis canina. Seprepararon extractos hidroalcohólicos a partir de par-tes aéreas de Baccharis boliviensis (Wedd.) Cabr., B.incarum (Wedd.) Perkins, Chiliotrichiopsis keideliiCabr., Chuquiraga atacamensis Kuntze, Nardophyllumarmatum (Wedd.) Reiche, Parastrephia lepidophylla(Wedd.) Cabr., P. lucida (Meyen) Cabr., P. phyliciformis(Meyen) Cabr. y Tessaria absinthioides (Hook. & Arn.)DC. A partir de perros con otitis externa se aislaron eidentificaron 13 cepas bacterianas pertenecientes a losgéneros Staphylococcus, Proteus y Escherichia, paracada cepa se evaluó la sensibilidad a antibióticos co-merciales (Eritromicina, Clindamicina, Cefoxitina,Teicoplamina, Vancomicina, Gentamicina, Ciprofloxa-cina, Oxacilina, Rifampicina, Trimetroprima/Sulfametoxazol). Se determinaron los valores de con-centración inhibitoria mínima (CIM) y concentraciónbactericida mínima (CBM) de las tinturas mediante elmétodo de macrodilución en agar y microdilución en

Page 16: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

106

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

medio líquido y se realizaron las curvas de muerte delos extractos más activos. Las cepas aisladas mostra-ron distintos perfiles de resistencia a los antibióticoscomerciales ensayados, muchas de ellas fueron resis-tentes a más de un antibiótico. Los extractos de lasnueve especies estudiadas fueron activos principalmen-te frente a bacterias Gram positivas, los extractos deBaccharis resultaron los más activos con valores deCIM entre 9,35 y 37,5 µgEAG/ml y el efecto fuebactericida sobre las cepas de S. aureus con concen-traciones iguales a 4xCIM y 8xCIM. Estos resultadosapoyan el uso de extractos de especies de Asteraceaede ecosistemas áridos en el tratamiento de otitis exter-na canina.Palabras clave: Asteraceae - otitis canina - activi-dad antimicrobiana.

A5-27. YACON FLOUR, A NATURAL PLANTPRODUCT, AMELIORATES VISCERAL ADI-POSITY WITH BENEFICIAL METABOLICEFFECTS IN INSULIN-RESISTANT STATE.Stella M. Honoré*, Susana B. Genta, Sara S.Sánchez. INSIBIO-CONICET, UniversidadNacional de Tucumán. Chacabuco 461(T4000ILI), San Miguel de Tucumán, Argentina.*[email protected] is a medical condition involving an ex-cess accumulation of body fat and is correlated withnumerous metabolic disorders among which themost relevant are diabetes, insulin-resistance, hy-pertension and cardiovascular diseases. Obesitymanagement is a modern challenge because of therapid evolution of unfavorable life styles and un-fortunately there are not effective treatments toobese/overweight people. The purpose of this studywas to investigate the antiobesity effect of yaconroots supplementation in high-fat/high-fructosediet-induced obese rats. Male Wistar rats were in-troduced to either standard (SD) or high-fat/high-fructose diet (fat 20%/ fructose 10% w/w, ad libi-tum, HFF). After 12 weeks on a HFF-diet, rats wererandomly assigned to one of the 4 treatment con-ditions: HFF-diet group, HFF-diet group plusyacon (340mg/kg body weight; HFF+Y), HFF-group that began to receive an standard diet (HFF-SD) and HFF group that began to receive an stand-ard diet plus yacon (340mg/kg body weight; HFF-SD+Y). After 8 weeks, it was observed that oraladministration of yacon flour significantly reducedfood intake (HFF: 21.44 ± 1.62 g/day vs. HFF-SD

+ Y: 17.67 ± 1.16 g/day) and food efficiency (HFF:0.213 ± 0.002 vs. HFF-SD+Y: -0,123 ± 0.003);suppressed body weight gain (HFF: 101.03 ± 17.92g vs. HFF-SD + Y: -17.52 ± 10.12 g), decreasedbody mass index (HFF: 0.84 ± 0.01 vs. HFF-SD+Y:0.71 ± 0.07) and visceral fat accumulation. Yaconalso reduced serum free-fatty acid (HFF: 1.10 ±0.13 mmol/l vs. HFF-SD+Y: 0.87 ± 0.15mmol/l),serum triglyceride (HFF:1.71 ± 0.12 g/l vs. HFF-SD+Y: 0.63 ± 0.10 g/l), insulin (HFF: 2.06±0.35ng/ml vs. HFF-SD + Y: 1.37 ± 0.21 ng/ml) andleptin (HFF: 12.52 ± 0.35 ng/ml vs. HFF-SD+Y:8.45 ± 1.07 ng/ml) levels, increasing adiponectin(HFF: 2.86 ± 0.13 ng/ml vs. HFF-SD+Y: 8.21 ±1.06ng/ml) levels compared to the HFF-group.However, no significant changes were observed inserum total cholesterol levels between differentgroups. Urea and transaminases plasma levels werealso reduced by yacon treatment. Histological ex-amination revealed that yacon treatment amelio-rated induced hypertrophy and hyperplasticity ofadipocytes induced by HFF-diet. Our results indi-cated that yacon flour is effective in preventingbody weight gain and fat accumulation protectingagainst features of the metabolic syndrome in diet-induced obese rats. Together, these observationssuggest that yacon root is a potential agent to studyin the management of obesity and related disor-ders.Keywords: yacon roots - obesity - high fat-diet.

A5-28. ESTUDIO GENOTÓXICO DEL EX-TRACTO ACUOSO DE ARISTOLOCHIAMACROURA. G. S. Jaime¹,²*, G. E. Barboza³, M.A. Vattuone4. 1 Instituto de Estudios Vegetales.Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia.Universidad Nacional de Tucumán. Ayacucho 471(4000), Tucumán, Argentina. 2 Universidad Na-cional de Chilecito.La Rioja. 3 IMBIV- Univer-sidad Nacional de Córdoba. 4 CONICET.*[email protected] macroura Gómes, popularmente cono-cida como “mil hombres”, “patito”, “buche de pavo”,entre otros, es una planta que habita la región este ynoreste de la Argentina. Se comercializan en mer-cados, herboristerías y farmacias fragmentos de ta-llos que se utilizan en infusiones por sus propieda-des medicinales tradicionales. Se han informado sususos etnomédicos diversos, como antirreumático,emenagogo, abortivo, anti-inflamatorio y antisépti-

Page 17: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

107

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

co, entre otros. Especies del género Aristolochia sehan informado como drogas tóxicas y se ha demos-trado que el extracto metanólico de hojas tiene efectocitotóxico sobre líneas celulares hepáticas de carci-noma humano, HepG2. En este trabajo se analizalos efectos citotóxico y genotóxico del extracto acuo-so de tallos de A. macroura por medio del Test deAllium cepa, para validar su uso terapéutico tradi-cional. Se evaluó el extracto vegetal en el ensayo decélulas de A. cepa determinando variables como elcrecimiento radicular, el índice mitótico y las abe-rraciones cromosómicas. Todas estas variables fue-ron afectadas al exponer los meristemas radicularesde cebolla a distintas concentraciones de extracto(10, 100, 1 000 y 10 000 ppm) durante 72 horas. Lacitotoxicidad se manifestó en la longitud radicular,que disminuyó más del 50 % en todos los tratamien-tos; se observarone cambios en la morfologíaradicular con ápices espatulados, gruesos ytumoraciones a las mayores concentraciones. En elnivel microscópico se detectaron megacélulas, ma-yor vacuolización, y genotoxicidad con la apariciónde aberraciones cromosómicas a partir de concen-traciones de 100 ppm, tales como cromosomas frag-mentados, puentes y c- mitosis. El índice mitótico(IM) disminuyó de 57 % (100 ppm) a 34 % (10000ppm), y se manifestó significativamente en la inhi-bición del ciclo celular. El extracto de A. macrouramuestra un evidente efecto inhibitorio, en el mode-lo experimental, que tiende a detener la prolifera-ción celular.Palabras clave: citotoxicidad - genotoxicidad -Aristolochia macroura.

A5-29. ESTUDIO GENOTÓXICO DECAESALPINIA PARAGUARIENSIS. G. S. Jai-me1,2*, M. A. Sgariglia1,3, J. R. Soberón1,3, D. A.Sampietro1,3, M. A. Vattuone3. 1 Instituto de Es-tudios Vegetales, Facultad de Bioquímica, Quí-mica y Farmacia, Universidad Nacional deTucumán. Ayacucho 471 (4000), Tucumán, Ar-gentina. 2 Universidad Nacional de Chilecito. LaRioja. 3 CONICET. *[email protected] paraguariensis (D. Parodi) Burkart(Caesalpiniae) es un árbol autóctono de la Argenti-na, cuya corteza es empleada medicinalmente porsus propiedades vulnerarias. Estudios previos indi-can que el extracto etanólico de esta planta escitotóxico sobre larvas de Artemia salina y fuerte-mente genotóxico por Bacillus subtilis Rec-assay.

El propósito de este trabajo fue analizar el efectogenotóxico del extracto etanólico (EECCP) pormedio del Test de Allium cepa (cebolla), buscandoobservar cómo afecta la mitosis y si genera altera-ciones cromosómicas. Se ensayaron distintas con-centraciones de EECCP (10, 100 y 1 000 ppm) y seanalizó el efecto sobre el desarrollo de las raíces decebolla midiendo su longitud. Las alteraciones cau-sadas en la división celular de meristemas apicalesradiculares se analizaron por microscopía óptica, yse obtuvieron preparados a partir de ápicesradiculares teñidos con orceína acética, y posterioraplicación de la técnica squash. Se observaron untotal de 3 500 células/campo para cada una de lasconcentraciones ensayadas. Se evaluaron parámetrosmacroscópicos y microscópicos, como la presenciade cofias desgarradas, necrosis radicular, aberracio-nes cromosómicas, como c- mitosis, cromosomasfragmentados, presencia de puentes . Los resulta-dos obtenidos mostraron que a 100 ppm se produce50 % de inhibición del crecimiento radicular res-pecto del control, establecida como la dosiscitotóxica. A la misma concentración se observóefecto antimitótico, con un IM de 56 %. Además, elIM de cada concentración está relacionado signi-ficativamente con la inhibición en longitud de lasraíces, a 10 ppm: IM 60,54 %, 100 ppm: IM 56 %, 1000 ppm: IM 47,31 %. A 1 000 ppm se observaronaberraciones y anomalías cromosómicas, comopuentes y cromosomas fragmentados. El efectoantimitótico observado permite considerar a EECCPcomo posible agente antitumoral.Palabras clave: genotoxicidad - antimitótico -Caesalpinia paraguariensis.

A5-30. ACTIVIDAD ANTICOLINESTERASADE LOS ALCALOIDES CERNUANOS AISLA-DOS DE LYCOPODIELLA CERNUA (L.),LYCOPODIACEAE. Eduardo L. Konrath1*,Maria G. Ortega2, José L. Cabrera2, Amélia T.Henriques1. 1 Universidade Federal do Rio Gran-de do Sul, Programa de Pós Graduação emCiências Farmacêuticas, 90610-000, Porto Ale-gre, RS, Brazil. 2 Farmacognosia, Departamentode Farmacia. Facultad de Ciencias Químicas,Universidad Nacional de Córdoba, Córdoba,Argentina. *[email protected] plantas de los géneros Huperzia, Lycopodium yLicopodiella (Lycopodiaceae) se caracterizan por surico contenido en alcaloides, muchos considerados

Page 18: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

108

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

potentes inhibidores de la enzima acetilcolinesterasay con potencial uso para la enfermedad deAlzheimer. Este trabajo tiene como objetivo la eva-luación química y biológica de la especie brasileñaLycopodiella cernua (L.), utilizada en la medicinapopular de América del Sur por supuestas activida-des anti-inflamatorias y para tratar el reumatismo.En estudios previos fue demostrada la presencia detriterpenos serratenos y de alcaloides de los gruposcernuano, flabellidano y quinolizidínico. El mate-rial vegetal fue recolectado en Rio Grande do Sul,Brasil, y procesado siguiendo la marcha de extrac-ción ácido-base. El extracto bruto de alcaloides (EA)así obtenido fue analizado por CG-EM, que permi-tió caracterizar las estructuras de los compuestospresentes. Fue evaluada la medición de la actividadacetil (AChE) y buritilcolinesterasa (BChE) del EA,utilizando fisostigmina como inhibidor de referen-cia. El perfil cromatográfico del EA demostró lapresencia de dos alcaloides previamente descritospara la especie, cernuina y licocernuina, que fueronaislados y purificados por cromatografía en capafina. Los resultados obtenidos demuestran un efec-to inhibitorio importante y selectivo para cernuinasobre AChE, mientras que licocernuina no tiene efec-to inhibitorio. Además, ninguno de los alcaloidesmostró inhibición sobre la enzima BChE. La deter-minación de las actividades biológicas en modelosanimales para los productos puros está en progresoen nuestro laboratorio.Palabras clave: alcaloides - Lycopodiaceae - acti-vidad anticolinesterasa.

A5-31. ATIVIDADE HIPOGLICEMIANTE DOCHÁ DE FOLHAS DE MYRCIARIAFLORIBUNDA. Francisco P. Machado1*, Luis A.C. Tietbohl1, Paula C. A. da Silva2, Danielle C.Ribeiro2, Carlos A. S. da Costa2, Leandro Rocha1,Gilson T. Boaventura2. 1 Laboratório de Tecnologiade Produtos Naturais, Faculdade de Farmácia,Universidade Federal Fluminense. Niterói, RJ,Brazil. 2 Laboratório de Nutrição Experimental,Faculdade Nutrição, Universidade FederalFluminense. Rua Mário Santos Braga 30, Niterói,RJ, 24020-140, Brasil. *[email protected] floribunda, pertencente à famíliaMyrtaceae, é uma espécie amplamente distribuídana América Central e do Sul. Na Restinga deJurubatiba (Rio de Janeiro, Brasil), é conhecida po-pularmente como “Camboim amarelo” e possui fru-

tos comestíveis. Estudos fitoquímicos das folhas ecaules tem revelado a presença predominante deflavonóides glicosilados, agliconas e terpenóidesque apresentam atividades biológicas tais comoantiinflamatória, antifúngica, entre outras. Folhasde Myrciaria floribunda foram coletadas no Par-que Nacional da Restinga de Jurubatiba e iden-tificadas. Uma exsicata foi depositada no Herbárioda Faculdade de Formação de Professores (UERJ,Brasil). Ratos machos Wistar com 12 semanas fo-ram divididos em 2 grupos; um grupo controle, tra-tado só com água (C) e outro tratado com chá defolhas de Myrciaria floribunda na concentração de5 % (MF). Após 42 dias de tratamento, os gruposforam sacrificados e a massa corporal, glicemia,órgãos do corpo, análises de soro e os parâmetrosdo fémur foram avaliados. Durante 42 dias, o de-senvolvimento do corpo foi semelhante entre osgrupos. Os grupos apresentaram resultados seme-lhantes referentes à glicemia na primeira semana.Na última semana, o grupo MF mostrou menorglicemia (P < 0,05, -14 %). Dados como dimen-sões ósseas, massa do coração e composição mi-neral foram semelhantes entre os grupos. No en-tanto, o tamanho do fígado foi menor e os rins fo-ram maiores no grupo tratado com o chá. Pode-seconcluir que o chá de folhas da Myrciariafloribunda diminuiu significativamente a glicemiano grupo tratado, além de não ser prejudicial paraa saúde óssea. No entanto, deve ser melhor avalia-do a possibilidade do chá de plantas dessa espéciepoder causar distúrbios hepáticos e dos rins.Palavras chave: Myrciaria floribunda - restinga -hipoglicemia.

A5-32. ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD INMU-NOMODULADORA DE FILIFOLINONA ATRAVÉS DE LA INDUCCIÓN EN LA EXPRE-SIÓN DE CITOQUINAS. Brenda Modak1* , Bea-triz Valenzuela2, Mónica Imarai2 , René Torres1.1 Laboratortio de Química de Productos Natu-rales, Facultad de Química y Biología. Universi-dad de Santiago de Chile. Av. BernardoO’Higgins 3363, Santiago de Chile. 2 Laborato-rio de Inmunología, Centro de BiotecnologíaAcuícola, Universidad de Santiago de Chile. San-tiago de Chile, Chile. *[email protected] pisciculturas están expuestas constantemente aenfermedades infecciosas debido a las intensivascondiciones de producción, bajo las cuales, los

Page 19: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

109

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

microorganismos se desarrollan rápida y fácilmen-te, hecho que provoca serias pérdidas económicas.El uso masivo de antibióticos para su control, hadesarrollado resistencia y su acumulación en elambiente acuático. Es por ello que resulta urgenteel desarrollo de nuevas herramientas farmacológicaspara estimular la producción de una respuesta in-mune protectora en salmónidos que permita com-batir las enfermedades infecciosas. Evaluamos laactividad inmunoestimulante de derivados terpé-nicos aislados de la especie vegetal Heliotropiumfilifolium (Heliotropiaceae). El efecto inmuno-modulador del derivado aromático geraniladofilifolinona fue estudiado in vitro usando la líneacelular SHK-1 derivada de leucocitos de riñón desalmón, e in vivo en especies de salmón atlántico.Para la evaluación estudiamos el efecto de este com-puesto en la expresión de diferentes citoquinas. Losresultados mostraron que filifolinona incrementa losniveles de expresión de citoquinas proinflamatoriasy antiinflamatorias. Los resultados sugieren quefilifolinona es un potencial inmunoestimulante parauso veterinario.Palabras clave: filifolinona - actividad inmunoes-timulante - citoquinas.

A5-33. PROPIEDADES ANTIBACTERIALESDE MIELES MONOFLORALES DERETANILLA TRINERVIA DE LA VI REGIÓNDE CHILE. Gloria Montenegro, C. Astudillo,M. Gómez, A. M. Mujica*. Departamento deCiencias Vegetales, Facultad de Agronomía e In-geniería Forestal, Pontificia Universidad Cató-lica de Chile. Vicuña Mackenna 4860, Macul,Santiago, Chile *[email protected] “tebo” (Retanilla trinervia (Gillies et Hook.)Hook. et Arn.) es una especie endémica del mato-rral esclerófilo del área mediterránea de Chile cen-tral, zona declarada Hotspot de Biodiversidad mun-dial. Corresponde a un arbusto espinoso deciduo deverano que se encuentra principalmente en laderasde exposición norte de cerros ubicados tanto en laCordillera Andina como en la Costera. Apismellifera, (abeja melífera) utiliza su néctar para laelaboración de miel, la cual puede ser monofloral sise realiza una cosecha temprana , ya que en cose-chas tardías se obtienen mieles poliflorales con par-ticipación tanto de especies vegetales nativas comointroducidas. Investigaciones anteriores han proba-do control sobre el crecimiento de bacterias utili-

zando mieles monoflorales de especies endémicascomo “quillay” (Quillaja saponaria) y “ulmo”(Eucryphia cordifolia) en pruebas realizadas in vitro.El objetivo del presente trabajo fue determinar laspropiedades antibacteriales de miel monofloral de“tebo” y sus extractos fenólicos sobre Escherichiacoli, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureusy Pseudomonas aeruginosa mediante el método dedifusión en Agar. En placas de cultivo sembradascon las bacterias seleccionadas se perforaron tresorificios en los cuales se aplicaron muestras de seismieles de “tebo” escogidas previamente. Luego de24 horas de cultivo se midieron los halos de inhibi-ción, y se obtuvieron los mejores resultados para S.aureus. En la evaluación de los extractos fenólicosse midió la mínima concentración inhibitoria de cadaextracto en una placa ELISA y la mínima concen-tración bactericida en un subcultivo en una placa dePetri. Los resultados mostraron inhibición de S.aureus y S. pyogenes y también acción bactericidasobre S. pyogenes.Palabras clave: tebo - actividad antibacterial - mielmonofloral.

A5-34. ESTUDIO SOBRE ACTIVIDAD AN-TIVIRAL IN VITRO DE EXTRACTOSDE GALIUM LATORAMOSUM CLOS(RUBIACEAE). María L. Mugas1,2*, Brenda S.Konigheim1,2, Laura Rojas3, Juan J. Aguilar1,2,M Jacqueline Joseau3, Marta S. Contigiani2, Su-sana C. Núñez Montoya1,2. 1 IMBIV, CONICETy Farmacognosia, Departamento de Farmacia,Facultad de Ciencias Químicas, UNC. Haya dela Torre y Medina Allende, Ciudad Universita-ria, Córdoba, Argentina. 2 Instituto de Virología“Dr. J. M. Vanella”, Facultad de Ciencias Médi-cas, UNC. Córdoba, Argentina. 3 Silvicultura,Facultad de Ciencias Agropecuarias, UNC. Cór-doba, Argentina. *[email protected] latoramosum Clos (Rubiaceae) es una hier-ba o subarbusto que se encuentra en el centro y nor-te de la Argentina, conocido popularmente como“chipe-chape” y utilizado en medicina tradicionalcomo inductora de aborto y anticonceptiva. Estaespecie pertenece a un género que se caracteriza porcontener metabolitos secundarios bioactivos; sinembargo, hasta el momento, no ha sido estudiadaen cuanto a su contenido químico. Si bien solo seha informado la actividad antifúngica in vitro de suspartes aéreas, no se han encontrado estudios de

Page 20: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

110

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

actividad antiviral. Por lo tanto, el objetivo de estetrabajo fue evaluar el efecto antiviral in vitro deextractos obtenidos a partir de las raíces deG.latoramosum sobre los virus herpes simple tipo 1(HSV-1) y encefalitis equina venezolana (VEEV).A partir de las raíces de esta especie vegetal se ob-tuvieron extractos con solventes de polaridad cre-ciente, mediante un aparato soxhlet: benceno (Ben),acetato de etilo (AcOEt), etanol (EtOH) y agua (Aq).Los ensayos biológicos se realizaron sobremonocapas de células Vero, utilizando el métodode captación de rojo neutro (RN). Mediante las cur-vas de viabilidad celular vs. concentraciones de cadaextracto, se determinó la concentración que afectaal 20 % y al 50 % de las células (concentraciónsubtóxica y CC50), y la máxima concentración nocitotóxica (MCNC). Para evaluar la actividadantiviral de los extractos, se eligieron 7 concentra-ciones ≤ a la MCNC. Los resultados se graficaroncomo porcentaje de inhibición de virus (%I) vs. con-centraciones ensayadas, y se estimó la concentra-ción que inhibe el 50 % (CI50). Para el ensayo decitotoxicidad y de actividad antiviral, tanto las con-centraciones testeadas de cada extracto como losrespectivos controles (celulares y virales) se eva-luaron por triplicado. De los extractos evaluados, elúnico que evidenció actividad fue el extracto AcOEt,capaz de inhibir al virus HSV-1 (56,0 ± 0,4 %) a suMCNC (30µg/ml). Esto motiva a purificar e identi-ficar los metabolitos responsables del efecto exhi-bido por este extracto.Palabras clave: Galium latoramosum Clos -actividadantiherpética - HSV-1.

A5-35. EVALUACIÓN DE LA CAPACIDADANTIOXIDANTE DE EXTRACTOS ETA-NÓLICOS DE DOS ESPECIES DE LA FAMI-LIA VERBENACEAE. María B. Núñez*, CarlosA. Vonka, Alberto J. Bela, Edit G. Sánchez, Cris-tina M. Pérez-Zamora, María I. Aguado. Labo-ratorio de Farmacognosia y Farmacotecnia, De-partamento de Ciencias Básicas y Aplicadas, Uni-versidad Nacional del Chaco Austral. Comandan-te Fernández N° 755 (3700), Sáenz Peña, Chaco,Argentina. *[email protected] actividad antioxidante puede determinarse pormétodos in vitro como el del radical catión 2,2'-azino-bis-(3-etillbenzotiazolin-6-sulfonico) ABTS.+,un cromógeno que pierde el color de forma propor-cional a la concentración del agente antioxidante que

se adiciona en el sistema. Los polifenoles muestranuna gran capacidad para captar radicales libres cau-santes del estrés oxidativo. El propósito del trabajofue determinar la capacidad antioxidante de extrac-tos etanólicos de dos especies Verbenaceae por elmétodo ABTS.+ y su relación con el contenido defenoles. El material vegetal fueron las hojas ysumidades floridas de Aloysia polystachya (Griseb.)Moldenke y de Lippia turbinata (Griseb.). El mate-rial fue colectado en verano, desecado durante 7 díasbajo techo en un ambiente aireado e higiénico y pro-cesado a un tamaño entre 840 y 1680 micras. Luegose prepararon extractos fluidos por lixiviaciónhidroalcohólica simple empleando etanol de 70°,previa humectación por 24 horas. Medianteespectrofotometría se determinó el contenido defenoles totales con el reactivo Folin-Ciocalteau, laconcentración inhibitoria 50 y la capacidadantioxidante equivalente a Trolox (TEAC) con elradical ABTS.+. Los valores de fenoles totales seexpresaron en miligramos equivalentes a ácido gá-lico. Los ensayos se realizaron por triplicado y losresultados se evaluaron por estadística descriptiva.El extracto de A. polystachya presentó un conteni-do de fenoles totales de 2,35 ± 0,03 mg EAG/mlextracto, concentración inhibitoria (IC50) 0,86 µgEAG/ml de reacción y TEAC de 9,30 ± 0,29 mg detrolox/ml extracto; mientras que L. turbinata tuvoun contenido de fenoles de 1,29 ± 0,02 mg EAG/mlextracto, IC50 de 0,954 µg EAG/ml de reacción yTEAC de 3,66 ± 0,01 mg de trolox/ml extracto. Demodo exploratorio, para establecer la relación de laactividad antioxidante con los componentespolifenólicos en ambos extractos, se realizaronautografías en cromatofolios de silicagel utilizandoel sistema tolueno-acetato de etilo-ácido acético(36:12:5) y rociado de la placa con solución deABTS.+. El revelado presentó cuatro bandas de com-ponentes flavonoides con actividad antioxidante. Lastécnicas de cromatografía en capa fina y desplaza-miento de bandas por espectrofotometría UV-visi-ble sugieren que los compuestos pertenecen a losgrupos flavonoles y flavonas.Palabras clave: Aloysia polystachya - Lippiaturbinata - polifenoles.

A5-36. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEEXTRACTOS HIDROALCOHÓLICOSDEL TÚBER DE DOS ESPECIES DELOPHOPHYTUM. María B. Nuñez1*, Cynthia

Page 21: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

111

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

N. Sánchez1, María J. Viviani1, Carola A. Torres1,Héctor Sato2, Ana M. González1,2. 1 Laboratorio deFarmacognosia y Farmacotecnia, Departamentode Ciencias Básicas y Aplicadas, Universidad Na-cional del Chaco Austral. Comandante FernándezN° 755 (3700), Presidencia Roque Sáenz Peña,Chaco, Argentina. 2 Instituto de Botánica del Nor-deste. Universidad Nacional del Nordeste. Co-rrientes, Argentina. *[email protected] (Balanophoraceae) es un género deplantas holoparásitas sin clorofila y parásitas de raí-ces de ciertas Fabaceae. Presentan un cuerpovegetativo o túber del cual emergen inflorescencias,carecen de diferenciación de tallo, raíz y hojas. Enla Argentina crecen Lophophytum leandri Eichler(Corrientes y Misiones) y L. mirabile Schott & Endl.subsp. bolivianum (Wedd.) B. Hansen (Salta yJujuy). Lophophytum leandri (“flor de piedra”) esusada como diurética y hepática, mientras que L.mirabile (“batata de escamas”) es usada para icteri-cia. Debido a la escasez de estudios sobre actividadbiológica en estas especies, hemos determinado pre-viamente la concentración de fenoles totales y rea-lizado un tamizaje fitoquímico. El objetivo de estetrabajo ha sido determinar el contenido de flavo-noides y evaluar la actividad antioxidante de tintu-ras preparadas en etanol de 80° a partir del túberdesecado y molido (polvo grueso) de L. leandri yde L. mirabile. Para la determinación de flavonoidesse usó espectrofotometría UV-visible y tricloruro dealuminio. Para determinar la actividad antioxidantese utilizaron las técnicas de decoloración del radi-cal libre 1,1-difenil-2-picrilhidrazilo (DPPH•) y delradical catión del ácido 2,2’-Azinobis-(3-etiben-zotiazolin-6-sulfónico) (ABTS•+), las cuales permi-tieron evaluar la actividad antirradicalaria, y la téc-nica de co-oxidación del sistema micelar β-caroteno-ácido linoleico. Los valores de flavonoides fueronde 57,90 µg equivalentes de quercetina/ml de tintu-ra (EQ/ml) para L. leandri y de 98,29 µg EQ/mlpara L. mirabile. La actividad antirradicalaria seexpresó como IC50 en µg EQ/ml y los valores fue-ron 0,25-1,61 con DPPH y 0,03-0,21 con ABTS paraL. leandri y L. mirabile, respectivamente. La acti-vidad antioxidante por decoloración del β-carotenofue de 33 % para L. leandri y 55 % para L. mirabile,mostrando un efecto moderado comparado conbutilhidroxitolueno (92 % a concentración de 0,1%). Los resultados indican que a mayor contenidode flavonoides mayor actividad antioxidante. Sin

embargo, L. leandri presentó IC50 menor lo querepresenta mejor actividad antirradicalaria a menorcontenido de flavonoides, debido probablemente aotros fenoles captadores de radicales libres. Estosson los primeros datos de actividad antioxidante paraambas especies y podrían explicar su uso popular,considerando el rol de los antioxidantes naturalesen la hepatoprotección.Palabras clave: Lophophytum leandrii - Lophophytummirabile - flavonoides.

A5-37. INHIBICIÓN DE FACTORES DEPATOGENICIDAD DE CANDIDA ALBICANSPOR ZUCCAGNIA PUNCTATA. G. Nuño1, I. C.Zampini1,2, M. R. Alberto1,2, A. S. Cuello1, R. M.Ordoñez1,2, M. I. Isla1,2*. 1 Universidad Nacionalde Tucumán. 2 INQUINOA-CONICET, SanLorenzo 1469 (4000) Tucumán, Argentina.*[email protected] ha informado una gran cantidad de infeccionesfúngicas producidas por levaduras del géneroCandida. La virulencia de estas levaduras se atribu-ye a varios factores que actúan de forma combina-da, como la producción de exoenzimas y la forma-ción de biofilm. Por ello, es importante encontrarnuevas sustancias capaces de inhibir no solo el cre-cimiento fúngico sino también la producción de fac-tores de virulencia. El objetivo del trabajo fue eva-luar el efecto de extractos de Zuccagnia punctataCav sobre factores de virulencia de Candidaalbicans (biofilm, producción de hemolisinas,fosfolipasa y formación de tubo germinativo). Seprepararon extractos hidroalcohólico y dicloro-metánico a partir del material seco y triturado deZuccagnia punctata (“jarilla pispito”, “puspus” y“jarilla macho”). En todos los casos el efecto de losextractos sobre la producción de factores de viru-lencia se realizó poniendo los microorganismos endiferentes condiciones de cultivo en presencia yausencia de diferentes concentraciones de extrac-tos. La formación de biofilm de C. albicans se pusode manifiesto mediante ensayos espectrofoto-métricos de reducción de sal de tetrazolium a 492nm. La formación de tubo germinativo por C.albicans se realizó a 37 °C en medio que conteníasuero humano. El recuento de células que presentantubo germinativo se realizó en cámara de Neubauerutilizando un microscopio óptico. El efecto sobre laproducción de fosfolipasa se realizó en un medio decultivo adicionado con yema de huevo y se midió el

Page 22: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

112

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

halo de precipitación. El efecto sobre la producciónde hemolisinas se realizó midiendo el halo dehemólisis en medio agarizado que contenía sangrede carnero. Los resultados obtenidos indican queambos extractos de Zuccagnia punctata tienen ca-pacidad para inhibir la formación de biofilm por C.albicans y contribuyen además, a la erradicacióndel biofilm ya formado al disminuir el metabolismoy biomasa celular en el mismo, el extractodiclorometánico fue más potente. El extractoetanólico fue más efectivo para inhibir las enzimashemolíticas mientras que el extracto diclorometánicoresultó más inhibitorio para la enzima fosfolipasa yen la formación de tubo germinativo. Sobre la basede los resultados podemos sugerir la utilización deZuccagnia punctata en micosis producidas porCandida albicans.Palabras clave: tubo germinativo - exoenzimas -biofilm.

A5-38. EFECTO INHIBITORIO DE ACEITESESENCIALES DE ORIGANUM VULGARE YTHYMUS VULGARIS SOBRE LA PRODUC-CIÓN DE BIOFILM EN PSEUDOMONASSYRINGAE FITOPATÓGENAS. María de lasM. Oliva*, Milena V. Giuliano, María E.Carezzano, Yesica P. Zaio, Walter Giordano,Mirta S. Demo. Departamento de Microbiolo-gía e Inmunología. Facultad de Cs. Ex, Fco.-Qcas. y Nat. Universidad Nacional de Río Cuar-to. Ruta 36 km 601, Río Cuarto, Córdoba, Ar-gentina. *[email protected] pocas medidas efectivas de control demicroorganismos fitopatógenos. Los tratamientoscon antibióticos o sales de cobre no tienen demasia-da eficacia y son tóxicos ambientales. Una alterna-tiva son las sustancias naturales, tales como los acei-tes esenciales (AE). Las bacterias fitopatógenas pro-ducen biofilm como estrategia de colonización paracomenzar el ciclo de enfermedad. Está formado porcomunidades bacterianas adheridas a una superfi-cie y embebidas en una matriz de exopolisacáridos.Es el primer paso en la patogénesis, y la agregacióncelular promueve la virulencia y la protección con-tra las respuestas de defensa de la planta. En el pre-sente estudio se evaluó la capacidad de AE del oré-gano y el tomillo de inhibir el biofilm producidopor 6 cepas de P. syringae aisladas de soja y de re-ferencia (P61 y DC3000). Se evaluó la formación yla inhibición de biofilm por la técnica de cristal vio-

leta. Se determinó la concentración inhibitoria mí-nima (CIM) por técnica de microdilución en caldoy la concentración bactericida mínima (CBM). To-das las cepas fueron productoras de biofilm, la for-mación fue detectada a las 8 horas de incubación, yse observó concentraciones variables que dependíande las cepas. Los AE presentaron actividadinhibitoria sobre las cepas analizadas. Los valoresde CIM para tomillo estuvieron entre 1,4 y 11,5 mg/mL. y para orégano, entre 5,8 y 46,3 mg/mL. Dosissub-inhibitorias de AE redujeron significativamentela producción de biofilm a las 8, 24, 36 y 48 horas.No se observó producción de biofilm cuando fue-ron expuestas a la CIM de ambos AE. La efectivaactividad antibacteriana que tienen estos AE, y laimportancia de la inhibición total de la formaciónde biofilm a dosis subletales constituyen una alter-nativa promisoria para el tratamiento de enferme-dades bacterianas de cultivos de soja, hortalizas, fru-tales, legumbres, cereales, ornamentales, y además,de que estos productos naturales no generan resis-tencia bacteriana, ni eliminan residuos tóxicos alambiente.Palabras clave: biofilm - aceites esenciales -Origanum vulgare - Thymus vulgaris - Pseudomonassyringae fitopatógenas.

A5-39. DETERMINACIÓN DE CONDICIONESÓPTIMAS DE CULTIVO DE PSEUDOMONASFLUORESCENS, CEPA BIOTRANSFOR-MANTE DEL ACEITE ESENCIAL DEALOYSIA TRIPILLA. María de las M. Oliva1*,Yesica P. Zaio1, Mauro N. Gallucci1. María ECarezzano1, Milena V. Giuliano1, Julio A. Zygadlo2,Mirta S. Demo1. 1 Departamento de Microbiolo-gía e Inmunología. Facultad de Ciencias Exactas,Físicoquímicas y Naturales, Universidad Nacio-nal de Río Cuarto. Ruta 36 km 601, Río Cuarto,Córdoba, Argentina. 2 Cátedra de Química Orgá-nica, Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Na-turales. Universidad Nacional de Córdoba. Cór-doba, Argentina. *[email protected] plantas aromáticas producen aceites esenciales(AE), los cuales son utilizados por bacterias epifitaspara ser reconvertidos en una amplia variedad decompuestos contribuyendo a ampliar el número denuevas moléculas naturales con distintas propieda-des biológicas. Las variaciones del ambiente y delos parámetros nutricionales influyen tanto en elcrecimiento como en la ruta metabólica. El estado

Page 23: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

113

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

fisiológico de la biomasa celular tiene efectos di-rectos en la bioconversión, cuando las células cre-cen en condiciones óptimas. P.fluorescens es resis-tente a numerosos AE y tiene la capacidad de utili-zar terpenos como única fuente de carbono. Estegrupo de investigación logró aislar una bacteria iden-tificada como P.fluorescens de acuerdo con su RNA16s, presente en la filósfera de A.triphylla capaz demodificar el AE exudado por la misma planta aro-mática. Se evaluó el crecimiento de P.fluorescensen diferentes condiciones de cultivo: temperatura(28 ºC, 37 ºC y 42 ºC), fuente de nitrógeno (mediomineral (MM) + extracto de levadura, MM+ KNO3,MM + ClNH4), pH (5 a 9) y fuente de carbono (MM+ 1 % glucosa, MM + 0,1 %glucosa + 1 % AE, MM+ 1 % AE). El crecimiento microbiano se midiómediante espectrofotometría a 620nm. La tempera-tura óptima de crecimiento en caldo tripticasa soya(CTS) fue de 28 ºC. El pH fue evaluado a 28 ºC endiferentes medios de cultivo y el óptimo fue 6. Lafuente óptima de nitrógeno fue extracto de levadurapresentando menor desarrollo en medios sintéticos.Las fuentes de carbono fueron evaluadas a 28 ºC,pH 6 y 7. En el MM no se observó desarrollo, mien-tras que en los medios con fuente de carbono orgá-nica hubo crecimiento inclusive solo con AE. Lasvelocidades de crecimiento (k) y los tiempos de ge-neración (tg) fueron para: CTS: k = 0,30g/h; tg =3,3h; MM + glucosa: k = 0,27g/h y tg = 3,70h yMM + AE: k = 0,35g/h, tg = 2,85 h. Los mejoresvalores de k y tg fueron con AE como única fuentede carbono, demostrando que esta especie vive aexpensas de la sustancia existente en su medio na-tural. Esto indicaría la presencia de vías metabólicasdegradadoras de estos sustratos, que producen in-termediarios útiles e interesantes y con aplicaciónbiotecnológica.Palabras clave: Pseudomonas fluorescens - aceiteesencial - Aloysia triphylla.

A5-40. INVOLVEMENT OF 5HT1A RECEPTORSIN THE ANXIOGENIC-LIKE EFFECT OF THEUNCARIA TOMENTOSA (WILLD) DC AQUE-OUS EXTRACT. María Julia Ortiz1, A. Ponce2,C. Bregonzio3, G. Baiardi1*. 1 Laboratorio deNeurofarmacología. Facultad Ciencias Químicas.Universidad Católica de Córdoba. Instituto deInvestigaciones Biológicas y Tecnológicas (IIBYT-CONICET-Universidad Nacional de Córdoba).Av. Armada Argentina 3555 (5017), Córdoba, Ar-

gentina. 2 Instituto de Fisiología Humana. Facultadde Ciencias Médicas. Universidad Nacional deCórdoba. Córdoba, Argentina. 3 IFEC-CONICET-Departamento Farmacología, Facultad CienciasQuímicas, Universidad Nacional de Córdoba.Córdoba, Argentina. *[email protected] aqueous extract of Uncaria tomentosa (EUT)prepared by decoction of the root and stem bark isused in the treatment of several diseases. There isevidence showing the interaction of the extract com-ponents with serotonin receptors. Particularly, the5HT1A receptors strongly involved in the etiologyof anxiety and depression disorders. The aim of thepresent work was to study the involvement of 5HT1Areceptors in the anxiogenic-like effect induced bythe aqueous extract of Uncaria tomentosa and theinfluence of estrous cycle. Female albino swiss micestereotaxically implanted with bilateral stainless-steel cannuli into lateral ventricles were used. Dur-ing 20 days, the mice were orally administered withwater or EUT. It was used NAN 190 described as5HT1A autoreceptors partial agonist and 5HT1A post-synaptic receptor antagonist. The animals receiveda 1 µl intracerebroventricular injection of vehicleor NAN 190 (0.10 µg/µl o 0.25 µg/µl). Five min-utes later, the mice were tested in the elevated plusmaze. The results obtained showed a significantanxiogenic effect induced by EUT and the higherdose of NAN 190 during the estrous although nodifferences were found when NAN 190 was admin-istered in EUT treated animals. In the diestrous stage,the low dose of NAN 190 induced an anxiolytic ef-fect and this response was blunted in EUT treatedanimals. Interestingly, an anxiolytic effect was foundwith the higher dose of NAN 190 in EUT treatedanimals. Our findings support a differential actionof EUT depending on estrous cycle that could beexplained as a desensitization of the 5HT1Aautoreceptor induced by estrogen. Since theanxiogenic effect of EUT is observed only underdesensitization conditions of 5HT1A autoreceptors,it was concluded that EUT could induce anxietythrough an indirect stimulation of the raphe nucleus.Keywords: Extract of Uncaria tomentosa - 5HT1Areceptors - anxiety.

A5-41. ACTIVIDAD INSECTICIDA Y REPE-LENTE DE EXTRACTO DE HOJAS DEFORTUNELLA SPP. CONTRA SITOPHILUSGRANARIUS. Valeria E Palmieri1*, Gabriel

Page 24: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

114

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

Bettucci1, Adriana Cortadi1, Enrique L. Larghi2,María L Martínez1. 1 Área Biología Vegetal. Fa-cultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuti-cas, Universidad Nacional de Rosario. Suipacha531 (S2002LRK), Rosario, Santa Fe, Argenti-na. 2 Área Química Orgánica. Facultad de Cien-cias Bioquímicas y Farmacéuticas, UniversidadNacional de Rosario, Santa Fe, Argentina.*[email protected] presencia de insectos en granos almacenados traecomo consecuencia la pérdida de la calidad del gra-no, tanto para el consumo humano como para suuso posterior. Para disminuir estas pérdidas son uti-lizadas medidas de control basadas en la aplicaciónde insecticidas químicos sintéticos. El uso extensi-vo e indiscriminado de estos compuestos ha ocasio-nado contaminación ambiental, la resistencia a pla-gas y efectos tóxicos sobre otros organismos, de aquíla necesidad de contar con otras alternativas para elcontrol de plagas. Los plaguicidas botánicos sonindicados para el uso en la producción orgánica dealimentos y la protección poscosecha. La familiaRutaceae incluye especies usadas tradicionalmentecomo pesticidas. El objetivo de este estudio fue de-terminar la actividad insecticida y repelente de ex-tractos de las hojas de Fortunella sp. contraSitophilus granarius (plaga primaria del trigo). Elbioensayo se efectuó con ejemplares de Sitophilusgranarius. 30 adultos fueron utilizados en cada prue-ba e incubados con trigo previamente tratado condistintas concentraciones de extracto o solo solven-te como control. La mortalidad fue registrada dia-riamente durante 7 dias y se calculó el % de efica-cia = b - k / 10 - k donde b = % de individuos muer-tos en caja tratada y k = % de individuos muertos encaja testigo. Se realizaron también análisisfitoquímicos de los extractos mediante cromato-grafía en capa delgada (CCD) y cromatografía ga-seosa acoplada a masa (GC-MS). El extracto pre-senta actividad insecticida contra la plaga, alcan-zando el 100 % de mortalidad a las 2horas con 140mg del mismo, y a las 48horas con 70mg. Por otrolado, no se detectó actividad repelente. El análisispor CCD mostró la presencia de flavonoides yterpenos. Estos compuestos fueron extraídos de laplaca cromatográfica y analizados mediante GC-MS.Se han identificado los compuestos alfa-eudesmol,beta-eudesmol, los sesquiterpenos cubenol ymuureleno y beta-cariofileno. Además, se detectóen el extracto total óxido de cariofileno que se ha

degradado durante la purificación cromatográfica.Palabras clave: Fortunella sp. - aceites esenciales -Sitophilus granarius.

A5-42. BIOPESTICIDAS DE ORIGEN VEGE-TAL. ACTIVIDAD BACTERICIDA DE LOSEXTRACTOS DE CASTELA COCCINEA YPICRAMNIA SELLOWII CONTRAXANTHOMONAS CITRI SUBSP. CITRI TIPOA. Valeria E Palmieri1*, María V Rodríguez1,María N Campagna1, Osvaldo Di Sapio1, ElenaOrellano2, María L Martínez1. 1Área Biología Ve-getal, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Far-macéuticas, Universidad Nacional de Rosario.Suipacha 531 (S2002LRK), Rosario, Santa Fe,Argentina. 2Área Biología Molecular, Facultadde Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Uni-versidad Nacional de Rosario. Rosario, Santa Fe,Argentina. *[email protected] cancrosis de los cítricos, causada por la bacteriaXanthomonas citri subsp. citri tipo A (‘Xac’), esconsiderada una amenaza para la industria citrícola.Esta enfermedad tiene un fuerte impacto sobre elvalor y la comercialización de los frutos en los mer-cados internacionales. En la actualidad existe unacreciente demanda para la producción orgánica queno permite el uso de plaguicidas químicos sintéti-cos. La necesidad de contar con alternativas para elcontrol de plagas menos contaminantes promueveel aprovechamiento sostenible de nuestra flora comofuentes de materia prima para la producción debactericidas naturales. La familia Simaroubaceaeincluye especies tradicionalmente utilizadas comoplaguicidas botánicos. En este trabajo se evaluó laactividad bactericida de extractos de dos especiesque pertenecen a esta familia: Castela coccinea yPicramnia sellowii. Las hojas y la madera fueronextraídas con diclorometano. La actividad anti-bacteriana se evaluó mediante el método demicrodilución en medio líquido; para ello, se utili-zó una suspensión de Xac (109 CFU/mL) que se in-cubó con diferentes concentraciones del extracto osolvente durante 24 h a 28 ºC., y se midió la dismi-nución de la absorvancia. Se realizaron tambiénanálisis fitoquímicos de los extractos mediantecromatografía en capa delgada (CCD), croma-tografía líquida de alta performance (HPLC) ycromatografía gaseosa acoplada a masa (GC-MS).Los extractos presentan actividad antibacteriana atodas las concentraciones ensayadas. El extracto más

Page 25: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

115

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

activo fue el de hoja de C. coccinea que alcanza 80% de inhibición a 200µg/ml. Por CCD, se detecta-ron antraquinonas y compuestos fenólicos en P.sellowii y terpenoides, cumarinas y alcaloides en C.coccinea. El análisis mediante HPLC mostró la pre-sencia de ácido clorogénico, y compuestos con elcromóforo de aloína y emodina en P.sellowii. Por elcontrario, en C. coccinea se detectó la presenciaescopoletina y un compuesto con un cromóforo iguala la boldina. En el análisis por GC-MS de C.coccinea se detectaron 8 compuestos hidrofóbicoscon una masa entre 380 y 450 cuyos espectros mues-tran similitudes con los triterpenos.Palabras clave: biopesticida - Simaroubaceae -Xanthomonas citri.

A5-43. EFECTO DE UN FLAVONOIDE PRENI-LADO DE DALEA ELEGANS SOBRE ELESTRÉS OXIDATIVO Y EL TRANSPORTEACTIVO EN BIOFILMS DE CANDIDAALBICANS. Mariana A. Peralta1*, María A. daSilva2, María G. Ortega1, José L. Cabrera1, Cris-tina Pérez3, María G. Paraje2. 1 Farmacognosia eIMBIV-CONICET, Departamento de Farmacia,Facultad de Ciencias Químicas, UNC. Haya dela Torre y Medina Allende (X5000HUA), CiudadUniversitaria Córdoba, Argentina. 2 Microbio-logía Farmacéutica. IMBIV-CONICET. De-partamento de Farmacia, Facultad de CienciasQuímicas, UNC. Córdoba. Argentina.3 Farmacología, Facultad de Odontología, Uni-versidad de Buenos Aires. CABA, Argentina.*[email protected] resistencia múltiple a drogas (MDR) en cepasfúngicas es efectuada por la sobreexpresión de trans-portadores de membrana. En estudios previos reali-zados sobre una cepa de C. albicans (CaR) resis-tente a fluconazol por sobreexpresión de transpor-tadores, demostramos que el flavonoide 2’,4’-dihidroxi-5’-(1’’’,1’’’-dimetilalil)-8-prenilpi-nocembrina (8PP) aislado de raíces de Dalea elegansGillies ex Hook et Arn (Fabáceas), inhibió las bom-bas de eflujo y combinado con fluconazol, revirtióla resistencia en esta cepa. Otra forma de resisten-cia a antifúngicos, es la formación de biofilms, dondelas células se adhieren irreversiblemente a una su-perficie y se recubren de una sustancia exo-polisacárida. En este trabajo el objetivo fue estu-diar la actividad de 8PP sobre el estrés oxidativo ylos transportadores de membrana (MDR) en las cé-

lulas de C. albicans agrupadas en biofilms. La for-mación del biofilms se realizó en placa de 96-poci-llos y se cuantificó por tinción con cristal violeta,definiendo la Unidad de Biomasa del Biofilms(UBB) como 1UBB = 0,1Abs595nm. Se utilizó unacepa sensible (CaS) y otra resistente a fluconazol(CaR) por transportadores de eflujo. Para evaluar elestrés oxidativo en biofilms, se midió el aniónsuperóxido mediante la reacción colorimétrica conNBT y la capacidad antioxidante total del biofilmspor la metodología FRAP (ferric reductionantioxidant power). Para valorar el funcionamientode los transportadores en células del biofilms se uti-lizó citometría de flujo. Se midió la fluorescenciacaptada por las células (M1) durante la incubacióncon Rodamina 6G (R6G), se realizó una segundaincubación sin R6G para que actúen los transporta-dores, y se midió la fluorescencia remanente en lascélulas (M2). La diferencia entre M1 y M2 repre-senta el eflujo de R6G. Se observó que la presenciade 8PP (50 µM) inhibió las unidades de biomasadel biofilms (UBB) incrementando las especiesreactivas del oxígeno y la capacidad antioxidantetotal del sistema con respecto al control. La reduc-ción del biofilms fue mayor en CaS que en CaR (80% y 34 % de inhibición respectivamente). En cuan-to al funcionamiento de los transportadores en cé-lulas del biofilms, los resultados muestran que en lacepa CaS, el eflujo de R6G en células del biofilmsfue mayor que en el estado planctónico (97,92 % y28,6 % de eflujo de R6G respectivamente). Estoindica un aumento de la actividad de transporte du-rante la formación del biofilms de CaS. El eflujo enla cepa CaR, fue similar comparando células delbiofilms y en estado planctónico (90 % y 95 % deeflujo de R6G, respectivamente). En conclusión, 8PPinhibe el biofilms de C. albicans, tanto sensiblecomo resistente a fluconazol, incrementando elestrés oxidativo. La inhibición que este flavonoideprenilado ejerce sobre los transportadores de eflujopodría potenciar su acción de reducción del biofilms.Palabras clave: Dalea elegans - flavonoideprenilado - biofilms.

A5-44. FRACCIONAMIENTO GUIADO PORFOTOACTIVIDAD DE EXTRACTOS DEPOROPHYLLUM OBSCURUM. Agustina Pos-tigo1, Elisa Petenatti2, Susana Zacchino1,Maximiliano Sortino1*. 1 Farmacognosia, Facul-tad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas,

Page 26: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

116

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

Universidad Nacional de Rosario, Suipacha 531(2000), Rosario, Santa Fe, Argentina. 2 Herbariode la Universidad Nacional de San Luis. San Luis,ArgentinaAlgunas plantas producen, como protección frentea patógenos y predadores, moléculas fotosensi-bilizantes (FS) que, al ser excitadas por luz de unadeterminada longitud de onda, ejercen efectos tóxi-cos sobre las biomoléculas y las células, destruyén-dolas. La quimioterapia fotodinámica antimicro-biana (QTFA) es una opción terapéutica reciente-mente desarrollada que utiliza moléculas FS parainducir un daño oxidativo en patógenos microbianos.Tiene muchas ventajas frente a los tratamientosantifúngicos tradicionales, tales como amplio espec-tro de acción, baja probabilidad de generación decepas resistentes, mínimo daño a tejidos sanos delhospedero y compatibilidad con otras terapiasantifúngicas. El objetivo del presente trabajo fuedetectar compuestos FS en Porophyllum obscurum(Spreng) DC. El que es un subarbusto aromáticonativo de América (nombre común “yerba del ve-nado”) perteneciente a la tribu Helenieae de la fa-milia Asteraceae. Habita el centro y norte de la Ar-gentina. Partes aéreas de P. obscurum, recolectadoen El Volcán (San Luis), se extrajeron por mace-ración con hexano, diclorometano, acetato de etiloy metanol. Los extractos se evaluaron por el méto-do de microdilución en caldo de CLSI, modificadopara detectar fotoactividad antifúngica. El ensayose realizó en microplacas por duplicado. Despuésde agregar el inóculo de Candida albicans ATTC10231, una de ellas se irradió con luz UV de 350nm y la otra, no. Luego, ambas se incubaron 24 h enoscuridad a 28 ºC. Los extractos hexánico ydiclorometánico demostraron actividad FS con con-centraciones inhibitorias mínimas (CIMs) de 3,91 y7,81 µg/mL, respectivamente luego de la irradia-ción, mientras que fueron inactivos (CIM > 1000µg/mL) en oscuridad. El extracto diclorometánicofue sometido a cromatografía en columna y se ob-tuvieron 17 fracciones. De las fracciones 1 y 7 seaislaron los compuestos FS, 2,2’:5’,2”-tertiofeno (1)y 5-(4-hidroxi-1-butenil)-2,2’-bitiofeno (2) respec-tivamente.Palabras clave: Porophyllum obscurum - fotosen-sibles - antifúngica.

A5-45. NUEVA FITOPROTEASA DEPHYTOLACCA DIOICA Y SU ACCIÓN

HIDROLÍTICA SOBRE SUERO LÁCTEO.Anabela Prospitti, María E. Errasti, MarceloF. Pardo, Claudia L. Natalucci*. LIProVe, De-partamento de Ciencias Biológicas, Facultadde Ciencias Exactas, UNLP. Calle 115 s/n(1900), La Plata, Buenos Aires, Argentina.*[email protected] proteasas conforman el grupo de enzimas másutilizado en la industria. La gran mayoría es de ori-gen bacteriano pero las proteasas vegetales siguensiendo preferidas en ciertos procesos. El número deproteasas vegetales aisladas y caracterizadas es muybajo y solo un 1 % de las especies vegetales conoci-das ha sido estudiado. Uno de los procesos en losque participan las proteasas es el reciclado de mate-rial de desecho de la industria alimentaria. Un ejem-plo de este tipo de material es el suero lácteo (pro-ducto de descarte de la industria quesera). Su po-tencial reutilización sería beneficiosa tanto para laeconomía como para el medio ambiente. Ante lanecesidad de hallar nuevas proteasas con caracte-rísticas diferenciales, hemos obtenido un extractoproteolítico a partir de frutos de Phytolacca dioicaL., comúnmente llamada “ombú”. El “ombú” es unaplanta arborescente nativa de la pampa argentina yuruguaya, perteneciente a la familia Phytolaccaceae,de la cual han sido estudiadas ampliamente lasproteasas de frutos de P. americana L. El objetivode este estudio fue analizar la actividad hidrolíticade ese extracto sobre suero lácteo comercial. Paraello, a partir de los frutos maduros de P. dioica seobtuvo un extracto que contiene fitoproteasascisteínicas. Fue parcialmente purificado por preci-pitación fraccionada con solvente orgánico y luegocaracterizado. Presentó una actividad caseinolíticade 2,0 Ucas/mg y su máximo efecto fue alcanzadoen un rango de pH entre 6,5 y 8,0. Demostró sermuy resistente a la temperatura, conservando un 10% de actividad caseinolítica luego de una hora deincubación a 70 °C. Se hidrolizó suero lácteo co-mercial utilizando el extracto proteolítico, y se de-terminó el grado de hidrólisis (%GH = 5) mediantela técnica del pH-stat. Se analizó la actividadantioxidante de los hidrolizados por el método dedepuración de radicales libres utilizando DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidracilo), y se obtuvo mayor depu-ración que con el suero. Así, los hidrolizados obte-nidos probaron tener mayor capacidad antioxidanteque el material de origen, y pueden ser consideradoscomo antioxidantes naturales; podrían ser utilizados

Page 27: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

117

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

como aditivo de alimentos funcionales, mejorandola salud del consumidor.Palabras clave: hidrolizado enzimático -Phytolaccaceae - suero lácteo.

A5-46. VALIDACIÓN DEL USO DE SIDATUBERCULATA Y SIDA RHOMBIFOLIA EN ELTRATAMIENTO DE ACCIDENTES OFÍ-DICOS CON BOTHROPS DIPORUS. BárbaraV. Ricciardi Verrastro1*, Ana M. Torres1, GabrielaA. L. Ricciardi1, Armando I. A. Ricciardi1, Eduar-do S. Dellacassa2. 1 Facultad de Ciencias Exactasy Naturales y Agrimensura, UNNE. Av. Libertad5470 (3400), Corrientes, Argentina. 2 Cátedra deFarmacognosia y Productos Naturales, Facultadde Química. Universidad de la República. Mon-tevideo, Uruguay. *[email protected] especies del género Sida, conocidas como“escobadura”, “afata”, “escoba”, “pichana”, son uti-lizadas en etnomedicina como antinflamatorias,antimicrobianas y analgésicas. En particular, S.rhombifolia L. es citada como antiveneno de víbo-ras en forma de cataplasma de hojas. Considerandoque las especies no son fácilmente diferenciablespor quienes las utilizan, se han estudiado dos de ellaspara comprobar este uso. Sobre la base de una pros-pección geográfica previa del género Sida en Co-rrientes (Argentina), se colectó material vegetal deS. tuberculata R.E. Fries y de S. rhombifolia, y seprocedió a su secado por venteo. Se prepararonextractos acuosos (1), alcohólicos (2) y hexánicos(3) por maceración de las partes aéreas molidas (ta-miz 12), desecados con rotavapor al vacío. Elscreening in vitro de la actividad inhibitoria sobreun pool de veneno de yarará chica secado al vacíose realizó por SDS-PAGE, y se observó que todoslos extractos tienen alguna actividad debido a la dis-minución de intensidad o a la desaparición de ban-das. Todos disminuyeron la intensidad de las ban-das correspondientes a enzimas coagulantes (33,5-56 KDa) y el extracto (3) de S. tuberculata (St) fueel que más disminuyó las fosfolipasas (11-15 KDa).Se analizaron las actividades inhibitorias de: coa-gulación (técnica del plasma recalcificado),hemólisis (placas de agar sangre- fosfatidilcolina)y proteólisis (SDS-PAGE con caseína) del venenode yarará chica. Todos los extractos presentaron unaactividad leve, entre el 24-35 % de recuperación deltiempo de coagulación normal, con mayor activi-dad en el (2) de S. rhombifolia (Sr). Las dos espe-

cies presentaron muy poca actividad antihemolítica,y fue el extracto (3) de St el más activo (17 %). Porotra parte, los extractos (2) de St y Sr inhibieron un100 % la acción de las proteasas del veneno deyarará. En conclusión, si bien estas especies resul-taron poco activas contra el veneno de B. diporus,mostraron una importante acción sobre las proteasasy las enzimas coagulantes, por lo que deberá ade-cuar su uso en ese sentido.Palabras clave: actividad alexítera - SDS-PAGE -pruebas in vitro.

A5-47. PROPIEDADES NUTRICIONALES YFUNCIONALES DE HARINAS DE CAPSICUMPUBESCENS RUIZ Y PAVÓN. Marisa A.Rivas1,2, Catiana Zampini1,3, Roxana M.Ordoñez1,3, María R. Alberto1,3, María I. Isla1,3*. 1

Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Mi-guel Lillo, U.N.T. San Lorenzo 1469 (4000), SanMiguel de Tucumán, Argentina. 2 Cátedra deBotánica Sistemática y Fitogeografía. Facultadde Ciencias Agrarias. Universidad Nacional deJujuy. San Salvador de Jujuy, Argentina. 3

INQUINOA-CONICET. *[email protected] frutos de Capsicum pubescens Ruiz & Pav. secomercializan en el noroeste argentino en merca-dos y ferias regionales y se la conoce como “locoto”.Sus frutos se consumen frescos o secos y molidos.En este trabajo se planteó como objetivo determi-nar la calidad nutricional y funcional de harinas de“locotos”. Las harinas se obtuvieron de la liofili-zación de “locotos” verdes, amarillos y rojos. Serealizaron extracciones diferenciales con distintossistemas de solventes. Los compuestos con valornutricional como carbohidratos y proteínas, y loscompuestos con valor funcional como compuestosfenólicos totales, flavonoides, taninos, entre otros,se determinaron mediante métodos espectro-fotométricos. Se evaluó la capacidad antioxidantepara todos los extractos (acetona-agua y etanólico)obtenidos de los “locotos” (ensayo de depuracióndel radical catión ABTS y ensayo de protección dela oxidación del β-caroteno). También se evaluóactividad antiinflamatoria (actividad inhibitoria delipoxigenasa). Los efectos mutagénicos se analiza-ron mediante el ensayo de retromutación deSalmonella typhimurium (TA98 y TA100). Los re-sultados demuestran que las harinas de los “locotos”contienen de 11 a 14 % de azúcares totales y de0,14 a 0,2 % de proteínas solubles. El contenido de

Page 28: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

118

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

compuestos fenólicos fue de 0,6 a 0,8 g EAG/100gharina. También se detectó la presencia de compues-tos como carotenoides, vitamina C, fibras entre otros.Los extractos presentaron actividad antioxidante convalores de concentración depuradora del 50 % delos radicales ABTS (CD50) de 0,7 a 3,2 µg EAG/mly concentración inhibitoria del 50 % de la peroxi-dación de lípidos(CI50) de 1,2 a 15,4 µg EAG/ml.Se demostró capacidad inhibitoria sobre la enzimaproinflamatoria LOX (CI50 1,4-3,8 mg/ml) y ausen-cia de genotoxicidad. Los “locotos” estudiados, tan-tos los verdes como los amarillos y rojos, presentanun alto contenido en compuestos fenólicos y tienenpotencial como fuente de antioxidantes y anti-inflamatorios naturales lo que los hacen de especialinterés para la elaboración de complementos alimen-ticios o aditivos.Palabras clave: locotos - harinas - actividad bioló-gica.

A5-48. ESTUDIOS NUTRICIONALES YFUNCIONALES DE PREPARACIONES DECAPSICUM PUBESCENS RUIZ Y PAVÓN.Marisa A. Rivas1,2, Catina Zampini1,3, Roxana M.Ordoñez1,3, María I. Isla1,3*. 1 Facultad de Cien-cias Naturales e Instituto Miguel Lillo, U.N.T. SanLorenzo 1469 (4000), San Miguel de Tucumán,Argentina. 2 Cátedra de Botánica Sistemática yFitogeografía. Facultad de Ciencias Agrarias.Universidad Nacional de Jujuy. San Salvador deJujuy, Argentina. 3 INQUINOA-CONICET.*[email protected] pubescens Ruiz & Pav. es una especieoriginaria de la zona andina. Se los considera entrelos más picantes del género y forma parte de losplatillos autóctonos de estas regiones. En la Argen-tina se comercializan sus frutos y derivados en mer-cados y ferias regionales. Se utiliza para condimen-tar sopas, salsas, guisos y rellenos de empanadas yse lo conoce como “locoto”. El objetivo de este tra-bajo fue analizar su composición nutricional y cali-dad funcional en diferentes preparaciones de C.pubescens con el fin de simular las condiciones alas que son sometidos los frutos frescos durante suprocesamiento. Se trabajó con “locotos” verdes,amarillos y rojos, a partir de preparaciones acuosasy alcohólicas con y sin calentamiento. Mediantemétodos espectrofotométricos se cuantificaron com-puestos con valor nutricional como proteínas y azú-cares y compuestos con valor funcional, como com-

puestos fenólicos totales (expresados en equivalen-tes de ácido gálico, EAG), flavonoides, entre otros.Se analizó la capacidad antioxidante (ensayo dedepuración del radical catión ABTS y ensayo deprotección de la oxidación del β-caroteno). Los re-sultados indican que el contenido de carbohidratossolubles en las preparaciones acuosas fue de 2 a 3,2%, mientras que para las alcohólicas fue de 0,3 a0,6 %; el de las proteínas estuvo entre 0,010 y 0,13%. Los compuestos fenólicos totales fueron de 50 a70 y 8 a 11 mg EAG/100 g de fruto fresco para laspreparaciones acuosas y alcohólicas respectivamen-te. También se determinó la presencia de compues-tos fenólicos no flavonoides, flavonas y flavonoles,entre otros. Los extractos polifenólicos presentaronactividad antioxidante con valores de concentracióndepuradora del 50 % de los radicales ABTS (CD50)de 0,12 a 7 µg EAG/ml y concentración inhibitoriadel 50 % de la peroxidación de lípidos (CI50) de 0,5a 9 µg EAG/ml. El aporte proteico y de carbohidratosfue bajo. Los datos de actividad antioxidante de laspreparaciones que fueron sometidas a calor indica-rían que algunos de los compuestos responsablesserían termoestables, por ello los frutos pueden usar-se para diferentes preparaciones que requieran ca-lor, ya que son capaces de retener la mayor parte desu actividad antioxidante después de la cocción.Palabras clave: locoto - preparaciones - actividadantioxidante.

A5-49. EVALUACIÓN DE LA CAPACIDADANTIOXIDANTE Y DEL CONTENIDO DECOMPUESTOS FENÓLICOS DE LAS ESPE-CIES NATIVAS DEL GÉNERO VERBENA L.(VERBENACEAE) DE LA PROVINCIA DEBUENOS AIRES, ARGENTINA. Gabriela Ro-cha, Natalia Grignoli, Anabella Currá, AdrianaRosso, Mónica Parisi*. Departamento de Cien-cias Básicas, Universidad Nacional de Luján.Ruta 5 y 7 (6700), Luján, Buenos Aires, Argenti-na. *[email protected] los últimos años la búsqueda de fuentes natura-les de compuestos con actividad antioxidante haadquirido gran importancia. El aprovechamiento deresiduos agroindustriales (cáscara, piel o semillasde plantas, frutas o vegetales) así como de plantasmedicinales han cobrado importancia debido a suelevado contenido en antioxidantes; sin embargo,no todos los vegetales los producen en la mismacantidad y tipo. Además, el empleo de antioxidantes

Page 29: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

119

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

sintéticos está siendo cuestionado debido a su ele-vada toxicidad. Por este motivo, el objetivo de estetrabajo es el estudio de las especies nativas del gé-nero Verbena (V. bonariensis, V. montevidiensis, V.litoralis, V. rigida, V. gracilescens y V. intermedia)de la provincia de Buenos Aires con el fin de eva-luar y comparar la capacidad antioxidante in vitroen relación con el contenido de compuestos fenólicosen los distintos extractos obtenidos a partir del vás-tago de las especies estudiadas. Se prepararoninfusiones acuosas y extractos metanólicos yetanólicos, y en ellos se cuantificaron los compues-tos fenólicos por el método de Folin-Ciocalteau ex-presados como mg equivalentes de ácido gálico/gde peso seco de la planta (mg EAG/g PS). La activi-dad antioxidante se evaluó con el método de neu-tralización del radical DPPH y se expresó como laconcentración necesaria para producir el 50 % deneutralización del radical (IC50). El mayor conteni-do de polifenoles se extrajo en las infusiones y os-ciló en un rango de 12,0 a 25,0 mg EAG/g PS, y seobservó que los valores más altos correspondían alas especies V. bonariensis, V. litoralis y V. interme-dia. La capacidad antioxidante de los extractos fuemuy variable y dependiente de la especie. Todospresentaron capacidad antioxidante, sin embargo, losmayores valores se observaron en los extractosmetanólicos de V. intermedia, V. rigida y V.bonariensis y etanólicos de V. bonariensis y V. rígi-da (IC50 = 10-30 µgmL-1) y la menor actividad enlos extractos etanólicos de V. gracilescens y V. in-termedia (IC50 = 200 µgmL-1, IC50 = 928 µgmL-1).Los resultados obtenidos muestran claramente quelos extractos de este género podrían ser utilizadoscomo un suplemento dietario efectivo y funcionaldebido a su notable contenido de compuestosfenólicos y a su significativa actividad antirra-dicalaria.Palabras clave: capacidad antioxidante - polife-noles - Verbena.

A5-50. DETECCIÓN DE COMBINACIONESSINÉRGICAS DE EXTRACTOS DEBACCHARIS (SECCIÓN CAULOPTERAE)CON TERBINAFINA CONTRA EL HONGOTRICHOPHYTON RUBRUM. María V.Rodriguez1*, Martha A. Gattuso1, Susana A.Zacchino2. 1 Farmacobotánica, Facultad CienciasBioquímicas y Farmacéuticas, Universidad deNacional Rosario. Suipacha 531 (S2002LRK),

Rosario, Argentina 2 Farmacognosia, FacultadCiencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Univer-sidad de Nacional Rosario. Rosario, Argentina.*[email protected] género Baccharis L, con más de 500 especies entodo el mundo, es el más numeroso de la familiaAsteraceae. En particular 96 especies fuerondescriptas para la Argentina, de las cuales nueve [B.articulata (Ba), B. crispa (Bc), B. gaudichaudiana(Bg), B. microcephala (Bm), B. penningtonii (Bp),B.phyteumoides (Bphy), B. sagittalis (Bs), B.triangularis (Btria) y B.trimera (Btrim)] tienen ta-llos alados. A excepción de B. triangularis, todasellas pertenecen a la sección Caulopterae DC. Mu-chas de estas especies con tallos alados han sidotradicionalmente usadas en la Argentina y paísesvecinos en enfermedades relacionadas con infeccio-nes fúngicas y este antecedente ha aumentado laprobabilidad de encontrar en las mismas compues-tos antifúngicos contra dermatofitos. A pesar de losregistros etnobotánicos, estudios previos de activi-dad antifúngica en especies de Baccharis no fueronprometedores. Sin embargo, algunas especies deBaccharis tienen flavonoides y diterpenos del tipolabdanos y clerodanos presentes en especies que sídemostraron propiedades antifúngicas en informesprevios. Con el objetivo de incrementar la posibili-dad de detectar actividad antifúngica en extractosde Baccharis, 44 extractos de especies de Bacchariscon tallos alados (EB) fueron probados en combi-nación con terbinafina contra el dermatofitoTrichophyton rubrum. Para aumentar la probabili-dad de detectar combinaciones sinérgicas, Zhang etal. (2007) proponen mezclar una concentraciónsubinhibitoria de droga antifúngica con una concen-tración subinhibitoria de cada extracto y seleccio-nar aquellas mezclas que alcancen el 90 % de inhi-bición. Para realizar el ensayo, se usaron microplacasde 96 pocillos. Se colocó en cada pocillo (por du-plicado): (1) antifúngico comercial (Terbinafina) auna concentración que inhibe al hongo prueba (CIM); (2) antifúngico comercial a una concentración ala que no inhibe al hongo prueba (1/2, 1/5, 1/10 dela CIM); (3) extracto vegetal a una concentración <a su CIM (a la que no inhibe al hongo); 4) una com-binación de (2) y (3). A todos los pocillos se lesagregó un inóculo del hongo a probar, cuantificadode acuerdo con las recomendaciones de CLSI. Delos EB que mostraron aumento significativo de laactividad antifúngica, fueron seleccionados aque-

Page 30: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

120

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

llos que alcanzaron un porcentaje de inhibición ≥50 % en al menos una combinación. Por lo tanto,solo 18 EB alcanzaron las condiciones necesariaspara el análisis tridimensional (2, 3, 6, 8, 9, 11,12,20, 21, 25, 26, 29, 33, 34, 35, 37, 42 y 43), en elcual se determina si las interacciones son sinérgicas,aditivas o antagónicas. De los 18 EB, sólo 10 (Ba2,Ba8, Ba9, Bc11, Bc12, Bphy25, Bphy26, Bt34,Bt35, Bt43) mostraron al menos una combinaciónsinérgica o aditiva en las superficies de dosis- res-puesta (22 %).Palabras clave: Baccharis sp. - sinergismo - acti-vidad antifúngica.

A5-51. EFECTO DE PROPÓLEOS DE REGIO-NES ÁRIDAS DEL NOA SOBRE LA ACTIVI-DAD Y EXPRESIÓN DE ENZIMAS PROIN-FLAMATORIAS: CICLOOXIGENASA Y ÓXI-DO NÍTRICO SINTASA. Ana Salas1, María I.Isla1,2, Iris C. Zampini1,2, Enrique Bedascarra-bure3, Luis Maldonado3, J.L.Ríos 4, R.M.Giner 4, María R. Alberto1,2*. 1 INQUINOA (Instituto deQuímica del Noroeste Argentino, CONICET). 2

Universidad Nacional de Tucumán. San Loren-zo 1469 (T4000INI), San Miguel de Tucumán,Tucumán, Argentina. 3 Estación ExperimentalAgropecuaria Famaillá (Instituto Nacional deTecnología Agropecuaria). Famaillá, Tucumán.4 Departamento de Farmacología. Facultat deFarmàcia. Universitat de València. Valencia, Es-paña. *[email protected] propóleos es un material resinoso y aromáticoelaborado por las abejas a partir de diversas plan-tas, que se mezcla con la cera y los productosmetabólicos secretados por el insecto. Muchas pro-piedades biológicas han sido atribuidas a varios ti-pos de propóleos. El objetivo de este trabajo fueevaluar el efecto de los extractos de dos muestrasde propóleos provenientes de regiones áridas deTucumán sobre la actividad y la expresión deenzimas pro-inflamatorias como óxido nítricosintasa inducible (iNOs) y sobre ciclooxigenasa 2(COX-2). Esas enzimas están implicadas en las sín-tesis de mediadores de la inflamación (prosta-glandinas, leucotrienos, hidroperóxidos, etcétera)responsables de los síntomas típicos de todo proce-so inflamatorio. La producción de óxido nítrico (ON)se determinó por método colorimétrico en cultivoscelulares (macrófagos murinos). La expresión de lasenzimas COX-2 e iNOs se evidenció mediante téc-

nicas de Western blot en cultivos celulares estimu-lados con lipopolisacáridos. Concentraciones de 100µg/ml de ambos extractos de propóleos inhiben el50 % de la producción de PG a partir de la enzimaCOX-2, estos no inhibieron la expresión de la enzi-ma hasta la concentración de 50 µg/ml, en la cual laviabilidad de los macrófagos fue superior al 90 %.En los ensayos en cultivos celulares se observó queambos extractos de propóleos inhiben la actividady la expresión de la óxido nítrico sintasa (iNOs) dadoque el efecto dosis es dependiente (6-50 µg/ml) ysimilar al antiinflamatorio comercial dexametasona(10 µM) usado como control. Dado que los extrac-tos fueron capaces de inhibir la actividad y la ex-presión de enzimas que se activan en procesosinflamatorios podemos decir que los propóleos deesta región tendrían un potencial uso en patologíasinflamatorias.Palabras clave: propóleos - enzimas pro-infla-matorias - mediadores de la inflamación.

A5-52. CARACTERIZACIÓN FITOQUÍMICAY POTENCIAL USO DE PROPÓLEOS DE RE-GIONES ÁRIDAS DEL NOA COMO ANTI-FÚNGICO EN MEDICINA VETERINARIA.Ana Salas1, Catiana Zampini1,2, RoxanaOrdoñez1,2, Luis Maldonado3, Enrique Bedes-carrabure3, María Inés Isla1,2*. 1 INQUINOA (Ins-tituto de Química del Noroeste Argentino,CONICET). 2 Universidad Nacional de Tucumán.San Lorenzo 1469 (T4000INI), San Miguel deTucumán, Tucumán, Argentina. 3 Estación Ex-perimental Agropecuaria Famaillá (Instituto Na-cional de Tecnología Agropecuaria). Famaillá,Tucumán. *[email protected] propóleos es una sustancia resinosa recolectadapor las abejas (Apis mellifera) a partir de exudadosde árboles y arbustos. A través del tiempo a esteproducto apícola se le han atribuido numerosas pro-piedades farmacológicas, y muchas de ellas han sidovalidadas científicamente. El objetivo de este tra-bajo fue evaluar la actividad antifúngica de dosmuestras de propóleos obtenidas de colmenas ubi-cadas en la misma región fitogeográfica del NOA(región del Monte) sobre diferentes aislamientosclínicos de Candida de interés veterinario. Se reali-zaron tinturas por maceración de las muestras depropóleos en etanol 80°. Las extracciones fueroncaracterizadas fitoquímicamente mediante determi-naciones cualitativas (cromatografías en capa fina)

Page 31: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

121

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

y cuantitativas del contenido de diferentes gruposquímicos mediante métodos espectrofotométricos ysus perfiles cromatográficos se obtuvieron porHPLC-DAD. Se evaluó el efecto antifúngico in situde los componentes bioactivos mediante ensayosbioautográficos. Se determinó la concentracióninhibitoria mínima (CIM) y concentración fungicidamínima (CFM) por el método de microdilución enmedio líquido. Se emplearon 8 aislamientos clíni-cos de Candida. Los extractos presentaron activi-dad inhibitoria del crecimiento de C. albicans,C. tropicalis, C. krusei, C. parapsilosis,C. guilliermondi con valores de CIM entre 128 y256 µgEAG/ml y de CFM entre 256 y 512 µgEAG/ml. Las tinturas presentaron elevado contenido decompuestos fenólicos y flavonoides y se identifica-ron dos chalconas, una de las cuales presentó acti-vidad antifúngica. Los resultados indicarían queambas muestras de propóleos presentan una mode-rada actividad anti-Candida por lo que podrían serusados en tratamientos naturales alternativos en al-gunas infecciones de interés veterinario causadas porCandida.Palabras clave: propóleos - actividad antifúngica -Candida.

A5-53. AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE BIOLÓ-GICA DE PLANTAS MEDICINAIS - ATIVIDA-DE ANTICOLINESTERÁSICA E ANTIOXI-DANTE DE MACADAMIA INTEGRIFOLIA(MAIDEM & BETCHE) - PROTEACEAE.Orlando S. Takemura*, Tatiane T. P. Egami, SilésiaD. Cogo. Curso de Farmácia, UniversidadeParanaense, UNIPAR, Campus Sede, PraçaMascarenhas de Moraes 4282, CEP 87502-210.Umuarama, Paraná, Brasil. *[email protected] integrifolia - Proteaceae é uma espéciearbórea de médio porte nativa das florestas tropi-cais da Austrália que popularmente é conhecidacomo “macadâmia”, “noz-de-queensland” ou !no-gueira-macadâmia”. O presente trabalho teve comoobjetivo avaliar as atividade antioxidante eanticolinesterásica de extratos de folhas Macadamiaintegrifolia. As folhas da espécie foram coletadasno Cemitério Municipal de Umuarama - Paraná,Brasil, em abril de 2013, foram desidratadas em es-tufa com circulação de ar/36 ºC. O extrato bruto foiobtido submetendo-se folhas trituradas à maceraçãoem metanol, concentrado em rotaevaporador, e sub-metido a fracionamento por partição líquido-líqui-

do com os solventes: hexano (HEX), diclorometano(DIC) e acetato de etila (AE). O extrato bruto e asfrações foram aplicadas em placa de sílica-gel eeluídas na fase móvel: clorofórmio, metanol e água(75:20:5). As placas foram observadas em UV365, eem seguida pulverizou-se uma solução metanólicade 2 mg/mL de di-fenil-picrilhidrazila. A atividadeanticolinesterásica foi avaliada borrifando-se enzimae solução de acetato de naftila em placas eluídas.As placas foram incubadas em banho-maria (37 ºCpor 20 min), e em seguida, borrifou-se a solução deFast Blue B. A presença de inibidores da acetil-colinesterase foi observada através da formação deum halo branco (ausência de cor púrpura). A ativi-dade antioxidante foi detectada para as seguintessubstâncias: Rf: 0,03 e 0,14 do extrato bruto; 0,83da fração hexânica; Rf: 0,12 e 0,54 da fraçãodiclorometano e 0,03; 0,08; 0,11; 0,16; 0,22; 0,24 e0,89 da fração acetato de etila. E a atividadeanticolinesterásica foi detectada nas seguintes subs-tâncias: Rf: 0,75; 0,11; 0,91 do extrato bruto; 0,07;0,14; 0,16; 0,2; 0,23; 0,30; 0,4 e 0,67 da fraçãohexânica e 0,17; 0,23 da fração diclorometano. Nãohouve substâncias que combinaram as duas ativida-des avaliadas. Foram encontradas mais substânciascom atividade anticolinesterásica na fração hexânicaque mostra predominância de substâncias de natu-reza apolar. Com relação à atividade antioxidantefoi encontrado um maior número de substâncias ati-vas na fração de acetato de etila, possivelmente atri-buída principalmente às substâncias fenólicas comofoi demonstrada com revelação com reagente ácidodifenilbórico.Palavras-chave: macadâmia - Fast Blue Salt B -DPPH - cromatografia de camada delgada.

A5-54. PLANTAS MEDICINALES DE LAPUNA ARGENTINA. ACTIVIDAD INHIBI-TORIA DE MEDIADORES DE LA INFLAMA-CIÓN. Romina Torres Carro1, María I. Isla1,2,José L. Ríos3, Rosa M. Giner3, Elisa Giner3,María R. Alberto1,2*. 1 Universidad Nacional deTucumán. 2 INQUINOA-CONICET. San Lo-renzo 1469 (4000), Tucumán, Argentina.3 Departament de Farmacología. Facultat deFarmàcia. Universitat de València, Valencia,España. *[email protected] especies de plantas evaluadas se utilizan tradi-cionalmente en la puna de la Argentina para el tra-tamiento de procesos inflamatorios o patologías re-

Page 32: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

122

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

lacionadas. El objetivo de este estudio fue evaluarla capacidad inhibitoria de enzimas pro-in-flamatorias y mediadores de la inflamación de ex-tractos hidroalcohólicos de catorce plantas seleccio-nadas con el fin de validar su uso tradicional. Lacapacidad de los extractos de reducir la biosíntesisde prostaglandinas (PG) se investigó en un sistemalibre de células usando un kit de enzimainmuno-ensayo. El efecto de los extractos sobre la produc-ción de óxido nítrico (NO) se examinó en macró-fagos RAW 264.7 estimuladas con lipopolisacáridos.El efecto de los extractos sobre la expresión de lasenzimas proinflamatorias, óxido nítrico sintasainducible (iNOS) y ciclooxigenasa-2 (COX-2) enmacrófagos fue detectada por Western blot. Lacitotoxicidad de los extractos se midió con la ayudade un ensayo colorimétrico basado en la reducciónde 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetra-zoliumbromide (MTT) a formazan. Diez extractosde plantas inhibieron la producción de NO de ma-nera dosis dependiente sin afectar a la viabilidad deRAW264.7. Parastrephia lucida, P. phyliciformis,Baccharis incarum y Tessaria absinthioides a200 mg/ml inhibieron la expresión de la iNOS y laCOX-2. Mientras que Junellia seriphioides y P.lepidophylla mostraron efecto inhibidor solo sobrela actividad de la enzima COX-2, pero no en su ex-presión. Las especies de Parastrephia tienen un efec-to inhibitorio significativo en la producción de NOa 200 mg/ml. Los resultados obtenidos sugieren quevarias plantas de la Puna argentina tienen capaci-dad de inhibir la producción de mediadoresinflamatorios (NO y PG) por diferentes mecanis-mos moleculares: en el nivel transcripcional o en laactividad enzimática (iNOS y COX-2). La capaci-dad inhibidora de enzimas proinflamatorias por ex-tractos de plantas de la puna argentina es compati-ble con su uso tradicional para el tratamiento decondiciones asociadas con eventos inflamatorios enseres humanos y animales y, en consecuencia, seríauna prometedora fuente de compuestos antiin-flamatorios naturales.Palabras clave: enzimas proinflamatorias -prostaglandinas - óxido nítrico.

A5-55. ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DECATORCE ESPECIES VEGETALES DE LASREGIONES ÁRIDAS DEL NOROESTE AR-GENTINO. Romina Torres Carro1, Romina E.D’Almeida2, María I. Isla1,2, María R. Alberto1,2*.

1 Universidad Nacional de Tucumán. 2 INQUI-NOA-CONICET. San Lorenzo 1469 (4000),Tucumán, Argentina. *[email protected] inflamación crónica está asociada a una gran va-riedad de enfermedades, como la artritis, el Alzheimer,asma, esclerosis, etcétera. El uso de plantas para pre-venir y tratar los síntomas de estas enfermedades havuelto a cobrar importancia debido a su efectividad ya sus escasos o nulos efectos secundarios. Las espe-cies vegetales fueron recolectadas en las zonas ári-das del noroeste argentino. Con ellas se prepararontinturas que fueron utilizadas para evaluar su capaci-dad de inhibir la actividad de dos enzimas pro-inflamatorias (lipoxigenasa y hialuronidasa), y deprevenir la lisis de los lisosomas (inferido a partir desu capacidad para proteger la membrana de los gló-bulos rojos). Además, se realizó un tamizajefitoquímico para determinar la presencia deflavonoides, taninos, triterpenos, saponinas,cardiotónicos, cumarinas y derivados antracénicoslibres. Adicionalmente, se analizó la toxicidad agudautilizando Artemia salina como organismo control.Todas las especies vegetales inhibieron la actividadde la lipoxigenasa en el rango de concentracionesentre 50 y 400 µg/ml,y fueron Frankenia triandra yEphedra multiflora las que exhibieron los mayoresniveles de inhibición. A las mismas concentracionesTessaria absinthioides fue la especie que inhibió enmayor medida la actividad de la hialuronidasa y fuemayor que el antiinflamatorio comercial indo-metacina. Las especies vegetales que evitaron la lisisdel 50 % o más de los glóbulos rojos fueron:Baccharis boliviensis, B. incarum, Chiliotrichiopsiskeidelii, Parastrephia lepidophylla, P. phyliciformisy Junellia seriphioides. El ensayo de toxicidad de-mostró que ninguno de los extractos resultó ser tóxi-co hasta la concentración de 400 µg/ml. Por otra par-te, el perfil fitoquímico reveló la presencia de com-puestos con importantes propiedades beneficiosaspara la salud, entre los que se destacó la presencia depolifenoles, flavonoides y taninos. Esto avala elpotencial uso de estas especies vegetales en patologíasinflamatorias, además de respaldar sus usos tradicio-nales.Palabras clave: lipoxigenasa - hialuronidasa -lisosomas.

A5-56. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEEXTRACTOS Y ACEITES DE PLANTAS DELNORDESTE ARGENTINO. Ana M. Torres1*, Su-

Page 33: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

123

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

sana Ferrero2, Gabriela A. Ricciardi1, BárbaraV. Ricciardi Verrastro1, Marcela Cáceres Wenzel1,Armando I. Ricciardi1, Eduardo S. Dellacassa3. 1Cátedras de Química Orgánica y Toxicología,Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agri-mensura, UNNE. Av. Libertad 5470 (3400), Co-rrientes, Argentina. 2 Cátedra de Bacteriología yMicología Clínica, Facultad de Ciencias Exactasy Naturales y Agrimensura, UNNE. Corrientes,Argentina. 3 Cátedra de Farmacognosia y Pro-ductos Naturales, Facultad de Química, Univer-sidad de la República. Montevideo, Uruguay.*[email protected] conocimiento de la tradición del uso de las plan-tas como antimicrobianos en la etnomedicina y ladisponibilidad de herramientas rápidas y sensibles,como la bioautografía, para evaluar diferentes tiposde extractos, nos condujo a realizar un screeningpor bioautografía para evaluar la actividadantimicrobiana frente a Staphylococcus aureus yEscherichia coli de los aceites esenciales, extractosacuosos, alcohólicos y hexánicos de Aloysiacitriodora, Lippia alba, Nectandra angustifolia(“laurel amarillo”), N. megapotamica (“laurel ne-gro”), Ocotea acutifolia (“laurel”) y Asclepiasmellodora (“yerba de la víbora”). Se colectó mate-rial vegetal de las especies en zonas rurales de Co-rrientes (Argentina), se depositaron ejemplares enherbario, se obtuvieron los aceites esenciales pordestilación por arrastre con vapor de agua (ed) y losextractos por maceración en agua 24 h (1), alcohol48 h (2) o hexano 48 h (3) del material oreado ymolido (tamiz 12). Los extractos se evaporaron asequedad a presión reducida y las soluciones se pre-pararon en el momento de uso. La bioautografía sellevó a cabo con microorganismos en fase de creci-miento exponencial: S. aureus (ATCC 25923) y E.coli (ATCC 25922), sembrados en forma de línea: 5µl de los aceites y 5 µl de los extractos (10 mg/ml)en cromatofolios de silica gel GF de 5 x 10 cm, ade-más de los controles negativos de inhibición (sol-ventes: alcohol y hexano) y positivo de inhibición(5 µl de gentamicina 8 mg/2 ml). Luego de 24 horasde incubación a 37 ºC, se coloreó con solución acuo-sa de sal de tetrazolium (TTZ) y se obtuvieron lossiguientes resultados: activos contra S. aureus: edde A. citriodora (++), O. acutifolia (+++), Lippiaalba (+), N. angustifolia (++++) y N. megapotamica(+); activos contra E. coli: ed de L. alba (++), N.angustifolia (+++). No activos contra ambos

microorganismos ensayados: extractos acuosos, al-cohólicos y hexánicos de A. citriodora, L. alba, N.angustifolia, N. megapotamica, O. acutifolia y A.mellodora. La metodología utilizada, combinaciónde medida de actividad biológica in vitro con se-paración por TLC, permitirá el aislamiento de frac-ciones activas y la identificación de componentesen la búsqueda de sustancias naturales con activi-dad antibiótica aplicable.Palabras clave: bioautografía - Staphylococcusaureus - Escherichia coli.

A5-57. VQ-I PEPTIDASA CISTEÍNICA CONACTIVIDAD FIBRINOGENOLÍTICA OBTE-NIDA DEL LÁTEX DE VASCONCELLEAQUERCIFOLIA A. ST. HIL. (CARICACEAE).María J. Torres1*, Claudia L. Natalucci2, LauraM.I. López3. 1 Departamento de Ciencias Básicasy Experimentales, UNNOBA. Newbery 355, Junín(6000), Buenos Aires, Argentina. 2 LIProVe, De-partamento de Ciencias Biológicas, Facultad deCiencias. Exactas, UNLP. La Plata, Buenos Aires,Argentina. 3 Instituto de Ciencias de la Salud,UNAJ. Florencio Varela, Buenos Aires, Argenti-na. *[email protected] enzimas proteolíticas desempeñan un papelimportante en diversos mecanismos bioquímicos quemantienen los procesos metabólicos de los organis-mos. El fibrinógeno es una glucoproteína que seencuentra soluble en el plasma y por acción de latrombina se transforma en fibrina insoluble, respon-sable de la coagulación sanguínea. La plasmina de-grada las redes de fibrina a fibrinopéptidos solubles,evitando la formación de trombos. Una elevada con-centración de fibrinógeno se asocia con ateros-clerosis, trombosis, y con otros factores de riesgode enfermedad cardiovascular. En respuesta a unalesión, los frutos de Vasconcellea quercifolia A. St.-Hil. (Caricaceae) responden rápidamente para dete-ner la pérdida de látex mediante formación de uncoágulo alrededor de la herida, fenómeno similar alobservado en los tejidos de mamíferos expuestos aun trauma al detener la pérdida de sangre. Durantela coagulación del látex se produce el procesamien-to de péptidos concomitantemente con la activaciónsecuencial de enzimas proteolíticas, semejante a loque ocurre en mamíferos. Las similitudes entre am-bos procesos de coagulación nos llevaron a plan-tear que factores análogos pueden estar presentesen ambos sistemas y que posiblemente metabolitos

Page 34: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

124

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

vegetales que intervienen durante la cicatrizaciónde la planta, también pueden actuar durante el pro-ceso en mamíferos. En tal sentido, empleando ellátex de frutos inmaduros de V. quercifolia, una es-pecie que crece en la Argentina, hemos obtenido unapreparación enzimática con elevada actividadproteolítica, a partir de la cual hemos purificado pormétodos cromatográficos siete peptidasas cisteínicasque fueron caracterizadas e identificadas estruc-turalmente empleando herramientas de proteómica.La peptidasa de menor punto isoeléctrico (VQ-I)mostró actividad proteolítica sobre fibrinógeno (10mg/ml) cuando se emplea a una concentración de0,1 mg/ml a 37 °C; este efecto fibrinogenolítico essuprimido cuando se inhibe la proteasa rever-siblemente con tretationato de sodio y coninhibidores irreversibles específicos de proteasascisteínicas. Los productos de hidrólisis delfibrinógeno por VQ-I fueron detectados y caracte-rizados por SDS-PAGE. Los resultados obtenidosestán en concordancia con los recientemente infor-mados para proteasas del látex de Vasconcelleacandamarcensis, que han demostrado tener activi-dad trombolítica. La actividad enzimática detecta-da para VQ-I revela su potencial utilidad en el trata-miento de trastornos tromboembólicos.Palabras clave: proteasas - látex - fibrinógeno -Vasconcellea quercifolia - Caricaceae.

A5-58. ACTIVIDAD CITOTÓXICA DE LAC-TONAS SESQUITERPÉNICAS AISLADAS DESMALLANTHUS SONCHIFOLIUS EN LÍNEASCELULARES TUMORALES. Jerónimo L.Ulloa1, Christian De Ford2, Flavia Redko1, Cé-sar Catalán3, Virginia S. Martino1, IrmgardMerfort2, Liliana V. Muschietti1*. 1 Cátedra deFarmacognosia, IQUIMEFA (UBA-CONICET),Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA.Junín 956 (1113), Buenos Aires, Argentina.2 Department of Pharmaceutical Biology andBiotechnology, University of Freiburg, Freiburg,Germany. 3 INQUINOA (CONICET), Facultadde Bioquímica, Química y Farmacia, UNT.San Miguel de Tucumán, Argentina.*[email protected] lactonas sesquiterpénicas (SLs) son un grupoimportante de metabolitos secundarios presentes,principalmente, en especies de la familia Asteraceae.Estos compuestos han sido descriptos como los cons-tituyentes activos de varias plantas medicinales uti-

lizadas tradicionalmente para tratar procesosinflamatorios. En los últimos años, se ha demostra-do que las SLs constituyen un grupo promisorio decompuestos con actividad antitumoral debido a laselectividad preferencial sobre ciertos tumores y lí-neas celulares,y por actuar sobre vías de señaliza-ción específicas. La tapsigargina y un derivado delpartenólido (DMAPT) son dos SLs que se encuen-tran en fase I de investigación clínica para el trata-miento de cánceres de diferente estirpe. En este tra-bajo se describe la citotoxicidad de las SLsenhydrina, uvedalina, polimatina B y sonchifolinay de una nueva SL identificada como 8β-angeloiloxi-9α-hidroxi-14-oxo-acantospermólido, todas aisladasde Smallanthus sonchifolius (Asteraceae). El estu-dio se llevó a cabo in vitro (ensayo colorimétrico deMTT) en líneas celulares de leucemia (CCRF-CEM), de leucemia resistentes a doxorrubicina(CEM-ADR5000) y celulas tumorales pancreáticas(MIA PaCa-2) y en células mononucleares de san-gre periférica (PBMC). El compuesto más activofue la polimatina B con valores de IC50 de 0,8(CCRF-CEM), 1,4 (CEM-ADR5000) y 3,7 µM(MIA-PaCa-2). No obstante, ninguno de los com-puestos ensayados resultó citotóxico en células nor-males (PMBC). A fin de determinar el posible me-canismo de acción de polimatina B el ensayo deMTT se llevó a cabo también a concentraciones enel rango de 0,312-20 µM con la presencia delantioxidante N-acetil-L-cisteina (NAC), delinhibidor de caspasas QVD-OPh y del inhibidor denecroptosis, necrostatina-1 (Nec-1). La NAC fuecapaz de restaurar significativamente la viabilidadde todas las líneas celulares luego del tratamientocon polimatina B. QVD-OPh solo fue capaz de re-cuperar la muerte celular inducida por polimatina B(1,25 µM) en la línea celular CCRF-CEM y luegodel pretratamiento con Nec-1 solamente se obser-varon diferencias estadísticamente significativas enlas células CEM-ADR5000. Los resultados obteni-dos demuestran que la polimatina B tiene una acti-vidad citotóxica significativa, especialmente en cé-lulas CCRF-CEM, y baja toxicidad en células nor-males. Se continúa el estudio analizando el efectode este compuesto sobre el ciclo celular.Palabras clave: lactonas sesquiterpénicas -Smallanthus sonchifolius - citotoxicidad.

A5-59. ACCIÓN CONJUNTA DEL POLVO DEPEUMUS BOLDUS, LAURELIA SEMPERVIRENS

Page 35: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

125

Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013

Y LAURELIOPSIS PHILIPPIANA PARA EL CON-TROL DE SITOPHILUS ZEAMAIS. MotschulskyNataly Valenzuela C., Gonzalo Silva A.*, InésFigueroa C., Angélica Urbina P., Maritza Tapia. V.Departamento de Producción Vegetal. Facultad deAgronomía, Universidad de Concepción, VicenteMéndez 595, Casilla 537, Chillán, Chile.*[email protected] gorgojo del maíz (Sitophilus zeamaisMotschulsky) es una de las principales plagas degranos almacenados en nivel mundial. El polvode hojas de “boldo” (Peumus boldus), “tepa”(Laureliopsis philippiana) y “laurel” (Laureliasempervirens) ha mostrado un alto efecto insecti-cida de contacto y fumigante para el control deesta plaga cuando se aplica individualmente enconcentraciones de 1 y 2 %. El objetivo de la pre-sente investigación fue evaluar en laboratorio elefecto insecticida de la mezcla del polvo de fo-llaje de estas especies en proporciones de 1:1 parael control de S. zeamais. En los bioensayos deefecto insecticida por contacto la mayor toxici-dad la registró el polvo de “laurel” con una CL50de 0,28 gk-1aunque sin diferencias significativascon “boldo” que tuvo una CL50 de 0,46 gk-1. Aun-que, en el cálculo del índice de acción conjunta(IAC) y de concentración-adición (ICA) en todoslos tratamientos se obtuvo valores menores a 1 loque significa que la mezcla presenta acción anta-gónica. Es decir, la toxicidad de los polvos esmayor cuando se aplican individualmente quecuando se combinan. En el caso de la actividadcomo fumigante la mayor toxicidad del polvo seobtuvo con las mezclas” boldo”-“laurel” y “bol-do”-“tepa” con una CL50 de 0,63 y 0,69 µL aire-

1respectivamente. Los tratamientos de polvos eva-luados individualmente mostraron CL50 sig-nificativamente mayores. En el cálculo de IAC eICA todas las mezclas mostraron un valor mayora 1 indicando que todas presentan efecto sinérgico,es decir su actividad fumigante se potencia cuan-do se aplican combinados. En los bioensayos deefecto sobre la emergencia de insectos adultos (F1)se observó que tanto para el efecto por contacto yfumigante a mayor concentración se produce unamenor F1. Por último, todos los tratamientos eva-luados no afectaron significativamente lagerminación del maíz. Se concluye la mezcla delos polvos de “boldo”, “laurel” y “tepa en pro-porciones de 1:1 presenta una potenciación de las

propiedades insecticidas como fumigante.Palabras clave: gorgojo del maíz - insecticidas ve-getales - sinergismo.

A5-60. UN NUEVO DERIVADO SEMISINTÉ-TICO DE SAUROÍNA INDUCE POTENCIA-CIÓN POTENCIACIÓN A LARGO LARGOPLAZO PLAZO EN CORTES DE HIPOCAM-PO Y MEJORA EL APRENDIZAJE EN EL LA-BERINTO DE MORRIS. Mariana Vallejo1*,Sebastián Loyola2, Darwin Contreras2, GonzaloUgarte2, Diego Cifuente3, Gabriela Ortega1, JoséCabrera1, Marc Zeise4, Carlos Tonn3, MarioCarreño2, Bernardo Morales2 y Mariel Agnese1.1 IMBIV, -CONICET y Farmacognosia, Depar-tamento de Farmacia, Facultad de Ciencias.Químicas, Universidad Nacional de Córdoba,Haya de la Torre y Medina (X5000HUA), Allen-de. Ciudad Universitaria, (X5000HUA) Córdo-ba, Argentina. 2 Laboratorio de Neurociencia, De-partamento de Biología, Facultad de Química yBiología, Universidad de Santiago de Chile, San-tiago, Chile. 3 INTEQUI, CONICET y Área deQuímica Orgánica, Facultad de Química,Bioquímica y Farmacia, Universidad Nacional deSan Luis, San Luis, Argentina. 4 Escuela de Psi-cología, Facultad de Humanidades, Universidadde Santiago de Chile, Santiago, Chile.*[email protected] demostrado que sauroína, el alcaloide ma-yoritario de Huperzia saururus (Lam.) Trevis.(Lycopodiaceae) tiene actividad sobre aprendizajey memoria, y en la búsqueda de nuevas estructurascon esta actividad, se utilizó ese alcaloide como basepara realizar modificaciones químicas sobre su es-tructura. Mediante reacciones de acetilación, se ob-tuvieron dos derivados semisintéticos: monoacetil-sauroína (MAS) y diacetil-sauroína (DAS). Sus es-tructuras químicas fueron dilucidadas a través detécnicas espectroscópicas (RMN). MAS es el pro-ducto teórico de una acetilación, mientras que DASes un derivado inesperado, generado a través delequilibrio ceto-enólico de sauroína. En experimen-tos electrofisiológicos, MAS no exhibió actividadalguna, mientras que la aplicación aguda de DASindujo una potenciación a largo plazo (LTP) de tipoquímica, en la región CA1 del hipocampo de ratas,en ausencia de estimulación eléctrica. Este efectofue bloqueado por el ácido D(-)-2-amino-5-fosfonopentanoico (AP5,10 µM ), sugiriendo que

Page 36: A5 Farmacología y Actividad biológica Pharmacology and ... · PDF file93 Dominguezia - Vol. 29(Suplemento) - 2013 medioambientales, por lo que la micropropagación controla los efectos

126

XI Simposio Argentino XIV - Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica

el mismo depende de la activación de receptoresNMDA. Además, la administración crónica de DASa ratas Wistar macho durante 6 días (n = 8), mejoróel aprendizaje visuoespacial en el laberinto deMorris. En experimentos posteriores, los cortes dehipocampo de estos animales exhibieron una LTPpor estimulación sináptica eléctrica 2,5 veces ma-yor aque los controles. Como conclusión, los cortesde hipocampo perfundidos en forma aguda con DASmostraron una LTP de tipo química, robusta, depen-diente de receptores NMDA, mientras que en ratascon tratamiento crónico, este proceso parecería in-crementar las habilidades conductuales a través deun mecanismo metaplástico, manifestado como unaumento en la sensitividad para la inducción de laLTP. DAS, por lo tanto, resultaría un candidatopromisorio en la búsqueda de nuevas drogasnootrópicas.Palabras clave: modificaciones químicas - diacetil-sauroína - aprendizaje y memoria.

A5-61. FRUTOS DE ESPECIES DEL GÉNEROSOLANUM EN LA QUIMIOPREVENCIÓNDEL CÁNCER. Iris C. Zampini1,2,3*, FernandoArenas Espinoza2, Pedro Blendiger1,4,Norberto Gianini1,3, María I . Is la1,2,3.1 CONICET 2 Facultad de Bioquímica, Quími-ca y Farmacia, 3 Facultad de Ciencias Natu-rales e IML. 4 Instituto de Ecología Regional,Universidad Nacional de Tucumán. San Mi-guel de Tucumán. , Tucumán. , Argentina. (CP4000). *[email protected] género Solanum (Solanaceae) incluye nume-rosas especies frutícolas con potencial en laquimioprevención del cáncer. El objetivo del pre-sente trabajo fue analizar la composición denutrientes y metabolitos secundarios así como laspropiedades funcionales de frutos de especies delgénero Solanum que crecen en las Yyungas

tucumanas. Materiales y Métodos: Se prepararonextractos acuosos y etanólicos de frutos madurosde ocho especies, Solanum abutiloides (Griseb)Bitter y Lillo, S. aloysiifolium Dunal. , S.argentinum Bitter y Lillo, S. consimile C. V.Morton , S. palinacanthum Dunal , S.pseudocapsicum L. , S. riparium Pers. y S.tenuispinum Rusby. Los extractos fueron carac-terizados químicamente. Se analizó la capacidadde los extractos de depurar radicales libres y supotencial antimutagénico frente a 4-nitro-O-fenilendiamina (4-NPD), mediante el Test deAmes. También se evaluó la presencia demutágenos y/ o promutágenos en las muestras.Resultados: En general, todos los frutos resulta-ron bajos en azúcares y proteínas, los frutos de S.aloysiifolium, S. palinacanthum y S. consimilepresentaron una elevada cantidad de potasio y S.aloysiifolium y S. consimile, además mostraronbuen contenido de hierro. Los extractos presen-taron un contenido variable de compuestosfenólicos (entre 2,26 y 209,03 mg EAG/100 g deFF) y en general mostraron un bajo contenido deflavonoides. En ningún extracto se detectó la pre-sencia de compuestos mutagénicos o promuta-génicos. Todas las muestras fueron capaces de de-purar radicales libres, los extractos acuosos de S.palinacanthum, S. tenuispinum y S. argentinumresultaron los más activos. S. palinacanthum y S.tenuispinum fueron además capaces de inhibir elefecto del mutágeno 4-NPD en el ensayo deretromutación. Conclusiones: Estos resultados in-dican que los frutos de S. palinacanthum y S.tenuispinum podrían proteger al ADN del dañoproducido por mutágenos lo que los hacepromisorios en la búsqueda de agentes quimio-preventivos del cáncer.Palabras claves: Frutosfrutos - Solanum - antioxi-dante - antimutagénico.