3 virusologie lp AM.pptx

7/26/2019 3 virusologie lp AM.pptx

1/31

LP 9:Diagnostic de laborator in virozerespiratorii. Izolarea virusurilor gripale pe oul

de gaina embrionat. Reactia dehemaglutinare. Identifcarea virusurilorgripale. Reactia de hemaglutinoinhibare. Cazclinic prezentat de studenti.

LP 12: Diagnosticul in inectia cupapipomavirusuri umane - algoritm.Diagnostic serologic versus diagnosticulmolecular. Importanta tehnicilor degenotipare si corelarea cu diagnosticulcitologic. Posibilitati de vaccinare in cancerede etiologie virala. Caz clinic prezentat de

studeni.


2/31

PapovaviusesPapilomavirusuri(>100 genotipuri)

Poliomavirus (la rozatoare)

Virusul simian vacuolizant SV40

Papillomavirusurile determina:

tumori benigne ale pielii negi sau veruci! care pot regresa spontan" inectie litic# $n celule permisive cu productia de virioni inectanti

leziuni ale mucoasei genitale si anale care pot maligniza dacapersista mai multi ani " inectie persistent# $n celule nepermisive care

duce la transormare malign#


3/31

Frecventa inectiilor asimptomatice! su"clinicesau atipice

Persistenta virusurilor si capacitateatransormanta #$isplazie cervicala intraepiteliala

si carcinom cervical scuamos % &PV 1'! 1! 1!! *)

+a,oritatea cancerelor $e cervi-! vulvare sipeniene sunt asociate cu &PV tipurile 1'! 1!

1! ! *! 9! 4*! *1! *2! *'! ''! '! .0 caretransorma /eratinocitele umane

Principalul actor $e risc pentru cancer $e coluterin %a"senta screening

F356 7 P6PL8+6V7S7L3 7+63(&PV)


4/31

Epiteliu Normal

Suprafata cervicala

Membrana bazala

Celule bazale

Celule

Parabazale

Strat scuamos

%tratscuamosmatur

. .

. .

.

.

.

Epiteliu Infectat

Adaptat dupa Frazer IH. Nature Rev Immunol. 2004;4:4654.

Eliberarea virionilor

cu cel descuamate (3 sapt)

Infectia celulelor

bazale (keratinocite)

(gene E1 si E2)

A! viral Episomal

in nucleul celulei

(E1 and E2" E# and E$)

%eplicare de A! viral

odata cu multiplicarea cel(E#

and E$)

Asamblare virala(gene &1 and &2)

nectia cu &PV are anumiteparticularitati

&


5/31

iagnostic &PV ; $iagnostic $irect

1


6/31

?enotipare &PVPCR urmat de hibridizareaacizilor nucleici!

26 genotipuri

Rezultatul poate fi:

1' pozitiv(cu decelarea urmatoarelor

genotipuri: 6, 11, 1#, 1, 31, 33, 4,

*, *1, !", !4, *, *+, ##, #,$3, #$,

2' negativ sau

"% pozitiv pentru alt genotip -./ fara

a se cunoaste genotipul -./

responsabil de leziune" rezultat

notat 0-./ ')* genotipuri

+, , 1', 1, +, 1, , *, 9,/0, /, 4*, *1, *2, 1), 1/, 11, *',*, *9, +, +, +/, '', +*, ', +2,

*0, *, *, .332!, 4, 233/!,4) 33*!, 4/ 334!, I%)2, and


7/31

Vaccinarea este utila in anumite situatii

Vaccin

6ntigen 6$,uvant

SS53+ 6@7V65: 6S04-+onoosoril lipi$ 6 a"sor"it pe

- &i$ro-i$ $e aluminiu

Garcon N. evelopment and evaluat!on o" A#04$ a novel and !mproved ad%uvant &'&tem conta!n!n( )*+ andalum!num &alt. In: #c,!%n& -$ Ha(an $ ed&. Immunopotent!ator& !n modern vacc!ne&. +ondon: Academ!c*re&&$ 2005: /6/1.

6S04

irus Li/e Particles (VLP)articule asemanatoare virusului


8/31

Majoritatea Ac IgG de lanivelul epiteliului genital seconsidera a fi rezulatultransudarii la nivel epitelial aanticorpilor serici

Un raspuns imunumoral puternic estenecesar pentru a realizaniveluri sustinutedetectabile de anticorpila nivelul mucoaseicervicale (infectiaprimara)

HPV are mecanisme proprii

prin care scapa mecanismelorsistemului imun natural deaparare

Nu determina viremieHPV nu distruge keratinocitele

Lamina Aazala

Vas $e sange

5piteliu

Adaptat dupa :

)unoz N et al. ,apter /: H*- !n t,e et!olo(' o" ,uman cancer.-acc!ne 24#3 2006 #3/#3/0

G!ann!n! #. et al. 7n,anced ,umoral and memor' 8 cellular !mmun!t' u&!n( H*-/6/1 +/ -+* vacc!ne "ormulated 9!t, t,e)*+alum!n!um &alt com!nat!on A#04 compared to alum!n!um &alt onl'. -acc!ne$ -olume 24$ I&&ue& 3334$ /4 Au(u&t 2006$*a(e& 5


9/31

1'!1! 4*! 1Prevenirea cancerului $e col

uterin6vem 2 vaccinuri pe piata:

impotriva 9P6 +, , +, 4

impotriva 9P6 + si 4


10/31

Diagnostic in inectia cu virusuri gripale


11/31

ORTHOMIXOVIRUSURI-V. GRIPALE A, B, C

myxa-mucus

tip A, B, C : NP, M

subtipuri: HAsi NA16 tipuri de HA si 9 de NA

+atrice

ucleocapsi$a Belicoi$ala6ss

&6 # Bemaglutinina

transcriptaza

anvelopa

6 # neuramini$aza


12/31

iagnostic clinic $e gripa

ebra )-1 zile!, mialgie, cealee, astenie saptamani!, tuse uscata, aringita,rinoree.

;ripa nu se diagnosticheaza clinic.Simptomatologie asemanatoare cu inectii $eterminate $e:

)'copla&ma pneumon!ae, adenovirusuri,virusul respirator sincitial, rhinovirusuri,virusuri paragripale, si +e(!onellaspp.


13/31

EI4&45IE

.4SI6I&A

.rodus

.atologic

I74&A%E g' I%EC

8detectiedirecta

g' I!I%EC

8serologie

/' 5%I.A&E A" 6" CS!9

A!9A6

45E

Culturicelulare

A

: .C% si I9

A

studii epidemoiologice


14/31

Pro$use patologice:

a)spalatura nazo aringianase obtine cuan! nu sunt indicate

$n diagnosticul virozelor respiratorii.


15/31

Spalatura nazo aringiana(SF)ecoltare


16/31

isc $e la"orator asociat manevrarii $epro$use patologice supuse $iagnosticului in

ve$erea izolarii virusurilor gripale

6irusurile gripale sunt prezente intractul respirator in concentratiiridicate si pot usor disemina din

e?udate, spalaturi nazoaringiene siaspirate traheobronsice la personalulcare manipuleaza aceste probe

clinice prin intermediul aerosolilor.Culturile de celule inectate sunt siele sursa de inectie si diseminare a

virusurilor.


17/31

iagnostic $e la"orator in gripairectii $e $iagnostic

IEF'R5GID5(BIIC'R5

G7$ RHA= RHAI

D5B5CBI5 DIR5CB' PCR si I

DI';(E%BIC %5REFE;IC


18/31

.-pe culturi primare de rinichi demaimuta rhesus.

-pe linia continua epiteliala derinichi de ciine " 3DCH - 3adin-Darb Canine Hidne.

.pe ou de gaina embrionat,de 2-zile, inoculat intraamniotic sauintraalantoidian.

Izolare virala ! e"amenul optim pentru diag gripei


19/31

&ema$sor"tie$emonstreaza izolarea v


20/31


21/31

Izolareape E;5

Izolarea se dem prin proprietatea v. gripalede a aglutina hematii


22/31

Etape#

ag viral dilutii binaresuspensie de $ematii

%e incubeaza la temperatura camerei

%e citesc rezultatele in &' minute

Martorul reactiei contine suspensie $ematii

ol &6:Demonstrarea prezentei virusului hemaglutinant

Bitrarea antigenului hemaglutinant inaintea reactiei de hemagutino-inhibare

HA

3+8S5636 P3C353V7S7L73656 3 &3+6?L7563


23/31

ID5(BIIC'R5' 6. ;RIP'F5R. 953';FJBI(E-I(9IK'R5

)e$nica reactiei#

dilutii binare din serul testato cantitate constanta de ag viral $emaglutinant%e lasa la incubat *' min la *+,-%e adauga sistemul indicator . suspensia de $ematii%e incubeaza &' min la temperatura camerei

/eactia de identificare a virusurilor gripale

HAI


24/31

Reactia de953';FJBI('R5 si953';FJBI(E-I(9IK'R5


25/31

('B nucleic acid tests!RB PCR

Duic/ iagnosis o Flu Strains Possi"le EitB eE +icrocBip 5est(ational nstitute o 6llergG an$ nectiousiseases) # FluBip!

ne-pensive 5est etects inHuenza nections Duic/lGan$ 6ccuratelG(ational nstitute o 6llergG an$ nectiousiseases) % +Bip

SEine Hu real#time P /it (PrimeresignLt$ # 7I) ! 5Be real#time P /it # rapi$lGmultiplGing a sample ta/en rom a

suspecte$ sEine Hu patient< 5Bis testJuic/lG $iKerentiates common strains o tBeHu virus rom otBer &11

3 virusologie lp AM.pptx

Documents

Transcript of 3 virusologie lp AM.pptx