CytogCytogéénnéétique et tique et FoetopathologieFoetopathologie

•• CaryotypeCaryotype–– IMGIMG

–– Mort fMort fœœtale in uterotale in utero

–– Expulsions spontanExpulsions spontanééeses

–– DDééccèès ns nééo-natalo-natal

•• Nouveaux prNouveaux prééllèèvements par svements par séécuritcuritéé et/ et/ou pour congou pour congéélation culturelation culture

IMGIMG

FFœœtus jeune < 15 satus jeune < 15 sa

•• VillositVillositéés choriales souvents choriales souvent

•• LA si possibleLA si possible

•• PrPréévoir congvoir congéélation si besoinlation si besoin

IMG : 15 < FIMG : 15 < Fœœtus < 22 satus < 22 sa

PrPréélever avant IMGlever avant IMG•• Meilleur tissu : LAMeilleur tissu : LA

•• VillositVillositéés chorialess choriales

•• Bonne quantitBonne quantitéé +++ +++–– Surnageant Surnageant

–– Caryotype Caryotype

–– Cultures pour cong Cultures pour congéélation f contextelation f contexte

IMG si FIMG si Fœœtus > 22 sa : Foeticidetus > 22 sa : Foeticide

•• LA : idLA : idééalal–– surnageant surnageant …… cong congéélation (lation (anasarque)anasarque)–– caryotype et cong caryotype et congéélation cultureslation cultures

•• Sang pour caryotype Sang pour caryotype ééventuelventuel•• SangSang

–– ds ds tube EDTA pour extraction ADNtube EDTA pour extraction ADN–– Pour bilan : NFS + plaquettes (hydroc Pour bilan : NFS + plaquettes (hydrocééphalie)phalie)–– Virologie, Virologie, etcetc……

Dans tous cas IMGDans tous cas IMG

Avant de pratiquer autopsieAvant de pratiquer autopsie•• Exiger rExiger réésultat du caryotype dans le dossiersultat du caryotype dans le dossier

•• Si en coursSi en cours

–– vvéérifier la bonne pousse MAISrifier la bonne pousse MAIS

–– prpréélever un autre tissu lever un autre tissu (ou +)(ou +) de principe de principe

–– pour caryotype et congpour caryotype et congéélation de cultureslation de cultures

(si besoin en fonction du r (si besoin en fonction du réésultat)sultat)

IMG 1er trimestreIMG 1er trimestreCas particulier des fCas particulier des fœœtus avectus avec

clart clartéé nuquale nuquale ou hygromaou hygroma•• IMG prIMG préécocecoce•• Sans rSans réésultat de caryotypesultat de caryotype•• Bon nombre an chromosomiquesBon nombre an chromosomiques•• Examen F-P non informatif souventExamen F-P non informatif souvent•• Pas dPas d’’aspiration+++aspiration+++•• PrPréélever autre tissulever autre tissu•• Garder cultures +++ en congGarder cultures +++ en congéélationlation

IMGIMG

Aberration chromosomiqueAberration chromosomique

•• Classique : pas de prClassique : pas de prééllèèvement en +vement en +

•• Rare , complexe ou Rare , complexe ou «« an an ééquilibrquilibréée e »»–– prpréélever autre tissulever autre tissu

–– CongCongéélation de cultureslation de cultures

•• MosaMosaïïque : plusieurs tissus F et Pque : plusieurs tissus F et P

•• En accord avec CytogEn accord avec Cytogéénnééticienticien

IMGIMG

Syndrome identifiSyndrome identifiéé àà caryotype normal caryotype normal

•• Faire quand mFaire quand mêême le caryotypeme le caryotype

•• PrPréévoir congvoir congéélation de cultureslation de cultures

•• PrPréélever tissuslever tissus

•• Localisation future +++ en coursLocalisation future +++ en cours…… d dééjjààpublipubliééee

IMGIMG Syndrome malformatif non Syndrome malformatif nonidentifiidentifiéé àà caryotype normal caryotype normal

•• Caryotype fCaryotype fœœtaltal•• Garder culturesGarder cultures•• Si couple apparentSi couple apparentéé +++ +++•• Si rSi réécurrence +++ de pathologiecurrence +++ de pathologie

malformative connue ou nonmalformative connue ou non

Cas particulier des anasarquesCas particulier des anasarques

•• Garder du surnageant de LA enGarder du surnageant de LA encongcongéélation pour bilan mlation pour bilan méétaboliquetaboliquedd’’autant que non fait en autant que non fait en antenatal antenatal ++++++

•• IntIntéérrêêt majeur des cultures det majeur des cultures defibroblastes en congfibroblastes en congéélationlation +++ +++

IMG : Nouveaux prIMG : Nouveaux prééllèèvementsvementspour caryotypepour caryotype

Discordance PhDiscordance Phéénotype / Caryotypenotype / Caryotype

•• Tableau Tableau éévocateur dvocateur d’’an chromosomiquean chromosomique

•• Caryotype normalCaryotype normal

•• Erreur possibleErreur possible

•• MosaMosaïïqueque

•• PrPréélever Tissu flever Tissu fœœtal et placentairetal et placentaire

IMG : Nouveaux prIMG : Nouveaux prééllèèvementsvementspour caryotypepour caryotype

Caryotype normal sur 1 tissuCaryotype normal sur 1 tissuAnomalies en mosaAnomalies en mosaïïqueque

•• Caryotype normal sur sangCaryotype normal sur sang•• Tableau => une anomalie connueTableau => une anomalie connue•• Hernie diaphragmatiqueHernie diaphragmatique•• TTéétrasomie 12p et Syndrome de Frynstrasomie 12p et Syndrome de Fryns•• Caryotype sur LA, tissus F et PCaryotype sur LA, tissus F et P•• Conseil gConseil géénnéétique difftique difféérentrent

IMG : Nouveaux prIMG : Nouveaux prééllèèvementsvementspour caryotypepour caryotype

Caryotype normal sur 1 tissuCaryotype normal sur 1 tissu

Anomalies en mosaAnomalies en mosaïïqueque•• AgAgéénnéésie du corps calleuxsie du corps calleux

•• Si Caryotype normal sur LASi Caryotype normal sur LA

•• Rechercher Trisomie 8Rechercher Trisomie 8

•• Caryotype sur sang et tissus F et PCaryotype sur sang et tissus F et P

Trisomie 9 Trisomie 9 etcetc……

Trisomie 8 en mosaTrisomie 8 en mosaïïqueque

•• AnomalieAnomaliechromosomiquechromosomique

•• souvent absente souvent absente ds ds LALA

•• prpréésente (homogsente (homogèène)ne)

–– dans sang fdans sang fœœtaltal

–– dans tissus fdans tissus fœœtauxtaux

–– dans villositdans villositéésschorialeschoriales

•• A/hypoplasie rotulesA/hypoplasie rotules

•• HydronHydronééphrosephrose

IMG : Nouveaux prIMG : Nouveaux prééllèèvementsvementspour caryotypepour caryotype

Anomalies en mosaAnomalies en mosaïïqueque

AsymAsyméétrie corporelletrie corporelle

VVéérifier plusieurs tissus Frifier plusieurs tissus Fœœtaux ettaux etPlacentairesPlacentaires

H Héémicorps droit et gauchemicorps droit et gauche

Diff Difféérents viscrents viscèèresres

IMG : Nouveaux prIMG : Nouveaux prééllèèvementsvementspour caryotypepour caryotype

Discordance Caryotype / SexeDiscordance Caryotype / Sexe

•• Ex : OGE fEx : OGE fééminins et caryotype 46, XYminins et caryotype 46, XY

•• ContrContrôôle sur tissus fle sur tissus fœœtaux et placentairestaux et placentaires

•• ContrContrôôle sur gonadesle sur gonades

•• SRY, biologie molSRY, biologie molééculaireculaire

•• CongCongéélations de cultureslations de cultures et de gonadeet de gonade

IMG : Nouveaux prIMG : Nouveaux prééllèèvementsvementspour caryotypepour caryotype

Discordance PhDiscordance Phéénotype / Caryotypenotype / Caryotype

•• Caryotype normalCaryotype normal

•• PhPhéénotype pouvant notype pouvant éévoquer unevoquer unemicrodmicrodéélléétion => FISHtion => FISH

•• 4p-4p-

•• CCT : 22q11.2CCT : 22q11.2

•• HoloprosencHoloprosencééphalie : 7q3.6 etc..phalie : 7q3.6 etc..

•• LissencLissencééphaliephalie

IMG : Nouveaux prIMG : Nouveaux prééllèèvementsvementspour caryotypepour caryotype

Dans les RCIUDans les RCIU

•• FFœœtus tus àà caryotype sur LA normal caryotype sur LA normal

•• Tissus placentairesTissus placentaires

•• Rechercher mosaRechercher mosaïïque confinque confinéée aue auplacenta en prplacenta en préélevantlevant–– Chorion et villositChorion et villositéés en plusieurs endroitss en plusieurs endroits

IMG : Nouveau prIMG : Nouveau prééllèèvementvementpour caryotypepour caryotype

•• Nouveau prNouveau prééllèèvement +++vement +++

•• Souvent cultures en cours terminSouvent cultures en cours terminééeses

•• Doute : nouveau prDoute : nouveau prééllèèvementvement

•• Souvent caryotype fait pourSouvent caryotype fait pour–– ÂÂge maternelge maternel

–– NuqueNuque

–– Marqueurs sMarqueurs séériquesriques

Quand faut-il congeler desQuand faut-il congeler des cultures de fibroblastes ? cultures de fibroblastes ?

•• Couple apparentCouple apparentéé +++ +++•• RRéécurrence de malformations +++currence de malformations +++•• RRéécurrence de MFIU ou FCS +++currence de MFIU ou FCS +++•• Anasarques +++Anasarques +++•• IMG pour CN IMG pour CN àà caryotype normal caryotype normal•• Syndrome malformatif Syndrome malformatif àà caryotype normal caryotype normal•• S malformatif avec an S malformatif avec an chrchr. Inhabituelles. Inhabituelles……•• RCIU non expliquRCIU non expliquéé•• CardiopathiesCardiopathies……..

IMG du 1er trimestre

r 13

Mort FMort Fœœtale In Uterotale In Utero

PrPréélever tissus pour caryotypelever tissus pour caryotype•• LA+++ et/ou chorionLA+++ et/ou chorion•• Si malformationsSi malformations•• et /ou Dysmorphie C et /ou Dysmorphie C –– F (difficile) F (difficile)•• RCIU +++ difficileRCIU +++ difficile

Garder des cultures de fibroblastesGarder des cultures de fibroblastes•• Si consanguinitSi consanguinitéé parentale parentale•• Si syndrome connu ou nonSi syndrome connu ou non•• Si antSi antééccéédentdent

Mort FMort Fœœtale In Uterotale In Utero

•• 1er Trimestre +++ An 1er Trimestre +++ An Chrom Chrom frfrééquentesquentes

•• MFIU chez GarMFIU chez Garççons +++ons +++

•• 33èème Trimestre +++ parents, mme Trimestre +++ parents, méédecins,decins,mméédico-ldico-léégal, gal, éévitera vitera amnio amnio àà G suivante G suivante

•• SystSystéématique si antmatique si antééccéédent de FCS ou MFIUdent de FCS ou MFIU

•• Caryotype en excCaryotype en excèès mais rassures mais rassure

•• LA : idLA : idééal avant induction sinon T foetauxal avant induction sinon T foetaux

Triploïdie

MFIU du 2MFIU du 2èème trimestreme trimestre

Hypoplasiethymique

CardiopathieConoTroncale

Fish 22 :Di George

Expulsions spontanExpulsions spontanééeses

Pratiquer caryotypePratiquer caryotype

•• DDéécouverte dcouverte d’’une malformationune malformation

•• Dysmorphie C-FDysmorphie C-F

•• AutreAutre……RCIURCIU

•• Contexte dContexte d’’hydramnios, Y penserhydramnios, Y penser

•• RRéécurrencecurrence

TGVAO

AP

PrPrééllèèvements fvements fœœtus bon tus bon éétattat

FFœœtus en bon tus en bon éétat, rare aprtat, rare aprèès IMGs IMG•• PEAU PEAU «« belle, blanche belle, blanche »» pas rouge pas rouge•• Muscle quadricepsMuscle quadriceps…… psoas psoas……•• PoumonPoumon•• Selon contexteSelon contexte•• Rein Rein etcetc……•• GonadeGonade

––Toujours prToujours prééfféérer rer musclemuscle àà peau peau–– Et au moins 1 T placentaire : Et au moins 1 T placentaire : chorionchorion

PrPrééllèèvements fvements fœœtus bon tus bon éétattat

En cas dEn cas d’’anamniosanamnios

•• LA impossible en LA impossible en antenatalantenatal

•• PrPréévoir voir àà expulsion expulsion–– SANG Intra cardiaque si OK , pas idSANG Intra cardiaque si OK , pas idééalal

–– Deux tissus fDeux tissus fœœtaux peau et muscletaux peau et muscle

–– Et au moins 1 sur le placenta : chorionEt au moins 1 sur le placenta : chorion

PrPrééllèèvements foetusvements foetus

Si Si anamniosanamnios,, mais mais mméégavessie gavessie ou anasarqueou anasarque

Il est possible de prIl est possible de prééleverlever•• «« urine furine fœœtale tale »»•• ascite, liquide pleuralascite, liquide pleural•• liquide hygromaliquide hygroma•• En ante ou post natalEn ante ou post natal

PrPrééllèèvements sur le fvements sur le fœœtustus mac macéérréé apr aprèès IMG ou MFIUs IMG ou MFIU

•• Tissus fTissus fœœtaux => Echectaux => Echec•• PrPréélever tissus sur placentalever tissus sur placenta•• ChorionChorion, , villositvillositéés, amnios, cordons, amnios, cordon•• Tenter muscle et cordon si pas deTenter muscle et cordon si pas de

placentaplacenta

PrPrééllèèvements sur le Placentavements sur le Placenta

Meilleur Tissu : CHORIONMeilleur Tissu : CHORIONTrTrèès bon reflet du fs bon reflet du fœœtustus

•• Puis cordonPuis cordon•• AmniosAmnios•• VillositVillositéés chorialess choriales•• Etude Nicole JoyEtude Nicole Joyéé•• Etude de JVDAEtude de JVDA

Bilan Saint-Antoine N JOYE

Bilan Saint--Antoine

PrPrééllèèvements usuels pour caryotypevements usuels pour caryotype et / ou culture de et / ou culture de fibroblastasfibroblastas

FFœœtus en bon tus en bon éétattat

•• Muscle plutMuscle plutôôt que Peaut que Peau

•• et et ChorionChorion

PrPrééllèèvements usuels pour caryotypevements usuels pour caryotype et / ou culture de et / ou culture de fibroblastasfibroblastas

FFœœtus mactus macéérréé souvent souvent ds ds IMGIMG•• Pas de prPas de prééllèèvement sur le fvement sur le fœœtustus ou ou

sinon le doubler par un autre tissusinon le doubler par un autre tissu

•• CHORION en double exemplaireCHORION en double exemplaire

•• CordonCordon

•• villositvillositééss

Mettre prMettre prééllèèvementvementdans un tube de milieudans un tube de milieu

•• Tubes congelTubes congeléés s àà –– 20 20°°

•• DDéécongcongéélation lation àà la demande la demande

•• Tissus peuvent rester plusieurs joursTissus peuvent rester plusieurs joursdans tube de milieu au frigo ou dans tube de milieu au frigo ou éétuvetuve

•• IDEAL : Se garder un tissu dans milieuIDEAL : Se garder un tissu dans milieude culture en rde culture en rééserve au cas oserve au cas où…ù…

PrPrééllèèvements usuels pour caryotypevements usuels pour caryotype et / ou culture de et / ou culture de fibroblastasfibroblastas

RRéésultat des cultures en relationsultat des cultures en relationavec nombre de tissus pravec nombre de tissus préélevlevééss

•• Plus de chance dPlus de chance d’’avoir une culture siavoir une culture si3 ou 4 pr3 ou 4 prééllèèvementsvements

•• Voir Etude de Nicole JoyVoir Etude de Nicole Joyéé

•• Travail lourd Travail lourd

3/4

3/4

1/31/3

Bonne pratique du Bonne pratique du FoetopathologisteFoetopathologiste

•• VVéérifier si rrifier si réésultat du K sultat du K ds ds dossierdossier

•• Ne jamais fixer le placenta dNe jamais fixer le placenta d’’emblemblééee

•• Attendre fin autopsie et mAttendre fin autopsie et mêême plusme plus……

•• Et synthEt synthèèse rapide dossierse rapide dossier

•• Pour garder des cultures en congPour garder des cultures en congéélation,lation,prpréélever de principe,mettre au frigo ou lever de principe,mettre au frigo ou éétuvetuve

•• Tissu peut attendreTissu peut attendre……2, 3, 4j2, 3, 4j…… etcetc……

•• MMêême le fme le fœœtustus……..

Bonne pratique : CongBonne pratique : Congéélation de tissuslation de tissus

•• Congeler au moins 3T fCongeler au moins 3T fœœtaux, + selon contextetaux, + selon contexte

•• 2 pour 2 pour éétude biochimique et/ou mtude biochimique et/ou méétaboliquetabolique

•• 1 ou 2 pour extraction ADN1 ou 2 pour extraction ADN

•• foie :foie : sert pour sert pour éétude biochimique (mal mtude biochimique (mal méétabolique,tabolique,pathologie du cholestpathologie du cholestéérol, SLO etc..)rol, SLO etc..)

•• Muscle :Muscle : utile pour pathologies s utile pour pathologies s’’exprimant exprimant ds ds musclemusclepatho patho neuroneuro--musculmuscul, m, méétaboliquetabolique

•• Poumon, thymus, rate, rein pour extraction dPoumon, thymus, rate, rein pour extraction d’’ADN etADN etsi besoin FISH appositionsi besoin FISH apposition …………

08/06/2004Service d'Histo -Embryologie et Cytogénétique Necker - Unité de Cytogénétique Moléculaire

ALLIOT Foetuscentromères X et Y

Nom :

Hybridation :

Commentaires :

Image 1

Image 2

Ne pas mettre le résultat sur cette feuille SVP

08/06/2004Service d'Histo -Embryologie et Cytogénétique Necker - Unité de Cytogénétique Moléculaire

ALLIOT Foetuscentromères X et Y

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Grossesse Extra amniotique: Caryotype sur LA??

Culture difficile …. 92, XXYYFISH : Apposition Lame de foie congelé : XY

Damien Sanlaville

CONCLUSIONCONCLUSION

•• Savoir contrSavoir contrôôler caryotype si douteler caryotype si doute

•• Garder des prGarder des prééllèèvements vements ds ds tube milieu entube milieu enattendant rattendant réésultatsultat

•• Au cas oAu cas oùù infection infection

•• Si caryotype dSi caryotype dééjjàà fait en fait en antenatal antenatal !!!!!!!!

EN PRATIQUE : Parler avec EN PRATIQUE : Parler avec CytoGCytoGéénnééticien ticien ++++++

COMMUNIQUER ++++COMMUNIQUER ++++

Service du Service du Pr Pr JP SIFFROIJP SIFFROI

•• Equipe Equipe FoetopathologieFoetopathologie–– Romulus GrigorescuRomulus Grigorescu

–– Sophie PatrierSophie Patrier

–– Marie-HMarie-Hééllèène Saint-Frisonne Saint-Frison

•• Equipe CytogEquipe Cytogéénnéétiquetique–– Sandra ChantotSandra Chantot

–– Nicole JoyNicole Joyéé

–– Marie-France Marie-France PortnoPortnoïï

–– Jacqueline Van Jacqueline Van den Akkerden Akker