3. Protocolos quimica

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  • CURSO DE TCNI-CAS DE HISTOLO-GA VEGETAL.

    CLULAS Y TEJIDOS VEGETALES

    Profesores: Dr. Francisco Jos Garca Breijo Dr. Jos Reig Armiana

    Laboratorio de Anatoma Vegetal Julio Iranzo del Jar-dn Botnico de la Universitat de Valncia.

    Laboratorio de Botnica. Departamento de Ecosistemas Agroforestales. Escuela Tcnica Superior de Ingeniera Agronmica y del Medio Natural (ETSIAMN). Universi-dad Politcnica de Valencia

  • Curso de Tcnicas de Histologa Vegetal.

    Tabla de Contenidos

    INTRODUCCIN ................................................................................................................................. 1

    EJERCICIO A: ESTRUCTURAS Y ORGNULOS DE LA CLULA VEGETAL ........................................... 1 Materiales necesarios para el ejercicio A............................................................................................................ 3 Procedimiento para el ejercicio A ......................................................................................................................... 3

    1. Observacin de plastos. Cloroplastos. ....................................................................................................................................... 3 2. Observacin de plastos. Cromoplastos ...................................................................................................................................... 5 3. Observacin de plastos. Amiloplastos. ....................................................................................................................................... 6 4. Observacin de cristales celulares .............................................................................................................................................. 7 5. Componentes de la pared celular. .............................................................................................................................................. 9

    EJERCICIO B: LOS TEJIDOS VEGETALES ........................................................................................... 11 Materiales necesarios para el ejercicio B. ......................................................................................................... 16 Procedimientos para el ejercicio B ...................................................................................................................... 16

    1. Observacin de tejidos ................................................................................................................................................................16 2. Tejidos epidrmicos. Observacin de tricomas y estomas. ..................................................................................................17

    BIBLIOGRAFA.................................................................................................................................. 20

    RESULTADOS.................................................................................................................................... 21 Ejercicio A: Estructuras y orgnulos de la clula vegetal ................................................................................ 21

    1. Observacin de cloroplastos. ................................................................................................................................................21 2. Observacin de cromoplastos. ..............................................................................................................................................22 3. Observacin de amiloplastos. ...............................................................................................................................................23 4. Observacin de cristales celulares .......................................................................................................................................24

    A. Observacin de rafidios. .....................................................................................................................................................24 B. Observacin de drusas. .......................................................................................................................................................24 C. Observacin de cistolitos. ....................................................................................................................................................24

    5. Componentes de la pared celular. .......................................................................................................................................25 A. Deteccin de celulosa ...........................................................................................................................................................25 B. Deteccin de lignina. ............................................................................................................................................................25 C. Deteccin de cutina. ..............................................................................................................................................................25 D. Deteccin de suberina. .........................................................................................................................................................26

    Ejercicio B: Tejidos vegetales ................................................................................................................................ 27 1. Observacin de diferentes tejidos. ......................................................................................................................................27 2. Observacin de estomas. .......................................................................................................................................................28 3. Observacin de tricomas. .......................................................................................................................................................29

    NOTAS ............................................................................................................................................. 30

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  • Curso de Tcnicas de Histologa Vegetal.

    Curso de Tcnicas de Histologa Vegetal.

    C L U L A S Y T E J I D O S V EG E T A L E S

    INTRODUCCIN Las plantas difieren de otras formas de vida de formas muy diversas y muchas de estas diferencias pueden observarse mirando en el interior de sus clulas. En estas prcticas, aprenderemos a conocer algunas estruc-turas y orgnulos celulares que son exclusivos de las plantas: las paredes celulares que proporcionan forma y dan proteccin a las clulas, los cloroplastos y cromoplastos implicados en el proceso fotosinttico, las vacuolas que, entre otras cosas, dan color a los frutos y flores para atraer a los animales, y los cristales que les proporcionan proteccin.

    Las angiospermas (plantas con flores) son organismos pluricelulares complejos formados de muchos tipos diferentes de clulas. Los grupos de clulas que estn especializados en estructura y funcin se conocen como tejidos. Los 3 tipos de tejidos bsicos que se encuentran en las plantas son los fundamentales, los drmicos, y los tejidos vasculares. Los tejidos drmicos forman las capas externas de la planta, los tejidos vasculares son los tejidos de conduccin, y los tejidos fundamentales incluyen todos los dems. Estos tres tipos de tejidos constituyen cada rgano de las plantas: tallos, races, hojas, flores, frutos, etc.

    EJERCICIO A: ESTRUCTURAS Y ORGNULOS DE LA CLULA VEGETAL En las clulas vegetales, la estructura est ntimamente relacionada con la funcin. En este ejercicio, prepa-raremos nuestras propias muestras para darnos cuenta de la belleza de las formas y funciones dentro de las clulas vegetales.

    Las clulas vegetales son clulas eucariotas que difieren en varios aspectos clave de las clulas de otros organismos eucariotas.

    Sus rasgos distintivos (figuras 1 y 2), con res-pecto a otros tipos de clulas eucariticas, son:

    1. Poseen una pared celular particular compuesta de celulosa, hemicelulosas, pectinas y, en muchos casos, lignina. Es segregada por el protoplasto en el ex-terior de la membrana celular. Esto contrasta con las paredes de los hon-gos (que son de quitina) y de las bac-terias (de peptidoglucano).

    2. Poseen plstidos, siendo los ms nota-bles los cloroplastos, que contienen clo-rofila y los sistemas bioqumicos para la fotosntesis, pero tambin amiloplas-tos especializados para el almacenamiento de almidn, elaioplastos especializados para el almace-namiento de grasa, y cromoplastos especializados para la sntesis y almacenamiento de pigmentos

    Figura 1. Estructura de la clula vegetal. Micrografa electr-nica (TEM) en falso color de una clula vegetal joven

    Adaptado de Mader, S.S. Biology, 10th. Ed. McGraw-Hill Companies

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    y que tambin son fotosintticamente activos. Al igual que en las mitocondrias, que tienen un genoma que codifica 37 genes, los plstidos tienen sus propios genomas con unos 100 a 120 genes nicos y que, se presume, surgieron como endosimbiontes procariticos.

    3. Poseen una gran vacuola central, llena de agua, rodeada por una membrana conocida como tono-

    plasto y que mantiene la turgencia de la clula, almacena molculas tiles para la clula y, tambin, materiales residuales.

    4. La divisin celular se lleva a cabo mediante la construccin de un fragmoplasto como paso previo

    a la formacin de la pared celular. Este tipo de citocinesis es exclusivo de las plantas terrestres y de algunos grupos de algas.

    5. El esperma de los brifitos y pteridfitos posee flagelos similares a los de los animales, pero las

    plantas superiores, (incluyendo las gimnospermas y las plantas con flores - angiospermas) carecen de flagelos y centriolos que si estn presentes en las clulas animales.

    Figura 2. Estructura de la clula vegetal. Esquema de una clula vegetal joven mostrando sus estructuras y orgnulos principales. Destacan con un asterisco los que son exclusivos de las plantas: pared celular, cloroplastos y vacuola central.

    Adaptado de Mader, S.S. Biology, 10th. Ed. McGraw-Hill Companies

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    Materiales necesarios para el ejercicio A Observacin de amiloplastos: pltano (Musa x paradisiaca), garbanzos (Cycer arietinum), patatas (Sola-

    num tuberosum), smolas de arroz (Oriza sativa) y de trigo (Triticum sp.). Observacin de cloroplastos: algas filamentosas (Spirogyra, Zygnema, etc.), hojas de Elodea (Elodea

    sp.), filoides de musgos (Spagnum sp.) Observacin de cristales: hoja de Dieffenbachia sp., hoja de oreja de elefante (Colocasia sp.), hoja

    del rbol del caucho (Ficus elstica), secciones transversales de tallos de geranio (Pelargonium sp.) Observacin de cromoplastos: pimientos (Capsicum annuum) de distintos colores (verdes, rojos, amarillos),

    tomates (Solanum lycopersicum), zanahorias (Daucus carota) Secciones transversales de tallos adultos de geranio (Pelargonium sp.) Secciones transversales de tallos jvenes de hiedra (Hedera helix)

    Cestillos de tincin Frasco con cido clorhdrico concentrado Frasco con etanol 70% Frasco con Sudn III Frasco cuentagotas con cloro-ioduro de zinc Frasco cuentagotas con floroglucina alcohlica al 1% Frascos cuentagotas con agua

    Aguja de diseccin Cuchilla Frasco cuentagotas con agua Frasco cuentagotas con azul de metileno Frasco cuentagotas con Lugol Lanceta Microscopio compuesto Microtomo de mano Pincel Pinzas Placas Petri Portas y cubreobjetos Tiras de papel de filtro

    Procedimiento para el ejercicio A

    1. Observacin de plastos. Cloroplastos.

    1. La Elodea (Elodea sp.) es una planta acutica con elevado desarrollo vegetativo. Sus hojas de color verde brillante son muy adecuadas para estudiar algunos de sus orgnulos celulares sin prepara-ciones previas. Con la ayuda de las pinzas coger, de una ramita de Elodea, una de sus hojas jvenes y ponerla sobre un portaobjetos que tenga una gota de agua. Cubrir con un cubreobjetos (dejndolo caer de forma inclinada para evitar la formacin de burbujas). Eliminar el exceso de agua del portaobjetos con ayuda de un trozo de papel de filtro.

    2. Observar al microscopio a 4x o 10x para un sector de solamente una o dos capas de espesor. Procurar enfocar la parte superior de la muestra y no las capas intermedias. Centrarse en un pe-queo grupo de clulas. Observar con el objetivo de 40x. Notar que las clulas vegetales tienen una forma regular. Se ven como rectngulos (Figura 3). El contorno de la clula es evidente porque el lmite exterior de una clula vegetal es la pared celular. La pared celular es rgida y da soporte a la celda. En estas clulas, la pared primaria se compone principalmente del polisacrido celulosa.

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    En algunos tipos de clulas vegetales, se depositan capas adicionales en la parte interna de la pared primaria. Esta es la pared secundaria, que es mucho ms gruesa y contiene lignina, adems de la celulosa. La dureza y el carcter de la madera se debe a la pared secundaria.

    La cohesividad existente entre las clulas vegetales se debe a la presencia de la lmina media, un cemento intercelular compuesto de pectinas, que mantiene unidas unas clulas con otras. La lmina media es ms evidente en las esquinas celulares.

    3. Observar el interior de una de estas clulas. Notar la presencia de pequeos discos verdes que parece que se concentran en la parte interna de la pared celular. Son los cloroplastos, y el pigmento verde que contienen se denomina clorofila. Son los orgnulos encargados de llevar a cabo la foto-sntesis. Aunque no es visible, una membrana celular rodea al protoplasto. Esta membrana es una bicapa lipdica que regula el paso de sustancias entre el exterior y el interior celular. Dibujar lo observado en el espacio disponible en el apartado de resultados.

    Observar tambin cloroplastos en preparaciones en fresco de muestras de algas filamento-

    sas, hojitas (filoides) de musgo, o de cualquier otra muestra disponible. Hacer preparaciones en fresco y observar a 4x o 10x y luego a 40x. Hacer dibujos representativos de lo obser-vado en el espacio disponible del apartado de resultados.

    4. En algunas clulas podremos encontrar el ncleo. Tiene forma esfrica y est limitado por una membrana nuclear. Su tamao en mayor que el de los cloroplastos y suele estar adyacente a la pared celular o en el centro de la clula. Su interior aparece granular debido a la cromatina (ADN y protenas). En ocasiones podemos ver una o dos pequeas regiones circulares dentro del ncleo. Son los nuclo-los, ricos en cido ribonucleico, que estn implicados en procesos de sntesis proteica.

    Figura 3 Micrografas pticas de las clulas de Elodea sp. Se puede apreciar claramente la pared celular, los cloroplastos y, en algunos casos, el ncleo.

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    5. Aunque el interior celular aparece vaco, realmente no es as. Normalmente est ocupado por una gran vacuola central. La membrana que delimita a la vacuola se denomina tonoplasto y es difcil-mente visible sin tincin. La vacuola sirve como reservorio de materiales, incluida el agua, que la clula usa cuando lo necesita. Tambin puede servir para almacenar productos de desecho. De hecho, algunos de estos materiales se acumulan en tan gran cantidad que precipitan formando cris-tales. Si observamos bien el interior de las clulas podremos ver algunos de estos cristales con forma de agujas. Algunos pigmentos se acumulan tambin en las vacuolas siendo los responsables del color de frutos y flores. Algunos de estos colorantes se han venido usando por el hombre desde hace muchos siglos para teir los tejidos.

    2. Observacin de plastos. Cromoplastos

    1. El color tambin puede deberse a la presencia en el interior de las clulas de cromoplastos. Estos orgnulos contienen carotenoides de color amarillo, naranja o rojo. Estn relacionados con los clo-roplastos; de hecho, unos y otros se originan a partir de proplastidios que son los orgnulos a partir de los cuales se originan todos los plastos.

    Los cromoplastos presentan una gran cantidad de formas y tamaos (figura 4). Son abundantes en los ptalos de las flores, en ciertos frutos, e incluso en algunas races. Para observar cromoplastos, tomar trozos pequeos de muestras y colocarlos sobre un portaobjetos. Aadir una gota de agua o de colorante y cubrir con un cubreobjetos. Observar a 4x o 10x y luego a 40x. Hacer dibujos representativos de lo observado en el espacio disponible al final de la prctica. Observar muestras de:

    1. Pimiento rojo, verde y amarillo (tomar ST del mesocarpo o trozos de epidermis). 2. Tomate (hacer squash con tejido del mesocarpo). 3. Zanahoria (ST de raz).

    Figura 4. Tipos de cromoplastos. Imagen modificada de Strasburger et al. (1994)

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    3. Observacin de plastos. Amiloplastos.

    1. Adems de cloro- y cromoplastos tambin podemos encontrar leucoplastos. Estos son incoloros y segn el material que acumulen se denominan amiloplastos (almidn), elaioplastos (lpidos), pro-teinoplastos (protenas), etc.

    Para observar amiloplastos realizaremos preparaciones en fresco y teidas con Lugol de distintas

    muestras. Las muestras pueden cortarse mediante un microtomo de mano para obtener secciones trans-

    versales de los distintos parnquimas que se depositan bien extendidas sobre una gota de agua colocada en un portaobjetos, o bien pueden rasparse con ayuda de un cter o bistur para obtener jugo que luego se deposita sobre un portaobjetos.

    Observar primero con el objetivo de 4x y de 10x y luego con el de 40x. Comprobar la diver-sidad de formas existentes entre los amiloplastos de las diferentes muestras (figuras 5 y 6). Dibujar lo observado en el espacio preparado para ello en el espacio disponible al final de la prctica.

    Observar muestras de: 1. Patata (ST del parnquima o raspado) 2. Pltano (squash del tejido parenquimtico) 3. Garbanzo (ST del albumen o raspado) 4. Smola de arroz 5. Smola de trigo

    Figura 5. Tipos de amiloplastos. Pueden tener forma muy variada: esfricos, ovales, alargados (en forma de fmur), y normalmente muestran una deposicin en capas alrededor de un punto, el hilo, que puede ser (A) excntrico (Solanum) o (B) cntrico (gramneas y leguminosas). Cuando hay ms de un hilo se forman granos compuestos (C, Avena; D, Oryza). Imagen modificada de Nultsch (1966)

    (B)

    (A)

    (C)

    (D)

    Grano de arroz visto con SEM

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    4. Observacin de cristales celulares

    Las plantas no poseen un sistema excretor y, por lo tanto, algunas sustancias del metabolismo celular pueden acumularse hasta alcanzar niveles txicos para las clulas. Mediante la formacin de cristales que precipitan en la vacuola celular, tales sustancias se extraen del citosol, convirtindose as en estructuras inertes e inocuas. Algunos de los cristales que se forman son muy bonitos de observar (rafidios, en forma de agujas, drusas, en forma de estrellas, o prismas). En ocasiones se emplean para la identificacin vegetal con motivos fo-renses o arqueolgicos. La mayora de estos cristales contienen calcio, bien en forma de oxalato clcico o, menos frecuentemente, como carbonato clcico. Se denomina fitolito a todo cuerpo mineralizado integrante de tejidos orgnicos que son producidos por sustancias ergsticas (resultantes del metabolismo); en particu-lar, los fitolitos son biolitos de origen vegetal, de tamao microscpico y naturaleza qumica preferentemente silcea o clcica. Son abundantes en ciertas familias y gneros de plantas, usualmente monocotiledneas. El silicio (Si) que las races absorben en forma de cido monosilcico (H4SiO4) de la solucin del suelo es depo-sitado como slice amorfa hidratada (SiO2.nH2O) en espacios inter o intracelulares o en las paredes celula-res. En general, el depsito cuando es intracelular toma la forma de la clula, por lo que es posible asociar una forma fitoltica con una clula o un tejido. De la misma manera que los fitolitos pueden reflejar formas que permiten reconocer tejidos, es posible identificar el taxn productor. Numerosos estudios han sealado y demostrado la relacin entre las formas fitolticas y la sistemtica. En este ejercicio, aprenderemos a observar y diferenciar distintos tipos de cristales encontrados en las plantas.

    1. Observacin de drusas. El oxalato clcico puede cristalizar en forma de rosa del desierto dando lugar a las drusas. Las drusas (figura 6) son grupos de cristales de oxalato de calcio, silicatos o carbonatos presentes en las plantas. Los cristales de oxalato de calcio (Ca(COO), CaOx) se encuen-tran en algas, angiospermas, y gimnospermas, en un total de ms de 215 familias. Estas plantas acumulan oxalato en un rango que va del 3% al 80% de su peso seco, a travs de un proceso de biomineralizacin en una variedad de formas. Las drusas son tambin un medio de defensa de las plantas ante los herbvoros.

    Utilizar cortes (ST) de tallo de geranio. Colocar un corte sobre una gota de agua y extender adecuadamente. Colocar un cubre y observar al microscopio con el objetivo de 4x y de 10x. Buscar cristales con forma de estrella especialmente en la zona del parnquima cortical (crtex) y en la mdula. Observar entonces con el objetivo de 40x. Dibujar lo observado en el espacio disponible al final de la prctica.

    2. Observacin de rafidios. En botnica, se denomina rafidio (o tambin rfide) a los cristales con forma de aguja (figura 7) compuestos por oxalato de calcio que se hallan presentes en muchas

    Figura 6. Tipos de amiloplastos. Formas y disposiciones de los amiloplastos en el interior de las clulas. (A) St de parn-quima reservante de tubrculo de patata (Solanum); (B) ST de albumen de trigo (Triticum); (C) ST de albumen de arroz (Oryza); (D) Squash de parnquima de pltano (Musa x paradisiaca).

    (A) (B) (C) (D)

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    clulas parenquimticas de las angiospermas. La funcin de tales cristales en las plantas aparente-mente est relacionada con los mecanismos de defensa contra los animales herbvoros.

    Tomar una pequea muestra de hojas de Dieffenbachia o de Colocasia. Hacer preparaciones

    en fresco de secciones transversal de estas hojas, cortar y deshacer con un bistur, colocar un cubreobjetos y observar al microscopio. Buscar haces de cristales con forma de aguja. Ob-servar al microscopio con el objetivo de 4x o de 10x. Observar entonces con el objetivo de 40x. Estas estructuras se conocen con el nombre de rafidios. Dibujar lo observado en los espacios disponibles al final de la prctica.

    3. Los cistolitos son otro tipo de cristal vegetal que podemos encontrar en las plantas (figura 8). Estn formados de car-bonato clcico y presen-tes en un pequeo n-mero de familias, entre las que se incluyen las morceas. El rbol del caucho (Ficus elstica) pertenece a esta familia. Tomar una seccin trans-versal de una hoja de Fi-cus (puesto que las hojas son bastante rgidas no deberemos tener excesi-vos problemas para cor-tar una seccin transver-sal de un trozo de las mismas).

    Figura 7. Tipos de cristales celulares. Esquema e imgenes al SEM de prismas, drusas, rafidios y estiloides. Figura adaptada de Nultsch (1966); imgenes tomadas de http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema8/8-5vacuola.htm

    Figura 8. Estructura de un litocisto. El litocisto es una clula epidrmica que con-tiene en su interior un cistolito, cristal de carbonato clcico (Dibujo adaptada de; Micrografa tomada de Raven et al., 2013)

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    Colocar esta seccin sobre un portaobjetos con una gota de agua y observar a 4x y 10x. Buscar en la zona de la epidermis del haz hasta localizar un litocisto (clula epidrmica que contiene un cistolito). Observar entonces con el objetivo de 40x. El cistolito tiene forma como de racimos de uvas colgado. Dibujar lo observado en el espacio disponible al final de la prctica.

    5. Componentes de la pared celular.

    Mientras las clulas animales, por lo general, se encuentran desnudas, las clulas vegetales poseen una pared celular exterior segregada por el citoplasma. La pared celular protege los contenidos de la clula, da rigidez a la estructura celular, funciona como mediadora en todas las relaciones de la clula con el entorno y acta como compartimiento celular. Adems, define la estructura y otorga soporte a los tejidos y muchas ms partes de la clula. La pared celular tambin limita la entrada de molculas grandes que pueden ser txicas para la clula. Adems, permite la creacin de un entorno osmtico estable mediante impidiendo la lisis osmtica y ayudando a retener el agua.

    En la mayor parte de las plantas el principal componente de la pared celular es la celulosa, que se encuentra en las paredes primarias y, sobre todo en las secundarias, formando estructuras fibrilares, por medio de puentes de hidrgeno. Durante la vida de la clula su pared celular puede adquirir nuevas pro-piedades qumicas y fsicas, al intercalarse nuevas sustancias en su estructura. A estas modificaciones se les denomina secundarias, siendo las ms importantes la lignificacin, la suberificacin, y la cutinizacin.

    1. Lignificacin: (de lignum, madera) consiste en la impregnacin de lignina, polmero del alcohol p-hidraxicinmico. Su misin es aumentar la resistencia de las paredes celulares, sin que la permeabi-lidad al agua y sustancias disueltas se altere. La lignina se sita entre las capas de celulosa por intususcepcin.

    2. Suberificacin: (de suber, corcho) consiste en la superposicin por aposicin de lminas de suberina, polmero de cidos grasos de elevado peso molecular, en las paredes de los tejidos derivados del felgeno o cambium suberoso. Este proceso confiere una gran impermeabilidad y defensa contra los agentes qumicos, microrganismos, picaduras de insectos, etc.

    3. Cutinizacin: (de cutis, piel) es la acumulacin de cutina, sustancia semejante a la suberina, por aposicin y por intususcepcin en las paredes celulares hacindolas impermeables. Este proceso slo afecta a las partes externas de las paredes que estn en contacto con el medio ambiente, y en la epidermis de algunos rganos, la cutina forma una capa pelicular (cutcula) que limita severamente la prdida de agua a travs de los tejidos.

    En este ejercicio estudiaremos el modo de detectar estas sustancias mediante tcnicas citoqumicas.

    1. Para la deteccin de la celulosa tomaremos una seccin transversal de tallo de hiedra o de gera-nio y la colocaremos bien extendido en un portaobjetos con una gota de agua.

    Secaremos bien el corte con ayuda de una tira de papel de filtro y, a continuacin, aadi-remos una o dos gotas de cloro-ioduro de zinc sobre la muestra. Dejamos actuar unos 15 seg.

    Cubrimos con un cubreobjetos evitando la formacin de burbujas y observamos al microsco-pio a 4x y 10x. Buscaremos las partes de la muestra que aparecen teidas de azul lo que nos indica que esas clulas contienen slo celulosa en sus paredes. Las clulas que aparezcan con otros colores y tonalidades poseen, adems de celulosa, otros componentes como lignina, suberina, etc.

    2. Para la deteccin de la lignina tomaremos una seccin transversal de tallo de hiedra o de geranio y la colocaremos bien extendido en un porta con una gota de agua.

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    Secaremos bien el corte con ayuda de una tira de papel de filtro y, a continuacin, aadi-remos una gota de floroglucina alcohlica sobre la muestra y dejaremos que se evapore completamente (unos 3 minutos).

    Seguidamente aadiremos una gota de cido clorhdrico concentrado y cubriremos la mues-tra con un cubreobjetos. Finalmente observaremos con el objetivo de 4x y de 10x. Buscare-mos las partes de la muestra que aparecen teidas de rojo lo que nos indica que esas clulas contienen lignina en sus paredes. Observaremos con el objetivo de 40x para ms detalle. Hacer dibujos representativos de lo observado en el espacio disponible al final de la prc-tica. Qu tejidos aparecen teidos de rojo?

    3. Para la deteccin de la cutina (paredes cutinizadas) tomaremos varios cortes de tallo de hiedra y los colocaremos en un cestillo de tincin.

    Introducir el cestillo con los cortes en una placa Petri con Sudn III. Mantendremos los cortes sumergidos durante 15 minutos.

    A continuacin, lavaremos los cortes. Para ello pasaremos varias veces el cestillo por placas Petri con agua hasta que no dejen color.

    Finalmente, montaremos 1 o 2 cortes sobre un portaobjetos de la manera habitual, los cu-briremos con un cubreobjetos y observaremos con el objetivo de 4x y de 10x. Nos debere-mos centrar en la zona ms exterior de los cortes donde se encuentra la epidermis. La cutina se deposita especficamente en la pared tangencial externa de las clulas epidrmicas for-mando la cutcula. Para observar claramente esta cutcula deberemos utilizar el objetivo de 40x. De qu color aparece la cutcula? Hacer dibujos representativos de lo observado en el espacio disponible al final de la prctica.

    4. Para la deteccin de la suberina (paredes suberificadas) tomaremos varios cortes de tallo de geranio y los colocaremos en un cestillo de tincin. que deber estar sumergido en una placa Petri

    Introducir el cestillo con los cortes en una placa Petri con etanol 70%. Mantendremos los cortes sumergidos durante 3 minutos.

    Seguidamente colocaremos el cestillo con los cortes en otra placa Petri con Sudn III. Man-tendremos los cortes sumergidos durante 15 minutos.

    A continuacin, lavaremos los cortes. Para ello pasaremos varias veces el cestillo por placas Petri con agua hasta que no dejen color.

    Finalmente, montaremos 1 o 2 cortes sobre un portaobjetos de la manera habitual, los cu-briremos con un cubreobjetos y observaremos con el objetivo de 4x y de 10x. Nos debere-mos centrar en la zona ms exterior de los cortes donde se encuentra el sber o corcho. La suberina se deposita especficamente en las paredes de las clulas de sber que sustituyen a la epidermis como tejido protector durante el crecimiento secundario. Para observar cla-ramente estas clulas deberemos utilizar el objetivo de 40x. De qu color se tien las pa-redes de estas clulas? Hacer dibujos representativos de lo observado en el espacio dispo-nible al final de la prctica.

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    EJERCICIO B: LOS TEJIDOS VEGETALES Los tejidos fundamentales constituyen la mayora de los rganos de las plantas no leosas. Difieren en tamao y forma, y realizan una amplia variedad de funciones. Los tres tejidos fundamentales son el parn-quima, colnquima, esclernquima (figura 9). De stos, los parenquimticos muestran la mayor diversidad en la forma y funcin.

    Los parnquimas constan de clulas vivas con paredes delgadas, que aparecen en diferentes regiones del cuerpo de la planta. Sus clulas pueden tener cualquier tamao o forma, sin embargo, con frecuencia apa-recen como polidricas de varias caras. Estas clulas, pueden aparecer separadas o en grupos, formando as un tejido. Las clulas del parnquima tienen muchas funciones diferentes. En las hojas, las clulas del parnquima son fotosintticas y forman el denominado mesfilo (figura 9A); en tallos subterrneos y races, las clulas del parnquima se utilizan para el almacenamiento. En las plantas no leosas, las clulas del parnquima constituyen la mayora del cuerpo de la planta.

    Los tejidos mecnicos o de sostn son dos, el colnquima y el escle-rnquima. El colnquima (figura 9B) est formado por clulas vivas alargadas que desarrollan una pared primaria irregularmente en-grosada. Estas clulas aparecen como filamentos o bandas justo de-bajo de la epidermis en hojas, tallos y flores. Sus paredes, son flexi-bles y plsticas, proporcionan sostn en los rganos de las plantas jvenes y en crecimiento activo. Hay diferentes tipos segn la forma de engrosamientos de sus paredes celulares (figura 10)

    El esclernquima (figura 9C) est formado por clulas con paredes secundarias gruesas y lignificadas, y de formas variables, que por lo general no tienen protoplasma vivo cuando estn maduras. La lignina, un componente nico que aparece en las clulas con paredes secun-darias, es un polmero complejo que aumenta la rigidez de la pared, su resistencia y su impermeabilidad al agua. El esclernquima pro-porciona sostn y proteccin mecnica en aquellas partes de las plan-tas ya maduras. Los poros son fcilmente visibles en las paredes de algunas clulas de esclernquima. El esclernquima se subdivide en dos grupos celulares: esclereidas, que son clulas pequeas y de forma irregular (figura 11), y las fibras, que son clulas alargadas (figura 12). Las esclereidas pueden aparecer formando capas com-pletas en la cubierta de la semilla, o pueden aparecer como grupos de clulas o incluso clulas individuales que estn distribuidas al azar en medio de otros tejidos. Cuando las esclereidas forman las cubiertas de las semillas, tienen una funcin protectora; cuando aparecen en las hojas,

    Figura 9. Micrografas pticas de los tres tipos principales de tejidos fundamentales. (A) Parnquima. Mesfilo; (B) Colnquima. Colnquima angular; (C) Esclernquima. Fibras floemticas.

    A B C

    A B

    C D

    Figura 10. Esquemas de los tipos de co-lnquima en funcin del engrosamiento de sus paredes celulares. (A) Angular; (B) Anular; (C) Laminar; (D) Lagunar.

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    les proporcionan soporte mecnico. En otros casos, su funcin es desconocida. La forma de las esclereidas es variable, pero rara vez son largas y delgadas. Por el contrario, las fibras son clulas de esclernquima con gruesas paredes y muy alargadas. La pa-red secundaria est generalmente muy lig-nificada. Las fibras se pueden presentar so-las, pero ms comnmente en grupos de c-lulas. Las fibras suelen estar asociadas con los haces vasculares en las hojas y tallos. Tambin forman una parte significativa de la madera en muchas plantas. Muchas fibras vegetales tienen aplicaciones comerciales en la fabricacin de telas y cuerdas.

    Los tejidos drmicos forman las capas ex-ternas de las plantas. Son responsables de las interacciones ambientales. Los dos tipos de tejidos drmicos son la epidermis y la peridermis. La epidermis se compone de c-lulas aplanadas que forman la capa ms externa de las plantas jvenes y las partes no leosas de las plantas ms viejas. En las hojas y los tallos, las clulas epidrmicas se-cretan cutina, un material creo que impide la prdida de agua de la planta. La capa de cutina se conoce como la cutcula (figura 13). En algunas hojas, la cutcula es tan espesa que la hoja tiene un aspecto brillante y ceroso. En las plantas suculentas, como los cactus, una cutcula engrosada es una de las adaptaciones que les ayuda a sobrevivir en condiciones ridas.

    Los tricomas son cualquier excrecencia epi-drmica, sea de la forma que sea, que constituye un resalte en la superficie de los rganos vegetales. Las formas ms comunes de tricomas son estructuras similares a pe-los. A pesar de que los tricomas individuales son microscpicos, pueden ser lo suficiente-mente abundantes como para dar una apa-riencia peluda o borrosa. Los tricomas, que pueden ser ramificados o no ramificados, varan mucho en tamao y forma (figura 14). Algunos tricomas ayudan a prevenir la prdida de agua en una planta, mientras que otros son glandulares. Los tricomas

    glandulares son capaces de secretar diversos productos qumicos, tales como nctar, enzimas, o compuestos aromticos, que proporcionan el aroma o fragancia a ciertas plantas. Los aceites esenciales que proporcio-nan el aroma y el sabor de las hierbas se encuentran en los tricomas glandulares.

    Figura 11. Tipos de esclereidas. Esquemas.

    Figura 12. Fibras de esclernquima. Esquemas de una seccin longi-tudinal (izquierda) y de una seccin transversal (derecha).

    Figura 13. Esquema de la epidermis mostrando la disposicin de las clulas epidrmicas y de la cutcula. (Adaptado de )

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    En la epidermis de las hojas y tallos verdes encontramos numerosos poros, estos poros se denominan esto-mas. Los estomas permiten el intercambio de gases, tales como dixido de carbono, oxgeno y vapor de agua, entre la planta y el medio ambiente. Cada poro estomtico u ostiolo est regulado por un par de clulas llamadas clulas oclusivas o guarda, que se sitan rodeando dicha abertura o poro (figura 14). Las clulas oclusivas, que tienen forma arrionada en muchas plantas, son las nicas clulas epidrmicas que contienen cloroplastos. En muchas plantas, dos o ms clulas adyacentes a las oclusivas aparecen asociadas funcionalmente a ellas y se distinguen por su morfologa de las dems clulas epidrmicas. Son las clulas anexas y segn la relacin entre dichas clulas y las oclusivas podemos distinguir distintos tipos de estomas: anomocticos, anisocticos, diacticos, paracticos y actinocticos (ver figura 16).

    La peridermis reemplaza la epidermis de las plantas que tienen crecimiento secundario. As, la peridermis que se desarrolla a partir cambium subergeno constituye la cor-teza exterior de los rboles maduros.

    Los tejidos vasculares son los tejidos conductores. Los te-jidos vasculares se encuentran en todas las partes de la planta y son fciles de ver en las hojas ya que forman las venas o nervios. Los dos tipos de tejido vascular son el xi-lema, que conduce agua y sales minerales desde las ra-ces hacia las partes areas, y el floema, que conduce los fotoasimilados por toda la planta. Tanto el xilema como el floema se componen de varios tipos diferentes de clu-las. Son tejidos complejos.

    Figura 14. Esquemas de diferentes tipos de tricomas vegetales. (Adaptado de Mauseth, 2003)

    Figura 15. Estomas de una hoja de col (Brassica ole-raceae) mostrando las partes del mismo.

    Ostiolo

    Clulas oclusivas

    Clulas anexas

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    Las clulas conductoras de agua del xilema son las traqueidas y los elementos del vaso (figura 17). En la madurez, estas clulas tienen gruesas paredes secundarias y no tienen citoplasma (clulas muertas). Las traqueidas son clulas alargadas con extremos afilados y muchos poros prominentes en sus paredes latera-les. En el xilema, las traqueidas se solapan, y el agua puede pasar de una a otra a travs de los poros de las paredes adyacentes. Las traqueidas tambin tienen funcin de soporte. Los elementos del vaso son ms cortos y anchos. A menudo tienen paredes horizontales finales con grandes aberturas o perforaciones (figura 17B). Los elementos del vaso se conectan por sus extremos para formar largos vasos, a modo de tuberas. El agua se mueve fcilmente a travs estas clulas, pasando de un elemento del vaso al siguiente a travs de esas grandes aberturas. Al igual que las traqueidas, las paredes laterales tienen numerosos poros. Ade-ms de las clulas conductoras, el xilema tambin contiene fibras y clulas de parnquima. Las fibras pro-porcionan soporte adicional, mientras que las clulas del parnquima estn implicadas en el almacenamiento y otras actividades metablicas. El xilema primario se origina a partir del procambium (meristema apical), y el xilema secundario se origina del cambium vascular. En los rboles, el xilema secundario puede llegar a ser muy extenso, constituyendo el tejido que llamamos madera.

    En el floema, las clulas implicadas en el transporte de materiales orgnicos son conocidas como elementos del tubo criboso (figura 18). Estas clulas estn vivas, son alargadas y presentan delgadas paredes prima-rias. Las paredes de los extremos son a menudo horizontales y tienen muchos poros grandes. Estas regiones con poros se denominan placas cribosas (figura 18B); Entre los elementos de los tubos cribosos adyacentes existen conexiones citoplasmticas a travs de los poros de las placas cribosas. Los materiales orgnicos son transportados a travs de estas conexiones citoplasmticas de un elemento del tubo criboso a otro. Junto a cada elemento del tubo criboso aparece una clula acompaante que est fisiolgica y ontognicamente relacionada con el elemento del tubo criboso. Estas clulas de compaa participan en la carga y descarga

    Figura 16. Esquemas de los principales tipos de estomas segn la disposicin de las clulas anexas.

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    de material orgnico en el elemento del tubo criboso. El floema tambin contiene fibras y clulas de parn-quima. El floema primario se produce por el procambium (meristema apical), y el floema secundario por el cambium vascular.

    Figura 17. Estructura del xilema. (A) Micrografa ptica y dibujo del tejido vascular del xilema mostrando la organizacin general de este tejido. (B) Dibujo de dos tipos de vasos (formados por elementos de los vasos) que difieren en el tipo de perforacin. (C) Dibujo de traqueidas. Adaptado de Mader, 2010)

    Figura 18. Estructura del floema. (A) micrografa ptica y dibujo esquemtico del tejido floemtico. (B) dibujo de un tubo criboso (formado por elementos de los tubos cribosos y clulas acompaantes). (Adaptado de Mader 2010)

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    Materiales necesarios para el ejercicio B.

    Hojas de geranio (Pelargonium sp.), clavel (Dianthus sp.), lirio (Iris sp.), carrasca (Quercus ilex), pltano de sombra (Platanus hybrida), olivo (Olea europea), ortiga (Urtica diocica), col (Brassica oleracea), lavanda (Lavandula sp.), Zebrina sp., Sedum sp., Trasdecantia sp., etc.

    Muestras preparadas de epidermis de geranio, clavel, lirio, col, Sedum, etc. Muestras preparadas de tallos, hojas y races de distinto origen. Muestras preparadas de tricomas de carrasca, olivo, pltano de sombra, ortiga, etc. Muestras de patata (Solanum tuberosum), cebolla (Allium cepa), apio (Apium graveolens), pera (Pyrus

    communis), geranio (Pelargonium sp.), Cucurbita sp., etc.

    Botella cuentagotas con agua destilada. Frasco cuentagotas con azul de anilina (colorante). Frasco cuentagotas con azul de toluidina (colorante). Frasco cuentagotas con HCl concentrado. Frasco cuentagotas con floroglucina alcohlica (colorante). Frasco cuentagotas con solucin de Lugol Microscopio de diseccin y microscopio compuesto. Micrtomo de mano. Portaobjetos, cubreobjetos, cuchillas de un solo filo, bisturs y agujas de diseccin.

    NOTA: La solucin de floroglucina-HCl es un colorante muy til para estudiar la estructura de la planta porque tie de color rojo las paredes lignificadas. Deberemos tener cuidado al usar este colorante, ya que lleva cido clorhdrico. El azul de toluidina es un colorante que tie estructura basfilas, tales como la cromatina. Se puede comportar como colorante ortocromtico (tie de color azul) o metacromtico (tie de color violeta-rojo), de-pendiendo del pH y de la naturaleza qumica de la sustancia teida. La solucin de Lugol es una disolucin de iodo molecular, I2, y ioduro potsico, KI, en agua destilada. Se une especficamente a algunos polisacridos como el almidn, tindolos de color azul oscuro.

    Procedimientos para el Ejercicio B

    1. Observacin de tejidos

    I. Secciones cortadas a mano o con un microtomo de mano. Realizar secciones a mano o bien con el mi-crotomo de Ranvier (figura 19) de las diferentes muestras mediante una cuchilla de afeitar o navaja histolgica. Hacer cortes finos en ngulo recto con el eje longitudinal del tejido vegetal, y colocar las sec-ciones en una gota de agua destilada dispuesta en un portaobjetos. Colocar un cubreobjetos. Examinar con el microscopio a bajos (objetivo 10x) y altos au-mentos (objetivo 40x).

    II. Observar muestras de:

    a. Tubrculo de patata. Observacin de parn-quimas reservantes.

    b. Tallo de apio. Observacin de colnquima. c. Peciolo de Cucurbita sp. Observacin de las cribas floemticas. d. Pulpa de pera. Observacin de esclereidas.

    Figura 19. Microtomo de mano (de Ranvier).

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    III. Parnquimas reservantes. Ver ejercicio A. En el caso del tubrculo de patata, las clulas de parnquima aparecen llenas con granos de almidn (amiloplastos). Utilizar la solucin de Lugol (aadir una gota sobre el corte) para comprobar la presencia de almidn en el interior de las clulas. Dibujar estas clulas de parnquima en el espacio adecuado del apartado resultados al final de la prctica.

    IV. Colnquima. Hacer secciones delgadas de peciolo de apio (tallo). Asegurarse de que la seccin incluye

    una o ms aristas. Montar la seccin en agua y colocar un cubreobjetos. Puede teirse con fucsina bsica o con safranina. Dibujar las clulas colenquimticas en el espacio adecuado del apartado resultados al final de la prctica. Tambin debemos observar las clulas de parnquima por debajo del coln-quima.

    V. Esclernquima. Obtener una seccin muy pequea de pulpa de pera. Usar las agujas de diseccin y

    machacar sobre un portaobjetos hasta obtener un pur. Secar con papel de filtro. Aadir una gota de floroglucina alcohlica y dejar que se evapore. Luego aadir una gota de HCl y colocar un cubreobjetos. Hacer un squash y observar. Dibujar unas pocas esclereidas en el espacio adecuado del apartado resultados al final de la prctica.

    VI. Tejidos floemticos. Cortar secciones longitudinales de tallos o peciolos de Cucurbita sp. En estos tallos,

    los elementos de los tubos cribosos del floema presentan placas cribosas muy prominentes. El floema se encuentra en los haces vasculares del tallo. Intentar localizarlo. Colocar uno de las secciones sobre un portaobjetos y secar. Deshidratar el corte con unas gotas de alcohol de 96. Teir durante 5 minutos con azul de anilina. Diferenciar durante 1 minuto con esencia de clavo, una o dos gotas sobre el corte. Deshidratar haciendo gotear alcohol absoluto sobre el corte. Aclarar. Montar y observar al microscopio. Si se dispone de microscopio de epifluorescencia, observar la muestra bajo luz UV para ver las

    cribas con mayor claridad. Dibujar los resultados al final de la prctica.

    2. Tejidos epidrmicos. Observacin de tricomas y estomas.

    I. Obtencin y observacin de estomas.

    1. Tomar diferentes muestras de hoja (geranio, clavel, lirio, col, etc.) e introducir la punta de la lanceta apenas por debajo de la epidermis del envs foliar.

    2. Levantar un trocito pequeo, cogerlo con la pinza y tirar hasta desprenderlo, procurando no arran-car al mismo tiempo el mesfilo.

    3. Montar un trocito de epidermis sobre un portaobjetos con una gota de agua, intentando que la

    superficie exterior quede hacia arriba. En lugar de agua podemos poner un colorante (azul de toluidina, fucsina bsica, etc.)

    4. Colocar el cubreobjetos y observar al microscopio. Hay estomas? Cmo son las clulas oclusivas?

    Y las anexas? Identificar los distintos tipos de disposicin de los estomas segn la especie vegetal. Hacer uso de la figura 16 y 20 para distinguir los tipos. En el caso de algunas muestras, como en el geranio, la epidermis puede contener tricomas glandulares. Intentar ver algn tricoma. Dibujar una porcin de cada epidermis observada en los espacios adecuados.

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    Figura 19. Diferentes tipos de disposicin de las clulas anexas respecto a las oclusivas en las plantas vasculares. (A) anomoctico; (B) cicloctico; (C) anficicloctico; (D) actinoctico; (E) anisoctico; (F) anfianisoctico; (G) diactico; (H) anfi-ciactico; (I) paractico; (J) anfiparactico; (K) braquiparactico; (L) anfibraquiparactico; (M) hemiparactico; (N) parate-tractico; (O) anfiparatetractico; (P) braquiparatetractico; (Q) anfibraquiparatetractico; (R) estauroctico; (S) anomote-tracitico; (T) parahexactico-monopolar; (U) parahexactico-dipolar; (V) braquiparahexactico-monopolar; (W) braqui-parahexactico-dipolar; (X) poloctico; (Y) copoloctico; (Z) axiloctico; (AA) coaxiloctico; (BB) desmoctico; (CC) perictico; (DD) coperictico; (EE) anfiperictico. (Adaptado de Dilcher).

    (A) (B) (C) (D) (E)

    (F) (G) (H) (I) (J)

    (K) (L) (M) (N) (O) (P)

    (Q) (R) (S) (T) (U)

    (V) (W) (X) (Y) (Z)

    (AA) (BB) (CC) (DD) (EE)

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    II. Montaje para la observacin de pelos epidrmicos (tricomas). 1. Coger muestras de hoja (pltano de sombra, olivo, carrasca, ortiga, etc.) y con la ayuda del bistur

    o de una lanceta raspar la superficie que presente mayor abundancia de pelos.

    2. Depositar lo raspado sobre un portaobjetos con una gota de agua. En lugar de agua podemos poner una gota de colorante (azul de toluidina, fucsina bsica, safranina, etc.)

    3. Colocar el cubreobjetos y observar e identificar los distintos tipos de pelos al microscopio usando

    las figuras 14 y 21 como referencia. Dibujar los tipos de tricomas que se observen en el espacio adecuado del apartado resultados al final de la prctica.

    NOTA: Limpiar cada vez el material con el que se raspan los pelos, a fin de evitar posibles mezclas de tricomas de plantas distintas.

    Figura 21. Diferentes tipos de tricomas. (A) pelo simple; (B) simple con base tuberculada; (C) pelo glandular peltado; (D) pelo vesiculado; (E) pelo moliniforme; (F) pelo dendrtico o en candelabro -ramificado en varios planos; (G) pelo estrallado ramificado en un plano; (H) pelo escamoso peltado; (I) pelo elongado; (J) pelo barbado; (K) pelo plumoso

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    BIBLIOGRAFA Evert, R.F. 2006. Esau's Plant Anatomy: Meristems, Cells, and Tissues of the Plant Body: Their Structure,

    Function, and Development, 3rd Edition. John Wiley & Sons Inc., Hoboken, New Jersey. Mauseth, J.D. 2011. Botany: An introduction to plant biology. 4nd ed. Sudbury (MA); Jones and Bartlett

    Publishers. Mauseth, J.D. 2008. Plant anatomy. 2nd ed., Menlo Park (CA); Benjamin/Cummings Moore, R., W.D. Clark, K.R. Stern and D.S. Vodopich. 1998. Botany. McGraw-Hill Companies, Inc. New

    York. Nultsch, W. 1966. Botnica General. Editorial Norma. Raven, P.H., R.F. Evert, and S. Eichhorn. 2013. Biology of plants, 8th ed., W.H. Freeman/Worth. New

    York. Santamarina, M.P., Rosell, J. & Garca Breijo, F.J. (2009). Atlas de Anatoma Vegetal. Editorial U.P.V.,

    Valencia. Strasburger, E. et al. 1994. Tratado de Botnica. 8 ed. Ediciones Omega S.A. Tobin, A.J. and R.E. Morel. 1997. Asking about cells. Forth Worth (TX). Saunders College Publishing.

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    RESULTADOS

    EJERCICIO A: ESTRUCTURAS Y ORGNULOS DE LA CLULA VEGETAL

    1. Observacin de cloroplastos. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    Estructura observada: Tipo de planta:

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    2. Observacin de cromoplastos. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    3. Observacin de amiloplastos. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    4. Observacin de cristales celulares

    A. Observacin de rafidios. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    B. Observacin de drusas. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    C. Observacin de cistolitos. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    5. Componentes de la pared celular.

    A. Deteccin de celulosa Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas. De qu color se tie la lignina?

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    B. Deteccin de lignina. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas. De qu color se tie la lignina?

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    C. Deteccin de cutina. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas. De qu color se tie la cutcula?

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    D. Deteccin de suberina. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas. De qu color se tie el sber?

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    EJERCICIO B: TEJIDOS VEGETALES

    1. Observacin de diferentes tejidos. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    2. Observacin de estomas. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    3. Observacin de tricomas. Dibujar en los espacios siguientes las muestras observadas al microscopio.

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    NOTAS

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    INTRODUCCINEjercicio A: ESTRUCTURAs y orgnulos de la clula vegetalMateriales necesarios para el ejercicio AProcedimiento para el ejercicio A1. Observacin de plastos. Cloroplastos.2. Observacin de plastos. Cromoplastos3. Observacin de plastos. Amiloplastos.4. Observacin de cristales celulares5. Componentes de la pared celular.

    EJERCICIO B: LOS TEJIDOS VEGETALESMateriales necesarios para el ejercicio B.Procedimientos para el Ejercicio B1. Observacin de tejidos2. Tejidos epidrmicos. Observacin de tricomas y estomas.

    BIBLIOGRAFARESULTADOSEJERCICIO A: ESTRUCTURAS Y ORGNULOS DE LA CLULA VEGETAL1. Observacin de cloroplastos.2. Observacin de cromoplastos.3. Observacin de amiloplastos.4. Observacin de cristales celularesA. Observacin de rafidios.B. Observacin de drusas.C. Observacin de cistolitos.5. Componentes de la pared celular.A. Deteccin de celulosaB. Deteccin de lignina.C. Deteccin de cutina.D. Deteccin de suberina.

    EJERCICIO B: TEJIDOS VEGETALES1. Observacin de diferentes tejidos.2. Observacin de estomas.3. Observacin de tricomas.

    NOTAS